野西瓜挥发油诱导SGC-7901凋亡的初步研究

研究野西瓜挥发油诱导SGC-7901细胞凋亡的机制.采用流式细胞术分析野西瓜挥发油对SGC-7901细胞早期凋亡的影响;采用激光扫描共聚焦技术观测野西瓜挥发油对肿瘤细胞内Ca2+浓度变化的影响;采用流式细胞术分析野西瓜挥发油对SGC-7901细胞线粒体跨膜电位的影响.野西瓜挥发油可以诱导SGC-7901细胞发生早期凋亡,使肿瘤细胞内的Ca2+浓度升高,并降低细胞线粒体跨膜电位.野西瓜挥发油具有明显的抗肿瘤作用,其抗肿瘤机制为诱导肿瘤细胞凋亡.通过升高肿瘤细胞内的[Ca2+]i而激活了Ca2+依赖性的核酸内切酶,同时通过PT孔的开放,引起线粒体跨膜电位下降而导致细胞凋亡.     

野西瓜总皂苷诱导SGC-7901凋亡的初步研究

探讨野西瓜总皂苷诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡作用.采用MTT法检测野西瓜总皂苷对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;采用荧光倒置显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;采用流式细胞术分析野西瓜总皂苷对SGC-7901细胞凋亡率的影响;采用激光共聚焦显微镜观测细胞内[Ca2+]i的变化.5、25、50、100、200和400 μg/mL的野西瓜总皂苷作用于SGC-7901细胞72 h后,野西瓜总皂苷可抑制SGC-7901细胞的增殖,其IC50为31.542 μg/mL;野西瓜总皂苷作用SGC-7901细胞40 h后,细胞出现早期凋亡细胞的形态;15、30、60 μg/mL的野西瓜总皂苷作用于SGC-7901细胞72 h后,细胞凋亡率分别为58.6%、92.298%、95.898%;15、30、60 μg/mL野西瓜总皂苷作用SGC-7901细胞24 h后,细胞内[Ca2+]i升高,并随野西瓜总皂苷给药剂量的增加而升高.野西瓜总皂苷能够促进SGC-7901细胞的凋亡,其作用机制可能与野西瓜总皂苷升高细胞内[Ca2+]i有关.     

野西瓜挥发油对人胃癌SGC-7901细胞的抑制

探讨野西瓜挥发油对人胃癌SGC-7901细胞生长的作用.采用MTT、SRB和肿瘤细胞集落形成能力实验观察野西瓜挥发油对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V和PI双染法检测野西瓜挥发油作用于SGC-7901细胞后细胞凋亡的形态特征.结果显示,野西瓜挥发油可抑制SGC-7901细胞的生长,MTT与SRB法测得其IC50为145.5μg/mL,GI50为121.32μg/mL,LC50为900.96μg/mL,TGI为240.55μg/mL;野西瓜挥发油对SGC-7901细胞集落形成的IC50为160.04μg/mL.Annexin V/PI双染激光共聚焦显微镜观察到75、150、300μg/mL的野西瓜挥发油可诱导SGC-7901细胞出现凋亡早、中、晚期的细胞形态.提示野西瓜挥发油具有明显的抗肿瘤作用,其抑瘤机制可能为诱导肿瘤细胞凋亡.     

西兰花中ITCS诱导SGC-7901细胞凋亡作用机制

研究西兰花中异硫氰酸盐(isothiocyanates,ITCS)诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的作用及其机制.应用MTT法检测ITCS对SGC-7901细胞增殖的影响;流式细胞仪检测活性氧、线粒体膜电位(Δψm)和细胞凋亡率.实验证明ITCS可明显抑制SGC-7901细胞增殖;不同质量浓度的ITCS作用于SGC-7901细胞24 h后,细胞内活性氧含量随给药剂量的增加而升高、线粒体膜电位依次降低.60、120、240μg/mL的ITCS作用于SGC-7901细胞48 h后可见细胞凋亡率分别为9.1%、20.1%和55.4%.ITCS可通过刺激SGC-7901细胞内活性氧的产生,损伤肿瘤细胞线粒体,使其膜电位下降最终引起SGC-7901细胞凋亡.     

