甘蔗黑穗病菌拮抗性芽孢杆菌的抗菌作用与伊枯草菌素A的产生有关

选择对甘蔗黑穗病菌有拮抗作用的5个革兰氏阳性芽孢杆菌拮抗菌株和3个革兰氏阴性拮抗细菌菌株,用PCR技术,扩增抗霉菌枯草杆菌素操纵元中mycB基因。结果是,5个革兰氏阳性芽孢杆菌拮抗菌株均扩增出一条大小为2.0kb左右的特异带,革兰氏阳性芽孢杆菌基因组的PCR产物和伊枯草菌素A合成酶操纵元中的,ItuB基因的同源性为97％～98％,说明其抗菌作用机制和Iturin类群脂肽抗生素的产生有关。3个革兰氏阴性拮抗细菌中,没有扩增到基因,其抗菌作用机制有待进一步研究。     

不同胶孢炭疽菌菌株比较

从我国6个省的38种植物上收集并鉴定43个胶孢炭疽菌(Colletorichum gloeosporiaides)菌株，比较和分析了它们的培养特征和生长适应性等性状。43个菌株的培养性状和不同培养条件(温度和pH)的生长适应性均存在着较大的差异。对43个菌株的分生孢子的长宽及43个菌株在不同条件下生长量进行单因素方差分析表明，菌株间的差异达到了极显水平。聚类分析把43个菌株分为距离相差不大的多个类群；各菌株的分．化与菌株的寄主种类和地理来源没有明显的相关性。因此菌昧的形态学特征不适合对林木胶孢炭疽菌进行种以下的类群划分。     

枯草芽孢杆菌B1-41对小麦全蚀病及其病原的防治和抑制作用

从小麦根际土壤中分离得到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B1-41拮抗菌株，室内测定其带菌培养液对小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis var．tritici)9826菌株和9812菌株的抑制效果分别为70％和68％，盆栽试验中，其防治效果为63％和59％，高于化学杀菌剂处理的55％和51％的效果．试验表明，该菌株可以造成病菌菌丝发生畸变和菌丝细胞壁瓦解．     

固氮细菌与杨树的联合固氮作用

从21个杨树无性系和家系根际分离筛选到具有较高固氮酶活性的5个菌株,分别接种到杨树无性系NL－80106组培苗根际,两个月后测定苗的生长量,结果表明接种固氮细菌的组培苗生长均好于对照。植株干重增幅可达17．9％－82．5％,苗高增幅达11．8％－29．6％,叶片的含氮量增幅为3．7％－21．5％,含磷量增幅为1．5％－57．0％,原位测定苗的固氮酶活性每株小时为12．25－45.81nmolC2H4,3号和71号菌株的接种效应最显,苗高,干重,地径,叶片数都达到了极显的水平,71号菌株处理苗的叶绿素含量,叶片中N,P含量最高,且其乙炔还原固氮酶活必也较高。说明这些菌株与杨树无性系NL－80106组培苗具有明显的联合固氮作用,同时也改善了磷的供应状况,促进了组培苗的生长。     

一株当归根腐病拮抗菌株的筛选、鉴定及培养条件优化

本研究从河西走廊盐碱土中分离得到的多株对植物病原菌具有拮抗活性的细菌菌株中,筛选当归根腐病拮抗菌株,为当归根腐病的生物防治提供适合的菌种资源.采用平板对峙、琼脂扩散法筛选拮抗细菌,通过形态学、生理生化试验及分子生物学鉴定法确定菌株分类学地位;以活性物质稳定性试验为基础,设计单因素试验,响应面分析法优化培养条件.结果表明:菌株A17-2-1具有较好的当归根腐病拮抗活性,且抗菌谱较广,经鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis);其活性物质在高温、强碱及紫外照射下均具有较好的稳定性;最优培养条件为p H8.5、温度32℃、氯化钠含量0.5%,在此条件下培养24 h,菌株A17-2-1菌悬液在波长600 nm处吸光度值为1.360,且在该条件下对两株当归根腐病病原菌的抑菌率均达到81.01%以上.     

