庆大霉素产生菌的紫外线诱变育种及发酵条件的研究

以庆大霉素产生菌ＪＹ１－１２为出发菌株，经紫外线照射，选育出性能优良菌株ＪＹ３－５，经正交试验确定了其最佳发酵培养基，研究了最佳发酵温及初始ＰＨ值，使其摇瓶效价提高３４．３％；３０ｍ＾３罐放大试验，比出发菌株效价提高１８．６％。     

啤酒糟固态发酵生产生物农药条件的优化

探讨了以啤酒糟为主要原料进行固态发酵生产生物农药的方法，研究了不同培养基成分及培养条件对苏云金杆菌毒力效价的影响．实验结果表明，最适发酵培养基为：啤酒糟1000g，玉米粉15g，豆粕180g，KH2PO42g；其最适发酵条件为：原料含水量为60％，发酵温度30℃、pH为7．5，培养时间56h．分析结果表明，苏云金杆菌的毒力效价达4960IU／mg．     

贝莱斯芽孢杆菌BR-01菌株高产抗菌肽培养基的优化及其抗菌肽的鉴定

贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis) BR-01菌株对水稻细菌性条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xoc)具有较好的拮抗作用。为了提高该菌株的抗菌肽发酵产量和生防价值，对其产抗菌肽培养基进行了优化，并初步鉴定了其抗菌肽的成分。以B.velezensis BR-01菌株无菌发酵滤液对Xoc的抑菌圈直径为评价指标，从7种常见培养基中筛选出最适培养基，通过单因素试验优化初始培养基各组分含量和发酵条件，再利用Plackett-Burman (PB)试验筛选出影响发酵滤液抑菌活性的显著因素，运用响应面分析法获得最优发酵条件。利用PCR分析B.velezensis BR-01基因组中抗菌肽合成相关基因；使用液相色谱-质谱联用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometer, LC-MS)技术鉴定其产生的抗菌肽。结果表明，B.velezensis BR-01菌株最佳抗菌肽培养基配方与发酵条件为麦芽糖11.89 g/L、酵母提取物13.54 g/L、NaCl 5 g/L、KH₂PO     

利用抗自身代谢物特性进行西索霉素菌种选育

经过诱变处理西索霉素产生菌，利用菌株抗自身代谢物特征，在添加高浓度的西索霉素的分离培养基上选育获得产生西索霉素比出发菌株单位高的突变株ＭＥ９７，经过薄层层析，生物效价测定，该突变株所产抗生素主要组份是西索霉素，总有抗生素效价提高，并且其它发酵特征也发生了改变。     

响应面分析法优化交沙霉素发酵培养基

以交沙霉素产生菌R29为供试菌株,采用响应面法综合实验设计,利用SAS分析软件对交沙霉素发酵培养基进行了优化.结果表明:棉籽饼粉和豆油为主效应因素,且培养基中棉籽饼粉和豆油最佳比例分别为1.9%和0.405%时,预测交沙霉素的发酵效价为220.6μg/mL.经验证试验,最优条件下交沙霉素的发酵效价为221.8μg/mL,与预测值相近,比原始配方下交沙霉素的发酵效价提高了10.66%.说明优化的发酵配方确实比初始配方更有利于菌株R29的产素.     

赤霉素的固态分批补料培养技术及其分离提取工艺研究

经菌种筛选来串珠镰孢AS．3,2960菌株;对影响赤霉素产率的固态分批补料发酵的7个因素进行了正交试验,从而筛选出最佳发酵条件为：在32℃下,按培养基初始pH值4．5,接种量20％的比例,在第3天添加13．2％的玉米淀粉,从第3通气,共培养6d;对固 发批补料发酵与传统的液态发酵产生赤霉素能力进行了比较,结果表明：其固态分批补料培养技术为液态发酵的3－4．7倍;对发酵产物进行了分离提取效果的比较实验,结果表明：以10％的乙醇,在pH2．5下提取效果最佳;进行了多级逆流浸提试验,赤霉素含量达到0．70g/kgDMB（发酵物）。     

