先兆子痫患者血清IL-18和IL-12的定量检测及其在发病机制中的作用研究

应用ELISA方法定量检测了20例正常未孕女性,20例健康妊娠孕妇,11例轻度、25例中度以及16例重度先兆子痫患者血清中IL-18与IL-12的含量。应用流式细胞术检测患者PBMC中Th1/Th2型细胞亚群的频率。健康妊娠孕妇血清中IL-18含量高于未孕女性(P<0.001),而IL-12的含量则要低于未孕女性(P=0.001)。先兆子痫患者血清中IL-18含量高于未孕女性(P<0.001),但与健康妊娠者无差别。轻、中度先兆子痫患者血清中IL-12含量低于未孕女性(P<0.05),中、重度先兆子痫患者血清中IL-12含量高于健康妊娠孕妇(P<0.05)。健康孕妇的IL-18/IL-12比值明显高于未孕女性,随先兆子痫病情严重程度,IL-18/IL-12比值逐渐降低且均低于正常妊娠孕妇。外周血中IL-2/IL-4的分泌比值及IFN-γ/IL-4的分泌比值,在健康未孕女性与健康妊娠孕妇组间无明显的统计学上的差异,但重度先兆子痫患者明显高于健康妊娠孕妇(P<0.01)。先兆子痫患者外周血Th1/Th2细胞亚群比值高于健康妊娠组,且与血清中IL-18/IL-12比值呈负相关(r=-0.535,P<0.001)。正常妊娠孕妇血清中IL-18的增加与IL-12的减少可能诱导Th2呈优势表达;而先兆子痫患者血清中IL-18与IL-12的同时增加可能促使Th1呈优势表达。     

IL18-IL2融合基因的克隆及其在大肠埃氏菌(E.coli)中的表达

构建IL-18和IL-2成熟区的融合基因IL18-IL2,并实现其在大肠埃氏菌中的大量表达.抽提经PHA刺激增殖的人淋巴细胞总RNA,RT-PCR法获得IL-18和IL-2基因的成熟区序列,并通过一段Linker相连得到融合基因IL18-IL2;将IL18-IL2克隆至原核表达载体pBV220,并转化至大肠埃氏菌BL21(DE3);阳性克隆经42℃温度诱导表达后用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白的表达情况及正确性.经SDS-PAGE分析,融合基因IL18-IL2在宿主菌中能够表达,其相对表观分子质量约为34.5 kD;Western blot进一步证明重组蛋白正确.实验结果表明,已成功构建了表达人IL18-IL2的菌株,为进一步研究融合蛋白IL18-IL2体内外抗肿瘤活性提供了基础.     

重组人截短型IL—6表达载体的构建及表达

旨在建立人截短型IL-6原核高效表达系统。用PCR方法获得截短的人IL-6基因（rhIL-6cDNA）,将其插入克隆载体pUC18中,经证实后再克隆入表达载体pBV220中,鉴定阳性表达载体。结果建立了截短型IL-6基因的克隆载体,经测序证实完全正确;构建了截短型IL-6的原核表达质粒pBV220/rhIL-6并获得高效表达;初步纯化的表达蛋白的比活性为5×10     

HIV-1感染者血清IL-18及IL-18BP水平的变化及临床意义

为了观察HIV-1阳性病人血清IL-18和IL-18BP水平与疾病的关系,用ELISA法检测67例经HAART治疗的HIV-1阳性病人及18例正常对照者血清的IL-18和IL-18BP水平.结果显示,HIV-1感染组血清IL-18水平明显高于正常对照组(P＜0.01),其中A类HIV-1感染组IL-18水平高于正常对照组(P＜0.05),B类、C类HIV-1感染组IL-18水平明显高于正常对照组(P＜0.01) ;HIV-1感染组血清IL-18BP的水平明显高于正常人(P＜0.01),其中各类HIV-1感染组IL-18BP水平均高于正常对照组(P＜0.05);正常对照组IL-18和IL-18BP水平呈正相关(r=0.705,P＜0.01),HIV-1感染组的IL-18和IL-18BP水平无相关性.可见,IL-18和IL-18BP水平的变化及失衡与艾滋病的发生、发展相关,动态监测外周血IL-18及IL-18BP水平可作为反映HIV-1感染者的免疫功能状态变化指标,调节体内IL-18、IL-18BP水平的平衡可能为艾滋病治疗提供新途径.     