用于生物防治水仙叶大褐斑病的拮抗细菌的筛选

从福建龙海市九湖采集水仙根际土样３０份,从中分离出１８０株根际细菌纯培养物。这些细菌与水仙叶大褐斑病原菌的平皿拮抗实验显打印,直到示,对病原菌有明显拮抗作用的细菌有２１株,拮抗作用中等的有５２株,略有拮抗作用或没有拮抗作用的有１０７株细菌。从中印结束或选出４２个菌株,经过盆载实验,淘汰危害严重的菌株,筛选出６株对水仙叶大褐斑病原菌具有良好的抑制效果的菌株。进一步的盆载防效实验证实,这６个菌株对由叶大褐病原菌引起的水仙病害有明显的防治效果。     

香蕉内生真菌、放线菌类群分析

采用内生菌分离法对华南种植的健康香蕉根、叶内生真菌、内生放线菌进行分离研究表明：叶内部的内生真菌主要为盘长孢刺盘孢菌物Colletotrichum gloeosporioides占60.77％；而根内部曲霉Aspergillus spp. ，青霉Penicillium spp.，拟青霉Pacecilomyces spp.的分离频率较高，共占70．4％。在根、叶内生放线菌中灰红紫类群链霉菌分离频率最高，分别占65.2％与78．2％；在整个植株中玫瑰浅灰链霉菌Streptomyces roseogriseolus的分离频率最高(占57．7％)，叶中该种链霉菌占69.0％，根中占43．5％。对峙实验表明：内生真菌在体外对香蕉枯萎病的病原菌(尖孢镰刀菌香蕉专化型)不显示明显的拮抗作用而内生放线菌则显示明显的拮抗活性，玫瑰浅灰链霉菌中有42．5％的菌株显示拮抗作用，该种链霉菌在提高香蕉植株对香蕉枯萎病的抗性中的作用值得重视。     

瓦雷兹芽孢杆菌FZB42菌株拮抗两种树木病原真菌及其机理研究

镰刀菌和交链孢菌是导致树木病害的两种常见病原真菌,常导致苗圃植物严重的危害和经济损失。瓦雷兹芽孢杆菌FZB42菌株具有高效生防性能和植物促生活性,为进一步探明该菌株的生防机理,首先测试了FZB42对镰刀菌和交链孢菌的抑制效果。在了解该菌株抑制作用的基础上,进一步构建质粒,通过同源重组的方式构建了FZB42的3个抗生素合成缺损菌株(ΔbmyA,ΔfenA、ΔbmyAΔfenA)。对这3个突变株进一步测试表明,FZB42合成的物质bacillomycin D和fengycin是抑制两种真菌生长的重要原因,且这两种物质的拮抗作用具有明显的协同强化效果。     

利用拮抗细菌防治棉花黄萎病

本项目研究中，从植物根围、根表和植物内部分离到1345株细菌，并测定了他们对棉花黄萎病菌的抑菌性。118株细菌表现较强的抑菌性，抑菌率≥50％。其中25个菌株的抑菌率≥。70％，93个菌株的抑菌率为50％～70％。另外从棉花黄萎菌的微菌核际分离到57株细菌，其中30株细菌能显著地抑制棉花黄萎菌微菌核的菌落生长(5个菌株完全抑制微菌核的萌发和生长，15菌株的抑菌率为40％～97％)。这些拮抗菌的培养滤液也能抑制棉花黄萎菌的生长。室内盆栽实验证明，应用拮抗菌处理棉花种子，有10个拮抗细菌能极显著地防治棉花黄萎病，其中4个菌株(ICB-18、NCD-2、CS-25和CS--27)的防病效果极好，防病效果为72．3％～81．4％，3个菌株(C-94、C-28和NCD-25)的防病效果为55．7％～61．9％。1999～2000年的2年田间小区试验中。NCD-2菌株对棉花黄萎病防治效果显著，并且显著优于国外商品化生防制剂TF，该菌株连续两年的防病效果平均为85．4％；另外4个菌株(ICB-18、CS-25、C-94和C-28)亦能显著防治棉花黄萎病，但防病效果与国外商品化生防制剂TF相当。在田间示范中，应用生防细菌NCD-2制剂拌种后直接播种技术防治棉花黄萎病，防病效果达到51．2％。同时应用生防细菌NCD-2制剂拌种育苗移栽技术防治棉花黄萎病，防病效果达到52．6％并且增产22．85％。本文同时测定了NCD-2对主要大田作物的安全性，证明其对小麦、玉米、棉花、马铃薯、黄瓜、茄子和大豆等7种作物没有致病性，并且对这些作物的出苗、生长和发育没有不良影响。     

