阳离子脂质体在基因治疗中的应用

介绍了阳离子脂质体的组成和结构特点以及作为基因载体在基因治疗方面的应用．阳离子脂质体转基因的机理研究表明：阳离子脂质体／基因复合物进入细胞的方式依赖于细胞的内吞作用或通过细胞的膜融合作用．     

基因转运载体的原子力显微镜研究

通过原子力显微镜观测阳离子脂质体及其与DNA复合物的结构。将一定量的阳离子脂质体以及阳离子脂质体／DAN复合物滴加到新解理的云母片上,干燥后用原子力显微镜观测。结果表明,阳离子脂质体在云母片上形成的颗粒为球形或椭圆形,粒径分布较为均匀;阳离子脂质体／DNA复合物在云母片上的颗粒形状不规则,粒径分布不均且比空白脂质体的粒径大。通过原子力显微镜可以快速有效地观测脂质体以及脂质体／DNA复合物的粒径、表面形态等,为分析脂质体的物理化学性质与基因转运效率的关系提供了一种研究方法。     

阳离子脂质体递送STAT3 siRNA抑制黑色素肿瘤细胞探究

利用阳离子脂质体作为载体,用其搭载鱼精蛋白与STAT3 siRNA复合物,通过一系列实验证实该复合体系可显著抑制STAT3基因在黑色素瘤细胞B16中的表达,促进肿瘤细胞的凋亡。首先对载体材料进行了一系列表征测定,检测了不同复合比例下载体和siRNA复合物的粒径和电位。利用载体和siRNA的复合物对B16细胞进行转染并测定转染效率,随后对复合材料的毒性进行了检测。此外还进行了细胞凋亡、平板克隆、荧光定量PCR以及Western Blot等一系列实验来进一步确定载体复合物的有效性。实验结果表明,阳离子脂质体搭载复合了鱼精蛋白的STAT3siRNA表现出了良好的靶向治疗性及优秀的递送效率,且复合体系稳定性良好,毒性低。     

阳离子脂质体基因载体的稳定性研究

从阳离子脂质体的形态、平均粒径、粒径分布、Zeta电位及浊度等方面,考察了季铵盐型阳离子脂质体CPA14的稳定性。经透射电子显微镜检测,阳离子脂质体呈球形结构,粒径为100~200 nm。经粒度分析仪检测,阳离子脂质体平均粒径为210~260 nm,颗粒分布均匀,Zeta电位为55~90 mV。脂质体在4 ℃条件下存放3个月,外观无明显变化,脂质体的浊度变化不大。证实季铵盐型阳离子脂质体CPA14稳定性良好,适合用作基因载体进行基因转运。阳离子脂质体与质粒DNA在N:P质量比为3:1时可高效转染人宫颈癌细胞,与商品转染试剂DOTAP转染效率相当。为新型季铵盐型阳离子脂质体基因载体的构建提供了理论依据。     

基于低分子量PEI的不同疏水链修饰的梳状低聚物基因载体

为了探究基于低分子量聚乙烯亚胺(polyethylenimine, PEI)基因载体的转染效率,通过Michael加成反应将PEI 600 Da接枝于含有疏水链的生物可降解聚酯上形成系列梳状聚合物,并将之应用于基因载体;利用核磁氢谱和凝胶渗透色谱对聚合物的化学结构与分子量进行了测定,此外,还利用凝胶电泳实验和绿色荧光蛋白实验研究了聚合物与DNA的结合能力及其复合物的转染性能。结果表明：本文方法成功合成了系列低聚物,并对DNA表现出较好的包裹能力;油酸修饰后的低聚物与DNA复合物在质量比为6.4时转染效果与PEI 25 kDa相当。可见,油酸修饰后的脂质体低聚物有作为非病毒基因载体的前景。     

质粒PBR322—脂质体的制备及其内含DNA的转移

采用改进的逆相蒸发法（ＲＥＶ）制备卵磷脂／胆固醇（７：３，ｍｏｌ／ｍｏｌ）脂质体，并用于包裹荧光特异标记的质粒ＰＢＲ３２２ＤＮＡ，构建了基因转移载体。然后将纯化的质粒ＰＢＲ３２２ＤＮＡ－脂质体与悬浮的白菜原生质体一起温育。经过ＤＮＡ－ＤＡＰＩ荧光复合物的镜检，证明ＤＮＡ被包裹到卵磷脂／胆固醇脂质体内。被包装的ＤＮＡ能有效地避免外源ＤＮＡａｓｃ的降解作用。且质粒ＤＮＡ通过脂质体与原生质体膜的融合可随     

