新型罗丹明类荧光探针中间体的合成及表征

目的研究一类新型罗丹明类细胞钙离子荧光探针并合成一系列荧光中间体。方法以间氨基苯酚为起始原料,制备对甲苯磺酸(3-氨基)苯酚酯2,对甲苯磺酸(3-N,N-二烯丙基)苯酚酯3,对甲苯磺酸(3-N,N-二苄基)苯酚酯3’,在脱去对甲苯磺酸保护基后与邻苯二甲酸酐反应。结果合成荧光中间体N,N,N,N-四烯丙基取代罗丹明5和N,N,N,N-四苄基取代罗丹明6。得到对甲苯磺酸(3-N,N-二苄基)苯酚酯3’单晶结构。荧光中间体5和6的结构经核磁共振光谱,红外光谱,质谱证实。结论合成的新型荧光中间体,为性能优良的罗丹明类荧光探针的合成提供了新思路。     

腺苷诱导神经细胞Ca~(2+)响应的微孔板荧光检测

以钙离子荧光指示剂Fluo-3-AM作为神经细胞内Ca2+荧光探针,用微孔板荧光检测仪测量神经细胞内游离Ca2+与荧光探针Fluo-3-AM结合的荧光强度,并实时检测此荧光强度在细胞外加不同浓度腺苷诱导下的变化情况。实验发现,各种浓度的腺苷都能诱导神经细胞Ca2+浓度升高,且其影响程度随腺苷浓度的增大而增强。这一结果对探究腺苷通过作用神经系统起止痛作用的机理具有重要意义。     

罗丹明类荧光探针的合成及在铜离子测定中的应用

合成了对铜离子有很强选择性的罗丹明类荧光探针。在乙腈/水(体积比1∶1)溶液中,当加入Cu2+后,探针显桃红色,随Cu2+浓度增大,荧光强度增强,发射荧光波长红移。并在2.8×10-7~2.8×10-5mol/L范围内,Cu2+离子浓度与荧光强度呈现良好的线性关系。其它常见离子引起很小的荧光光谱变化,合成的试剂可用于高选择性的检测铜。     

基于二氟荧光素内酰胺的一氧化氮分子荧光探针的合成及应用

合成了基于二氟荧光素内酰胺开环反应的一氧化氮分子荧光探针并对其结构进行了表征。二氟荧光素内酰胺本身无荧光,当与NO反应后开环水解生成二氟荧光素,在λex=484nm光激发下产生荧光且最大发射波长λem=514nm。在PH〉4．8的体系中二氟荧光素内酰胺与NO反应后荧光强度达最大且稳定。在H2O2、·OH、O2-、NO2-、ONOO-存在下,荧光探针对NO表现出很高的选择性。以NOC13为NO释放剂,荧光强度随NOC13浓度的增加而增大,可实现对NO的直接检测。     

荧光素二聚体荧光探针测定硫酸庆大霉素的同步荧光光谱研究

基于荧光素二聚体与硫酸庆大霉素通过电荷作用而产生荧光信号变化,建立了以荧光素二聚体为荧光探针,用固定波长同步荧光光谱技术测定硫酸庆大霉素的新方法。结果表明,在△λ=30nm,最优条件下,测定硫酸庆大霉素的线性范围为0.5～25.0μg/mL,检测限(3σ/K)为6.0×10-8g/mL。用于实际样品分析,测定回收率为100.2%～101.0%,相对标准偏差为1.3%～2.1%。     