连翘中具有药物活性成分内生菌的筛选及其拮抗特性的研究

采用组织分离法从连翘枝条中筛选出13株内生菌,其中有7株内生真菌,6株内生细菌。分别以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为指示菌株,采用平板对峙法对分离出的13株内生菌的抗菌活性进行筛选。结果表明：13株菌种中有10个菌株对1种供试菌具有抑菌活性。其中L-07-01、L-07-09、L-07-12、L-07-13的拮抗效果明显,L-07-09对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌效果,测量其抑菌圈直径为10 mm。L-07-12对大肠杆菌具有较强抑菌效果,测量其抑菌圈直径为10 mm。对拮抗效果较强的菌株进行液体发酵培养后采用双层打孔法,测定其抑菌效果后证明L-07-13对金黄色葡萄球菌有极强的抑制效果。对拮抗后的指示菌进一步镜检后,发现菌体有明显的溶菌、空洞、畸形等现象。连翘内生菌可以产生丰富的具有药物活性的次生代谢产物,可作为新型药物的筛选源。     

南澳大利亚麦田茄丝核菌抑病土中木霉菌的特性和鉴定

从抑制Rhizoctonia solani的麦田土中分离到木霉菌，依据形态特征，鉴定为Trichoderma pseudokoningii，T.parceramosum,T longibrachianum和T.harzianum。取样土壤为灰质砂壤土，pH8．4(H2O)，位于南澳大利亚的埃文。研究了与生物防治作用机制相关的生理学特性包括几丁质酶活性、β-1，3-葡聚糖酶活性、内切葡聚糖酶活性、抗菌活性以及重复寄生能力。T。pseudokoningii生长速度快但是产分生孢子少，但是T.parceramosum产分生孢子多。与其他种类相比，Trichoderma pseudokoningii的分离频率高，在盆载条件下对小麦Rhizoctonia solani根腐病以及全蚀病防治效果高，对R．solani的重复寄生能力强。Trichoderma pseudokoningii菌株问的重复寄生能力差异不明显，但在几丁质酶活性和β-1，3-葡聚糖酶活性上有明显差别。依据平板抑菌能力，可将木霉菌株分为3个组。菌株在不同pH培养基上的生长速度不同，但没有发现特别能适应碱性条件而快速生长的菌株，虽然这些菌株都分离自碱性土壤。     

云南高海拔牧场牦牛捕食线虫真菌生防高效菌株的筛选

目的:为筛选云南高海拔牧场牦牛高效力的寄生线虫生防真菌菌株。方法:对云南大理花甸坝牧场,中甸打日坝牧场及白马雪山牧场采集的少孢节丛孢(A.oligospora)、弯孢节丛孢(A.musiformis)、椭圆隔指孢(D.ellipsospora)和长孢隔指孢(D.leptospora)采用盐酸胃蛋白酶处理筛选耐受菌株,并进一步比较了耐受菌株的捕食活力。结果:12株捕食线虫真菌中,有6株通过盐酸胃蛋白酶处理,通过率为50%,其中大理花甸坝和中甸打日坝的A.oligospora及白马雪山牧场的D.ellipsospora显示出较强的捕食活力。结论:本研究初步筛选出3株生防高效菌株,为牦牛及其它动物线虫病的生物防治积累了捕食线虫真菌菌种资源。     

玉竹高产栽培技术的研究

以玉竹1a根茎为实验材料,研究不同栽植密度、不同种栽直径、不同播种深度对玉竹生长及产量的影响。结果表明:栽植密度与株高、平均单株叶片数、单位面积根茎产量不呈正相关,最佳密度是10cm"30cm,1a生玉竹根茎产量达到667m2为2332.8kg;种栽直径与株高、单株叶片数、单位面积根茎产量呈正相关,种栽直径1.1cm的平均单株根茎重量为0.1653kg,是种栽直径0.2cm的平均单株根茎重量0.1005kg的1.64倍,增加产量幅度达64.5%,因此,瘦弱细小的根茎不宜留种;播种深度与株高、单株叶片数、单位面积根茎产量不呈正相关,种栽播种深度为6cm是最佳播种深度,其根茎产量比播种深度14cm的增产111.2%,比播种深度10cm的增产44.2%,比播种深度2cm的增产36.1%。     

