陕西关中地区小麦幼胚脱分化特性研究

在MS培养基上附加不同激素,对陕西省关中地区推广品种及育成品系共12个材料幼胚脱分化特性进行研究.结果表明,不同品种(系)愈伤组织形成期和愈伤组织诱导率明显不同,愈伤组织诱导率平均值在65.9% ～ 100.0%之间;胚性愈伤组织诱导率和胚芽率在基因型间存在显著差异,多数材料在2种培养基间的波动趋势具有一致性;培养基中附加的6-BA在促进胚性愈伤组织产生的同时却加重了胚发芽程度.12种供试材料的脱分化性状结果说明,小偃22、陕麦150和小偃54综合性能上表现出愈伤组织诱导率高、胚性化能力强及生长旺盛等特点,可用作基因转化研究的遗传种质资源.     

小麦耐盐变异体的筛选——Ⅰ.小麦体细胞胚性无性系的建立

利用春小麦11个品种,通过幼穗和幼胚离体培养,研究了基因型,外植体和培养基成分对愈伤组织诱导率和分化率的影响.结果表明,不同基因型的愈伤组织诱导率和分化率差异明显.幼穗长度以10～14mm 时接种为宜,幼胚以开花后11～14d 接种效果最好.诱导培养基的效果以 MB>MS>N_6>LS,2,4-D 以2mg/L 较为合适,不宜加6BA 和 NAA,但加适量甘氨酸和谷氨酰胺有利于愈伤组织的诱导.分化培养基中加少量6BA 和 NAA 是必要的,而且 ZT 的作用优于 KT.通过以上研究,从中筛选出了3个能长期保持较高再生植株潜力的体细胞胚性无性系.     

冬小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化

以4个冬小麦品种的成熟胚为外植体进行离体培养，研究了品种、不同激素组合以及不同预处理等因素对愈伤组织形成及分化的影响．结果表明，代表不同基因型的品种是影响离体培养的重要因素，成熟胚愈伤组织的诱导使用4mg／L的2，4-D浓度较为有利，在MS KT1mg／L 6-BA2mg／L培养基上分化率较高．低温及CaCl2预处理对成熟胚愈伤组织的影响与小麦品种有关．     

玉米自交系幼胚离体培养及植株再生研究

采用4种不同类型的玉米自交系为供试材料，用MS和AG培养基进行诱导培养。获得胚性愈伤组织，结果表明，基因型和外植体的发育时期对愈伤组织的诱导率有很大影响；不同的2，4-D浓度及山梨醇浓度影响愈伤组织的保持和质量改善；6-BA浓度为2mg／L时，有利于再分化培养，在再分化培养中，获得了再生植株。     

曲阜香稻胚性愈伤组织培养及悬浮细胞系的建立

水稻 (OryzasativaL .)曲阜香系 10 3成熟胚在MS1培养基上诱导培养 ,初始愈伤组织为深黄色、瘤状 ,非松脆类型 .当在MS2 培养基上继代培养 ,经 3～ 4月初始愈伤组织转变为浅黄色、小颗粒状 ,松脆型胚性愈伤组织 .将胚性愈伤组织置于液体培养基中悬浮培养 ,经 4月多可得分散性好、生长快的胚性悬浮细胞系 .     

红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】① 在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基; ② 添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%); ③ DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L + 6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳; ④ 在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR +蔗糖35 g/L + NAA 2.0 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。     

玉米胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

采用生产上推广的14个基因型的玉米为材料,由幼胚诱导出胚性愈伤组织并再生植株。其中原齐722×5003等单交种在适宜条件下,胚性愈伤组织的诱导率可达90%,愈伤组织分化苗频率高于80%。在加有1ppm 6BA 和0.1%活性碳的改良 N_b 培养基上,分化出的幼苗长成健壮的小植株。接种幼胚的大小和基因型、基本培养基成份及蔗糖浓度、激素种类和浓度等对胚性愈伤组织的诱导、继代和分化幼苗均有明显的影响。另外,将培养7-8天的幼胚抉碎,可显著提高胚性愈伤组织的诱导率,并能使较大的幼胚产生胚性愈伤组织。随着胚性愈伤组织继代次数的增多,再生植株中畸形苗频率也升高     

籼稻9311成熟胚再生体系

建立9311水稻高效再生体系，将有利于人们以9311水稻为受体进行遗传改良及籼型水稻基因功能的研究．报道了9311成熟胚高效再生途径．以9311成熟胚为外植体，设计了5类（N6DP，N6DA，MSDP，MSDA和MSDAP）共13种不同愈伤组织诱导培养基，比较了9311成熟胚在不同培养基中愈伤组织的诱导以及初始愈伤组织被继代后的表现．结果显示：9311成熟胚在添加2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）的所有培养基中都能够形成愈伤组织；将最初被诱导的愈伤组织进行继代培养，在前4类培养基上诱导的初始愈伤组织，不论被分别继代于与原培养基成分相同的新鲜培养基上，还是被继代于MSDAP培养基上，继代后的愈伤组织都相继褐化死亡，而将从MSDAP培养基上诱导的初始愈伤组织继代在MSDAP培养基上，愈伤组织很少出现褐化现象，并且能够较快地增殖．由此表明，MSDAP培养基是9311成熟胚合适的愈伤组织诱导培养基和增殖培养基．采用MSDAP培养基培养，9311水稻成熟胚愈伤组织诱导率达87．5％．分化率为46．7％．再生植株的比例为23．3％、     

