秦皮乙素对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

研究秦皮乙素对S_(180)荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响,探讨秦皮乙素红细胞免疫抗肿瘤机制.采用体内移植S_(180)肿瘤细胞株复制S_(180)荷瘤小鼠模型.以红细胞免疫花环实验检测红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力;采用分光光度法测定荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸含量、Na~+,K~+-ATP酶和Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性.采用Western blot测定带3蛋白含量.结果表明:秦皮乙素能够增强S_(180)荷瘤小鼠红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力;增加红细胞膜唾液酸含量及带3蛋白含量;提高红细胞膜Na~+,K~+-ATP酶和Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性.秦皮乙素可能通过改善S_(180)荷瘤小鼠红细胞膜的功能状态,提高膜的稳定性,增强红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力,从而发挥其抗肿瘤作用.     

龙葵碱对肿瘤细胞膜ATP酶活性的影响

荷瘤小鼠分为治疗组(37．50mg／kg、18．75mg／kg、9．37mg／kg)和对照组(生理盐水组、环磷酰胺组30mg／kg),分别测定各组肿瘤细胞膜的Na^ ,K^ -ATPase及Ca^2 ,Mg^2 -ATPase活性．结果表明龙葵碱(37．50mg／kg、18．75mg／kg)对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na^ ,K^ -ATPase及Ca^2 ,Mg^2 -ATPase活性均有明显的抑制作用,并且其抑制作用呈量效正相关．因此龙葵碱这一作用可能是其抗肿瘤作用机理之一．     

瑞香狼毒对东亚飞蝗作用机理的初步研究

利用硅胶柱分离瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ段粗分物,并测定对东亚飞蝗毒杀活性最高的I段粗分物对东亚飞蝗的致死性及对其体内Na~+-K~+-ATPase、Ca~(2+)/Mg~(2+)-ATPase、乙酰胆碱酯酶的抑制活性.研究表明:瑞香狼毒I段粗分物对东亚飞蝗具有较强的毒杀作用,在药物浓度为10mg/mL、72h对东亚飞蝗的校正死亡率为92.50%;同时,毒杀作用具有浓度和时间依赖性;而且瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物I段粗分物对上述3种酶均有一定的抑制作用,且对Na~+-K~+-ATPase的抑制作用最强,在药物浓度为5mg/mL、96h对Na~+-K~+-ATPase的抑制率为40.38%;分析发现瑞香狼毒活性成分对东亚飞蝗的毒杀作用与对Na~+-K~+-ATPase的抑制作用之间具有显著相关性,据此推测,Na~+-K~+-ATPase可能是瑞香狼毒活性成分的主要作用靶标之一.     

仙人掌多糖对荷瘤小鼠肿瘤细胞钙泵的影响

研究了食用仙人掌多糖、药用仙人掌多糖对S180小鼠肿瘤细胞膜Ca2 -ATPase的活性影响.结果表明,二者均能明显抑制荷瘤小鼠肿瘤细胞膜上Ca2 -ATPase的活性.仙人掌多糖的这一作用改变了荷瘤小鼠细胞膜的物质、能量平衡,推测其作用可能表现为促进肿瘤细胞的凋亡.     

基于萘基团的Zn~(2+)“关-开”荧光探针

合成了一种新Zn~(2+)的荧光探针2-羟基-苯甲酸(2-羟基-萘-1-基亚甲基)-酰肼(P3),该探针Ag~+,Al~(3+),Bi~(3+),Cd~(2+),Co~(2+),Cr~(3+),Cu~(2+),Dy~(3+),Eu~(3+),Fe~(3+),Hg~(2+),K~+,Mg~(2+),Mn~(2+),Na~+,Ni~(2+),Pb~(2+),La~(3+),Sm~(3+),UO_2~(2+),Th~(4+)和Zr~(4+)等多种离子的存在下,对Zn~(2+)具有很好的选择性。探究了探针P3识别Zn~(2+)的最佳条件,建立了一种荧光检测Zn~(2+)的方法。其结果表明在pH值为7. 36,φ(CH_3OH)=10%及φ(H_2O)=90%的体系中,Zn~(2+)浓度在1～9μmol/L范围内,探针的荧光强度与Zn~(2+)的浓度呈现良好的线性关系(y=40. 333x+10. 323,R~2=0. 99),其检出限0. 045 6μmol/L。同时,研究了P3与Zn~(2+)的作用模式,提出了荧光机制。     

芦荟多糖对荷瘤小鼠肿瘤细胞膜功能的影响

研究芦荟多糖对荷瘤小鼠肿瘤细胞膜功能的影响.采用荧光分光光度法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳以及唾液酸试剂盒分别测定库拉索和木立2种芦荟多糖对S180小鼠肿瘤细胞膜脂流动性、膜蛋白及唾液酸含量的影响.结果表明,2种芦荟多糖各剂量组均能不同程度地降低S180小鼠肿瘤细胞膜脂流动性、膜交联蛋白百分比含量和唾液酸的含量,且两种多糖中、高剂量组具有显著性(P<0 05或P<0 01).提示,芦荟多糖对S180小鼠肿瘤细胞膜功能具有抑制作用,提示其可能为芦荟多糖发挥抗肿瘤作用的主要机制之一.     

