抗人肝癌单克隆抗体JHⅢ的制备及其生物学特性

用肝癌细胞株ＢＥＬ－７４０２脾内直接免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，获得一株分泌肝癌单抗的杂交瘤细胞株ＪＨⅢ，其染色体众数为９０－１１０，单抗ＪＨⅢ系ＩｇＧ２ｂ亚类。杂交瘤细胞培养上清和腹水的效价分别为１：１０＾２～１０＾３和１：１０＾６以上。ＡＢＣ法证实它对肝癌组织有较好的相关性。ＩＦＡ法也证明它对肝癌细胞ＢＥＬ－７４０２有强的阳性反应，而对其他肿瘤细胞株和肿瘤组     

VP—16诱导的鼻咽癌细胞亚系多药耐受表型的研究

经ＶＰ－１６大剂量短暂冲击加递增低浓度诱导方法建立了鼻咽癌耐药细胞亚纱ＬＣＥ／ＶＥ,用ＲＴ－ＰＣＲ和ＰＣＭ免疫荧光法检测了耐药基因ＭＲＰ和ｍｄｒ１在ｍＲＮＡ水平和蛋白质水平的表达,并用ＭＴＴ法测定了ＬＣＥ／ＶＰ对９种化疗药物的敏感试验,结果发现ＬＣＥ／ＶＰ细胞几ｍｄｒ１在ｍＲＮＡ水平均有表达,且前明显高于后,蛋白质水平的表达情况与ｍＲＮＡ水平相一致,ＬＣＥ／ＶＰ对９种化疗药物中的６种药物敏感程     

成纤维细胞静脉注射途径实施血友病B基因治疗的初步探索

将转有报告基因ｌａｃＺ的成纤维细胞３Ｔ３／ＢＡＧ以５×１０＾５量尾静脉注射到Ｂａｌｂ／ｃ小鼠体内，７ｄ后在主要脏器检测到３ＴＥ／ＢＡＧ的表达且至少可持续３０ｄ。将转有人凝血因子Ⅸ小基因的正向表达载体Ｇ１ＮａＣｉ’Ⅸ和反向表达载体Ｇ１ＮａＣｉ’ⅨＲ的成纤维细胞ＰＡ３１７／Ｇ１ＮａＣｉ’Ⅸ和ＰＡ３１７／Ｇ１ＮａＣｉ’ⅨＲ分别以１×１０＾５量尾静脉注射到Ｂａｌｂ／ｃ小鼠体内，ＥＬＩＳＡ测定小鼠血浆中ｈＦ     

A1Et2C1／t—BuC1引发α—蒎烯阳离子聚合

考察了Ａ１Ｅｔ２Ｃ１／ｔ－ＢｕＣ１引发体系的α－蒎烯阳离子聚合反应行为。结果表明，Ａ１Ｅｔ２Ｃ１单独不能引发α－蒎烯聚合，与ｔ－ＢｕＣ１复合后才具有引发活性。其引发活性随ｔ－ＢｕＣ１／Ａ１Ｅｔ２Ｃ１的不同而变化，质谱分析表明α－蒎烯聚合产物中存在ｔ－ＢｕＣ１和基（ＣＨ３）３Ｃ，证明ｔ－ＢｕＣ１参与了链的引发反应。进一步实验还有表明：ｔ－ＢｕＣ１与Ａ１Ｅｔ２Ｃ１相互作用除生成活性物质Ｂｕ＾＋ＡｌＥｔ     

小鼠B7—1cDNA克隆,测序,表达及其抗瘤效应的初步探讨

用反转录ＰＣＲ的方法,从ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞中扩增出Ｂ７－１ｃＤＮＡ后,插入ｐｃＤＮＡ３质粒中构建成小鼠Ｂ７－１ｃＤＮＡ的真核表达载体ｐＣＤ－ｍＢ７．１,经酶切鉴定和序列分析证实此表达载体中插入的Ｂ７－１ｃＤＮＡ的序列与献报道一致。     

AlEt_2Cl／t－BuCl引发α－蒎烯阳离子聚合

考察了ＡｌＥｔ_２Ｃｌ／ｔ－ＢｕＣｌ引发体系的α－蒎烯阳离子聚合反应行为。结果表明，ＡＩＥｔ_２Ｃｌ单独不能引发α－蒎烯聚合，与ｔ－ＢｕＣｌ复合后才具有引发活性，其引发活性随ｔ－ＢｕＣｌ／ＡｌＥｔ_２Ｃｌ的不同而变化，质谱分析表明α－蒎烯聚合产物中存在ｔ－ＢｕＣｌ残基（ＣＨ_３）_３Ｃ，证明ｔ－ＢｕＣｌ参与了链的引发反应。进一步实验还表明，ｔ－ＢｕＣｌ与ＡｌＥｔ_２Ｃｌ相互作用除生成活性物质ＢｕＡｌＥｔ_２Ｃｌ_２外，还有烷基化的产物ＡｌＥｔＣｌ_２，ＡｌＣｌ_３生成，聚合反应条件及引发剂加料方式对α－蒎烯转化率及聚合产物组成都有影响。     

丙型肝炎病毒核酸疫苗的研究

从丙型肝炎病人的阳性血清中提取出丙型肝炎病毒ＲＮＡ，通过ＲＴ－ＰＣＲ的方法获得丙型肝炎病毒Ｃ区基因片段。并将此片段克隆到真核细胞表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（＋），得到重组质粒ｐｃＤＮＡ－ＨＣＶ／Ｃ，再将其通过肌肉注射免疫ＢＡＬＢ／小鼠后，小鼠产生了抗ＨＣＶ／Ｃ区抗体。     

人粒细胞集落刺激因子在昆虫细胞中的表达

利用苜蓿尺核型多角 体病带β－Ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ基因标志的非融合蛋白基因转移载体ｐＢＢ成功地构了重组杆状病毒ＡｃＮＰＶ－Ｇ－ＣＳＦ．在感染重组病毒的草地夜蛾细胞中ｈＧ－ＣＳＦ得到了高效表达。表达产物由ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检出，其分子量约为１９ＫＤａ。     

重组PAI—1在大肠杆菌中表达条件的研究及其对t—PA,u—PA…

带有表达质粒ｐＢＶ２２０／ＰＡＩ－１的大肠杆菌中，在菌体密度为Ａ６００ｎｍ＝０．３＝０．４时诱导，表达重组ＰＡＩ－１的效率最高。在诱导后的６ｈ以内，ｒＰＡＩ－１的百分含量持续升高。ｒ－ＰＡＩ－１经分离纯化并用盐酸胍激活后，能够与ｔ－ＰＡ及ｕ－ＰＡ反应，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和纤维蛋白自显影方法可以检测出它们所形成的复合物。     

束缚应激引起小鼠脾内TrkC mRNm水平变化

用地高辛标记的寡核苷酸探针进行RNA缝隙杂交,观察了束缚应激不同阶段的BALB／c小鼠脾内TrkC mRNA表达水平的变化．结果显示脾内TrkC mRNA于应激8h时表达明显增加,而于4和12h时均有不同程度的降低．提示NT-3／TrKc系统在应激引起的神经-免疫系统相互调节中起一定作用．     

新型的具有电开关特性的含C60复合薄膜

利用真空双源同时蒸发法制备了新型Ｃ６０－１，４－ｂｉｓ（－１，１－ｄｉｃｙａｎｏｖｉｎｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅ（ＢＤＣＢ）复合薄膜。用高分辨扫描电镜和Ｘ－射线衍射仪分析了ＢＤＣＢ－Ｃ６０复合薄膜的表面形貌和结构特性，结果表明ＢＤＣＢ－Ｃ６０复合薄膜是一种不同于纯Ｃ６０薄膜和纯ＢＤＣＢ薄膜的结构相。Ａｇ／ＢＤＣＢ－Ｃ６０／Ａｇ的拓明治型结构具有电学双稳态现象和记忆特性。     

在大肠杆菌中利用反义RNA抑制乙肝病毒（HBV）X基因的表达

将乙肝病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ株完整的Ｘ基因正向重组到原核表达质粒ｐＢＶ－２２１的ＰＬ启动子下游，得到能表达Ｘ蛋白的重组质粒ｐＢＶ－ＨＢＶ（＋）；同时将Ｘ基因反向重组到原核表达质粒ｐＢＶ－２２０的ＰＬ启动子下游，得到能转录Ｘ基因反义ＲＮＡ的重组质粒ｐＢＶ－ＨＢＸ（－）。利用这两个质粒，构建出能同时转录Ｘ基因ｍＲＮＡ和反义ＲＮＡ的重组质粒ｐＥＸ。ＡＮ－ＨＢＸ，并在原核水平上，证实了反义ＲＮＡ对Ｘ基因的表     

黑白花乳牛关节滑膜炎的研究：I.两性霉素B诱发急性…

对７头一岁龄健康黑白花乳牛的１４个腕关节内注射两性霉素Ｂ（１２．５ｍｇ／关节）成功诱发急性浆液性腕关节滑膜炎（ＡＳＣＳ）注射前及诱发关节炎后（注射后４８ｈ）分别抽取正常及炎性腕关节滑液（ＳＦ）样品，同时采集血液样品待检，检测结果表明，乳牛ＡＳＣＳ时，ＳＦ中细胞总数（ＴＣＣ），总蛋白（ＴＰ），乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）．碱性磷酸酶（ＡＬＰ），γ－谷氨酰转伏酶（γ－ＧＴ），蛋白及ＬＤＨ同功酶各组分含量均显著     

BMP—3及BMP—5在不同组织和细胞中的表达

报道ＢＭＰ－３及ＢＭＰ－５在不同组织细胞中的表达，将人的神经终细胞瘤ＳＫ细胞的总ＲＮＡ及人的脑，肝，胸腺，脾，胎盘及睾丸的总ＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ作为模板，利用设计的编码ＢＭＰ－３和ＢＭＰ－５成熟蛋白的专一性引物分别扩增出相应的片段。ＰＣＲ产物的琼脂糖凝胶电泳结果表明，ＢＭＰ－３及ＢＭＰ－５在不同组织细胞中表达类型不同。     