NLRP3炎性小体对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能及炎性因子分泌的影响

为了探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用,并分析白细胞介素-18(IL-18)及白细胞介素-1β(IL-1β)在COPD大鼠体内分泌与肺功能的关系,按照随机原则将36只wistar大鼠平均分为空白组、COPD组及干预组,其中COPD组及干预组建造大鼠模型,干预组在造模的同时给予AC-YVAD-CMK抑制剂处理,造模结束后测定3组大鼠的呼吸阻力、肺总量、肺顺应性及血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-18和IL-1β的水平.结果显示:1)COPD组大鼠的肺总量和肺顺应性均低于干预组和空白组(p0.05),呼吸阻力大小依次为COPD组干预组空白组(p0.05);2)COPD组大鼠血清中IL-1β水平高于空白组和干预组(p0.05),COPD组和干预组大鼠血清中IL-18水平高于空白组(p0.05);3)COPD组大鼠BALF中IL-18水平高于干预组和空白组(p0.05),BALF中IL-1β水平大小依次为COPD组干预组空白组(p0.05);4)大鼠BALF中IL-18水平与其呼吸阻力呈显著正相关(p0.05).由上述结果可知:COPD模型大鼠的肺总量、肺顺应性降低而呼吸阻力升高,体内IL-18和IL-1β水平升高,且BALF中IL-18水平与大鼠呼吸阻力呈正相关性,提示IL-18参与了COPD炎症反应;阻断NLRP3炎性小体中caspase-1活化可以改善COPD模型大鼠肺功能并降低IL-18和IL-1β水平,提示NLRP3炎性小体可能参与了大鼠COPD的发病过程.     

肺炎支原体肺炎患儿血清IL-2、IL-6、IL-18 and TNF-A的变化及临床意义

目的探讨炎症因子IL-2、IL-6、IL-18、TNF-A在儿童肺炎支原体肺炎中的变化及其临床意义。方法选择广州市越秀区儿童医院儿科肺炎支原体肺炎住院患儿50例为观察组,同时选取正常患儿50例作为对照组,采用酶联免疫法检测患儿急性期、恢复期及正常儿童血清的IL-2、IL-6、IL-18、TNF-A水平。结果与对照组相比,肺炎支原体肺炎患儿血清IL-2水平显著降低,而IL-6、IL-18、TNF-A水平均不同程度升高,p<0.05。结论 IL-2、IL-6、IL-18、TNF-A参与了肺炎支原体肺炎的发生、发展,检测相关血清炎症因子水平对判定病情和预后有一定的临床价值。     

膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达及意义

目的探讨膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达及意义.方法选取行人工膝关节置换术患者28例,收集膝骨关节炎软骨标本,体外培养软骨细胞,分为空白对照组、siRNA组(siRNA脂质体2000转染软骨细胞)、重组人骨桥蛋白刺激组(1 mg/L重组人骨桥蛋白干预软骨细胞).酶联免疫吸法检测细胞培养上清液中IL-18,IFN-γ,IL-6,TNF-α水平; RT-PCR检测透明质酸合成酶mRNA表达水平.结果转染48 h后,空白对照组、siRNA组、重组人骨桥蛋白刺激组中膝骨关节炎软骨细胞的骨桥蛋白mRNA和蛋白相对表达量差异具有统计学意义(P0.01);其中siRNA组骨桥蛋白mRNA和蛋白相对表达量明显降低,重组人骨桥蛋白刺激组明显提升. siRNA组细胞培养液中IL-18,IFN-γ,IL-6,TNF-α水平明显低于空白对照组、重组人骨桥蛋白刺激组,差异具有统计学意义(P0.01);重组人骨桥蛋白刺激组细胞培养液中IL-18,IFN-γ,IL-6,TNF-α水平明显高于空白对照组、siRNA组,差异具有统计学意义(P0.01).siRNA组透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶2、透明质酸合成酶3 mRNA相对表达量明显高于空白对照组、重组人骨桥蛋白刺激组,差异具有统计学意义(P0.05);重组人骨桥蛋白刺激组透明质酸合成酶1、透明质酸合成酶2、透明质酸合成酶3 mRNA相对表达量明显低于空白对照组、siRNA组,差异具有统计学意义(P0.01).结论下调膝骨关节炎软骨细胞中骨桥蛋白表达可抑制炎症因子分泌,促进透明质酸合成,改善膝骨关节炎病情.     

