二氨基荧光素单取代功能化研究

一氧化氮(NO)是生物体内一种重要的信号分子。二氨基荧光素是一种能够有效检测NO的荧光探针化合物。通过结合"tagging"技术对二氨基荧光素进行单功能化可提高其NO探测的靶向性和空间分辨率。本文针对二氨基荧光素和HaloTag结合的问题,以邻苯二胺为模型化合物对反应条件进行优化,并用二氨基荧光素二乙酸酯验证了该系列反应条件的合理性,以高效液相色谱(HPLC)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析了取代产物的组成和含量。实验结果表明,溴乙酰溴是二氨基荧光素和HaloTag之间最合适的连接子。采用优化的反应条件,目标单取代产物的产率可以达到34.8%。本研究为邻二氨基类一氧化氮荧光探针的单烷基取代功能化的应用奠定了基础。     

波长对NO光解反应的影响

利用公式ΔGo+RTlnKop=0.1196n/λ计算了不同波长条件下NO光解反应的标准平衡常数.当波长为183 nm和230 nm时,反应NO+hv→N.+O.的标准平衡常数分别为3.64×109和1.45×10-14;当波长为230 nm时,反应2NO+hv→N2+O2的标准平衡常数为e279.72.解释了为什么NO吸收λ<183 nm的光子后解离为游离态的氮原子和氧原子,而吸收λ<230 nm的光子后形成激发态分子NO*,进而与NO反应形成N2和O2.     

荧光素二聚体荧光探针测定硫酸庆大霉素的同步荧光光谱研究

基于荧光素二聚体与硫酸庆大霉素通过电荷作用而产生荧光信号变化,建立了以荧光素二聚体为荧光探针,用固定波长同步荧光光谱技术测定硫酸庆大霉素的新方法。结果表明,在△λ=30nm,最优条件下,测定硫酸庆大霉素的线性范围为0.5～25.0μg/mL,检测限(3σ/K)为6.0×10-8g/mL。用于实际样品分析,测定回收率为100.2%～101.0%,相对标准偏差为1.3%～2.1%。     

荧光素二聚体荧光探针同步荧光法测定阿米卡星

基于阿米卡星(AMK)能增强荧光素二聚体的荧光信号,建立了以荧光素二聚体荧光探针同步荧光光谱技术测定AMK的新方法.结果表明,在△λ=30nm,最优条件下,测定AMK的线性范围为0.5～20.0μg/mL,检出限 (LOD)为0.51μg/ml .用于实际样品分析,测定回收率为96.9%～104.5%,相对标准偏差(RSD)为3.7%～5.3%.     

二维钡钨双金属膦酸配位聚合物的合成、结构及荧光研究

水热条件下,以2,2'-联吡啶(2,2'-bipy)为结构导向剂,利用Ba(II)盐,硅钨酸与1-羟基-2-(3-吡啶基)亚乙基-1,1-二膦酸(H5L=(H4C5N)CH2C(OH)(PO3H2)2)反应,得到二维钡钨双金属膦酸配位聚合物{[Ba2(L-H)(H2O)2(WO3)]·H2O}n(化合物1).该化合物为单斜晶系,C2/c空间群,晶胞参数:a=2.305(2)nm,b=0.7310(5)nm,c=2.033(1)nm,β=93.160(7)°,V=3.420(4)nm3,Z=8,R1=0.0293,ωR2=0.0702.单晶X-射线衍射分析表明其具有二维双金属无机层状结构.荧光测试结果表明,在236nm发射波长下,出现2个来自于膦酸分子内(λem=380.5nm,437.5nm)π*-π跃迁的荧光发射峰:λem=317nm,445.5nm.     

银-邻二氮菲-二溴荧光素光度法测定银的含量

研究了银 -邻二氮菲 -二溴荧光素离子缔合物体系在水溶液中的显色反应 .在pH7.1NH4 Ac缓冲介质中 ,PVA - 12 4存在下 ,形成 1∶2∶1型红色的离子型缔合物 ,λmax=5 40nm ,ε =4.2 9× 10 4 L·mol-1·cm-1,银含量在 0～ 5 0 μg/ 2 5mL范围内符合比尔定律 ,在EDTA存在下本文提出的测定银的新方法选择性好、灵敏度高 ,用于相纸、废定影液和废水中银的测定 ,有很好效果。     

一种酰胺型香豆素类Cu~(2+)荧光探针

4-二乙胺基水杨醛在哌啶存在下与丙二酸二乙酯反应生成了3-乙氧酰基-7-二乙胺基香豆素,再与二亚乙基三胺反应合成目标产物L.在乙腈溶液中,Cu~(2+)能使探针L的荧光强度增强,最大发射波长λem有一定程度的蓝移.在其他金属离子存在下,L对Cu~(2+)具有一定的荧光选择性,与Cu~(2+)的配合比为1∶1.     

