不同培养基对小麦花药出愈率的影响

在小麦花药培养过程中,观察分析C17、N6、K、MS 4种基本培养基对小麦花药愈伤组织的诱导和分化的影响,结果表明出愈率在4种培养基中表现为K＞C17 ＞N6 ＞MS.     

“T”型杂种小麦花药培养研究

本项研究表明,C_(17)培养基诱导小麦三系材料花药出愈,均好于其它五种培养基的诱导效果;而杂种F_1代材料花药出愈均极显著地高于不育系、保持系和恢复系材料花药的出愈频率。杂种F_1代花药在培养过程中产生愈伤组织同它们的母本不育系和父本恢复系花药出愈频率没有相关关系,杂种F_1代材料花药出愈频率同检查它们在田间套袋自交结实表现有逆相关的趋势;杂种F_1代材料花药的出愈同测得材料起身至拔节期过氧化物同工酶谱带变化也存在相关的趋势。     

番茄花药培养愈伤组织诱导及不定芽形成的研究

为了建立番茄花药愈伤组织诱导及分化的实验体系,通过花药离体培养并设计不同的试验处理,以6个番茄品种的花药为试材,研究了植物生长调节剂、蔗糖浓度、硝酸银浓度、基因型和培养基对番茄花药培养愈伤组织诱导率及不定芽形成的影响.结果表明:培养基中添加1.0mg/L的2,4-D和0.5mg/L的KT,里格尔87-5和石番9号愈伤组织诱导率都达最高;培养基中加入30g/L的蔗糖,里格尔87-5的愈伤组织诱导率达20.24%;培养基中加入10μmol/L的硝酸银,花药组织褐化率较对照降低了70.59%,当浓度超过50μmol/L,褐化率增高,出愈率略有降低;不同基因型愈伤组织发生率明显不同,相同培养条件下,里格尔87-5的诱导率高达21.43%,而粉B二号的诱导率仅有0.46%;培养基中加入175g/L的马铃薯汁、0.1%的活性炭,6个材料的愈伤组织平均诱导率较对照分别降低了35.14%、95.48%.番茄花药愈伤组织在MS+6-BA 2mg/L+ZT 0.5mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上可再分化成不定芽,不定芽诱导率达15.15%.     

激素质量浓度及不同培养方式对马铃薯愈伤组织的诱导

以马铃薯幼茎为供试材料,通过在液体和固体的MS培养基中分别添加植物激素NAA和6-BA,进行愈伤组织诱导.实验结果表明,无论激素是添加在液体培养基还是固体培养基中,愈伤组织诱导率都随着NAA质量浓度的增加先升高后降低,液体培养基中愈伤组织最佳诱导率是77.78%（NAA2.5 mg/L＋6-BA0.5mg/L）;固体培养基中愈伤组织最佳诱导率是100.00%（NAA3.5mg/L＋6-BA0.5mg/L）.并且,固体培养基中添加激素的诱导率普遍高于液体培养基中添加激素的诱导率,表明液体培养基中添加激素的方式不能提高马铃薯的愈伤组织诱导.6-BA对马铃薯愈伤组织的诱导影响没有NAA显著.本文还对马铃薯未分化愈伤组织及分化出不定根的愈伤组织进行扫描电镜观察.     

不同理化因子对黄花乌头花药愈伤组织诱导的影响

目的：通过不同理化因子对黄花乌头花药愈伤组织诱导研究，为国家一类新药关附甲素的工业化生产提供新的原料来源．方法：以黄花乌头花药为外植体，考察不同植物激素及其配比、不同种类的培养基、碳源、NH4^ 与NO3^-比例、天然添加物及低温处理对花药愈伤组织诱导的影响．结果：2，4—D 2mg/L，KT 0．2mg／L为最佳激素配比；MS培养基诱导愈伤组织效果最好;以蔗糖为碳源，ρ(NH4^ )/ρ(NO3^-)为4：1时有利于愈伤组织的诱导；分别以0．03mmol/L的组氨酸、赖氨酸、色氨酸、谷氨酰胺代替MS培养基中的甘氨酸有利于愈伤组织的诱导，而丝氨酸对其有抑制作用；水解酪蛋白能提高愈伤组织诱导率；低温(4—10℃)处理48—120h能促进愈伤组织生成．结论：植物细胞工程技术是解决黄花乌头原料匮乏问题的可行方法之一．     

石刁柏花药离体培养

诱导石刁柏花药产生愈伤组织的频率高低,同培养基中2.4—D浓度、花药低温预处理因素相关;诱导愈伤组织分化芽点获得胚性细胞后,转入N_6或MS培养基上,均可获得理想的增苗效果;石刁柏花粉试管苗在繁苗或生根培养基中根芽不能同步发生,生根需要专用培养基。     