低温胁迫下油菜素内酯对高山离子芥悬浮细胞膜系统的影响

为研究低温胁迫下油菜素内酯(brassinosteroids, BRs)对植物细胞膜系统的影响,使用24-表油菜素内酯(24-epibrassinolide, EBR)在4℃处理高山离子芥(Chorispora bungeana)悬浮细胞.结果显示,低温胁迫下高山离子芥悬浮细胞的离子渗漏率和丙二醛(MDA)含量明显升高,而EBR处理显著降低了细胞的离子渗漏率和MDA含量.此外,低温胁迫下,EBR处理在一定程度上提高了膜脂脂肪酸不饱和程度并明显增强了细胞质膜H~+-ATPase,K~+-ATPase,Ca~(2+)-ATPase以及Mg~(2+)-ATPase的活性.另外,低温诱导CbCOR15基因大量表达.而在低温胁迫初期,EBR处理细胞的CbCOR15基因表达水平更高.以上实验结果表明,EBR在稳定低温胁迫下高山离子芥悬浮细胞膜系统的结构与功能方面发挥积极作用,从而保证细胞生理代谢的正常进行,以提高其抗寒能力.     

大负荷跑台运动对大鼠心肌细胞膜Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase与肌浆网Ca2+-ATPase活性的影响

目的:探讨大负荷跑台运动对大鼠心肌细胞膜钠钾泵(Na+-K+-ATPase)、钙泵(Ca2+-ATPase)与肌浆网钙泵(Ca2+-ATPase)活性的影响。方法:选择30只成年雄性SD大鼠分为空白对照组和运动后24 h组以及运动后即刻组。结果:运动后即刻组的Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性均显著低于其他两组,(P<0.05);运动后24 h组的Ca2+-ATPase显著低于其他两组,(P<0.05);电镜观察可见运动后24 h组的肌细胞及肌浆网出现肿胀,肌原纤维结构出现明显的损伤;运动后即刻组的线粒体结构出现明显的损伤。结论:大负荷跑台运动会导致大鼠心肌细胞膜钠钾泵(Na+-K+-ATPase)、钙泵(Ca2+-ATPase)与肌浆网钙泵(Ca2+-ATPase)活性的降低。     

姜黄素对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

研究姜黄素对S180和H22荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响.观察姜黄素对荷瘤小鼠红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力;观察姜黄素对荷瘤小鼠红细胞免疫调节因子活性的影响;采用DPH荧光探针,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P),并计算膜的微黏度(η)研究红细胞膜脂流动性(LFU).姜黄素能对两种荷瘤小鼠均具有非常显著的抑瘤作用;能够升高两种荷瘤小鼠的红细胞黏附肿瘤细胞的花环率;显著提高两种荷瘤小鼠红细胞C3b受体花环促进率,降低其抑制率;提高两种荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性.姜黄素可能是通过提高两种荷瘤小鼠红细胞免疫调节因子活性及红细胞膜脂流动性.从而恢复荷瘤小鼠红细胞免疫功能进而达到抗肿瘤目的.     

石蒜碱诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制研究

利用MTT试验,检测石蒜碱对人肝癌HepG-2细胞具有增殖抑制作用,并观察细胞凋亡形态,采用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率,发现石蒜碱对人肝癌HepG-2肿瘤细胞具有显著的抗肿瘤作用;通过对肿瘤细胞膜上主要组成成分进行检测,发现石蒜碱可以改变HepG-2细胞膜主要组成成分,使细胞膜结构发生变化;通过考察石蒜碱对HepG-2细胞细胞膜结构功能的影响,发现石蒜碱可以破坏肿瘤细胞膜完整性,并且能够降低肿瘤细胞膜封闭度、肿瘤细胞膜流动性以及肿瘤细胞膜阳离子通道活性,肿瘤细胞膜主要组成成分、结构的改变将会改变肿瘤细胞的内环境,细胞的内环境的改变必将影响细胞正常的新陈代谢功能,引发细胞凋亡.     

