人血清白蛋白与叶酸相互作用的荧光光谱法研究

基于荧光光谱技术,研究了人血清白蛋白与叶酸的相互作用.结果表明:人血清白蛋白与叶酸共存时会发生相互作用;叶酸对人血清白蛋白荧光光淬灭机制为静态淬灭,且在发生荧光淬灭的同时生成了蛋白质与药物的复合物;人血清白蛋白是通过疏水性作用力与叶酸发生相互作用的,叶酸在血清白蛋白中仅有一个结合位点.     

人血清白蛋白与吩噻嗪相互作用时的构象变化研究

研究了人血清白蛋白与药物吩噻嗪相互作用时的荧光淬灭及构象变化情况．结果表明：吩噻嗪通过静态方式对HSA的荧光进行淬灭,并与HSA形成了复合物;吩噻嗪在与人血清白蛋白相互作用时未引起该蛋白质构象的变化．因此,吩噻嗪作为药物在用于某些疾病的治疗时,不会影响到人血清白蛋白这样的传输蛋白的正常生理功能．本研究对药理学和临床医学具有重要意义．     

原花青素的抗氧化活性研究

以脱脂葡萄籽为原料提取原花青素,选择了清除超氧阴离子自由基、对亚油酸体系的保护、以及对猪油自氧化的抑制等三方面对原花青素的抗氧化活性进行评定,同时考察了原花青素与合成抗氧化剂的复合使用效果及与有机酸、Vc的协同效应.结果表明,原花青素具有很强的清除O2-.的能力,其抑制邻苯三酚自氧化率可高达91.5%;其对亚油酸抗氧化的最适范围是在pH值为7.0的环境中;0.03%原花青素的抗氧化活性接近于0.01%BHT,0.02%原花青素的抗氧化活性优于0.01%茶多酚,0.01%原花青素与0.01%PG的复合使用效果最佳,可使猪油的货架期在20℃下由8.5个月延长到23.9个月.     

灿烂甲酚蓝与DNA结合模式的荧光光谱法研究

采用光谱法、热力学理论以及盐效应作用等手段,研究了灿烂甲酚蓝(BCB)与DNA的结合模式,结果表明,BCB可与DNA形成复合物发生荧光淬灭,二者淬灭常数随温度升高而减小,说明DNA对BCB淬灭机制为静态淬灭;ΔG 0,表明二者的相互作用可自发进行;且ΔS 0,ΔH 0,说明BCB和DNA之间主要作用力为氢键和疏水作用力,Na Cl和NaH_2PO_4的加入对BCB-DNA体系的荧光强度没有影响,故二者之间不存在静电作用; BCB浓度增大,DNA-盐酸小檗碱(BR)体系的荧光强度减弱,说明BCB与DNA的结合模式类似于BR与DNA的结合,为嵌插结合.     

卡博替尼与血清白蛋白的相互作用研究

采用紫外可见光谱和荧光光谱考察了卡博替尼(CBZ)与牛血清白蛋白(BSA)间相互作用,结果表明CBZ主要借助疏水作用力与BSA形成1∶1的配合物,导致BSA内源性的荧光发生淬灭,其类型为动、静态同时存在的联合淬灭.上述结合作用的动态淬灭常数KSV和表观结合常数Ka分别为5.223×10~4L·mol~(-1)和5.06×10~4L·mol~(-1),说明CBZ与BSA间存在较大相互作用,该研究对于从分子水平上研究CBZ合理应用具有重要意义.     

华中五味子稀有降三萜成分及其与人血清白蛋白的相互作用

应用多种色谱技术从华中五味子中分离纯化出一个稀有降三萜成分schicagenin A,采用荧光淬灭技术和紫外光谱方法研究该化合物与人血清白蛋白的相互作用机制,两者的相互作用研究显示：静态淬灭机制参与其中,提示schicagenin A与人血清白蛋白结合形成了复合物;在schicagenin A与人血清白蛋白的结合过程中疏水作用起了主要驱动作用;人血清白蛋白的ⅡA亚域(位点I)是schicagenin A与之的结合位点.本研究为schicagenin A在人体内进一步的生物活性研究和基于该化合物的新药设计提供了参考数据.     

