珙桐花药诱导愈伤组织的初步研究

采用濒危植物珙桐花药为外植体,研究了花序外形与小孢子发育时期的关系以及低温预处理、激素种类与浓度、蔗糖浓度等对诱导花药愈伤组织的影响并初步探讨了其诱导分化的可能性.结果表明:低温预处理对愈伤组织的形成影响不显著,随着低温时间的延长,愈伤组织诱导率逐渐降低;高浓度的蔗糖不利于愈伤组织的形成;愈伤继代后褐化严重未产生分化.在本实验中,诱导珙桐花药愈伤组织的最佳条件为:选用长度为1.7～2.2 cm的花序,4℃预处理2d,培养基为MS+2,4-D 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA31 mg/L+5％蔗糖,最高诱导率为91.3％.     

加工番茄的花药培养技术

为确定适宜于加工番茄花药愈伤组织诱导的最佳取材时期和激素组合,以2个加工番茄品种的花药为材料,以醋酸洋红液为染液,压碎法制片,用体视显微镜观察小孢子的发育时期;以MSB培养基为基本培养基,附加不同浓度的植物激素2,4-D、NAA、KT、6-BA、ZT、TDZ进行花药培养,研究不同植物激素组合对加工番茄花药愈伤组织诱导的影响。结果表明:番茄花蕾纵径为5.25-6.19 mm,横径为2.09-3.20 mm,绝大多数的小孢子发育时期处于单核靠边期;不同基因型加工番茄愈伤组织的诱导率不同,品种CK8的诱导率为18.63%,品种CK3的诱导率为14.19%;0.5 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L TDZ是最适宜愈伤组织诱导的激素组合,诱导率为56.52%,其次是0.1 mg/L2,4-D+2.0 mg/L 6-BA的组合,诱导率为56.36%;番茄花药愈伤组织在MS+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/LKT培养基上可形成胚性愈伤组织;4℃低温预处理花蕾的适宜时间为2-5 d。     

沙枣叶片愈伤组织诱导研究初报

以沙枣叶片作为外植体,以MS为基本培养基,用两种不同浓度激素的组合,筛选5组培养基进行继代愈伤组织及增殖诱导.结果表明,沙枣叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 1 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5),诱导率达86.67%;以MS 6-BA 0.5 mg/L NAA0.5 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5)作为愈伤组织增殖培养较理想.     

裂叶秋海棠的离体快速繁殖

利用野生裂叶秋海棠叶片及叶柄培养，通过两种方式获得大量再生植株。(1)直接从外植体表面诱导出不定芽，最佳诱导培养基为MS 6-BA 3mg／L，不定芽在培养基MS NAA0．5mg／L 6-BA0．5mg／L增殖成丛生芽．(2)先诱导出愈伤组织，再由愈伤组织分化出大量不定芽．最佳愈伤组织诱导培养基为MS NAA0．5mg／L 2，4-D0．5mg／L 6-BA0．5mg／L,愈伤组织不定芽分化培养基为MS 6-BA 1mg／L,试管苗在含1／5MS无机盐的培养基上生根，之后移栽成活率达85％。     

花叶如意叶愈伤组织的诱导及植株再生

研究花叶如意叶愈伤组织的诱导及分化条件．实验结果表明：诱导愈伤组织的培养基为MS 2，4-D1．0mg／L 6-BA2．0mg／L．在此培养基上，叶片比叶柄更易得到愈伤组织．叶愈伤组织的诱导时间过长易褐化，从而影响分化，其最适时间为20d．诱导愈伤组织分化的培养基为MS NAA0．2mg／L 6-BA2．0mg／L．根分化的培养基为1／2MS NAA0．5mg／L．     

苦豆子愈伤组织的诱导与继代培养的去褐化研究

利用苦豆子的子叶进行愈伤组织的诱导与继代,筛选出诱导愈伤组织及继代时的最佳培养基．实验发现各种培养基均能诱导出愈伤组织,0．5—1．0mg／L的2,4-D和0．5—2．0mg／L的细胞分裂素6-BA或与Zt共同添加,诱导的愈伤组织状态较好,且当NAA（浓度为0．5mg／L）存在时可改善愈伤组织的状态;浓度为2．0mg／L的Kt和1．0mg／L以下的2,4-D、NAA分别或同时使用时同样可得状态较好的愈伤组织．低浓度的2,4-D、6-BA混合使用或添加1．0mg／L以下的NAA是愈伤组织继代时较好的激素组合,同时观察到0．5mg／L2,4-D和0．5mg／L Kt以及0．5mg／L2,4-D、0．2m-g／LNAA和0．2mg／LTDZ两种组合也能较好的继代愈伤组织．愈伤组织的去褐化除调节激素的浓度与配比外,还采取了其他的去褐化措施,发现添加0．1％活性炭的条件下快速继代（2d继代一次）以及调整基本培养基是较好的去褐化措施．     