珙桐花药诱导愈伤组织的初步研究

采用濒危植物珙桐花药为外植体,研究了花序外形与小孢子发育时期的关系以及低温预处理、激素种类与浓度、蔗糖浓度等对诱导花药愈伤组织的影响并初步探讨了其诱导分化的可能性.结果表明:低温预处理对愈伤组织的形成影响不显著,随着低温时间的延长,愈伤组织诱导率逐渐降低;高浓度的蔗糖不利于愈伤组织的形成;愈伤继代后褐化严重未产生分化.在本实验中,诱导珙桐花药愈伤组织的最佳条件为:选用长度为1.7～2.2 cm的花序,4℃预处理2d,培养基为MS+2,4-D 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA31 mg/L+5％蔗糖,最高诱导率为91.3％.     

华北大黄愈伤组织培养及土大黄苷含量研究

为有效保护和利用华北大黄野生资源,以野生华北大黄为材料,探讨了不同种类、不同质量浓度的植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及增殖效应,并采用高效液相色谱对愈伤组织及野生植株中土大黄苷含量进行了分析.结果表明:MS培养基中单独添加不同质量浓度的6-BA,不利于愈伤组织的增殖;培养基中单独添加不同质量浓度的NAA和2,4-D,对...     

冬春性小黑麦花药愈伤组织诱导的影响因素

以12个冬春性小黑麦杂交组合F1代为材料,分别接种到不同培养基上,研究了基因型和培养基以及激素和碳源对花药愈伤组织诱导的影响,并对冬春小黑麦在不同培养基上的诱导率做了比较。结果表明,基因型和培养基对冬性小黑麦愈伤组织的诱导率均有显著影响;而对部分春性小黑麦的影响差异不显著;激素和碳源的调整对愈伤组织的诱导有一定程度的影响,但差异不显著。冬春性小黑麦在不同培养基上的反应不同．冬性小黑麦在PⅡ培养基上的愈伤组织诱导率最高,而春性小黑麦的最适培养基因基因型的不同而不同。     

油茶花药离体培养影响因子研究

以攸县油茶花药为外植体,研究了不同花粉发育时期、低温预处理时间及添加物对愈伤组织诱导的影响,同时分析了不同激素种类和比例对愈伤组织继代增殖的影响。结果表明:花粉四分体时期为油茶花药愈伤组织诱导的最佳时期;花药的低温预处理时间应在10 d以内;培养基添加物以AgNO3效果最优,诱导率最高为8102 ％。继代增殖培养中6-BA与NAA配比有着较好的效果,其中最适增殖培养基配方为:MS+6-BA（200 mg／L)+NAA(005 mg／L)。     

胀果甘草愈伤组织生长和多糖合成的调控

为了研究培养基基本成分、碳源以及离子浓度对甘草愈伤组织生长和多糖合成的影响,以MS,6,7-V为基本培养基,改变碳源、PO43-及Ca2+浓度,分析胀果甘草愈伤组织生长及多糖产量.结果表明:MS培养基附加蔗糖最利于甘草愈伤组织生长,6,7-V培养基虽利于甘草多糖的合成但不利于愈伤组织生长从而影响多糖产量.当培养基中PO43-浓度为1.25mmol/L、Ca2+浓度为2.99mmol/L时,甘草愈伤组织生长量积累最高,同时对多糖的生物合成也最为有利.高浓度的PO43-和Ca2+有利于甘草多糖的合成,但不利于愈伤组织的生长.研究结果为利用生物工程手段进行甘草多糖的产业化生产提供参考数据.     

紫花苜蓿耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究不同激素对紫花苜蓿2号愈伤组织的诱导效果,筛选出最佳诱导愈伤组织培养基;以茎尖、茎段及叶片作为外植体,确定了叶片作为紫花苜蓿组织培养的最佳外植体;在1/4、1/3及2/3 3种不同海水培养基上分别诱导出紫花苜蓿耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株.     