冬春性小黑麦花药愈伤组织诱导的影响因素

以12个冬春性小黑麦杂交组合F1代为材料,分别接种到不同培养基上,研究了基因型和培养基以及激素和碳源对花药愈伤组织诱导的影响,并对冬春小黑麦在不同培养基上的诱导率做了比较。结果表明,基因型和培养基对冬性小黑麦愈伤组织的诱导率均有显著影响;而对部分春性小黑麦的影响差异不显著;激素和碳源的调整对愈伤组织的诱导有一定程度的影响,但差异不显著。冬春性小黑麦在不同培养基上的反应不同．冬性小黑麦在PⅡ培养基上的愈伤组织诱导率最高,而春性小黑麦的最适培养基因基因型的不同而不同。     

玉米幼胚组织培养及其转化的研究

对6个玉米自交系和15个杂交组合的幼胚在不同培养基中进行了愈伤组织诱导、继代、分化培养,所试材料都能诱导出状态良好的愈伤组织,并在继代培养中生长正常.使用D icam ba和A gNO3能促进和改善愈伤组织的诱导数量和质量,二者对愈伤组织的良好状态和分化能力的保持具有协同效应.在分化培养基中提高蔗糖的浓度和附加细胞分裂素有利于胚状体的形成和苗的分化.杂交组合的愈伤组织生长状态遗传了双亲的特点,正反交试验表明,其特征更接近母本.对自交系Z3和Z31进行基因枪转化,PCR及PCR-Sou thern检测证实外源基因的导入.     

Germination of embryo in soybean anther culture

A large number of experiments about induction of callus, embryo and germination of regeneration plants were done in soybean anther culture. Screening for genotypes, low_temperature pretreatment for floral buds, constituent of hormone in medium and effects of different temperatures on induction rate of callus and embryo were studied. It was found that the TDZ played an important role in embryo induction and germination. 28 genotypes had reaction competent to the anther culture in all 110 genotypes. Induction rate of callus was 26%-68.1%. Plant differentiation rate was 0.5%-2.0%.     

玉米茎尖培养再生体系的建立

不同基因型的玉米茎尖分生组织在添加不同浓度6-BA(6-苄基嘌呤)的MS培养基上,经过4周愈伤组织诱导培养和4周芽发育培养,获得高频率的丛生芽和再生植株,芽尖倍增数可达3~8芽/茎尖.通过比较试验,确立了诱导丛生芽发生的适宜培养条件和程序,反映了不同基因型的茎尖形成愈伤组织和再生植株的能力不同,从而初步建立了利用玉米茎尖分生组织再生植株的培养体系.     

厚朴组织培养与高产细胞系建立的研究

对来自厚朴种源试验林的10个不同基因型材料开展组织培养和高产细胞系,结果表明：基本培养基、激素种类与配比、外植体的取材部位等因素对厚朴愈伤组织的诱导率、生化、褐化均有显影响。B5＋2，4-D 4mg/L NAA 1mg/L培养基的诱导率达到100％；而采用B5＋BA 1.0-2.0mg/L NAA 1.0MG/l的培养基，愈伤组织的增殖率最高，褐化率最低；140、54两个基因型的细胞增殖最快，是其它基因型细胞均值的2．12倍；不同的基因型、培养基、培养时间所产生愈伤组织细胞的厚朴酚类含量不同，以140基因型的细胞系在B5＋BA 2.0mg/L NAA 1.0mg/L的培养基上培养60d为最优。     

仙客来种苗球茎胚性愈伤的诱导及体胚的发生

为了建立仙客来稳定的快繁增殖体系,以仙客来种苗为试材,接种于含不同浓度激素组合的I／2MS培养基上,经过初培养和多次继代培养,诱导产生胚性愈伤,结果表明：球茎是较好的诱导胚性愈伤的材料,1／2MS＋6-BA0．2mg／L＋2,4-D2mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6．5g／L＋肌醇100mg／L＋酪蛋白100mg／L是较好的诱导配方,将胚性愈伤转接到不含激素的1／2MS基本培养基上,诱导产生大量球形胚和鱼雷胚,2—3周后正常成熟的体胚萌发,表明此研究可以为仙客来的快速繁殖提供技术参考．     

紫花苜蓿耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究不同激素对紫花苜蓿2号愈伤组织的诱导效果,筛选出最佳诱导愈伤组织培养基;以茎尖、茎段及叶片作为外植体,确定了叶片作为紫花苜蓿组织培养的最佳外植体;在1/4、1/3及2/3 3种不同海水培养基上分别诱导出紫花苜蓿耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株.     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

向日葵耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究了不同激素对康地5号向日葵愈伤组织的诱导效果,筛选出了最佳诱导愈伤组织培养基;以子叶、下胚轴及真叶作为外植体。确定了子叶和下胚轴作为康地5号组织培养的最佳外植体;在含50、100、及150mmol／L NaCl不同盐浓度培养基上分别诱导出向日葵耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株．     

影响水稻愈伤组织植株再生频率的因素研究

以水稻成熟种子为外植体,研究了影响水稻伤组织再生频率的各种因素,如渗透压,植物激素素和ＡｇＮＯ３等。发现不同基因型愈伤组织再生频率有很大差异,增加诱导培养基或分化培养基其中的渗透压和琼脂浓度,继代培养时加入适量的激动素或６－苄基氨基腺嘌呤以及在分化增减基中加入活性炭、玉米素等均可明显提高水稻愈伤组织的再生频率。