食品抗氧化剂叔丁基对苯二酚与溶菌酶结合特性的荧光光谱学研究

叔丁基对苯二酚是一种被广泛应用的脂溶性酚类食品抗氧化剂,为揭示食品抗氧化剂叔丁基对苯二酚与溶菌酶的相互作用机理,利用荧光猝灭、同步荧光、三维荧光与荧光寿命的测定,从结合机理、亲和能力及结构改变等方面分析了叔丁基对苯二酚与溶菌酶的结合特性.结果表明:叔丁基对苯二酚能与溶菌酶形成不发光的基态复合物,常温下的结合常数约为3×104L/mol;该结合过程属自发行为,且氢键和范德华力在此过程中起主导作用;叔丁基对苯二酚的嵌插促使复合物的形成,并改变了溶菌酶的原有氨基酸残基微环境,但蛋白整体构象保持完整.     

发酵协同多酚复合对大米淀粉消化性能的影响

为提升大米淀粉的抗消化性能,采用发酵协同原花青素相互作用的方法和现代分析技术系统研究了原花青素C1复合后发酵大米淀粉的消化性能变化规律,及发酵大米淀粉-原花青素复合物的颗粒形貌、半结晶层状结构、结晶结构、螺旋结构和表面短程有序结构等多尺度结构的变化情况,揭示了原花青素复合调控发酵大米淀粉抗消化性能的分子机制.结果表明:...     

矢车菊素与矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对H2O2诱导HepG-2细胞氧化应激保护作用的比较

以人肝癌细胞HepG-2为模型,以细胞抗氧化水平为指标,比较研究一种花色苷元矢车菊素(Cy)和其对应的花色苷矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对H_2O_2诱导的细胞氧化应激的保护作用。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的存活率,采用总抗氧化能力(T-AOC)和细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)的含量评价样品的抗氧化保护作用。结果表明:两种花青素在0~0.5 mmol/L范围内对HepG-2细胞无明显的毒性;与H_2O_2氧化应激模型组相比,在高(400μmol/L)、中(200μmol/L)、低(50μmol/L)3种浓度下两种结构的花青素处理均可显著提高细胞总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活力和还原型谷胱甘肽含量,降低细胞内丙二醛含量,抗氧化能力与花青素浓度呈正相关性;而Cy的细胞抗氧化作用显著高于C3G。该研究结果为阐明花青素的构效关系提供了体外研究的新证据。     

LSPcZn与马心肌红蛋白相互作用的研究

本文研究了在人体生理条件下β-四(5-磺酸萘氧基)锌酞菁(LSPcZn)与马心肌红蛋白分子(FePP-Mb)的相互作用,LSPcZn能够显著地猝灭FePP-Mb分子的荧光,说明两者之间有着很强的相互作用.变温荧光光谱实验的结果验证该作用可以导致LSPcZn分子和FePP-Mb分子之间形成复合物,使得LSPcZn可以通过静态猝灭有效地猝灭FePP-Mb的荧光.通过对荧光光谱的数据进行处理,得到LSPcZn分子和马心肌红蛋白(FePP-Mb)在不同温度下形成复合物的结合常数和结合位点.另外,LSPcZn与FePP-Mb分子之间相互作用可以改变FePP-Mb的构象.     

