新型亲和技术及其应用

亲和层析是基于生物分子间特异性的亲和作用而建立的分离纯化技术。综述了该技术与其它分离纯化方法相结合而产生的新型亲和技术及其应用     

新型亲和技术的研究进展

亲和层析是基于生物分子间特异性的亲和作用而建立的分离纯化技术,综述了该技术与其它分离纯化方法相结合产生的新型亲和技术及其应用。     

两种亲和色谱在中草药活性成分分离和纯化中的应用

亲和色谱多用于生物大分子的分离与纯化.随着技术的发展,出现了多种新型的亲和色谱,其应用范围也不断拓展.本文简要介绍了分子烙印亲和色谱和免疫亲和色谱的基本原理,以及它们在中草药活性成分分离和纯化中的应用概况.     

两种亲和色谱在中草药活性成分分离和纯化中的应用

亲和色谱多用于生物大分子的分离与纯化.随着技术的发展,出现了多种新型的亲和色谱,其应用范围也不断拓展.本文简要介绍了分子烙印亲和色谱和免疫亲和色谱的基本原理,以及它们在中草药活性成分分离和纯化中的应用概况.     

两种亲和色谱在中草药活性成分分离和纯化中的应用

亲和色谱多用于生物大分子的分离与纯化。随着技术的发展,出现了多种新型的亲和色谱,其应用范围也不断拓展。本文简要介绍了分子烙印亲和色谱和免疫亲和色谱的基本原理,以及它们在中草药活性成分分离和纯化中的应用概况。     

利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因

目的:人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离.方法:利用NCBI、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的方法合成编码链霉亲和素蛋白基因.将纯化的链霉亲和素通过偶联剂与带羧基的磁粒共价结合,用于快速...     

亲和温敏聚合物PNIPAA,-co-AA,的制备及表征

制备一种新型的蛋白质分离纯化材料。探讨亲和温敏双水相体系对牛血清白蛋白（BSA）的分配特性。优化分离纯化BSA条件,同时测定BSA的回收率以及纯化倍数,并通过电泳SDS-PAGE对BSA蛋白进行了表征。     

固定化金属离子亲和色谱研究进展

 固定化金属离子亲和色谱是将过渡金属离子通过配体螯合在固相基质上,通过过渡金属离子与靶分子的组氨酸或半胱氨酸特异性结合形成相对稳定的复合物,最后以竞争性洗脱方式实现靶分子的富集与纯化,其核心为金属螯合亲和基质材料制备。具有亲和选择性高、生物兼容性好、可逆再生等优势,迄今已发展了40余年,广泛应用于靶分子的特异性富集、分离与纯化,本文综述了近3年固定化金属离子亲和色谱纳米材料、微球色谱基质、棉纤维、分子印迹材料、整体材料、共价有机骨架等方面的研究进展。     

自制纤维素金属螯合亲和膜的部分吸附性能及纯化牛血SOD

×10-6 g/cm2,但蛋白解吸率前者低于后者,表明一定浓度的NaCl有助于亲和膜对蛋白质的吸附,同时也使被吸附的蛋白的解吸率有所降低.吸附-解吸方式(静态法)分离纯化SOD,解吸样品比活达8 770 U/mg,纯度为81%;吸附-洗脱方式(动态法)分离纯化SOD,穿柱流出样品比活达12 418 U/mg,纯度为85%.自制纤维素亲和膜有较好的吸附性能和纯化效果,重复使用性能良好,制备和纯化过程简便易行,具有广阔应用前景.     

自制核心链霉亲和素的性质

在实验室分离和纯化链霉亲和素的基础上对其性质进行了鉴定．在SDS-PAGE中链霉亲和素只有一条带，单体的分子量为14500Da，链霉亲和素的相对分子量约为58000Da；其等电点为5．9～6．2；结合生物素的活性为15．7U／mg．结果表明自制链霉亲和素为核心链霉亲和素，在纯度、活性等方面达到了理想的效果．     

磁性琼酯糖亲和吸附剂的合成与应用

采用反相悬浮包埋技术合成了粒径在43-295μm之间的磁性琼脂糖微球。磁性琼脂糖微球经环氧氯丙烷活化后，分别键合6-氨基已酸、氨基乙酸和乙二胺为间隔臂，用水溶性碳二亚胺为缩合剂，分别偶联对氨基苯甲脒、l-精氨酸甲酯和胍基已酸，制备了3种磁性亲和吸附剂，并用于尿激酶粗品的分离纯化。测定了活性回收率和比活提高倍数，并与以磁性葡聚糖为基质的磁性亲和吸附剂对尿激酶的纯化效果进行了对比。     

胃蛋白酶的生物提取法中分离纯化技术的研究进展

本文就胃蛋白酶的生物提取法,对其在生产过程中的分离、纯化技术展开综述。其中,分离技术主要介绍了：盐析法、有机溶剂沉淀法、底物亲和法、透析法。纯化技术主要介绍了：凝胶过滤法、透析离子交换法。综合比较各分离纯化方法的特点,得到最优的分离纯化方法有机溶剂与盐析共沉淀法、膜分离技术、等电点沉淀法与底物亲和法。     