向日葵耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究了不同激素对康地5号向日葵愈伤组织的诱导效果,筛选出了最佳诱导愈伤组织培养基;以子叶、下胚轴及真叶作为外植体。确定了子叶和下胚轴作为康地5号组织培养的最佳外植体;在含50、100、及150mmol／L NaCl不同盐浓度培养基上分别诱导出向日葵耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株．     

甜叶菊叶片离体培养及试管无性系的建立

研究了离体条件下甜叶菊（Stiuia rebaudiana Bertoni)叶片愈伤组织诱导和植株再生技术,离体培养以MS为基本培养基并附加300mg/L水解酪蛋白,离体叶片在BA 0．5mg/L和NAA 0．5mg/L的培养基上诱导形成愈伤组织,在BA 0．5mg/L和NAA0．05mg/L的培养基上可诱导愈伤组织分化不定芽,分化频率为100％,不定芽在White基本培养基并附 加NAA0．01mg/L的培养基上诱导生根,生根率可达100％,炼苗后移栽,成活率达95％以上。     

基因型及生长调节物质对玉米成熟胚培养的影响

对30个基因型的玉米成熟胚进行离体培养,研究不同基因型对培养的反应和培养基对成熟胚愈伤组织诱导和生长的影响.结果表明,成熟胚的愈伤可诱导能力较为普遍,但诱导频率因基因型的不同有很大差异,不同基因型所诱导出的愈伤质量也有所不同;MS、N6两种基本培养基对成熟胚出愈率的高低影响不大;不同的生长调节物质对成熟胚愈伤组织生长状况有明显的影响,脯氨酸的添加对愈伤组织质量有促进作用;细胞分裂素对愈伤组织的质量和长势均有一定的负面影响.     

影响宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的因素

对宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的影响因素进行分析,结果表明,宁夏枸杞根外植体的年龄及其生理状态能影响胚性愈伤组织的形成和体细胞胚发生;4℃低温处理两周能明显促进愈伤组织形成体细胞胚,同时也能增加愈伤组织内源多胺的含量;添加Ag+有利于愈伤组织的体细胞胚发生,适当增加Ca2+浓度也有利于愈伤组织的生长及其体细胞胚发生;Eu3+的添加能明显促进愈伤组织生长,而低浓度的Ce2+、Eu3+作用有利于愈伤组织体细胞胚发生.     

日本结缕草茎节和愈伤组织再生体系的优化

分别以日本结缕草的成熟胚和茎节为外植体,建立并优化了2套组培再生体系.实验结果表明:利用成熟胚诱导愈伤组织,适宜诱导培养基为MS基本培养基添加2 mg/L 2,4-D配合0.2 mg/L 6-BA,诱导率为42.5%;继代培养可改善愈伤组织状态,增加胚性,其中增加培养基渗透压,并适当添加ABA(0.2 mg/L),可明显提高胚性愈伤组织比率;继代2次后的愈伤组织在3种细胞分裂素6-BA,KT,ZT适当配比的分化培养基上,分化率可达到50%~75%.在以茎节为外植体的组培体系中消毒处理和预培养是比较关键的环节;预培养时MS培养基效果优于1/2 MS,在MS基本培养基中添加0.25 mg/L KT,1.0 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA为比较适合的芽诱导培养基,诱导率可达37.9%.同时,比较了两套再生体系的优缺点,为日后日本结缕草的遗传转化奠定基础.     

中华芦荟愈伤组织的诱导

以中华芦荟幼苗茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同浓度的生长素、细胞分裂素或两者组合,以及添加Vc或活性炭(共350种组合),研究中华芦荟愈伤组织的诱导及生长情况.结果表明, 在单独使用不同种类的生长素时,不同浓度的生长素诱导的愈伤组织频率差异明显,且愈伤组织的生长状态也各异;单独使用细胞分裂素时,愈伤组织的诱导率极低.当组合不同浓度和种类的生长素和细胞分裂素时,愈伤组织诱导频率差异显著;同时发现在减轻愈伤组织褐化的效果上,Vc较活性炭好.通过对愈伤组织诱导结果的比较,MS 2.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 10 mg/L Vc为中华芦荟愈伤组织诱导的较好培养基,愈伤组织诱导率达到91.4%,且愈伤组织生长较旺盛.     

柳杉种子合子胚的愈伤组织诱导及植株再生

为探索柳杉种子合子胚的愈伤组织诱导技术,选取柳杉4个家系,采集其尚未完全成熟的种子进行愈伤组织的诱导,并经器官发生再生途径得到再生植株。利用6-BA、2,4-D等激素种类及其浓度的正交设计,研究各因素及其交互作用对柳杉种子合子胚愈伤组织诱导的影响。结果发现:柳杉4个家系的愈伤组织诱导量在8月中旬采种时呈明显上升,至8月底时各家系的子叶胚愈伤诱导率达到最高,其中57号家系愈伤诱导率最高,达92%。柳杉4个家系,在不同激素组合中愈伤诱导率存在着一定的差异。其中57号家系子叶胚在DCR+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L培养时,愈伤组织诱导率达到最高,且诱导出来的愈伤组织状态为白色、干燥、无针状突起,结构紧密。愈伤组织在DCR培养基上成功获得再生植株。