6-F硫色烯并[4,3-c]吡唑啉的体内抗肿瘤活性

用小鼠移植性肿瘤法对6-F硫色烯并[4,3-c]吡唑啉(Ja)进行体内抗肿瘤活性研究.通过检测其对小鼠H22肝癌细胞、S180肿瘤细胞的体内抑瘤作用,计算肿瘤抑制率和生命延长率,并与阳性药顺铂做比较.结果表明,该化合物可抑制H22肝癌细胞皮下移植瘤的生长,在剂量为1,2,4 mg/(kg·d)时,腹腔注射给药抑瘤率分别为13.93%,37.49%,47.45%;而以剂量为5,10,20 mg/(kg·d)灌胃给药时,抑瘤率分别为31.53%,43.77%,50.73%;另外,该化合物可明显延长S180腹水瘤小鼠存活时间,以剂量为5,10,20 mg/(kg·d)灌胃给药时实验测得生命延长率分别为30.4%,64.7%,88.2%.该化合物有较强的体内抗肿瘤活性,对其抗癌作用机制值得进行深入研究.     

5种灵芝硒多糖抑制小鼠S180肉瘤生长作用的比较研究

比较5种灵芝硒多糖S180肉瘤的抑制作用及其与抗氧化作用的关系.用浓度为2.5g/L的SeGLP5种系列产品的溶液对BALB-c小鼠进行皮下注射,以正常小鼠作阳性对照,以注射生理盐水的荷瘤小鼠作阴性对照,连续注射14d,第15天测定小鼠血液和肝脏中SOD的活性和MDA的含量,并测肿瘤重量.结果显示,5种灵芝硒多糖对小鼠S180肉瘤都有不同程度的抑制作用,抑瘤率从62.79%到32.26%不等,其中SeGLP-1B的抑瘤作用最显著(P0.001),SeGLP-2B次之,其余各种多糖的抑瘤效果也都显著或极其显著(P0.005或P0.001).认为SeGLP5种系列产品均可通过提高机体的抗氧化能力来抑制S180肉瘤的生长,其抑瘤效果与硒的含量呈正相关的剂量依赖关系.     

药物干预小鼠凝血功能对肿瘤形成的影响

目的:以药物干预接种肿瘤小鼠凝血功能,研究早期肿瘤形成与凝血系统功能的关系。方法:成年健康KM小鼠皮下接种S180肿瘤细胞,分正常组、肿瘤对照组、肝素组、抗癌药组、溶剂组。接种瘤细胞后第5天开始药物干预,分别为:不处理、皮下注射生理盐水(2 d 1次)、皮下注射低分子量肝素(2 d 1次)、抗癌药灌胃(每d 1次)、溶剂灌胃(每d 1次)。在接种后第3周末测量肿瘤大小、凝血酶原时间、血浆抗凝血酶Ⅲ和血清TNF-α水平,再处死小鼠,剥离实体肿瘤。统计学分析肿瘤大小与各检测参数之间的相关性。结果:肿瘤对照组和溶剂组分别在接种瘤细胞后第6和第10天有1小鼠死亡,肿瘤大小测量结果显示,对照组和溶剂组的瘤体显著较大,平均为(5.0±2.5)cm~2,肝素组的外观比前两者略小,平均为(3.2±1.8)cm~2,但与前两者无统计学上差异。抗癌药组瘤体显著较小,平均(1.8±0.82)cm~2,与对照组有显著差异(P<0.01)。统计学分析结果显示,肿瘤大小与凝血酶原时间和抗凝血酶Ⅲ水平成负相关(P<0.05),但与血清TNF-α的水平成正相关(P<0.05)。结论:单纯肝素干预治疗肿瘤小鼠无显著减小肿瘤大小作用,但与对照组相比瘤体有缩小的趋向,抗凝药物治疗可能对肿瘤的发生和发展具有抑制作用。     

北虫草培养残基中虫草素的提取纯化及抗肿瘤活性

以北虫草固体培养残基为实验材料,比较闪式提取、超声波提取和超高压提取培养残基中虫草素的效果,用陶瓷膜过滤提取液,获得虫草素粗提液,利用高速逆流色谱分离制备虫草素,通过LC-MS/MS对产物结构进行鉴定,并验证了虫草素对小鼠S180肉瘤的抑制作用。结果显示,超高压提取培养基中虫草素较好,高速逆流色谱分离纯化条件是以V(乙酸乙酯)∶V(正丁醇)∶V(水)=2∶3∶5的两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速3.0mL/min,主机转速900r/min,分离温度28℃,以此分离条件经一步洗脱,高速逆流色谱收集馏分,其中峰Ⅲ产物经HPLC检测纯度达97.6%,结构经LC-MS/MS鉴定为虫草素。从100g北虫草培养残基中可制备得虫草素181.90mg,并对其活性验证发现剂量为100mg/kg时小鼠S180肉瘤瘤重抑制率为64.48%。     

