非休眠期成年牛耳成纤维细胞用于核移植

哺乳动物的自然生殖方式是有性生殖 ,需要精子和卵子进行受精作用 .核移植技术为哺乳动物无性生殖提供手段 .以前 ,人们多采用未分化或分化不完全的胚胎细胞作为供核细胞 .自Wilmut等人应用成年绵羊体细胞作为供核细胞进行核移植获得全程发育以来 ,体细胞核移植已在多种动物上获得成功 .Wilmut等人认为 ,应用G0 期成年体细胞作为供核细胞是核移植成功的关键 (“G0 期假定”) .为了验证“G0 期假定” ,我们用非休眠期成年牛耳成纤维细胞作为供体 ,以去核牛卵母细胞 (体外成熟 )作为受体进行核移植 .实验中核移植后电融合率达5 1 .6 % ,融合后重组卵卵裂率达 5 4.5 % ,并且有 9.1 %发育到 32细胞期 .这些结果表明 :处于非休眠期的成年牛供核体细胞移植到去核卵母细胞至少能进行早期发育     

精子抗原MSH27参与精卵膜融合过程

利用单克隆抗体技术，从抗顶体反应后精子头的单克隆抗体库中，筛选出一株单抗ＭＳＨ２７，在顶体反应后，抗原定位于精子与卵子质膜融合的起始位置－－精子的赤道段和顶体后区；此抗体能够阻断精卵膜融合，但不影响精子与卵质膜的结合，这种阻断作用呈现抗体剂量依赖性，用含６００μｇ／ｍＬＩｇＭ型单抗ＭＳＨ２７处理精子，受精指数下降９０％，免疫亲合层析分离纯化的抗原（分子量３９ｋｕ）作用于卵子质膜，也可使精卵膜融合指     

微卫星DNA分析证明异种克隆大熊猫重构胚的核来自大熊猫供体

建立了一种从早期囊胚中提取ＤＮＡ以进行核内和核外ＤＮＡ分析的方法，用这种方法从异种克隆大熊猫重构重构胚中提取总ＤＮＡ，以大熊猫特异的微卫星ＤＮＡ引物成功地扩增出了微卫星座位ｇ＾０１０，ＰＣＲ产物双向测序表明，２个重构胚与大熊猫供体对照序列完全一致。结果证明该异种大熊猫重构胚的核的确来自大熊猫供体细胞核。     

带下(卵周隙)受精精卵识别机理的研究

若干年来,世界范围内推行的3种显微注射的体外受精技术,称之为:(1)透明带开孔技术(Partial zona dissetion,PZD),(2)卵透明带下注射技术(Subzonal insemination,SUZI),(3)卵质内注射技术(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)。使用这3种技术的共同目的,旨在弥补试管婴儿常规体外受精方法失败的人或体外受精成功率低的人,而采用的显微操作技术,在国际临床应用上已见成效,目前SUZI和ICSI的成功率比PZD为高。至于机理研究,目前大多数侧重在生理效果的分析和成功率上,或者对精子顶体反应的重要性的探讨,但对其精卵识别机制研究目前尚未见报道。鉴于这种情况,我们试图采用SUZI揭示精卵在透明带下(卵周隙中)的相互关系。