密蒙花(Buddlija officinalis)基因转化受体系统的建立

以密蒙花(Buddlija officinalis Maxim)芽、叶、茎段为外植体，在B5，MS，White培养基上获得愈伤组织。结果表明：芽、幼叶脱分化能力差异不大；不同时期的叶片差异较大，以幼叶诱导为佳；作者筛选出的愈伤组织最佳培养基为B5 6-BA0．5mg／L 2，4-D0．5mg／L。在继代培养阶段，B5比MS和White更适合细胞的快速生长和繁殖；并且以叶片的愈伤组织生长较快，芽、茎段次之，最佳继代培养基为B5 6-BA0．5mg／L NAA0．5mg／L，继代的愈伤组织可在B5 6．BAlmg／L NAA0．1mg／L GA0．1mg／L培养基中分化出幼苗，在生根培养基1／2MS NAA0．2mg／L或1／2MS NAA0．6mg／L中分化出根且获得再生植株，将长4～6cm的再生小苗练苗3d后移植，幼苗成活率达100％，并于当年开花。     

益母草愈伤组织分化及无性系建立的研究

以益母草根颈为材料,进行了愈伤组织诱导、增殖与分化,分化芽生根,试管苗移栽、定植的研究.结果表明：MS＋6-BA 0.5mg·L-1＋NAA 0.6mg·L-1＋2,4-D1.2mg·L-1是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS＋6-BA0.5mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1＋2,4-D 1.5mg·L-1是愈伤组织继代增殖培养的理想培养基;1/2MS＋6-BA 0.2mg·L-1＋NAA 0.1mg·L-1是愈伤组织分化培养和分化芽继代分化增殖培养的理想培养基;N6＋IAA0.2mg·L-1培养基是益母草分化芽生根培养的理想培养基.移栽成活率为94.4%;定植成活率为99.1%;定植成活的试管苗保持野生益母草的所有植物学性状.     

杜鹃红山茶花药愈伤组织的诱导

杜鹃红山茶花蕾经4℃低温预处理5～15 d后,用不同消毒剂进行表面消毒.以花药为外植体,MS为基本培养基,研究低温预处理下,花蕾表面消毒方法以及2,4-D与KT、NAA浓度组合对杜鹃红山茶花药愈伤组织诱导的影响.结果表明:4℃低温预处理花蕾的最佳时间为5 d,花蕾的最佳消毒方法为75%乙醇浸洗30 s后,用0.1%升汞消毒10 min;诱导花药愈伤组织的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT和MS+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L NAA,于23～25℃暗培养30 d,愈伤组织诱导率分别达34.44%和35.33%.     

蒲苇愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以蒲苇成熟种子为外植体,MS为基本培养基并附加不同激素组合,筛选出诱导蒲苇愈伤组织产生和分化的最佳培养基,成功建立蒲苇的再生体系．试验结果表明：蒲苇种子最佳灭菌方式是将种子灭菌前用无菌水浸泡24h左右,然后用75％酒精消毒20s,再用0．1％（W／V）氯化汞消毒灭菌10min．愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D3．0mg/L＋6-BA0．1mg／L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS＋6-BA 2．0mg／L＋NAA 0．1mg/L分化继代的最佳培养基为MS＋6-BA 1．5mg／L＋NAA 0．2mg/L;生根最佳培养基配方为1／2MS＋NAA 0．8mg/L＋6-BA 0．2mg／L＋（0．02％）AC．     

花粉愈伤组织群体偏态分离的SSR标记鉴定

利用水稻花粉育性基因S-b的SSR分子标记RMl3，鉴定籼粳稻杂种Fl的花粉愈伤组织的基因型，以确定每块愈伤组织在S-b座位的遗传来源，结果表明该座位的等位基因S^i或S^j在愈伤组织群体中分离比不符合1：1的规律，出现偏态分离现象．选择不同培养基及增加预冷处理不会改变偏态分离的方向，但预冷处理会增大偏分离的趋势．为进一步解释DH群体构建中的某些基因的偏态分离现象提供了依据，同时讨论了将SSR标记引入组织培养体系的可行性．     

磁场对玉米花药培养诱导率的影响

磁场对提高玉米花药培养诱导率具有明显作用。不同强度差异显著,以0.12—0.1308T效果最佳。磁场预处理能延长培养花粉的寿命,增加花粉均等分裂的频率和2—细胞雄配子体中营养细胞分裂。对小孢子胚胎发生也有明显影响。     