Characterization of nitrogen-fixing moderate halophilic cyanobacteria isolated from saline soils of Songnen Plain in China

Twenty out of 200 isolates of cyanobacteria mainly from saline soils of Songnen Plain of China were successfully grown on BG11 N-free medium. The nitrogen-fixing activity was then demonstrated for the 20 isolates in modified BG 11 medium using the acetylene reduction assay. All of them possessed appreciable nitrogenase activity （acetylene reduction） under non-saline conditions; however, at 5% NaCl only 60% of the isolates exhibited a high rate of this activity and 25% were completely negative under these conditions. The cyanobacteria isolates grew well in BG11 medium; nevertheless, growth of the majority of isolates was reduced by about 25-85% in the same medium containing 5% NaCl. Cellulolytic activity was detected in 50% of the 20 strains, amylolytic in 45%, and pectinolytic in 10%o of the isolates. The cyanobacteria isolates showed also enzymatic activity under saline conditions （6%）. The preliminary identification indicated that seven isolates were Nostoc, two were Microcystis, four were Oscillatoria, six were Anabaena, and one isolate was Synechococcus.     

4株菌根辅助细菌对苗木猝倒病菌的抑制作用

菌根辅助细菌（MHB）对植物具有促生作用,为探讨MHB对土传病原真菌的生防功能,采用离体平板对峙和活体接种的方法测定了4株MHB对土传病原真菌的抑制作用。结果表明：在离体平板对峙测定中,蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）HB12、HB59菌株和短小芽孢杆菌（B. pumilus）HR10菌株对苗木猝倒病病原丝核菌（Rhizoctonia sp.）有较为明显的抑制作用,其中短小芽孢杆菌HR10对丝核菌的抑制作用最强,抑菌率达85.58 %;蜡状芽孢杆菌HB12和HB59、短小芽孢杆菌HR10、藤黄微球菌（Micrococcus luteus）HR15对苗木猝倒病病原尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）均无抑制作用。将筛选获得的短小芽孢杆菌HR10进行活体松苗接种,结果显示,经HR10菌株处理后的黑松苗木其猝倒病的发病率仅为15 %,病死率也低至10 %,而单接种病原丝核菌的对照黑松苗木的发病率则高达80 %,病死率为65 %。说明菌根辅助细菌（MHB）除对植物具有促生作用外,对某些植物土传病害也具有一定的抑制作用。     

Characterization of nitrogen-fixing moderate halophilic cyanobacteria isolated from saline soils of Songnen Plain in China

Twenty out of 200 isolates of cyanobacteria mainly from saline soils of Songnen Plain of China were successfully grown on BG11 N-free medium. The nitrogen-fixing activity was then demonstrated for the twenty isolates in modified BG11 medium using the acetylene reduction assay. All of them possessed appreciable nitrogenase activity (acetylene reduction) under non-saline conditions; however, at 5 % NaCl only 60 % of the isolates exhibited a high rate of this activity and 25 % were completely negative under these conditions. The cyanobacteria isolates grew well in BG11 medium; nevertheless, growth of the majority of isolates was reduced by about 25%-85% in the same medium containing 5% NaCl. Cellulolytic activity was detected in 50% of the twenty strains, amylolytic in 45%, and pectinolytic in 10% of the isolates. The cyanobacteria isolates showed also enzymeatic activity under saline conditions (6%). The preliminary identification indicated that seven isolates were Nostoc, two were Microcystis, four were Oscillatoria, six were Anabaena, and one isolate was Synechococcus.      