荧光素-Fe(Ⅲ)配合物与BSA的相互作用的光谱学研究

双[N,N-双(羧甲基)氨甲基]荧光素(荧光素-甲胺基二羧酸)是一种含有三环平面结构的荧光素衍生物.研究采用荧光素-甲胺基二羧酸为配体,采用铁离子(Fe(Ⅲ))为中心金属离子,通过直接反应的合成方法,在水溶液中合成了荧光素-甲胺基二羧酸-Fe(Ⅲ)配合物.并采用紫外-可见(UV-vis)光谱和荧光(FL)光谱来研究荧光素-甲胺基二羧酸-Fe(Ⅲ)配合物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.相应的研究数据和计算结果表明荧光素-甲胺基二羧酸-Fe(Ⅲ)配合物对BSA分子荧光的猝灭机理是静态猝灭过程.同时采用三维荧光光谱和三维等高线剖面图谱进一步考察了荧光素-甲胺基二羧酸-Fe(Ⅲ)配合物存在时BSA分子的荧光猝灭过程和混合前后的构象变化.通过同步荧光光谱研究了荧光素-甲胺基二羧酸-Fe(Ⅲ)配合物与BSA分子相互作用的结合方式和结合位点.研究为荧光素及其衍生物在医疗领域中的进一步应用奠定了基础.     

“Turn Off”型蒽类荧光探针的合成及应用

通过2步反应合成了一种含仲胺基团的蒽类荧光分子,该小分子在不加其他任何试剂的情况下能够与二硫化碳(CS₂)发生反应,通过硫原子的重原子效应导致分子荧光淬灭.利用核磁氢谱、碳谱、红外光谱(IR)、紫外-可见光谱以及荧光光谱证实了该荧光分子与CS₂的反应,该类分子可成为检测CS₂的“Turn Off”型荧光探针.     

基于双氧水检测的硼酸酯荧光探针的研究

以邻羟基苯乙酮和苯甲醛为原料经过羟醛缩合反应、氧化反应以及取代反应,合成了一种新型荧光探针,其结构经过1H NMR、MS进行了表征。利用荧光光谱,探讨了该探针对双氧水响应的光谱性能、选择性、p H值以及反应时间等因素。结果表明,该探针能很好地对双氧水进行检测。     

用于检测铝离子的比色荧光探针及细胞成像研究

文章通过5-硝基水杨醛与二溴荧光素酰肼缩合反应,合成了一种新型的用于检测铝离子的荧光探针5-硝基水杨醛二溴荧光素腙(NDH),通过红外、核磁共振和质谱对化合物进行了表征。在THF:H_2O(9∶1,V/V)中,NDH与铝离子形成1∶1络合物,可以裸眼识别出颜色由黄色到无色的转变。荧光法检测Al~(3+)的线性范围为0.2～5.0μmol/L,检测限为0.01μmol/L。另外,细胞毒性试验结果表明Al~(3+)荧光探针可用于细胞成像的研究。     

一种新型荧光探针的光谱性能

研究了化合物N-戊基-4-（2，2’-二吡啶基）氨基-1，8-萘酰亚胺在不同pH值下的紫外可见光谱和荧光光谱。在酸性条件下，二吡啶胺上的仲胺质子化后，使二吡啶胺给电子能力降低，萘酰亚胺荧光团的荧光发生猝灭。通过调控pH值来改变萘酰亚胺的4位取代基二吡啶胺的给电子能力，使荧光发生明显变化，从而得到新型的荧光探针。     

邻菲啰呤和核苷酸对Tb(Ⅲ)的协同荧光增强效应(英)

对邻菲囉呤(Phen)存在下16种核苷酸对Tb(Ⅲ)荧光的增强效应进行了系统研究。根据I/I_0值(I和I_0分别为有和无Phen存在时体系的荧光强度)的大小可把这16种核苷酸分为3种类型:(1)对腺瞟啉核苷酸,I/I_0值在150—230之间,这就使得用该体系来研究腺苷酸与Ca和Mg离子间的作用成为可能;(2)对嘧啶碱基核苷酸类,I/I_0值在10—50之间,(3)鸟嘌啉核苷酸类,I/I_0值大约为0.8。我们发现Phen和核苷酸对Tb(Ⅲ)的荧光增强具有协同效应,这种协同效应可能是由于Phen和核苷酸芳环之间的疏水相互作用肥Phen限定在距Tb(Ⅲ)较近的范围内,因而增强了能量转移的效率及荧光强度。     