美洲黑杨小孢子母细胞减数分裂进程与花芽及 花药外观形态相关性研究

以美洲黑杨的雄花枝为材料,采用卡宝品红压片法,观察花粉母细胞减数分裂进程与花芽及花药外观形态的关系, 为美洲黑杨2n配子的诱导奠定基础。结果表明:美洲黑杨雄花花序开始露出芽鳞之前,小孢子母细胞减数分裂已经结束; 花芽顶端及侧面的芽鳞开始松动时,在同一花序中可以观察到从小孢子母细胞到花粉粒的所有减数分裂阶段,此时是诱导2n配子的最佳时期; 美洲黑杨花药长度与减数分裂阶段密切相关,长约0.5 mm的花药处于减数分裂的小孢子母细胞阶段, 长约1.0 mm的花药处于减数分裂的细线期、粗线期、中期Ⅰ、末期Ⅰ及二分体阶段,长约1.5 mm的花药处于减数分裂的四分体时期,长约2.0 mm的花药已处于花粉粒阶段; 同一花枝上的不同花芽及同一花序中不同小花的发育不同步,但同一小花中的不同花药发育基本一致。美洲黑杨减数分裂过程中染色体行为正常,是分子细胞遗传学研究的良好实验材料。     

不同培养基对小麦花药出愈率的影响

在小麦花药培养过程中,观察分析C17、N6、K、MS 4种基本培养基对小麦花药愈伤组织的诱导和分化的影响,结果表明出愈率在4种培养基中表现为K＞C17 ＞N6 ＞MS.     

冬小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化

以4个冬小麦品种的成熟胚为外植体进行离体培养，研究了品种、不同激素组合以及不同预处理等因素对愈伤组织形成及分化的影响．结果表明，代表不同基因型的品种是影响离体培养的重要因素，成熟胚愈伤组织的诱导使用4mg／L的2，4-D浓度较为有利，在MS KT1mg／L 6-BA2mg／L培养基上分化率较高．低温及CaCl2预处理对成熟胚愈伤组织的影响与小麦品种有关．     

影响宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的因素

对宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的影响因素进行分析,结果表明,宁夏枸杞根外植体的年龄及其生理状态能影响胚性愈伤组织的形成和体细胞胚发生;4℃低温处理两周能明显促进愈伤组织形成体细胞胚,同时也能增加愈伤组织内源多胺的含量;添加Ag+有利于愈伤组织的体细胞胚发生,适当增加Ca2+浓度也有利于愈伤组织的生长及其体细胞胚发生;Eu3+的添加能明显促进愈伤组织生长,而低浓度的Ce2+、Eu3+作用有利于愈伤组织体细胞胚发生.     

甜樱桃巨红13-38花药发育时期鉴定及愈伤诱导的初步研究

以甜樱桃巨红13-38为试材,对其花药发育时期和不同时期愈伤的诱导进行了研究.结果表明:小孢子母细胞越冬前已经形成,一直持续到次年的2~3月份,3月中旬开始减数分裂,3月末形成四分体,4月初形成单核期小孢子,4月中旬形成成熟花粉;花药单核期时诱导的愈伤状态最好为绿色,较致密,愈伤诱导率是各时期中最高的,为4.828%.     

Germination of embryo in soybean anther culture

A large number of experiments about induction of callus, embryo and germination of regeneration plants were done in soybean anther culture. Screening for genotypes, low_temperature pretreatment for floral buds, constituent of hormone in medium and effects of different temperatures on induction rate of callus and embryo were studied. It was found that the TDZ played an important role in embryo induction and germination. 28 genotypes had reaction competent to the anther culture in all 110 genotypes. Induction rate of callus was 26%-68.1%. Plant differentiation rate was 0.5%-2.0%.     

影响黄瓜愈伤组织诱导的因素研究

以新津11号、绿宝和金宝218三个品种黄瓜的无菌苗子叶和下胚轴为外植体,通过组织培养技术,利用外源激素IAA和6-BA诱导愈伤组织,研究基因型、外植体和激素配比对愈伤组织诱导的影响。结果表明,不同基因型的黄瓜在愈伤组织形成的时间以及激素的最佳浓度选择上呈现出明显的差异,并且不同的外植体表现了不同的最佳激素水平以及愈伤组织形态,IAA最佳激素水平范围为0.2~0.3 mg/L,6-BA最佳激素水平范围为1.2~3 mg/L。     

冬春性小黑麦花药愈伤组织诱导的影响因素

以12个冬春性小黑麦杂交组合F1代为材料,分别接种到不同培养基上,研究了基因型和培养基以及激素和碳源对花药愈伤组织诱导的影响,并对冬春小黑麦在不同培养基上的诱导率做了比较。结果表明,基因型和培养基对冬性小黑麦愈伤组织的诱导率均有显著影响;而对部分春性小黑麦的影响差异不显著;激素和碳源的调整对愈伤组织的诱导有一定程度的影响,但差异不显著。冬春性小黑麦在不同培养基上的反应不同．冬性小黑麦在PⅡ培养基上的愈伤组织诱导率最高,而春性小黑麦的最适培养基因基因型的不同而不同。