不同S180细胞株蛋白质特性的电泳及免疫组化法比较研究

用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫组化染色方法，比较研究４个不同单位保种的小鼠肉瘤（Ｓ１８０）细胞蛋白质的表达。电泳结果显示，北京市肿瘤研究所仲种的Ｓ１８０蛋白质条带数最多，武汉大学保种中心的Ｓ１８０最小。免疫组化染色法测定四个单位Ｓ１８０细胞的Ｒａｆ－１、Ｔｒｋ、Ｇａｉ、Ｇａｏ和ＮＦＫｂＰ６５蛋白表达，Ｇａｉ、ＴｒｋＡ和Ｒａｆ－１阳性率均低于０．２％；Ｇａｏ阳性率均低于４．２％     

扩展Fire单个单向突发错误纠正／全部单向错误检测码的构造

给出了构造１－ｌＵＢＥＣ／ＡＵＥＤ（单个单向突发错误纠正／全部单向错误检测）码的充分必要条件和建议的１－ｌＵＢＥＣ／ＡＵＥＤ码校验位的下限；将纠单个突发错误Ｆｉｒｅ码进行扩展，得到了扩展Ｆｉｒｅ１－ｌＵＢＥＣ／ＡＵＥＤ码；证明了扩展Ｆｉｒｅ码为无序码和１－ｌＵＢＥＣ／ＡＵＥＤ码；最后给出了基于移位寄存器实现扩展Ｆｉｒｅ码的编－译码框图。在纠单向突发错误和检单向错误时，扩展Ｆｉｒｅ码具有更高的译码效率和信息率。     

^27AlNMR法研究PACS水中稀释形态分布

用＾２７ＡｌＮＭＲ方法研究了碱化度（Ｂ），Ａｌ＾３＋／ＳＯ＾２－４摩尔比及水中稀释过程对ＰＡＣＳ（含ＳＯ＾２－４的聚合氯化铝）结构的影响，实验结果表明，ＰＡＣＳ中铝含量大于０．９ｍｏｌ／Ｌ时，水中稀释ＰＡＣＳ聚合度影响较大，小于０．９ｍｏｌ／Ｌ后水中稀释对ＰＡＣＳ聚合度影响较小，水中稀释可使聚合大分子向Ａｌ１３结构转化，这种转化能力的大小取决于ＰＡＣＳ中Ｂ的高低和Ａｌ＾３＋／ＳＯ＾２－４摩尔比的大     

人组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）在大肠杆菌中的表达,…

人组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）ｃＤＮＡ重组在表达质粒ｐＤＲ７２０中。在Ｅ．ｃｏｌｉＣ６００中获得了表达，表达水平为２％。以醋酸锌显色ＰＡＧＥ凝胶回收ｔ－ＰＡ表达条带，进行复性处理。复性产物经Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ，Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，纯化得到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染一条带纯度，比活为４，０００ｍｏｌ／ｓ·ｇ的人ｔ－ＰＡ。     

重组人粒细胞集落刺激因子在Escherichia coli中的表达研究

根据人天然粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）基因序列设计出引物,通过ＲＴ－ＰＣＲ从人外周血单个核细胞ｍＲＮＡ获得Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ片段,将该片段与原核表达载体ｐＴ７构建成重组体,导入大肠杆菌后发现天然Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ表达量并不理想,这可能是由于天然ｈＧ－ＣＳＦ５’端Ｇ＋Ｃ的比例过高,使转录后的ｍＲＡ很容易形成二级结构而影响翻译起始,因此在大肠杆菌中很难获得高效表达,根据密码子简并性原则,在不改变编码氨基酸顺序的前提下,通过重新设计ＰＣＲ引物,将ｈＧ－ＣＳＦ的前３个氨基酸密码子中的几个ＧＣ碱基作了改动,获得了新的ｃＤＮＡ突变体,将其与ＰＴ７的重组导入大肠杆菌,获得了高效表达。     

去B链羧端三肽人胰岛素原的基因构建和表达

用改进的寡苷酸诱导 突变法将人胰岛素原基因（ＢＣＡ）删除编码Ｂ链羧端三肽的碱基片段，得到去Ｂ链羧端三肽胰岛素原的基因（Ｂ＾－３ＣＡ）。为了便于表达产物的蛋白质后加工，又用ＰＣＲ的方法在Ｂ链Ｎ端起始Ｍｅｔ与Ｐｈｅ密码子之间增加了编码Ｌｙｓ的３个碱基，得到改造后基因ＬＢ＾－３ＣＡ，将ＬＢ＾－３ＣＡ克隆到表达质粒ｐＢＶ２２０上，在大肠杆菌系统中热诱导表达，表达率为１２％。表达产物经蛋白质后加工，得到的去