新型苊并吡嗪类高灵敏度极性探针

以苊醌为原料,经溴化、环构化和芳香亲核取代反应合成了一种新型的以苊并吡嗪为母体的极性荧光探针3-正丁胺基-苊并吡嗪-8,9二腈(A)。探针A的荧光强度随着溶剂极性的增加显著降低,从四氯化碳(Φf=0.364 2)到乙腈(Φf=0.000 6)荧光量子产率减弱超过600倍,从四氯化碳(533nm)到N,N-二甲基甲酰胺(651nm)最大发射波长红移了118nm。利用探针A对极性敏感来检测有机溶剂中的水含量,建立了一种新的四氢呋喃和1,4-二氧六环中水含量荧光分析方法,最低检测限分别为0.019%和0.0076%。     

一种用于氟离子可视化检测的荧光探针

丙二腈与6-羟基-2-萘甲醛反应合成2-(6-羟基萘-2-亚甲基)丙二腈(探针1),并将其作为荧光探针用于检测氟离子.在测试体系中,探针1的二甲基亚砜(DMSO)溶液为浅黄色,几乎没有荧光;加入氟离子后,溶液颜色立刻变为粉红色,且溶液显示蓝色荧光;而加入其他阴离子,溶液未显示荧光.研究还发现探针1对氟离子具有较强的选择性和较高的灵敏度;Job's法得出探针1与氟离子之间的配比为1:1;核磁滴定结果表明加入氟离子后,探针1上的酚羟基发生去质子化反应;分子轨道理论计算得出,探针1去质子化后HOMO-LUMO能级差增大,明显改变了溶液颜色和荧光光谱.     

罗丹明类铜离子荧光探针的合成及其应用研究

设计、合成了一种基于罗丹明B的铜离子荧光分子探针RF。研究发现在V乙腈∶V水=1∶1介质中,化合物RF最大发射波长为566 nm,Cu2+可使探针RF的荧光强度明显增大,同时溶液颜色从无色变为桃红色。该荧光探针对Cu2+具有较高的灵敏度和较好的选择性。RF的选择性荧光增强是由于其对Cu2+的识别开环引起的。该探针对Cu2+的识别是不可逆的,而且pH对探针RF在中性水溶液中检测Cu2+几乎没有影响。     

测定蛋白质的四溴荧光素分光光度法

在pH=2.0的Britton-Robinson(B-R)缓冲液中,牛血清白蛋白(BSA)与四溴荧光素(TBF)形成复合物,在波长540 nm处有最大吸收,比四溴荧光素本身的最大吸收红移25nm。对不同pH值及离子强度对其结合作用的影响进行了探讨,并研究了各种实验条件对反应体系的影响,确定了最佳反应条件,制订出BSA测定标准曲线。在四溴荧光素浓度为1×10-5mol.L-1时,其线性范围为0.05~12 mg.L-1,检出限为23μg.L-1(S/N=3),方法稳定性好,检测灵敏度高。该方法用于实际样品的测定,结果令人满意。     

新型含氟细胞钙离子荧光探针Fluo-3F的合成

目的设计并合成新型含氟荧光素类细胞钙离子荧光探针Fluo-3F。方法以5-氟邻硝基苯酚为起始原料,5步反应得到中间体BAPTA-F-CHO,再与4-氯间苯二酚缩合。结果新型含氟荧光素类钙离的结构经核磁共振光谱,红外光谱,质谱,元素分析得到证实。结论合成的新型含氟荧光素类钙离子荧光探针Fluo-3F荧光性能优异,为合成新型钙离子荧光探针提供了新的思路。     

分光光度法测定人血清中微量蛋白质的研究

研究了试剂3,6-二氯荧光素与蛋白质的显色反应,建立了一种测定蛋白质的新方法。在pH=7.00的缓冲溶液中,3,6-二氯荧光素与蛋白质发生灵敏的显色反应,生成1:1的复合物,最大吸收波长为500nm且在4h内稳定,蛋白质在3×10-8～3×10-7g/L范围内符合比尔定律,且回收率在90%～101%之间。探讨了氨基酸及金属离子K 等对测定的影响。测定了人血清中蛋白质的含量,结果满意。     

溶菌酶与矿物粉尘反应行为的模拟研究

对3个地区的矿物粉尘做了XRF分析及其与溶菌酶（Lys）的反应实验,结果显示Lys与样品中的物质进行了反应。在模拟样品中元素离子与Lys反应的uV—Vis、荧光光谱研究中发现,37℃下Lys与样品中的元素离子Fe^3＋、Pb^2＋的作用很明显。表现在紫外区Lys—Fe^3＋复合物吸光度增强,Lys—Pb^2＋复合物吸收峰红移13nm。荧光区Lys—Fe^3＋复合物在λem450nm处荧光强度增强,荧光峰红移30nm,Lys—Pb^2＋复合物在λem725nm处荧光强度增强,荧光峰红移205nm。     