应用正交试验法研究3，2960菌株的固态分批补料发酵条件

选取了对赤霉素真菌３，２９６０菌株产赤霉素能力有影响的七个因素，即培养时间、培养温度、接种量、培养基的初始ｐＨ值，加入玉米淀粉的时间，加入玉米淀粉的量，取下牛皮纸通气的时间，进行六水平正交试验。其结果表明：培养温度对赤霉素含量影响最大，其它为次要因素，培养基的初始ｐＨ值最不重要。该试验找出了使赤霉素含量达最高时的培养条件。     

浓度梯度法筛选华光霉素高产突变株

用华光霉素梯度平皿将华光霉素产生菌进行自然分离，结果表明：梯度法和常规法两种培养基上选出的菌株初筛平均效价分别为１０６．６％和１００％；在常规法中初筛效价比出发菌株高３０％以上的菌株为０，而在梯度法中有４株菌达到或超过这一水平。实验证明：用华光霉素梯度平皿分离不仅使效价的正变频率高于常规分离，而且正变幅度也大于常规分离。     

应用正交试验法研究3,2960菌株的固态分批补料发酵条件

选取了对赤霉素真菌３，２９６０菌株产赤霉素能力有影响的七个因素，即培养时间，培养温度、接种量、培养基的初始ＰＨ值，加入玉米淀粉的时间，加入玉米淀粉的量，取下牛皮纸通气的时间，进行六水平正交试验。其结果表明：培养温度对赤霉素含量影响最大，其它为次要因素，培养基的初始ＰＨ值最不重要，该试验找出了使赤霉素含量达最高时的培养条件。     

低双乙酰啤酒酵母菌种选育及其中试

以啤酒酵母FB作为出发菌株．通过紫外线诱变，并以发酵液中双乙酰含量为主要指标筛选获得一株优良啤酒酵母UB2．三角瓶低温发酵8d．其发酵液中双乙酰含量为O．0885mg／L，比出发菌株FB降低38％；发酵液保持了亲株FB的优良风味和凝聚性，且部分发酵性能有了较大的改善；在500L发酵罐中试实验中，UB2菌株发酵过程中的双乙酰峰值为0．17mg／L，比FB降低了45％；双乙酰还原速度较快，比FB提前1d达到质量标准，结束主酵；发酵得到的酒液经品评认为口感优于亲株．     

紫色红曲霉的微波诱变及其产红曲色素发酵条件的优化

以紫色红曲霉S1为出发菌株进行微波诱变,筛选出产红曲色素能力最高的突变株紫色红曲霉S1-29,其红曲色素值达3 240 U/g,比出发菌株提高了57%.针对菌株S1-29固态发酵培养产红曲色素的条件进行优化,添加不同的碳源、氮源以及无机盐,研究添加物对产红曲色素能力的影响,并进行正交实验,得到最佳发酵条件:在大米基质中添加葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁和磷酸氢二钾,使其质量分数分别为4%,6%,0.4%和0.3%,32 ℃培养11 d,菌株S1-29红曲色素值达到4 003 U/g,比优化前提高23.55%.     

发酵法生产京尼平菌株的筛选与培养

从土壤中筛选到一株产β-葡萄糖苷酶的菌株FYS-9,其发酵可将京尼平苷转化为京尼平。通过菌落形态特征、孢子和菌丝显微观察及18S rDNA基因序列分析,初步鉴定该菌株为泡盛曲霉（Aspergillus awamori）。以FYS-9为出发菌株,通过紫外线、原生质体诱变,选育得到一株高产β-葡萄糖苷酶的突变株70C-3,该突变株发酵产酶平均酶活力达到36.15IU/mL,比FYS-9提高39.4%。对突变株70C-3发酵转化京尼平苷条件的优化结果表明,在京尼平苷添加量1.5%,30℃、150r/min转化24h的条件下,京尼平苷的转化率达到97.7%,京尼平的产量可达8.5g/L。     

