乙二醇对速冻中小鼠胚胎发育的作用

利用快速冷冻方法处理小鼠2-细胞、4-细胞、8-细胞以及桑椹期的胚胎．用乙二醇作低温保护剂,浓度分别为0．5,1．5,2．5,3．5mol／L,其中含10％犊牛血清和0．25mol／L蔗糖,培养到囊胚阶段．结果发现,当乙二醇的浓度在2．5mol／L或以上时的保护效果较好．胚胎越处于较晚的发育阶段,越有较强的抗冻能力,同时也有较高的发育率．发育正常的胚胎移植后,受体均能分娩出正常的小鼠后代．     

小鼠胚胎低温生物学特性初探

NIH雌鼠腹腔注射5IU（83．35mol／s）的PMSG和5IU（83．35mol／s）HCG超排,一定发育时期的胚胎通过冲洗输卵管收集,在冷冻保护剂中的胚胎被吸入冷冻管后投入液氮中,以后用水浴解冻。用不同的冷冻保护剂冷冻保存胚胎后,体外培养能发育到囊胚的胚胎为具有功能活力的正常胚胎。平均发育率（X）和标准差（SD）根据表1－2中的基本数据所得。“A”代表冷冻管中的胚胎回收率,“B”代表回收的胚胎中发育到囊胚内的百分率。各组间的差异显著性通过t测验来评价。5种配方的保护剂CPI、Cpp、CP4、CPS和CPS用于冷冻保存多细胞期胚胎。3…     

大叶相思体细胞胚胎发生的初步研究

以种子萌发的无菌苗下胚轴为外植体，在Ｂ５＋２，４－Ｄ（１０－４ｍｏｌ／Ｌ）＋ＢＡ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ）＋ＣＨ０．５ｇ／Ｌ的固体培养基上培养４周，获得了胚性愈伤组织．该愈伤组织经Ｂ５＋２．４－Ｄ（１０－４ｍｏｌ／Ｌ）的液体培养基７ｄ的诱导在Ｂ５＋Ｌ－谷氨酰胺（２００ｍｇ／Ｌ）＋ＣＨ（０．５ｇ／Ｌ）的液体培养基上培养１４ｄ产生了球形胚．球形胚具有明显的两极，但只是根端发育，苗端并没有发育     

葡萄糖-BrO3--Mn2+-H2SO4-丙酮体系的振荡反应

以葡萄糖为有机底物，与－ＢｒＯ３－－Ｍｎ２＋－Ｈ２ＳＯ４－丙酮组成振荡反应体系，在恒温条件下进行振荡反应。结果表明：反应有诱导期，体系电导（Ｌ）不随时间（ｔ）变化；振荡周期，Ｌ随ｔ发生周期变化，溶液颜色在粉红色与无色之间交替变化，有典型的振荡波型。诱导期及振荡周期反应的表观活化能分别为８４．２７５ｋＪ／ｍｏｌ和９８．１５３ｋＪ／ｍｏｌ。体系振荡反应物浓度范围［葡萄糖］０．０１～０．０２ｍｏｌ／Ｌ，［ＢｒＯ３－］０．０３～０．０４５ｍｏｌ／Ｌ，［Ｍｎ２＋］０．０６～０．０８ｍｏｌ／Ｌ，［丙酮］０．２７～０．３０ｍｏｌ／Ｌ，［Ｈ２ＳＯ４］０．８～１．２ｍｏｌ／Ｌ。振荡反应有Ｂｒ２产生，Ｂｒ２准一级消耗速率常数ｋＢｒ２＝１．６×１０－５Ｓ－。对温度、反应物浓度、丙酮、Ｍｎ２＋、Ｃｌ－、底物对振荡反应的影响作了探讨。     

视黄酸对BEL—7402细胞酶活性及基因表达的影响

人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞分别以５μｍｏｌ／Ｌ、２０μｍｏｌ／Ｌ和５０μｍｏｌ／Ｌ的视黄酸（ＲＡ）处理后,细胞生长明显受抑,平均细胞群体倍增时间延长,并呈ＲＡ浓度及处理时间依赖性关系．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理的细胞中,ｒ－谷氨酰转肽酶（ｒ－ＧＴ）活性自给药后第２天即持续下降,至第６天降至４４．５％,而酪氨酸－α－酮戊二酸转氨酶（ＴＡＴ）活性则持续增高,至第６天较对照组高近１倍．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理５ｄ后,ＲＮＡ斑点杂交分析表明ｐ５３基因转录加强,而Ｎ－ｒａｓ基因表达下降,提示该两基因的表达变化可能在ＢＥＬ－７４０２细胞的生长抑制及逆转过程中起重要作用,有关机制尚待深入研究．     

