以胚胎干细胞为核供体能促进异种重构胚的体外发育

体细胞在异种成熟的去核卵母细胞中能够去分化和重编程,并能发育到囊胚,甚至能全程发育正常出生。为了评价胚胎干细胞作为供核细胞在异种动物克隆中的意义,以小鼠胚胎干细胞（ES）为核供体,兔成熟的去核卵母细胞为受体构建异种重构胚,分析其在体外的发育能力,并以小鼠胚胎成纤维细胞和成年小鼠外耳皮肤的成纤维细胞为对照。通过核移植的方法分别把3种细胞移入成熟的兔去核卵母细胞透明带下,经电融合和激活后,在体外培养,胚胎干细胞作为供核细胞所构建的异种重构胚在体外发育到囊胚的比例为16.1％,明显高于用成年小鼠外耳皮肤成纤维细胞（0％～3.1％,P<0.05）和小鼠胚胎成纤维细胞（2.1％～3.7％,P<0.05）所构建的异种重构胚的体外囊胚发育率.重构囊胚细胞经染色体分析,证实其染色体来源于小鼠胚胎干细胞。以上结果显示,用胚胎干细胞作为供核细胞,比体细胞作为供核细胞所构建的异种重构胚更容易进行重编程,并且胚胎干细胞指导异种克隆胚胎正常发育的能力强于体细胞。     

成纤维细胞和ES细胞在小鼠和兔去核卵母细胞内发育

以昆明白小鼠成纤维细胞和胚胎干（ES）细胞作为供核细胞，以昆明白小鼠和日本大耳白兔的MⅡ期去核卵母细胞作为受体，采用核移植方法，构楚了克隆胚胎．在同种克隆中，以ES细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率明显低于以成纤维细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（24．4％相对于56．9％，P〈0．05），1．8％的ES细胞克隆胚胎发育到囊胚阶段，而成纤维细胞克隆胚胎没能发育到囊胚阶段；在异种克隆中，以ES细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（89．6％）和囊胚发育率（18．8％）明显高于以成纤维细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（54．2％）和囊胚发育率（4．2％）．     

非休眠期成年牛耳成纤维细胞用于核移植

哺乳动物的自然生殖方式是有性生殖 ,需要精子和卵子进行受精作用 .核移植技术为哺乳动物无性生殖提供手段 .以前 ,人们多采用未分化或分化不完全的胚胎细胞作为供核细胞 .自Wilmut等人应用成年绵羊体细胞作为供核细胞进行核移植获得全程发育以来 ,体细胞核移植已在多种动物上获得成功 .Wilmut等人认为 ,应用G0 期成年体细胞作为供核细胞是核移植成功的关键 (“G0 期假定”) .为了验证“G0 期假定” ,我们用非休眠期成年牛耳成纤维细胞作为供体 ,以去核牛卵母细胞 (体外成熟 )作为受体进行核移植 .实验中核移植后电融合率达5 1 .6 % ,融合后重组卵卵裂率达 5 4.5 % ,并且有 9.1 %发育到 32细胞期 .这些结果表明 :处于非休眠期的成年牛供核体细胞移植到去核卵母细胞至少能进行早期发育     

连续核移植对异种克隆大熊猫胚胎发育的影响

异种体细胞核移植为拯求濒危动物提供了一条新的途径，已有的异种核移植报道证明，经休眠处理的体细胞核在异种胞质中能完成早期发育，用处于活跃分裂的大勇猛体细胞作为供核细胞移入去核的兔卵母细胞中，经电融合（融合率为71.6%）及电活化后，体外培养获得了4.2%的囊发育率，为了改善重构胚的发育率，采用连续核移植的方法，即用处于活跃分裂的来源于大熊猫－兔异种重松胚的卵裂球作为供核细胞移入去核兔卵母细胞透明带下，共进行3次连续核移植，核移植融合率分别为79.5%，84.1%和78.0%，与体细胞核移植组无显著差异；经电活化后，体外培养的异种重构胚胎获得了显著高于体细胞核移植组的胚胎发育率，囊胚发育率分别为19.4%,13.5%和10.3%（P＜0.05）。这些结果表明，未经休眠的体细胞核也能支持异种重构胚的早期发育，连续核移植可以提高异种克隆大熊猫重构胚的发育率。     

在化学启蒙教学中培养学生的学习兴趣

学生的学习兴趣是构成学习动机最有实际意义的心理成分.它是推动学生去探究知识并带有热烈情绪的一种意向和动力,同时也是促进和发展学生思维的一种催化剂.因此,在教学中,教师应设法创造一个能使学生产生浓厚兴趣和爱好的条件,借以保持他们最佳的注意力和激发他们的学习动机,以使获得良好的学习效果.初三是化学学科的起始阶段,它对学生智能的发展和对学生学科素质的培养都起着十分重要的作用.这段教学中,培养学生的学习兴趣显得尤为重要.在此,就自己数年的教学实践谈一些体会: