民族药物河谷地不容的生物碱成分研究

研究了民族药河谷地不容(Stephania intermedia H.S.Lo sp.Nov.)的生物碱成分,用色谱法从其块根提取物中分离得到7个生物碱,经波谱分析鉴定为千金藤碱(Stephanine,1)、克班宁(Crebanine,2)、异可利定(Isocorydine,3)、千金藤宁碱(Stepharanine,4)、药根碱(Jatrorrhizine,5)、巴马汀(Palmatine,6)和四氢巴马汀(Tetrahydropalmatine,7).其中化合物1～3是首次从河谷地不容中分离得到.研究结果表明,河谷地不容生物碱的结构类型和地不容正品(Stephania epigaea H.S.Lo)类似,但具体成分有明显区别,为保证药品安全,河谷地不容不宜作为药材地不容混用、代用.     

黄檗枝条生物碱含量初步分析

利用岛津20A高效液相色谱仪对黄檗不同枝龄主要生物碱质量分数进行了检测.结果表明:在黄檗木质部和韧皮部内,掌叶防己碱最多,小檗碱较少,药根碱最少;韧皮部中各生物碱质量分数均远高于木质部.药根碱质量分数在黄檗不同枝龄间差异显著.木质部内药根碱质量分数与小檗碱质量分数和黄檗枝龄均呈显著正相关;韧皮部内药根碱质量分数和掌叶防己碱质量分数呈显著正相关,小檗碱质量分数与掌叶防己碱质量分数呈极显著负相关,掌叶防己碱质量分数在木质部和韧皮部间呈显著正相关.     

金花小檗功效成分及其抑菌和抗氧化活性的研究

为充分利用川西南民族药——金花小檗,用不同的方法对其抑菌及抗氧化活性进行了测定.用酸性染料比色法、 HPLC法测定了金花小檗根、茎、醇提物、萃取部位的功效组分含量,发现生物碱集中于正丁醇部位和水部位中,小檗碱在醇提物、萃取部位中的含量都最多,巴马汀最少.测定其根、茎、醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌作用可知:与75%乙醇相比,金花小檗根、茎、醇提物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果为低敏;而与75%乙醇相比,金花小檗根、茎、醇提物对大肠杆菌的抑菌效果为中敏.用DPPH·清除率法、总还原力法测定其醇提物和萃取部位的抗氧化活性,结果相似:正丁醇部位、水相部位的抗氧化活性较强,石油醚萃取部位的抗氧化活性最低.用金花小檗醇提物、正丁醇-水部位分别饲喂小鼠30 d测定小鼠血清MDA和T-SOD值,所得结果与正常组比较,试验组小鼠T-SOD值显著降低, MDA值显著升高,说明金花小檗有显著的抗氧化活性.因此,金花小檗提取物、萃取部位不仅有显著的抑菌活性,而且也有较高的体、内外抗氧化活性.     

葛根黄连有效成分在大鼠体内药代动力学研究

目的：研究葛根有效成分葛根异黄酮和黄连有效成分黄连总生物碱伍用药效优于单用的药代动力学差异。方法：健康SD大鼠灌胃给予葛根异黄酮、黄连生物碱和葛根异黄酮黄连生物碱配比液(GH配比), 测定给药后不同时间点葛根素、大豆苷、小檗碱、巴马汀和黄连碱的药代动力学参数,比较单用葛根异黄酮、黄连总生物碱和伍用在体内的代谢过程。结果：葛根异黄酮黄连生物碱配比后由于各有效成分之间的相互作用,葛根素、大豆苷、小檗碱、巴马汀和黄连碱的最大血药浓度均降低,葛根素、大豆苷、巴马汀浓度达峰时间从单独给药时45 min延迟到60 min,小檗碱浓度达峰时间从单独给药时45 min缩短到30 min,,并延缓葛根素、大豆苷、小檗碱、巴马汀和黄连碱的代谢时间,使其在体内保留时间延长。结论：葛根异黄酮、黄连总生物碱配比后其有效成分代谢出现较大差异,可能在各有效成分在体内同时存在拮抗、协同或转化作用,从而导致药效差异。     

见血青总生物碱的抑菌活性和抗氧化性研究

采用滤纸片法,以12种细菌和4种真菌为试供菌种,对见血青总生物碱进行体外抑菌活性实验;并通过DPPH法测定见血青总生物碱清除自由基能力. 抑菌实验结果表明:见血青总生物碱对16种微生物的生长均有很强的抑制性.抗氧化实验表明,见血青总生物碱在0.5～100 μg/mL的实验浓度范围内具有很强的清除DPPH自由基的活性,清除率为5%～93.5%,其清除DPPH自由基的活性显著高于同等浓度的BHT.     

HPLC法测定黄连中3种原小檗碱型生物碱的研究

建立了一种同时测定黄连中3种原小檗碱型生物碱的高效液相色谱法,该方法可以使黄连中的小檗碱、巴马汀、药根碱得以分离和检测.采用Agilent Zorbax C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-20 mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液(pH 3.0,含0.2%三乙胺)梯度洗脱,柱温25℃,流速1 mL/min,在波长为265 nm处检测.结果表明,各组分线性关系良好,相关系数R为0.999 5~0.999 6,加标回收率在92.9%~105.9%,检出限0.1~0.45μg/mL.     

黄连生物碱治疗糖尿病——解偶联蛋白2

用不同浓度(4.00,2.00,1.00,0.50和0.25 mg/L)的黄连生物碱(黄连碱、小檗碱、表小檗碱、巴马汀)处理肝癌细胞(HepG2),应用HPLC和蛋白质印迹技术检测黄连生物碱在HepG2细胞中的吸收及黄连生物碱对解偶联蛋白2(UCP2)表达的影响.同一浓度下,HepG2细胞内黄连碱的浓度最高,小檗碱次之,其余生物碱含量较低;UCP2的表达量,黄连碱组最高、小檗碱次之,且随着黄连碱浓度和表小檗碱浓度的不断增加,细胞内UCP2相对表达量也增加,其它两组对UCP2表达影响不明显.黄连碱与小檗碱可以促进线粒体UCP2的表达且与治疗糖尿病并发症相关联.     

不同产地不同部位云黄连生物碱成分累积研究

 研究不同产地云黄连不同部位中盐酸小檗碱、药根碱和巴马汀3种生物碱积累量差异,旨在寻找云黄连优质产区及为非药用部位综合利用提供理论依据.在云黄连采收期,分别采集泸水、贡山、福贡、腾冲4县共10个地区的云黄连居群,测定云黄连根茎、须根和叶片3个部位的生物量,采用HPLC法测定样品不同部位中盐酸小檗碱、药根碱和巴马汀的含量.结果显示,云黄连不同部位3种生物碱含量大小依次为根茎>叶>须根.云黄连根茎中3种生物碱在不同产地间差异显著,其中贡山县后山、贡山县丙中洛神山、贡山县普拉底乡3个地区所产云黄连生物碱含量、生物量、生物积累量较高.其中贡山县普拉底乡积累量最高,其盐酸小檗碱、药根碱和巴马汀单株平均积累量分别为46.899,2.76,1.708 mg.结论:在云黄连种植生产过程中,在考察其有效成分含量的同时,还应考虑其生物量.综合比较不同产地不同部位生物量、3种生物碱含量及其积累量等因素,确定贡山县后山、贡山县丙中洛神山、贡山县普拉底乡为云黄连优质产区.非药用部位中3种生物碱的积累量较大,应收集后进行有效成分的提取,达到云黄连资源综合利用的目的.     

云黄连不同部位生物量及生物碱含量个体差异初探

以道地产区3个不同居群云黄连为研究材料,对不同单株不同部位(根茎、须根、叶)生物量及主要生物碱(小檗碱、药根碱、巴马汀)含量进行比较分析.结果表明:3个不同居群单株生物量及生物碱含量均存在较大个体差异,其中,单株根茎最稳定,叶次之,须根个体差异最大;作为非传统用药部位的叶和须根中的主要生物碱总量约占整株中将近1/3,可...     

金线风中5种生物碱含量测定及提取工艺研究

为了建立同时测定金线风药材中木兰花碱、左旋箭毒碱、非洲防己碱、巴马亭红碱及掌叶防己碱5种生物碱成分的高效液相色谱(HPLC)方法及提取工艺的优化。采用HPLC法,Wetch Xtimate C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相为乙腈(A)-0.5%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,检测波长为282 nm,流速为0.5 mL/min,柱温30℃;采用正交实验以乙醇浓度、料液比、pH和提取次数为考察因素,5种生物碱之和的提取率为考察指标对超声微波提取工艺进行优化并验证。木兰花碱、左旋箭毒碱、非洲防己碱、巴马亭红碱及掌叶防己碱分别在测量范围内线性关系良好。正交优化实验得出金线风生物碱最佳提取条件为乙醇浓度60%,料液比1∶18,用盐酸溶液调节提取液pH为2,提取4次。优化后的提取条件可使金线风生物碱提取率达到2.33%。该HPLC法准确可靠,灵敏快捷,重复性高,可为金线风提取物生物碱的质量评价与控制提供实验依据;优化的超声微波提取工艺可重复、稳定。     

一年生黄檗幼苗药用生物碱的分布及其含量变化

对一年生黄檗幼苗各部位中小檗碱、药根碱和掌叶防己碱含量及动态变化过程进行了分析,结果表明三种生物碱在茎外皮含量最高,其次是根,而茎木质部含量极低.茎外皮和茎木质部中三种生物碱总的变化趋势是随发育期逐渐升高,尤其在落叶前升高幅度较大;根中三种生物碱含量总体上是随生长进程先上升,而在生长后期下降.结合生物量计算得到单株产量,结果为越接近生长后期三种生物碱单株总产量越高,其中根的产量最高.     

粉叶小檗愈伤组织中生物碱的含量变化

以粉叶小檗（Ｂｅｒｂｅｒｉｓ ｐｒｕｉｎｏｓ,Ｆ）愈伤组织为材料,检测培养过程中小檗碱和药根碱的含量变化,发现原植物中含量为痕量的药根碱。在培养细胞中是主要的生物碱,而原植物中主要成分的小檗碱,在培养细胞中的含量（除静止期外）,低于原植物,并探讨了二者在离体培养条件下可能的转化方式和途径。     

Microcalorimetric investigation of effect of berberine alkaloids from Coptis chinensis Franch on intestinal diagnostic flora growth

The inhibitory effect of three berberine alkaloids (BAs) from Coptis chinensis Franch, a traditional Chinese medicinal (TCM) herb, on Bifidobacterium adolescentis growth was investigated by microcalorimetry. The power-time curves of B. adolescentis with and without BAs were acquired, meanwhile the extent and duration of inhibitory effect on the metabolism were evaluated by the growth rate constant (k), half inhibitory ratio (IC₅₀), maximum heat-output power (P _max), peak time of maximum heat-output power (t _p) and total heat production (Q _t). k, P _max and Q _t decreased, and t _p was prolonged with the increase of BAs concentration. The IC₅₀ of BAs is 806 μg/mL for berberine, 341 μg/mL for coptisine and 236 μg/mL for palmatine. The sequence of antimicrobial activity of BAs is berberine < coptisine < palmatine. Combined with previous studies, it could be shown that the sequences of antimicrobial activity of BAs on both Bacillus shigae and Escherichia coli are berberine > coptisine > palmatine. The structure-function relationship of BAs indicates that the functional group methylenedioxy or methoxyl at C2 and C3 might be the major group inducing the activities of BAs on E. coli and B. adolescentis. Meanwhile, the substituent groups at C2, C3, C9 and C10 almost have equal effect on B. shigae. Supported by the National Natural Science Foundation of China (Grant Nos. 30625042 and 30873385) and Key Projects of National Science & Technology Pillar Program of China in the 11th Five-Year Period (Grant No. 2007BAI40B05)     

胡萝卜籽抗氧化肽的分离纯化及活性研究

采用凝胶过滤色谱Sephadex G-50和反相高效液相色谱对胡萝卜籽中的抗氧化肽进行分离纯化.以DPPH自由基(2,2-二苯基-1-苦肼基)清除率为指标,测定多肽的抗氧化活性.采用电喷雾电离质谱法测定该多肽的相对分子质量.研究结果表明:经过分离纯化,得到一个具有较强抗氧化活性的多肽,在质量浓度为1 mg·m L-1时,其DPPH自由基清除活力达到(92.02±0.47)%,相对分子质量为339.3 u,由3个氨基酸残基组成.     