基于检测铜离子的香豆素水合肼希夫碱荧光探针的研究

设计合成了一种基于新型香豆素水合肼希夫碱荧光探针,结构经。HNMR表征．利用荧光光谱研究了该探针分子对铜离子的识别作用．实验表明,该探针对铜离子具有较好的选择性识别能力,加入铜离子后,该探针的荧光发射强度显著减弱,并且荧光发射强度随着Cu^2＋浓度的增加而减弱．通过荧光离子滴定实验对其选择性和抗干扰能力进行了系统研究,发现加入其他常见金属离子（如Al^3＋、Ca^2＋、Co^2＋、Cr^3＋、Fe^3＋、K^＋、Mg^2＋、Na^＋、Ni^2＋、Zn^2＋等）,荧光强度没有发生变化,并且上述各种离子分别与铜离子共存时,对其没有干扰．结果表明,香豆素水合肼希夫碱荧光探针对铜离子具有较高选择性识别．     

Ca^2＋ is involved in muscarine-acetylcholine-receptor-mediated acetylcholine signal transduction in guard cells of Vicia faba L.

Acetyicholine (ACh) is an important neuro-chemical transmitter in animals; it also exists in plants and plays a significant role in various kinds of physiological functions in plants. ACh has been known to induce the stomatal opening. By monitoring the changes of cytusolic Ca^2 with fluorescent probe Fiuo-3 AM under the confocal microscopy, we found that exogenous ACh increased cytosolic Ca^2 concentration of guard cells of Vicia faba L. Muscarlne, an agonist of muscarine acetyicholine receptor (mAChR), could do so as well. In contrast, atropine, the antagonist of mAChR abolished the ability of ACh to increase Ca^2 in guard cells. This mechanism is similar to mAChR in animals. When EGTA was used to chelate Ca^2 or ruthenium red to block Ca^2 released from vacuole respectively, the results showed that the increased cytosolic Ca^2 mainly come from intracellular Ca^2 store. The evidence supports that Ca^2 is involved in guard-cell response to ACh and that Ca^2 sigual is coupled to mAChRs in ACh signal transduction in guard cells.     

基于含硫席夫碱衍生物的荧光增强型Hg2＋探针

文中设计合成了新的含硫原子的席夫碱（Schiff base）衍生物CzSB,该化合物可以作为荧光增强型Hg2＋探针.通过紫外-可见光吸收光谱和荧光发射光谱研究了探针CzSB对Hg2的响应过程,Hg2＋的加入显著增强探针的荧光发射.探针CzSB对金属离子的识别作用和竞争选择能力也经由荧光光谱进行了研究,结果表明该探针对Hg2＋具有较高的选择响应性并且不受其他常见金属离子的干扰.初步探讨了该探针分子与Hg2的结合模式和荧光增强机理,Job曲线表明探针CzSB与Hg2以1∶2计量比配位.     

抗生素亚胺培南探针分子设计及传感性能研究

抗生素亚胺培南（imipenem,IPM）用药治疗败血症患者感染需要快速做出反应,目前的血药监测方法严重延迟药物注射。设计金属元素掺杂型石墨烯量子点（graphene quantum dots,GQDs）,可实现荧光法快速测定IPM和开辟荧光法检测抗生素的新途径。采用水热法制备了铁掺杂GQDs （Fe-GQDs）,用于快速探测IPM。采用透射电子显微镜（transmission electron microscopy,TEM）、X射线光电子能谱（X-ray photoelectron spectroscopy,XPS）以及荧光光谱等方法,探讨不同铁源起始剂对GQDs荧光性能及传感性能的影响,并分析了乙酸铁为铁源制备的Fe-GQDs的微观结构及荧光性能。结果表明：以乙酸铁为起始剂制备的Fe-GQDs荧光性能最佳,且对IPM具有显著的荧光淬灭效应。所制备的Fe-GQDs荧光淬灭强度（F/F₀）与IPM浓度（concentration,C）呈线性关系,线性方程为${F/}{{F}}_{\text{0}}\text{= 0.983}-\text{4.23×}{\text{10}}^{-3}\text{}$C,线性相关系数（R²）为 0.997,线性范围为0.007～0.073 g/L。Fe-GQDs探针分子对血浆中常见有机分子和金属离子具有良好的抗干扰性,检测IPM误差为1.6%～4.6%。     