高磁性壳聚糖微粒的制备与应用

采用壳聚糖包埋磁粉，经戊二醛修饰、环氧氯丙烷交联制得高磁性壳聚糖微料。此微粒共价结合卵清粘蛋白得到磁性亲和吸附剂，可应用于胰蛋白酶的亲和纯化。     

水溶性亲和超滤载体的制备和应用

用Ｄｅｘｔｒａｎ Ｔ２０００,经环氧氯丙烷交联并氧化产生部分羧基,偶联对氨基苯甲脒制得水溶性亲和载体巨配基。配基密度为７１．４μｍ ｏｌ／ｇ。截留分子量为１０ 万的超滤膜对所制亲和载体的截留率大于９９．５％ ,但尿激酶能自由通过。将比活为５００ＩＵ／Ａ２８０的尿激酶粗品经亲和超滤得到纯化的尿激酶,比活达６６ ３００ＩＵ／Ａ２８０,纯度提高１３３ 倍,回收率达８３．４％ 。     

新型嗜硫膜亲和纯化鸡传染性法式囊卵黄抗体研究

以普通定性滤纸为基质 ,经碱处理 ,二乙烯砜活化和巯基乙醇偶联后 ,制备成嗜硫膜 (thiophilic -mem brane ,TM) ,考察了其对鸡传染性法式囊 (IBD)卵黄抗体 (IgY)的特异性亲和吸附作用 .卵黄经醋酸钠 -醋酸缓冲液 10倍稀释于 4℃自然沉降脱脂后 ,所得上清液 (WSF)经嗜硫膜亲和吸附分离 ,可一步纯化得到SDS-PAGE电泳纯的卵黄抗体 .IgY在嗜硫膜上的吸附速度随着流速的增加而增大 ,吸附量则随着流速的增加而减少 .     

特异性Tetrodotoxin亲和吸附微珠的制备及其提取性能

将横纹东方豚卵巢与醋酸乙醇溶液混合匀浆,经离心,加热,沉淀,脱脂等处理,制得粗提液,活性炭吸附粗提液得到粗毒液;以壳聚糖为载体合成亲和微珠分别来分离纯化粗提液和粗毒液,用传统的小鼠生物法检测TTX毒素量．潮湿活性炭对TTX的吸附量约为2μg／g,潮湿亲和微珠吸附量约为10μg／g;亲和微珠吸附提取粗毒液,回收率达51％,直接吸附粗提液,回收率达到80％,同时蛋白也得到有效的去除．     

新型磁性亲和载体的制备及其对溶菌酶的吸附

对兼具亲和作用和磁分离优点的磁性亲和吸附过程进行了研究。采用氯化沉淀法制备强磁响应性纳米级磁流体，并通过聚乙烯醇包埋，获得磁性高分子载体。经NaBH4还原和活性色素辛巴蓝修饰，使载体具有特异性亲和吸附能力。通过透射电镜、红外光谱、磁化率测定等手段对载体物性进行表征，以溶菌酶为目标蛋白，考察了吸附时间及温度对载体吸附性能的影响。     

抗体亲和肽配基的高通量筛选和理性设计

抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白,在疾病治疗和检测方面应用前景广阔.目前抗体的分离纯化是其生产的瓶颈.高选择性的亲和色谱技术在抗体纯化过程中发挥着越来越重要的作用,而配基的高通量筛选和设计是亲和色谱技术应用的关键因素.短肽是一种常见的亲和配基类型.本文根据近年来国内外抗体亲和肽配基的研究情况,综述了抗体亲和肽配基的高通量筛选和理性设计方法,重点介绍其作用机理、发展现状以及目前存在的主要问题.最后展望了短肽配基仿生设计技术.     

基于亲和超滤技术的天然活性物质筛选方法

药效物质与药物靶标的相互作用是其生物活性的基础,利用药物靶标亲和选择性“钩钓”其特异性配体,可以实现复杂提取物中天然活性物质分析的“精准制导”.亲和超滤是一种以上述原理为基础,将亲和捕获与超滤分离相结合以实现化合物高通量筛选的技术,具有快速、简单、高效等特点,常与液质联用等分析技术联合使用,克服了天然活性物质筛选研究面临的诸多问题,近年来被广泛应用于天然活性物质的快速靶向筛选.本文从亲和超滤技术本身的原理、影响因素及与其他分析技术的联用情况等方面,详细综述了亲和超滤技术的特点和应用现状,以期为构建天然活性物质的快速筛选策略提供科学思路和依据.     

单克隆抗体亲和渗滤法制备两种牛生殖激素

在本室已获得高特异抗牛促卵泡激素 (bFSH)和抗牛促黄体激素 (bLH)杂交瘤细胞的基础上 ,制备纯化抗bFSH和抗bLH两种单克隆抗体 (McAbs) ,并进而建立了一种单抗免疫亲和渗滤新技术。使用该技术成功地制备了上述两种牛生殖激素 ,从 7g牛垂体干粉可提取 3.3mg亲和纯bFSH和 1 1 .1mg亲和纯bLH。回收率分别为 85 %和 82 %。