啤酒花中蛇麻酮诱导细胞凋亡及机制研究

通过体外抗肿瘤实验观察啤酒花(Humulus LupulusL.)中成分蛇麻酮(lupulone)对肿瘤细胞SGC-7901和HepG-2诱导细胞凋亡的作用,并揭示其作用机制.采用MTT法观察蛇麻酮体外抗肿瘤作用;采用流式细胞仪观察蛇麻酮对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响;采用Fluo-3AM探针标记,激光共聚焦技术观测细胞内[Ca2 ]i变化.蛇麻酮对肿瘤细胞SGC-7901及HepG-2均有较好的疗效.蛇麻酮作用于SGC-7901和HepG-2细胞48 h后,肿瘤细胞均有明显凋亡峰出现.蛇麻酮可以将肿瘤细胞SGC-7901和HepG-2的细胞周期阻滞在G0/G1和S细胞期,升高细胞凋亡指数(APO).蛇麻酮可使SGC-7901细胞内[Ca2 ]i升高,使HepG-2细胞内[Ca2 ]i先升高后降低.蛇麻酮通过诱导细胞凋亡来发挥抗肿瘤作用.蛇麻酮通过升高肿瘤细胞内[Ca2 ]i启动肿瘤细胞凋亡机制,[Ca2 ]i升高时Ca2 来源于细胞内钙库释放.     

野西瓜水溶性生物碱抑制HepG-2增殖作用

研究野西瓜生物碱的抗肿瘤作用.采用MTT实验观察野西瓜水溶性生物碱的体外抗肿瘤作用,采用流式细胞仪测定野西瓜水溶性生物碱对肿瘤细胞凋亡及细胞周期的影响. 10、50、100、150、200、300 μg/mL的野西瓜水溶性生物碱作用于HepG-2细胞72 h后均可不同程度的抑制HepG-2细胞的增殖,其中野西瓜水溶性生物碱IC50为171.5 μg/mL;作用48 h后出现凋亡形态;180 μg/mL、360 μg/mL的野西瓜水溶性生物碱作用48 h时出现细胞凋亡;周期分布发生改变.结果表明,野西瓜水溶性生物碱具有抗肿瘤作用.     

啤酒花中异葎草酮体外抗肿瘤作用及机制研究

研究啤酒花(Humulus Lupulus L.)中成分异葎草酮(tetrahydro-iso-α-acid)对人胃腺癌细胞SGC-7901和人肝癌细胞HepG-2的体外抑制作用,并初步揭示其抗肿瘤的作用机制.以MTT法进行细胞毒测定;采用流式细胞仪观察异葎草酮对肿瘤细胞凋亡的影响;细胞线粒体跨膜电位(MMP)测定用罗丹明123(Rhodamine l23,Rh123)标记,以流式细胞仪检测.异葎草酮对SGC-7901和HepG-2的IC50分别为13.4μg/mL和11.58μg/mL.异葎草酮作用于SGC-7901和HepG-2细胞48 h后,肿瘤细胞均有明显凋亡峰出现.异葎草酮可以导致SGC-7901和HepG-2细胞内线粒体膜电位明显下降,并呈剂量依赖关系.结果表明,异葎草酮对肿瘤细胞SGC-7901及HepG-2均有较强抑制作用,这一作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡实现的.异葎草酮是通过线粒体路径启动细胞凋亡的,而且诱导线粒体功能异常可能是其引起细胞凋亡发生的主要作用机理.     

ELISA法检测九香虫血淋巴诱导两种肿瘤细胞凋亡规律

为了检测九香虫血淋巴能否诱导肿瘤细胞发生凋亡,将20,30,40,50mg/L的九香虫血淋巴分别作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞、人胃癌SGC-7901细胞,采用ELISA法检测其细胞组蛋白-DNA片断吸光度的变化规律.结果显示:1)SGC-7901与MCF-7的细胞组蛋白-DNA片断吸光度随九香虫血淋巴浓度的提高而增加;2)同浓度的血淋巴处理后的细胞组蛋白-DNA片断吸光度MCF-7大于SGC-7901,表明九香虫血淋巴对SGC-7901和MCF-7均可能诱导其细胞凋亡,且呈一定的浓度依赖性;此外还说明MCF-7较SGC-7901对九香虫血淋巴更敏感.     