基于罗丹明衍生物的Fe~(3+)荧光探针研究

为建立一种高选择性的Fe3+荧光探针测定Fe3+含量,设计并合成了一种罗丹明衍生物(探针1)用于Fe3+含量的测定.结果表明:在pH 6.00的V水∶V乙醇=1∶1的溶液中,荧光探针显示微弱荧光,当向其中加入Fe3+后,在580 nm处荧光增强,探针对Fe3+显示了较高的选择性.除Al3+和Ni2+对Fe3+的测定有干扰外,其他碱金属、碱土金属和过渡金属均不干扰探针1对Fe3+的测定.该探针对铁离子的线性响应范围是8.0×10-6～1.0×10-3mol/L,检测下限是2.4×10-6mol/L.该探针用于中药材怀菊花、怀牛膝中Fe3+的测定,测量结果令人满意.     

15 － KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响

摘要: 目的探讨15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞内Ca2 + 的作用及其来源。方法以酶法( 胶原酶Ⅰ型和弹性 酶) 分离培养原代大鼠肺动脉平滑肌细胞,将细胞稀释所需密度( 2 × 105 个/mL) ,加样于6 孔板中的盖玻片上,放 入37℃孵箱中培养12 h,细胞贴壁后,取出6 孔板中的盖玻片,放入特制的小槽内,D-Hanks 液冲洗细胞3 次,加入 1 × 10 － 5mol /L 的Flou-3 /AM,置37℃孵箱中避光孵育约30 min,用D-Hanks 液洗去细胞外残留染料,应用激光扫描 共聚焦显微镜技术,测定了15-KETE 对大鼠肺动脉平滑肌细胞游离钙离子浓度的影响。结果1) 15-KETE ( 1 × 10 － 8-1 × 10 － 6 ) mol /L 可依赖性引起肺动脉平滑肌细胞内钙离子浓度( ［Ca2 +］i) 增加; 2) 1 × 10 － 6 mol /L 维拉米( L-型钙离子通道阻断剂) 和无钙离子细胞外液显著阻抑了1 × 10 － 6 mol /L 15-KETE 引起肺动脉平滑肌［Ca2 +］i 增 加。结论15-KETE 可引起大鼠肺动脉平滑肌［Ca2 +］i 增加,并且此钙来源于细胞外液钙离子。     

Fluorescence Spectra Studies on the Interaction between Lanthanides and Calmodulin

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＬａｎｔｈａｎｉｄｅ (Ｌｎ3 )ｃａｎ ｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｃｒｏｐｓａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｉｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ .Ｈｏｗｅｖｅｒ ,Ｌｎ3 ｃａｎａｌｓｏａｆｆｅｃｔａｎｉｍａｌｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｈａｓｓｏｍｅｔｏｘｉｃｆｕｎｃｔｉｏｎｓａｔｃｅｒｔａｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ[1] .ＴｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｂｙｗｈｉｃｈＬｎ3 ｅｘｅｒｔｓｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓｒｅｍａｉｎｓｕｎｃｌｅａｒ.ＳｔｕｄｉｅｓｓｈｏｗｔｈａｔＬｎ3 ｃａｎｉ…     

荧光探针法研究PNA-DNA双链和dsDNA结构的差异

运用荧光和紫外吸收光谱研究了Ru(bipy)2(dppz)^2 和苯胺红T两种荧光试剂与PNA-DNA、dsDNA之间的相互作用．实验结果表明：相同条件下同一荧光试剂与PNA—DNA、dsDNA两者之间发生不同的作用，从而说明了PNA-DNA、dsDNA的结构具有一定的差异，并对引起差异的原因进行了初步的探讨。     

葛根素荧光猝灭测定核酸的研究

基于DNA与RNA对中药葛根素的荧光有猝灭作用而建立了DNA、RNA的测定新方法.在生理pH值附近,当激发波长为266 nm,葛根素在460 nm处出现荧光,随着核酸的加入,葛根素的荧光强度线性下降,本文对4种不同核酸的线性方程、线性范围、检测限进行了测定,对外来离子的干扰进行了研究,与经典的核酸测定方法进行了对比,并对核酸使葛根素荧光猝灭作用机理进行了探讨.