南瓜多糖的抑瘤作用及对红细胞免疫功能的影响

目的 :探讨从南瓜中提取的多糖对动物肿瘤的抑制作用以及免疫活性 ,以寻找和开发新的植物抗肿瘤药。方法 :以小鼠 S- 180、艾氏腹水癌 (EAC)为动物模型 ,通过灌胃给予南瓜多糖 ,按 10 mg/ m L 每天灌胃 0 .4m L,连续给药七天 ,第八天处死动物 ,取瘤及胸腺称重求抑瘤率及增重率 ,并作眼底取血以检测外周血各种血细胞数、血浆总蛋白、白蛋白、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)、红细胞免疫功能试验。将所有数据进行 t检验。阳性对照安瘤乳组和阴性对照生理盐水组作同样检测和统计学处理。结果 :南瓜多糖对S- 180、艾氏腹水癌的抑瘤率分别为 37.3%和 33.3% ,对胸腺增重率为 8.3%。对白细胞及淋巴细胞数的影响 ,南瓜多糖与安瘤乳组比较 ,南瓜多糖组明显高于安瘤乳组 ,P<0 .0 1。对红细胞、血小板计数及血浆白蛋白水平均无显著影响。南瓜多糖组血浆 SOD活性升高 ,MDA含量有不同程度的降低 ,但无显著差异。红细胞免疫吸附肿瘤细胞能力增强 ,P<0 .0 5。结论 :南瓜多糖具有一定的抗癌及升高血浆白细胞、淋巴细胞的作用 ,增强红细胞免疫吸附功能。     

2-巯基苯并噻唑衍生物类小分子抑制剂对人结直肠癌细胞SW620的生长抑制作用

拟研究2-巯基苯并噻唑衍生物类小分子抑制剂(SKLB-163)对结直肠癌细胞SW620增殖及凋亡的影响;并探讨可能的作用机制。使用流式细胞术检测药物处理后肿瘤细胞凋亡的情况;利用MTT实验检测细胞增殖情况。在裸鼠人结直肠癌细胞SW620移植瘤模型中评估药物灌胃给药时能否抑制肿瘤生长。流式细胞术和MTT表明,SKLB-163能够促进SW620细胞凋亡,且能够显著抑制SW620细胞的增殖。动物实验表明,口服灌胃给药SKLB-163(200 mg/kg)能够显著抑制裸鼠人结直肠癌细胞SW620移植模型肿瘤的生长。总之,SKLB-163具有较好的抗肿瘤活性;为进一步发展新型2-巯基苯并噻唑类抗肿瘤药物提供了依据。     

牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D体外抗肿瘤活性及作用机制

为了研究牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D体外抗肿瘤活性及作用机制,用MTT法检测6.25～100 mg/L 2-hydroxyyunnandaphnine D分别作用于人肝癌细胞(HepG-2)、人乳腺癌细胞(MCF-7)及人宫颈癌细胞(HeLa)后不同时间点的细胞存活并计算细胞增殖抑制率和IC50;FDA/PI双染色荧光显微镜观察细胞死亡情况;分光光度法检测Caspase-3酶活性变化;MTT法检测凋亡抑制剂Z-VAD-FMK对2-hydroxyyunnandaphnine D抑瘤活性的影响.结果显示:2-hydroxyyunnandaphnine D对3种瘤株均有明显的抑制作用,且具有明显的时效量效关系,其48h的IC50值分别为(1.30±0.09),(7.32±0.10)和(8.41±0.11)mg/L.FDA/PI双染色荧光显微镜观察显示2-hydroxyyunnandaphnine D组中死亡细胞数较正常对照组细胞死亡数量增加,且随着剂量的加大细胞死亡数量增加.MTT法显示凋亡抑制剂Z-VAD-FMK不能阻断2个浓度的2-hydroxyyunnandaphnine D对HepG-2细胞的增殖抑制作用.Caspase-3酶活性测定显示l0,30mg/L 2-hydroxyyunnandaphnine D作用后肿瘤细胞的Caspase-3酶活力单位与正常对照组比较无统计学意义.结果表明:牛耳枫生物碱2-hydroxyyunnandaphnine D在体外具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用,其作用机制并非通过激活Caspase-3途径.