四氢异葎草酮诱导SGC-7901细胞凋亡作用的研究

观察四氢异棒草酮（Tetrahydro-isohumulone,TH）通过线粒体途径诱导SGC-7901细胞凋亡的机制．MTT法检测TH对SGC-7901细胞增殖的影响;荧光显微镜观察TH对SGC-7901细胞凋亡形态的影响;流式细胞仪分析SGC-7901细胞凋亡率;采用试剂盒检测Caspase-9的活性;Western blot法检测Caspase-3蛋白表达情况．2、8、32μg／mL的TH处理SGC-7901细胞72h后,SGC-7901细胞生长受到抑制,抑制率在一定范围内呈剂量、时间相关性;随着TH质量浓度的提高SGC．7901细胞的凋亡率也增加;TH各剂量均能够显著升高SGC．7901细胞内Caspase-9活性,并呈剂量依赖性;同时,TH能够上调SGC-7901细胞内Caspase-3的表达量．并且呈剂量依赖性．TH可通过诱导SGC-7901细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,启动线粒体凋亡通路可能是TH诱导SGC-7901细胞凋亡的重要机制之一．     

吴茱萸碱诱导人胃癌细胞SGC-7901细胞凋亡

探讨吴茱萸碱对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制、诱导细胞凋亡的影响.采用MTT法测存活率;光镜观察细胞形态学改变;流式细胞术测细胞凋亡;流式细胞仪检测线粒体膜电位.结果显示,吴茱萸碱能抑制胃癌细胞SGC-7901的生长.MTT法测得吴茱萸碱的IC50为3.15μg/mL.在光镜下观察药物作用24 h的细胞生长密度逐渐变疏,细胞变小,表面起皱,高质量浓度组大部分细胞破碎.流式细胞仪检测,用20、10、5、2.5、1.25μg/mL质量浓度的吴茱萸碱作用48 h均出现亚二倍体凋亡峰,凋亡率分别为27.273%、24.206%、20.575%、19.520%、18.361%.流式细胞仪测线粒体膜电位,用质量浓度2.5、1.25、0.625、0.313、0.152μg/mL的吴茱萸碱作用48 h后线粒体膜电位显著提高.提示吴茱萸碱通过诱导胃癌细胞SGC-7901的凋亡,而达到抗肿瘤作用.     

酸性染料比色法测定千里光总生物碱含量

目的:研究测定千里光中总生物碱含量的方法。方法:以氧化苦参碱为对照品,采用酸性染料比色法,在422 nm波长处测定千里光中总生物碱含量。结果:氧化苦参碱在6.75~135μg与吸光度呈良好的线性关系(r=0.999 2),平均回收率100.0%(RSD=1.54%)。结论:该方法简便、准确,可用于千里光中总生物碱的测定。     

瓦布贝母组织培养及生物碱的测定

为缓解川贝母的市场供需矛盾,本研究利用组织培养技术生产瓦布贝母再生鳞茎,探究了适宜的组织培养条件,并采取酸性染料比色法测定总生物碱.结果发现,鳞茎采用75%酒精约10 s和0.1%升汞15 min灭菌,外植体污染率最低;不同种类和浓度范围的激素能够影响外植体的启动和生长状况,NAA和6-BA浓度范围分别控制在0.5～2.0 mol/L,均能诱导出再生鳞茎;不同激素培养条件下,瓦布贝母再生鳞茎总生物碱存在差异,有超过一半的再生鳞茎总生物碱含量达到中华药典的规定要求,因此,组织培养是获取瓦布贝母活性成分的一种有效途径.     

双稠哌啶类生物碱注干剂影响杨树胸径生长的林间试验

以苦豆草中的双稠哌啶类生物碱为主要成分。开发出了促进杨树径向生长的注干剂，附以复合植物源氨基酸，含氮、磷、钾的无机盐，植物激素类有机化合物，铜、锰、锌、钴、钼、硼、铁等微量元素，在山东、江苏和安徽的不同地点对不同树龄、不同品种的杨树进行林间试验。结果表明，在试验期间，杨树胸径净生长量较对照增加了63．8％～223％。给受试树注射较注干剂用量高100倍的苦豆草总生物碱的试验结果表明，处理杨树的高生长没有受到显影响，胸径生长得到促进；同时，给受试树分别注射该注干剂和合成的氧化乐果的试验结果表明，施用注干剂后其注入孔伤口愈合率不仅高于氧化乐果处理组，而且也优于对照组。用不同配方注干剂分别做喷施和注干对比试验的结果表明，不同配方注干剂促进杨树胸径生长的效果有差异，但注干施药方式的效果均较喷施的效果要好。     

抗风湿涂膜剂的制剂研究

研究氮酮和丙二醇在不同体积分数下,对辣椒素和川乌总生物碱的促透影响以及涂膜剂的基质选择.应用改良Franz扩散池装置,通过HPLC法对辣椒素和酸性染色比色法对对川乌总生物碱进行含量测定,对比不同比例的氮酮和丙二醇对它们的促透效果;根据外观透明度、黏稠性和成膜性等确定基质壳寡糖的加入量.氮酮和丙二醇不同组合对辣椒素的促透...     