一种新颖的阳离子非病毒基因载体 Chitosan-g-PEI-g-PEG-OH 的性能研究

研究了新型阳离子聚合物Chitosan-g-PEI-g-PEG-OH的性能，重点考察其粒度，基因转染效率与细胞毒性，探讨了其作为基因载体的可能性.通过动态光散射仪（DSL）、透射电镜（TEM）观察了Chitosan-g-PEI-g-PEG-OH与DNA自组装形成的颗粒形态及粒径，Chitosan-g-PEI-g-PEG-OH可复合DNA形成粒径160～210 nm的纳米复合物，适合进入细胞.使用MTT比色法分析Chitosan-g-PEI-g-PEG-OH的毒性并与PEI，PEI-g-PEG-OH比较.选用增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 转染Hela细胞，应用流式细胞术检测转染效率.新型阳离子多聚物Chitosan-g-PEI-g-PEG-OH在提高基因转染效率的同时降低了其细胞毒性，有望成为基因转移的有效载体.     

复合环境离子强度对BDCP/DNA的粒径与转染效率的影响

为了探讨组装环境对基因载体/DN复合物的粒径和转染效果的影响,在三种不同离子浓度溶液体系(PBS, 5% 葡萄糖溶液, H₂O)中测量BDCP（biodegradable cationic polymer,一种生物可降解的阳离子聚合物）/DNA复合物粒径和结合力,进行了体外转染试验和毒性试验.结果显示,PBS最适合组装转染复合物,可取得更好的稳定性、最高的转染效率和较低细胞毒性、低溶血率;在5%葡萄糖溶液和水中组装的BDCP/质粒复合物结合力较弱,转染效率比较低.得出结论,BDCP/DNA粒径、结合力和基因转染效率受组装体系的离子强度影响.     

脂质体的制备方法及研究进展

脂质体是磷脂自聚集而形成的双分子层结构 ,作为药物载体具有减少药物毒副作用及靶向作用的特点 .主要介绍 :脂质体 3种制备方法物理分散法、两相分散法和表面活性剂增溶法的原理 ,制备出的脂质体的结构及包封性能和各自的优缺点 ;脂质体作为药物载体在抗癌、抗菌药物上的应用及其在药物载体方面应用的研究进展 .     

帕布昔利布和氟维司群共载药阳离子脂质体的制备和性质评价

制备帕布昔利布(Pal)和氟维司群(Ful)共载药阳离子脂质体(cationicliposomes,CLs),对其物理化学性质进行表征。以二油酰磷脂酰乙醇胺和(2,3–二油酰基–丙基)–三甲胺为膜材,采用薄膜分散法制备帕布昔利布和氟维司群共载药阳离子脂质体(CLs),HPLC法测定共载药阳离子脂质体的包封率和载药量,激光粒度仪考察脂质体粒径和电位的分布情况,透射电子显微镜观察脂质体的形态。结果表明:Pal-Ful-CLs的平均粒径为(182.13±3.56)nm,多分散系数为0.18±0.02,表明分散度良好;Pal-Ful-CLs的电位为(57.1±2.6)m V,阳离子脂质体表面的正电荷有利于脂质体在体系中的均匀分散和稳定;在透射电子显微镜下观察到脂质体呈圆形且粒径与粒度仪测定结果一致。本研究制备的共载药阳离子脂质体粒径均一、分散稳定并且工艺重现性好,作为药物共同递送载体具有一定的应用前景。     

Inorganic Nanoparticles Conjugated with Biofunctional Molecules

1 Results We have attempted to conjugate inorganic nanoparticles with biofunctional molecules.Recently we were quite successful in demonstrating that a two-dimensional inorganic compound like layered double hydroxide (LDH),and natural and synthetic clays can be used as gene or drug delivery carriers1-4.To the best of our knowledge,such inorganic vectors are completely new and different from conventionally developed ones such as viruses and cationic liposomes,those which are limited in certain cases of ap...     