血清IL-18在急性胰腺炎严重性预测中的研究

目的探讨血清IL-18对急性胰腺炎严重性预测的价值。方法对10例健康志愿者、10例急性水肿性胰腺炎、10例急性出血坏死性胰腺炎患者分别于第1,2,5,10进行APACHEII评分、血清TNF-α、IL-6、IL-18的测定,并对第1天IL-18与APACHEII评分、血清TNF-α、IL-6之间做相关性分析。结果MAP组与SAP组APACHEII评分、血清TNF-α、IL-6、IL-18水平显著高于对照组(P<0.01)。SAP组各项指标均高于MAP组,第1天IL-18水平与APA-CHEII评分、血清TNF-α、IL-6水平呈正相关关系(r=0.82,P<0.01;r=0.74,P<0.01;r=0.79,P<0.01)。结论血清IL-18在急性胰腺炎中是一个早期释放的细胞因子,对急性胰腺炎的严重程度有预测价值。     

肺炎支原体肺炎患儿血清IL-2、IL-6、IL-18 and TNF-α的变化及临床意义

目的 探讨炎症因子IL-2、IL-6、IL-18、TNF-α在儿童肺炎支原体肺炎中的变化及其临床意义.方法 选择广州市越秀区儿童医院儿科肺炎支原体肺炎住院患儿50例为观察组,同时选取正常患儿50例作为对照组,采用酶联免疫法检测患儿急性期、恢复期及正常儿童血清的IL-2、IL-6、IL-18、TNF-α水平.结果 与对照组相比,肺炎支原体肺炎患儿血清IL-2水平显著降低,而IL-6、IL-18、TNF-α水平均不同程度升高,p＜0.05.结论 IL-2、IL-6、IL-18、TNF-α参与了肺炎支原体肺炎的发生、发展,检测相关血清炎症因子水平对判定病情和预后有一定的临床价值.     

人肽基脯氨酰顺反异构酶基因的克隆、表达、纯化及热变性交联

蛋白质分子间交联是普遍存在的现象．然而，蛋白质交联的分子机理还不太清楚．为了进一步探测蛋白质交联的分子机理，以及交联能否在异源肽链间发生，本实验室克隆了人肽基脯氨酰顺反异构酶(human Peptidylproly-Cis-trans-isomerase，hPPI)cyclophilin cDNA基因，并纯化出了PPI蛋白．最后，将PPI和．lysozyme蛋白进行热变性交联实验，结果显示在同源和异源肽链间都有二聚体和多聚体形成．并证实蛋白质交联可经三步完成：1)蛋白质构象包括二级结构改变；2)形成分子间二硫键；3)形成分子间异肽键．     

重组人白细胞介素6工程菌的表达和功能初探

自人外周血的mRNA中获得了白细胞介素6(Interleukin-6, IL-6)cDNA,基因被克隆并在大肠杆菌中表达,在20L发酵罐中每L发酵液可得60g湿菌体,IL-6的表达量约占大肠杆菌全蛋白的30%以上,占包含体蛋白的60%。纯化产物在长期,急性毒性和三致实验正常的基础上,用恒河猴的功能实验表明,在不制造血象降低模型的情况下,仍能明显增加血液中血小板和白细胞的数量。     