水杨醛缩酪氨酸还原Schiff碱铜配合物的合成、结构及其与DNA键合作用的光谱学研究

利用水杨醛缩酪氨酸还原schiff碱(H2styr),合成了一个具有一维螺旋链结构的铜配合物,解析了其单晶结构,并用电子光谱、荧光光谱研究了该配合物和小牛胸腺DNA之间的相互作用.结果表明,当加入一定量的DNA时,电子光谱的最大吸收峰明显红移,产生减色效应;同时配合物也能较大程度地淬灭EB-DNA复合物的荧光,表明配合物与DNA存在插入结合作用     

原花青素微胶囊对花生油的抗氧化活性研究

以原花青素微胶囊作为抗氧化剂,采用Schaal烘箱法对花生油进行抗氧化研究,并与合成抗氧化剂BHT、PG进行对照,同时考察了BHT、PG以及不同增效剂对原花青素微胶囊抗氧化效果的影响.结果表明,原花青素微胶囊最适添加量为0.04%;原花青素微胶囊与维生素C的增效作用最强;原花青素微胶囊与PG混合使用的效果优于与BHT混合使用的效果.并对花生油货架寿命进行了预测,可知添加抗氧化剂后,花生油的货架期均得到了不同程度的延长.     

3种葡萄籽原花青素的抗氧化能力和稳定性研究

对山西地区种植的3种葡萄(玫瑰香、维多利亚、巨峰)葡萄籽进行原花青素提取,并对所得原花青素进行抗氧化活性和稳定性的研究。结果表明,3种葡萄籽原花青素均具有一定的抗氧化效果,其中巨峰葡萄籽原花青素的自由基清除作用较好;避光、微偏酸环境和避免金属阳离子的螯合作用可有效提高葡萄籽原花青素的存放效果。     

荧光光谱法研究尼麦角林与牛血清白蛋白的相互作用

目的:模拟正常人体生理条件下,采用荧光光谱技术研究尼麦角林与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的机制.方法:通过荧光光谱法确定尼麦角林对BSA荧光淬灭的机制,采用Stern-volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数方程计算反应的猝灭常数和形成常数,采用双对数方程计算两者结合常数和结合位点数,热力学公式计算反应前后焓变和熵变确定两者结合的主要作用力类型.结果:尼麦角林在0.25×l0-4~2.25×l0-4 mol·L-1浓度范围内,对BSA的内源荧光有较强的淬灭作用,淬灭类型属于静态荧光淬灭.在温度25℃和37℃时,尼麦角林与BSA的结合常数分别为3.499×104 L·mol-1和5.213×104 L·mol-1,结合位点数分别为1.21和1.25.由热力学参数焓变(ΔH=11.05 KJ·mol-1)大于零和熵变(ΔS=74.87J·mol-1·K-1)大于零,确定尼麦角林与BSA之间的作用力以疏水作用力为主.结论:尼麦角林与BSA通过疏水作用形成复合物,经静态猝灭机制引起BSA内源性荧光猝灭.     

荧光光谱法研究盐酸氟奋乃静与DNA相互作用

采用荧光光谱法研究了FPZ与DNA的相互作用机理.实验结果表明,DNA通过静态猝灭机制使FPZ的荧光发生猝灭,疏水作用力和氢键在FPZ-DNA复合物形成过程中发挥主要作用,FPZ和DNA的相互作用模式是嵌插结合方式.     

芦丁和阿魏酸与酪蛋白的相互作用研究

酚类物质与蛋白质的相互作用对富含酚类物质的功能性乳制品的稳定性及生物活性具有重要影响。通过光谱分析及抗氧化活性测定,研究了芦丁和阿魏酸与酪蛋白的相互作用机制。荧光光谱分析发现,芦丁和阿魏酸均能淬灭酪蛋白的内源荧光,淬灭方式为静态淬灭;热力学参数表明,芦丁与酪蛋白作用的驱动力为疏水作用,阿魏酸与酪蛋白作用的驱动力为疏水作用和氢键。紫外-可见光谱和同步荧光光谱表明,芦丁和阿魏酸的加入影响了酪蛋白中酪氨酸和色氨酸残基周围的微环境,从而引起酪蛋白的构象改变。傅里叶变换红外光谱和圆二色谱研究结果进一步表明,芦丁和阿魏酸使酪蛋白的二级结构发生了变化,但没有破坏其二级结构。     