一种基于2-(2-羟基苯基)苯并噻唑近红外脂滴荧光探针的合成及细胞成像研究

以2-(2-羟基苯基)苯并噻唑为母体,通过缩合反应,将其与二氰基异佛尔酮相连接,合成得到一种近红外荧光探针LD-YK,并对其结构进行了氢谱表征.通过紫外-可见吸收与荧光发射光谱研究了探针LD-YK的光物理性质,结果表明探针LD-YK在不同溶剂中的最大荧光发射波长均超过650 nm,属于近红外区域,且具有较大的斯托克斯位移.细胞实验结果表明探针LD-YK具有较低的细胞毒性,且可靶向于细胞内的脂滴部位.     

荧光素荧光熄灭法测定微量银

在pH 8.0 Tris-HCl缓冲溶液中,荧光素在515 nm处有1个荧光峰.当加入银-邻菲罗啉后,荧光峰降低,荧光猝灭强度ΔF与银离子浓度存在线性关系,其线性范围为1.06×10-7~1.20×10-4mol/L,回归方程为ΔF=3.08×105C+2.452(mol/L);相关系数为0.997 7;检出限为8.08×10-8mol/L.据此建立了一种灵敏、简便、快速、准确、选择性较高的测定痕量银的荧光分析法.     

壳聚糖荧光标记反应研究

 以壳聚糖-海藻酸钙微球在体检测为研究背景,建立壳聚糖的荧光标记方法.以荧光素异硫氰酸酯(FITC)作为标记化合物,采用紫外-分光光度计在447nm下检测标记在壳聚糖上的FITC,通过m(FITC,μg)/m(壳聚糖,g)表征壳聚糖的荧光标记效率.考察壳聚糖溶液pH值、浓度、反应时间以及壳聚糖分子量、脱乙酰度对壳聚糖荧光标记反应的影响.结果表明:选取相对分子质量20万、脱乙酰度95%的壳聚糖配制成0.01g/mL的溶液,在pH₁₀的条件下与荧光素反应5h将制得标记效率为117.4μg/g的荧光壳聚糖.建立了一种稳定有效的壳聚糖荧光标记方法,为荧光标记壳聚糖-海藻酸钙微球提供了技术支持.     

氯代荧光素染料染色锦纶织物性能研究

采用3种自制氯代荧光素染料上染锦纶织物,考察了染液pH值对染色织物的K/S值的影响,探讨了染色织物的K/S值、最大反射率及荧光强度三者的相互关系.结果表明,随着pH值的增大,氯代荧光素染色织物的K/S值均出现先增大后减小的趋势;染色织物的最大反射率及荧光强度均与K/S值呈现很好的负相关性.与荧光素染色织物相比,氯代荧光素染色织物的最大激发及发射波长均发生不同程度的红移,且染色织物的颜色包括荧光黄色、荧光橙色及荧光红色.     

罗丹明6G-二溴荧光素发光分子纳米微球标记凝集素及其分析应用

基于外重原子微扰剂LiAc存在下,罗丹明6G(R)-二溴荧光素(D)SiO2发光纳米微球(R-D-SiO2)在醋酸纤维素膜(ACM)上可分别发射R(λex/λem=481/648nm)和D(λex/λem=457/622nm)强而稳定的室温光信号.用R-D-SiO2标记麦胚凝集素(WGA),在ACM上采用R-D-SiO2-WGA-ALP(直接法)亲和吸附反应方式,研究了利用亲和吸附固体基质室温磷光法(AA-SS-RTP)测定碱性磷酸酶(ALP)的条件和分析性能.研究结果表明,对0.4ml点样量,R-D-SiO2-WGA-ALP法的检出限为0.41agspot-1(457/622nm)与0.44agspot-1(481/648nm).用本法和ELISA方法对比测定了血清试样中ALP的含量,结果相吻合.本研究表明,可分别采用D或R的磷光激发/发射波长进行测定,不仅提高了AA-SS-RTP的灵活性,而且适应性更广.     

ZnO量子点的制备及其发光特性研究

利用溶胶-凝胶法在乙醇溶液中制备出ZnO量子点。通过紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)和荧光光谱对合成量子点的发光性质进行了研究。结果表明,ZnO量子点的荧光光谱由两部分组成:一是较弱较窄的紫外荧光峰(346nm),另一是较强较宽的可见荧光发射峰(510nm)(λex=329nm);在反应温度为40℃,ZnAc2·2H2O与LiOH·H2O的物质摩尔比为1∶2时能产生明亮的黄绿色荧光。