不同条件对黑曲霉2产纤维素酶活性的影响

黑曲霉2是本实验筛选的一株具有降解有机废弃物的功能微生物,为进一步深入研究其产酶条件,提高应用效果,本研究基于现有研究结果,采用液体发酵培养法,分别测定了培养时间、接种菌龄、通气状况、初始pH、不同碳源底物对其产酶活性的影响。实验结果表明:黑曲霉2在采用原始菌株接种、基础培养基初始pH为6.5、每500mL摇瓶装量为150mL、发酵48h条件下产纤维素酶活性相对较高;同时采用不同碳源底物影响产纤维素酶活性,活性从高到低依次为木薯渣、中药渣、稻秸和糖泥。     

He-Ne激光对红曲霉ZL307的诱变育种

以红曲霉ZL307为出发菌株,利用氦-氖（He-Ne）激光对其单孢子悬液进行诱变育种．通过计算存活率和正突变率,确定激光诱变育种的处理条件为电流强度20mA,照射时间50min．通过平板初筛和摇瓶发酵进行复筛,选育出突变株红曲霉ZZ307．相对于出发菌株,实验不仅缩短了菌种的培养时间,而且产色素色价达到100．39U／mL（提高了34％）,色价达到峰值时间提前1d．进行10代遗传稳定性实验,突变菌株仍具有良好的遗传稳定性．     

饲用复合酶生产菌株的诱变选育

通过UV诱变复合酶产生菌黑曲霉筛选得到一突变株JW001,该菌株可同时发酵产生高活力的多酶系,其中纤维素酶和酸性蛋白酶活力分别为18 379 u/g和6 472 u/g,比出发菌株分别提高122%和92%.优化确定了曲盘固体发酵工艺,并进行了复合酶动物应用试验,试验表明黑曲霉JW001菌株发酵生产的饲用复合酶制剂对不同畜禽均有很好的饲喂效果.     

耐高渗压酵母的甘油发酵研究:ⅡGW-11菌株的发酵条件试验

甘油是国防和民用工业的一种重要原料,日前市场供需矛盾突出。耐高渗酵母发酵法制取甘油是解决这一供求矛盾的有希望的途径,而高产菌株选育是该途径的基础。我组1987年从广西自然环境中筛选获得一株产甘油的菌种GW-11。本文是通过对该菌株的培养基组成及培养条件的试验。以获得最佳发酵条件,并对其甘油生产性状进行考察。结果表明:优化发酵条件与原试验条件相比,该菌发酵甘油产率由原8％提高到14.0％,对糖转化率由原来的40％,提高到46.7％,GW—11是一株具有潜在工业生产价值的耐高渗的甘油发酵生产菌。     

果胶酶高产菌Aspergillus niger HYA4的选育

采用紫外线处理黑曲霉(Aspergillus nige)HY4孢子，照射剂量为75s。获得一株高产果胶酶突变株HYA4，在优化的固体发酵条件下酶活力达1285U/g物料，比出发菌株提高了2倍，为亚麻脱胶酶的生产提供了良好的菌株。     

枯草杆菌GMS7突变株肌苷发酵研究

以肌苷产生菌枯草杆菌7171—9—1为出发菌株,经物理、化学诱变剂连续处理,获得一株腺嘌呤营养缺陷型并对8—氮杂鸟嘌呤、磺胺胍、链霉素有三重抗性的突变株GMS7,在最佳摇瓶发酵条件下,平均产肌苷为21.35g/L,最高可达23.21g/L,比原菌提高了1.4倍。此外从形态学角度,跟踪观测了肌苷发酵过程中菌体形态的变化,并探讨了各种因素对发酵产苷的影响。     

透明质酸产生菌的化学诱变及发酵条件探索

以兽疫链球菌（Streptococcus zooepidemicus）C55151为原始菌种, 经N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（NTG）诱变处理, 获得一株高产透明质酸（Hyaluroni c acid, HA）的变异株J18, 其HA产量较原始株提高一倍. 利用正交设计试验探索出该变异株的最佳发酵培养基配比为葡萄糖50 g/L, 酵母膏30 g/L, 硫酸镁0.5 g/L.　发现添加十二烷基硫酸钠（SDS）能够大幅度提高HA产量． 同时对原始株、 变异株的发酵过程进行了研究, 发现变异株J18在发酵的任何时间, 其HA产量都高于原始菌种, 且菌体浓度与发酵液中的葡萄糖浓度及pH值呈负相关性.