姜黄素诱导人胃腺癌MGC80-3细胞凋亡研究

以５、１０和２０μｍｏｌ／Ｌ姜黄素处理ＭＧＣ８０－３７２ｈ,细胞存活率随药物浓度及处理时间依赖性下降,并呈现典型的凋亡细胞形态,以０、１０、２０及３０μｍｏｌ／Ｌ姜黄素处理细胞２４ｈ后,２０μｍｏｌ／Ｌ,以上的处理组ＤＮＡ琼脂糖电泳显示均有典型的凋亡梯形条带,同样条件处理后分别对断裂及未断裂ＤＮＡ作定量测定,计算细胞凋亡率分别为７．３％,３９．２％,５０．５％和６４．３％,表明姜黄素具有诱导ＭＧＣ     

成纤维细胞和ES细胞在小鼠和兔去核卵母细胞内发育

以昆明白小鼠成纤维细胞和胚胎干（ES）细胞作为供核细胞，以昆明白小鼠和日本大耳白兔的MⅡ期去核卵母细胞作为受体，采用核移植方法，构楚了克隆胚胎．在同种克隆中，以ES细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率明显低于以成纤维细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（24．4％相对于56．9％，P〈0．05），1．8％的ES细胞克隆胚胎发育到囊胚阶段，而成纤维细胞克隆胚胎没能发育到囊胚阶段；在异种克隆中，以ES细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（89．6％）和囊胚发育率（18．8％）明显高于以成纤维细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（54．2％）和囊胚发育率（4．2％）．     

产生乳腺定位表达人CD14的转基因小鼠研究

将来自ＰＣＲ法合成的绵羊β－乳球蛋白基因（ＢＬＧ）５’端８９８ｂｐ上游区和人单核细胞表面分化抗原基因（ｈＣＤ１４）成熟肽１２４５ｂｐ片段构建的ＢＬＧ－ｈＣＤ１４融合基因纯化后,注入小鼠受精卵原核。实验共注射受精卵１１４９枚,经体外培养发育到２－细胞期的胚胎计９６８枚,发育率为８４．２％。从发育的胚胎中选择６３４枚移植到４６只假孕受体。其中１４只妊娠产仔,妊娠率３０．４％。妊娠受体共移植胚移２０７枚     

川芎嗪对刺激─分泌偶联模型功能活动的抑制作用

用胶原酶消化分离小牛肾上腺髓质嗜铬细胞,１０－４ｍｏｌ／Ｌ乙酰胆碱（Ａｃｈ）促进细胞儿茶酚胺的分泌,其作用具有Ｃａ２＋依赖性,回归方程ｒ＝－３．２９０＋５．２７５ｘ,相关系数Ｒ＝０．９９１０＞＞α０．０１＝０．７９８０．高Ｋ＋（６５ｍｍｏｌ／Ｌ）使膜去极化,也促进细胞儿茶酚胺的分泌,在一定范围内与Ｃａ２＋浓度呈正相关,回归方程ｙ＝１．３７６＋５．３３７ｘ,相关系数Ｒ＝０．９８５６＞＞α０．０１＝０．７９８１．磷酸川芎嗪（ＴＭＰ）浓度为１０－４～１０－７ｍｏｌ／Ｌ时,能抑制Ａｃｈ促进的分泌作用,１０－３～１０－７ｍｏｌ／Ｌ时能抑制高Ｋ＋促进的分泌作用．     

羊心蒲氏纤维两个水平的早后去极化及其离子机制

用双电极电压箝制技术研究了羊心蒲氏纤维早后去极化（Ｅａｒｌｙ ａｆｔｅｒｄｅｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ,ＥＡＤ）的发生及其离子机制。在低钾生理溶液（２．５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｋ＾＋）灌流下,于自发活动基础上可诱发出２个膜电位水平（－２５与－５５ｍＶ的ＥＡＤ。低电位水平的发放可被硝苯吡啶（２．０μｍｏｌ／Ｌ）消除,而高电位的发放可由利多卡因（１０μｍｏｌ／Ｌ）或低温（３０℃）所抑制。在正常钾浓度（５．０ｍｍ