花生肽的体外抗氧化活性研究

本文对花生肽的体外抗氧化活性进行了初步研究。在对DPPH自由基的清除能力测定中,随着浓度的增加,花生肽显示出越来越强的清除能力,并呈现良好的量效关系。在还原能力的实验中,花生肽的还原能力明显不如维生素C,但随着浓度的增加呈现一定的还原能力。抗脂质过氧化能力的测定研究表明,花生肽在0.2~6.4 mg/mL浓度范围内呈现较好的剂量依赖关系,对卵黄脂蛋白脂质过氧化具有较好的抑制作用。     

新疆产细虫草菌醇提物抗氧化及抗肺癌活性研究

利用DPPH自由基清除能力与总还原能力分析,对新疆产细虫草发酵菌丝体的菌醇提物(OGPDC)的抗氧化能力进行测定.MTT分析OGPDC对肺癌A549细胞增殖的抑制作用.抗氧化结果表明OGPDC具有较好的清除DPPH自由基及总还原能力,且清除自由基和总还原能力随着醇提物浓度的升高,逐渐增强,清除DPPH自由基的IC50值为1.952 mg/mL;MTT结果显示OGPDC对肺癌A549细胞增殖有一定的抑制作用,随着浓度提高而增强,处理48 h时药物的IC50值为10.87 μg/mL.另外,利用用流式细胞仪检测OGPDC作用48 h后肺癌A549细胞周期变化及凋亡率,其总凋亡率高于仅加培养液的对照组,最高总凋亡率为34.77%,使A549细胞周期阻滞在G0/G1期.结果表明新疆产细虫草菌醇提物(OGPDC)在一定的浓度范围内具有抗氧化及抗癌活性,暗示新疆产细虫草发酵菌丝体具有重要的开发利用价值.     

赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位抗氧化活性的比较研究

通过测定1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、还原力、金属离子对其抗氧化活性的影响及总酚质量分数等比较赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位的抗氧化活性。结果表明:赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位清除DPPH的EC50为0.63、0.10 mg/m L;还原力的EC50分别为0.87、0.09 mg/m L。除Al~(3+)、Fe~(3+)外,K~+、Na~+、Mn~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)等金属离子对赤楠叶乙酸乙酯部位的DPPH清除作用为抑制作用;除Cu~(2+)、Ca~(2+)外,K~+、Na~+、Mn~(2+)、Mg~(2+)、Al~(3+)、Zn~(2+)、Fe~(3+)等金属离子对赤楠叶二氯甲烷部位的DPPH清除能力有促进作用。赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位的总酚质量分数分别为9.23%与59.17%。可见,赤楠叶乙酸乙酯部位具有较强的抗氧化活性与总酚含量,但其抗氧化活性较易受金属离子的拮抗作用。     

小叶女贞叶片提取物药用活性研究

对小叶女贞叶片提取物进行体外抗菌、细胞毒性以及抗氧化药用活性研究,结果表明,小叶女贞叶片提取物对铜绿假单胞菌PAO1具有较强的抑制作用,最小抑制浓度(MIC)为8.0 mg/mL;对人肝癌细胞BEL-7404体外增殖具有显著的抑制作用,浓度在0.6 mg/mL时,抑制率达94.2％;同时具有较强的DPPH自由基清除能力,浓度为15.1 μg/mL时,清除率为85.9％.活性跟踪测试表明,小叶女贞叶片提取物干柱层析得到的各组分中,低极性组分Fr.1为活性部分.