原花青素对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制研究

帕金森症(Parkinsons disease,PD)是一种老年人群常见的中枢神经系统变性病,因发病率明显上升,其病因与防治策略亟待阐明.文中以多巴胺能神经元模型细胞PC12为材料,以致PD毒性物质鱼藤酮(Rotenone,Rot)处理细胞,检测原花青素(Grape seeds procyanidins,GSP)对Rot引起细胞毒性的防护作用,并探讨其机理.MTT法显示,GSP可减弱Rot对细胞生长的抑制作用,其效果具有浓度和时间依赖性;倒置显微镜观察吉姆萨染色和荧光染料Hoechst 33342染色后显示,Rot处理细胞由平铺多角形变为皱缩,突起回缩,细胞核染色质凝集,部分细胞核碎裂,呈现一定凋亡特征;GSP预处理对细胞和细胞核形态的改变有明显保护作用.DCFH-DA、Rhodamine 123染色后经流式细胞术分析及荧光显微镜观察显示,GSP抑制了Rot所致细胞内活性氧水平升高,同时明显改善Rot引起的线粒体膜电势降低;Annexin V/PI双染分析发现GSP联合处理明显抑制了Rot所致细胞凋亡.结果表明,GSP可能通过降低细胞ROS生成、恢复线粒体膜电势水平而保护细胞,抑制Rot引起的细胞凋亡,可能在防治帕金森病方面发挥作用.     

紫外线吸收剂PBSA与DNA相互作用的光谱研究

采用荧光光谱法和紫外光谱法, 在模拟生理条件下(pH＝7.23)对紫外线吸收剂2-苯基苯并咪唑-5-磺酸(PBSA)与脱氧核糖核酸(DNA)的相互作用进行了研究.结果表明PBSA能够与DNA相结合形成复合物,引起了PBSA紫外吸收的降低和荧光的猝灭;PBSA与DNA的相互作用为静态猝灭过程,两者间的结合位点数为1.11.     

异烟肼与牛血清蛋白相互作用的光谱研究

用紫外吸收光谱和荧光光谱研究了异烟肼(INH)与牛血清蛋白(BSA)的相互作用.荧光光谱表明,INH对BSA的荧光有较强的猝灭作用.通过结合常数和结合位点数的计算,证明这种荧光猝灭机理符合静态机制,INH和BSA形成了1∶1稳定复合物;考察不同温度和酸度下的猝灭作用,进一步证实其静态猝灭行为和疏水作用机制.紫外吸收光谱和同步荧光光谱表明,INH与BSA的相互作用使蛋白质的分子构象发生变化,而同步荧光光谱显示两者的结合位点更接近于色氨酸.     

光谱法研究灿烂甲酚蓝与血浆蛋白质结合性质及蛋白质构象变化

在模拟的生理条件下,采用荧光发射光谱、紫外-可见分光光度法、同步荧光光谱、三维荧光光谱和圆二色(Circular dichroism,CD)光谱等技术研究了灿烂甲酚蓝(Brilliant cresyl blue,BCB)与人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)的结合性质以及药物的结合对HSA构象的影响.结果表明,BCB和能猝灭HSA的内源荧光,BCB对HSA的荧光猝灭是形成HSA-BCB复合物的静态猝灭过程,紫外-可见吸收光谱的结果也进一步证实了BCB对HSA荧光的静态猝灭.BCB与HSA分子Trp残基的距离r小于7 nm,说明HSA与BCB之间能够发生非辐射能量转移,但由于rR0值,这说明形成HSA-BCB复合物导致的静态猝灭是HSA荧光猝灭的主要原因.热力学参数计算结果表明BCB与HSA相互作用形成HSA-BCB复合物的过程是自发进行的,疏水作用力和氢键在形成HSA-BCB复合物的过程中发挥主要作用.同步荧光光谱、三维荧光光谱和CD光谱的结果说明BCB与HSA的相互作用形成的HSA-BCB复合物导致了HSA的构象发生了变化.