脂质体的制备和应用

脂质体介导的转染法是一种高效、对外源核酸的大小无限制、可在体内外进行转染的外源核酸进入真核细胞的重要技术.分析了脂质体作为基因载体的优点、组成及作用机制,结合实验结果对制备脂质体的超声波分散法、逆相蒸发法、二次乳化法做了比较分析.     

Fabrication of PEI-Liposome Loaded Fish Gelatin Nanofibers Mats by Green Electrospinning

Polyethyleneimine （PEI） and cationic liposomes were widely used for gent delivery and the combination of PEI and liposome was reported to result in a higher efficiency of cell transfection in vitro. In recent years, better transfection was observed for the drug-loaded iiposome fixed on the tissue engineering scaffolds via embedding, surface adsorption or covalent grafting thus protected and bound by the scaffolds. In the present study, a novel PEI-liposome loaded fish gdatin composite nanofiber was successfully fabricated by a green electrosplnning process. The existence of PEI- liposome in the composite nanofibers was determined by Fourier transform infrared （ FTIR ） spectra, transmission electron microscopy （TEM）, and confoeal laser scanning microscopy （CLSM）. As shown by scanning electron microscopy （SEM）, the dectrospun composite nanofibers with uniform diameter were smooth and round, and the morphology of the fish gelatin fibers did not change significantly after the incorporation of PEI-liposomes. The transfection results in vitro suggest PEI-liposome loaded fish gelatin material may have a promising application in non-viral gene delivery systems.     

Nanocarriers for siRNA delivery to overcome cancer multidrug resistance

Multidrug resistance(MDR)is an extremely complexed phenomenon in tumor chemotherapy and is one of the major obstacles for successful treatment.Discovery of RNA interference(RNAi)offers a new strategy with great potential to reverse MDR.Specific genes,which contribute to the emerging of MDR,can be silenced by RNAi.However,many natural barriers have to be overcome for efficient and safe delivery of siRNA.In recent years,the various kinds of nanocarriers,such as liposomes,cationic polymers,and inorganic materials,have been developed to deliver siRNA and show good results in reversing MDR.This review mainly summarizes the barriers in siRNA delivery and recent progress in designing nanotechnology-based siRNA delivery systems to overcome tumor MDR.     

脂质体模型在抗菌肽膜作用机制研究中的应用进展

抗菌肽是一种阳离子、两亲性的膜活性多肽,具有广谱抗菌活性,改变膜渗透性,且对宿主正常细胞的毒副作用较小的特点.近年来研究表明,抗菌肽最基本的作用方式是破坏细菌的细胞膜结构,因此抗菌肽膜作用机制的研究引起了人们的广泛关注.为了研究抗菌肽与细菌细胞膜的相互作用,根据细胞膜磷脂成分的差异,以脂质体模拟细胞膜的模型,逐步成为抗菌肽结构与功能研究中的常用方法.对脂质体模型在抗菌肽结构、功能以及膜作用方式等研究中的作用、意义和方法进行了综述.     

纳米材料在基因治疗中的研究进展:从肿瘤治疗到新冠病毒疫苗

基因治疗作为一种精准有效的策略,可用于治疗包括癌症在内的多种疾病以及预防病毒性感染疾病．然而,基因治疗中使用的核酸药物自身不稳定性和大尺寸阻碍了它们的广泛应用．纳米材料因其免疫原性低、可控性好、易于进行表面修饰等特点,已被证明是基因治疗中最有前途的载体之一．特别是新型冠状病毒肺炎（COVID-19）疫情爆发以来,与传统疫苗不同的mRNA疫苗备受关注,而脂质纳米颗粒（LNP）作为该疫苗的递送系统发挥了至关重要的作用,展现了纳米材料巨大的应用前景．本文概述了基因治疗的主要类型;介绍了基于脂质的纳米颗粒、基于聚合物的纳米颗粒、无机纳米颗粒及新型纳米材料如碳点等核酸递送平台;强调了其在肿瘤治疗和COVID-19核酸疫苗中的最新研究进展;提出了纳米材料用于基因治疗的挑战与前景．