Thermodynamic properties of three alkaloids in normal saline

Aim To provide a potent reference for the clinical application of these alkaloids.Method The enthalpy of dissolution for these alkaloids in normal saline are measured using a RD4962000Calvet Microcalorimeter at 36.5℃under atmospheric pressure.Results The differential enthalpy(Δ dif H m) and molar enthalpy(Δ sol H m) were determined for these alkaloids in normal saline.Conclusion On the basis of these experimental data and calculated results,the kinetic equation,half-life,Δ sol H m,Δ sol G m andΔ sol S m of the dissolution process were also obtained.     

长春花总生物碱的提取方法研究

采用酸水冷浸法、乙醇冷凝回流法提取长春花中的总生物碱,并通过沉淀反应、显色反应对提取出来的生物碱进行定性检测,通过紫外分光光度法测其相对含量。结果显示酸水冷浸法与乙醇冷凝回流法都能提取长春花中生物总碱,乙醇冷凝回流法比酸水冷浸法提取长春花生物碱含量高,效果更好。     

功劳木中生物碱类成分抗氧化活性研究

利用DPPH法测定功劳木中生物碱成分的抗氧化活性,采用pH 区带精制逆流色谱分离出小檗碱、药根碱、巴马汀、非洲防己碱和千金藤宁碱5种成分。通过测定功劳木总生物碱以及单体生物碱成分对DPPH自由基清除力,来评价功劳木中主要生物碱类成分的体外抗氧化能力。结果显示,在0～25 μg/mL范围内DPPH溶液浓度与吸光度呈线性正相关关系。功劳木总生物碱、小檗碱、药根碱、巴马汀、非洲防己碱以及千金藤宁碱的半抑制浓度（IC50）依次为0.07、0.32、0.24、0.20、0.18、0.59 mg/mL。因此,功劳木生物碱类成分具有一定的抗氧化能力,且随生物碱浓度的升高而增强,总生物碱抗氧化能力强于单体成分。功劳木生物碱抗氧化活性可能为协同效应。     

岩黄连离体细胞培养及生物碱成分分析

选取岩黄连不同组织部位作为外植体诱导愈伤组织，调整基本培养基和初始pH值，经多次继代培养，获得稳定生长的岩黄连离体细胞；采用薄层层析（TLC）、紫外扫描（UV）和高效液相色谱（HPLC）等方法对细胞和植株中生物碱成分进行分析测定。结果表明，叶片最适于诱导愈伤组织；最佳基本培养基为B5，初始pH值为6．0；岩黄连离体培养细胞的生长周期为20d左右，第15天生物量最高，达到15．3g／L（DW）；细胞和植株中生物碱成分有较大差别，但都舍有脱氢卡维丁，细胞中脱氢卡维丁的含量为0．58mg／g。     

抗风湿涂膜剂的体内药物动力学研究

考察抗风湿涂膜剂中辣椒素和乌头类总生物碱在生物体内药动学特征,以获得药动学参数为临床应用提供参考依据.方法为给家兔背部按一定面积涂抹抗风湿涂膜剂后,于不同时间采取血样.分别用高效液相色谱仪和紫外可见分光光度计测定血药质量浓度,通过3P97药动学软件对所得的数据自动拟合获得药动学参数,得辣椒素药动学行为符合一室模型,主要药动学参数为Ka=1.160 013h-1t、1/2(Ka)=0.597 534 h、Ke=0.219 206 2 h-1t、1/2(Ke)=3.162 079 h、AUC=22.084 286(μg/mL)h;乌头类总生物碱药动学行为符合一室模型,主要药动学参数为Ka=0.300 004 9 h-1t、1/2(Ka)=2.310 453 h、Ke=0.185 421t、1/2(Ke)=3.738 234 h、AUC=22.389984(μg/mL).h.药代动力学实验表明,本制剂中辣椒素在动物体内吸收分布速率较快,而代谢消除速率较慢;而乌头类总生物碱吸收与代谢均较慢.二者吸收程度均较好.     

五鹤续断中总生物碱的质量分数分析

采用索氏提取法对不同生长时期的五鹤续断中总生物碱进行提取并分离,探讨用紫外分光光度法测定总生物碱质量分数的方法.结果表明:随着生长年限的增加,其根中总生物碱的质量分数积累呈现出递增趋势.但是茎、叶中总生物碱的质量分数很低.因此,三年生的五鹤续断根为较好的药材,具有较好的药用价值和开发价值.