双黄清口胶囊对口腔溃疡的疗效观察

目的　观察双黄清口胶囊对口腔溃疡的治疗效果。方法　 (1)选用SD大鼠 ,分为双黄清口胶囊高、中、低剂量 (5 40、2 70、1 3 5g生药 kg)组 ,阳性对照组和空白对照组。连续灌胃给药 14d ,进行主要药效学实验。 (2 )选用KM小鼠 ,分为双黄清口胶囊高、中、低剂量 (7 2 0、3 60、1 80g生药 kg)组及阳性对照组和空白对照组。连续灌胃给药 7d ,进行抗炎、镇痛实验。结果　 (1)双黄清口胶囊各剂量组均能不同程度减小溃疡面直径 ,与空白对照组相比有显著性差异 (P <0 0 1,P <0 0 5)。 (2 )双黄清口胶囊可显著降低二甲苯所致小鼠耳廓炎性水肿 ,明显降低肿胀率(P <0 0 1,P <0 0 5)。 (3 )双黄清口胶囊可明显降低小鼠因热刺激引起的疼痛反应 ,提高痛阈值 (P <0 0 1,P <0 0 5)。结论　双黄清口胶囊能促进口腔黏膜溃疡的恢复 ,并具有较好的抗炎止痛作用     

DNA指纹图在小鼠ES细胞嵌合体鉴定中的应用

尝试应用多位点DNA指纹技术,检测经过胚胎干细胞(ES细胞)途径所获得的嵌合体小鼠中ES细胞在各种脏器中的嵌合情况、检测ES细胞在嵌合体小鼠中是否实现种系传递。结果表明：采用新型的人工合成的寡核苷酸多聚体探针(JL-02探针)的多位点DNA指纹图谱,具有足够的多态性和很好的稳定性。适用于鉴定ES细胞在嵌合体小鼠各种组织器官中的嵌合情况,也适用于鉴定ES细胞是否具有种系嵌合能力,尤其适用于在嵌合体研究中,最适宜的品种组合具有相同的毛色或相同的酶型。     

中国人HLA-G1的cDNA克隆、序列分析、表达和蛋白质空间结构预测

从中国人外周血单个核细胞、胎盘组织和肝癌组织等样品中克隆了包含完整HLA-G1读框的cDNA;与国外同行获得的该基因及其蛋白质序列比较分析表明,该基因虽然有着细微的种族特异性,但高度保守;并获得了它的截断型重组蛋白,根据蛋白一级结构和同源比较方法,模建了它及其与特异性受体KIR2DL4形成复合体的空间结构模拟,预测了它们之间相互作用的特征.     

孟门师-弟子问对艺术

先秦教与学以师生之间的问答为主要形式,通常称为"启发式",孟子亦然.考察<孟子>一书中所透露的师-弟子间的关系,尤其是他们的问对艺术,较之泛泛地议论孟子教育思想,当更接近于历史的真实.从中,亦可看出它同孔门师-弟子之间问对艺术的不同.     

关于去去相连的双音词的测试评分标准

在普通话水平测试中去声加去声的双音节词语评分标准存在一些问题 ,主要是对重中格式的词语把握不定。将《大纲》普通话常用词语表 (表一 )中去去相连的重中格式的词语辑录出来 ,可以引起人们的注意     

高分辩率谐波恢复的互四阶累计量的Pisarenko方法

互高阶谱估计是抑制混合色噪声的一种有效方法。为此提出了一种混合色噪声背景下谐波恢复的互四阶累积量的Pisarenko方法。仿真结果表明，该方法可同时抑制各信道间相关的高斯色噪声及相互独立的任意色噪声的影响，在混合色噪声和很低信噪比条件下谱估计的分辨率和对混合色噪声的抑制等方面均明显优于自高阶谱方法。     

基于特征技术的智能产品信息模型框架及其实现

研究了基于特征的智能产品建模系统的框架、工作机制及系统实现技术要点 .产品可以封装为包括几何形体信息、非几何属性信息及与产品相关知识等内容的对象 .特征建模是智能性建模方法 ,可将特征建模系统中的特征分为两类 :应用级特征和系统级特征 .应用级特征是面向应用领域的特征 ,它可由用户自行定义或扩充以符合用户的应用要求 ;系统级特征是由系统提供的低层次特征 .建模系统提供了利用系统级特征组建新的复合特征的函数方法     

单板机水暖锅炉控制系统

介绍了单板机在中小型水暖锅炉控制中的应用,其方法采用温度控制,即锅炉的出水温度跟踪室外气温(下称气温)的变化来控制锅炉的燃烧系统.