抗黄瓜灰霉病的枯草芽孢杆菌筛选及其抑菌活性的初步研究

结合涂布平板法和温室盆栽植株法,测定了41株枯草芽孢杆菌发酵液对灰霉病病原菌及黄瓜灰霉病的抑制效果,以此筛选出针对灰霉病的生防菌株.结果表明,抑菌效果最好的枯草芽孢杆菌为BS01和BS03.采用涂布平板法研究了菌株BS01和BS03抑菌活性,结果表明,抑菌效果均为50%时,BS03比BS01的菌体浓度低,得到抑菌效果最好的菌株BS03.采用温室盆栽植株法测试了菌株BS03的抑菌活性,结果表明,菌悬液比发酵滤液的抑菌效果好,并且在菌悬液处理黄瓜苗后的第3天抑菌活性最高.     

不同海拔梯度上地膜覆盖和不同肥力水平对马铃薯的影响

对不同海拔梯度上地膜覆盖和不同肥力水平的马铃薯物候期、农艺性状(出苗率、苗高、开花率)及产量进行了研究.结果表明:地膜覆盖可使马铃薯在低、中、高山地区较未覆膜分别提前5、8和10 d成熟;不同海拔梯度比较,随海拔升高各物候期推迟,中山、高山地区分别比低山地区成熟时间推迟3和12 d.在低、中和高山区对马铃薯出苗率促进作用分别为15.6%、27.9%和66.7%,对苗高增长的促进作用分别为4.8、5.0和5.2 cm,同时在一定程度上有利于马铃薯营养生长,延迟进入生殖生长的开花阶段;对马铃薯的增产效果最理想的是中山地区,平均增产1 369.5 kg/hm~2,高山地区平均增产850.5 kg/hm~2,而低山地区不理想.施肥水平对马铃薯出苗率和苗高的影响不显著;对马铃薯产量的影响明显,低山和中山地区中肥水平产量最高,而高山地区高肥水平产量最高.     

南澳大利亚丝核菌抑病土中细菌与放线菌的分离及其对病害的生物防治作用

从南澳大利亚埃文采集的土壤样品中计数分离了细菌和放线菌，该土壤对Rhizoctonia．solani融合群8引起的小麦根腐病具有抑制作用。统计了分离物中对R.solani AG-8菌株2l有拮抗作用的百分比。热处理(60℃，10min)能够消除土壤的抑病能力，可显著减少土壤中细菌和放线菌的数量，但是并不改变对病原菌有抑制作用的分离物的总体百分比。依据对R.solani AG-8菌株21，Gaewuarunomyces graminis var．tritici(Ggt)菌株8，Fusarium graminearum菌株Fg，Verticillium dahliae菌株Vd5，Bipolaris sorokiniana菌株Bs，Pythium irregulare菌株BH40，以及引起棉花猝倒病的Rhizoctonia solani solani AG-4菌株1664的抑菌能力，自2700个菌株中筛选了9个最强拈抗菌株；其中7个菌株能够产生几丁质酶，或者产生内切葡聚糖酶，而几丁质酶活性与生物防治效果具有相关性。这9个菌株鉴定为Bacillus megaterium(菌株Ap25)，B．subtilis(菌株Ap113)，Streptomyces spp．(菌株Ap117)，Bocillus coagulans(菌株Ap123)，Streptoverticillium reticuIum(菌株Ap89)，Cellulomonas flavigena(菌株ApT5)，以及放线菌(菌株Ap116，Ap111和Ap139)．B．megaterium Ap25 and B．subtilis Ap113对小麦根腐病及全蚀病的防治效果以及刺激小麦生长的作用最强。这两个菌株能够在平板上抑制一种分离自同一土样的有益菌Trichoderma pseudokoningii菌株ASMH的生长，但对该木霉菌的生物防治效果及其刺激植物生长的作用没有明显削弱。     

生防菌剂YKT41及B418防治茄子根结线虫病的田间试验

为了验证褐球固氮菌YKT41和越南伯克霍尔德氏菌B418对茄子根结线虫病的防治作用,进行了田间防治效果试验。结果表明,在使用30.0 kg/hm2微生物制剂（活菌数≥20×108 cfu/g）的情况下,YKT41及B418活菌制剂的防治效果分别达到了72.8%和75.6%,增产效果分别达到了14.6%和12.7%,具有良好的推广使用价值。试验还表明,该微生物菌剂主要以活体微生物起作用,灭活后使用效果较差,因此一定要在保质期内使用。