忽地笑(Lycoris aurea)叶片cDNA文库的构建与分析

用表达型噬菌体载体ZAP构建了忽地笑叶片cDNA文库。文库宿主菌为E.coliXL1 BLUE,亚克隆空菌为E.coliXLOLR。初始文库的滴度为5.6×105pfu/mL,扩增文库的滴度为6.9×109pfu/mL,含插入片段的频率为96%,插入片段大小在0.5～2.5kb,文库质量良好。为进一步从基因组学和分子生物学方面研究忽地笑叶片发育及克隆相关全长基因奠定了基础。     

石斑鱼卵巢cDNA文库构建及脂肪酸结合蛋白克隆

应用SMARPTM技术构建了斜带石斑鱼Epinephelus coioides卵巢cDNA文库。所构建的cDNA文库滴度为4.5×106 pfu/mL,重组率为99％,扩增后文库的滴度为1.2×1010pfu/mL。把phagemid转化为质粒后,随机挑选60个阳性克隆进行酶切鉴定和测序。酶切结果表明:插入片段长度均在500~3 000 bp之间。测序结果经过生物信息学分析,发现其中一个克隆为脂肪酸结合蛋白(FABP)基因全长,并与人肝型(L)脂肪酸结合蛋白同源性最高,为70％。     

杉木茎段形成层组织cDNA文库的构建

为了分离和克隆与杉木木材形成相关的重要基因,笔者以杉木2~3年生枝条,5~6月份形成层活动期的茎段形成层组织为材料,用表达型噬菌体载体ZAP构建了cDNA文库。文库宿主菌为E.coliXL1-Blue,亚克隆空菌为E.coliXLOLR。试验结果表明:初级文库的库容量达到6.1×105pfu,扩增文库的滴度达到5.2×109pfu/mL,重组率达到95%,插入片段大小在0.5~3.0 kb。     

中华大蟾蜍“高温卵”cDNA文库的构建

以长足但不具成熟潜能的中华大蟾蜍“高温卵”为材料,提取总RNA和mRNA,以Not I/Oligo dT18为引物,经反转录合成第1链cDNA;再以DNAPolymerase I合成第2链.所得到的cDNA加装衔接头后定向克隆到λ-ExCell载体上,构建cDNA文库.结果显示,平均每个“高温卵”中总RNA的含量为5.66μg,poly A+RNA含量约为63.96 ng,构建的cDNA文库的丰度为8.93×10-5pfu/μg cDNA.随机挑选的2个重组噬菌体经NotI、EcoR I双酶切后,均能酶切出外源片段,说明我们已成功地构建了中华大蟾蜍"高温卵"的cDNA文库.     

小麦苗期盐胁迫72h cDNA文库的构建及质量检测

以98-160盐胁迫72 h叶片的mRNA为起始材料,采用SMART技术构建了一个高质量的cDNA文库,经检测,未扩增文库的滴度为3.44 ×106 pfu/mL,白斑率＞85%,插入片段多数在0.5～1.5kb,有的可以达到2kb,平均长度为800bp.因此,按照此方法构建的是1个高质量的cDNA文库,可有效地用于下一步全长基因的筛选和克隆.     

烟草腺毛全长cDNA文库的构建

冻刷法收集烟草品种K326腺毛组织,Trizol法提取总RNA,采用SMART技术构建了烟草腺毛的全长cDNA文库.经鉴定表明,文库滴度为1.01×106pfu/mL,重组率为99.5%.随机选择24个阳性克隆进行插入片段测序,结果显示,插入片段长度在800~1 000 bp之间,将测得的序列进行Unigene归并和序列全长分析,得到了23条Unigene,21条序列有相关同源信息,其中14条为全长,完整性比率达到66.7%.结果表明,文库质量较好,可用于下一步基因克隆及基因表达谱的研究.     

棉铃虫雌性成虫脂肪体cDNA文库的构建

用异硫氰酸胍 酚 氯仿 步法从棉铃虫雌性成虫脂肪体中提取总RNA ,经过Oligo(dT)纤维柱分离出mRNA .以mRNA为模板 ,Oligo(dT)为引物 ,在逆转录酶催化下合成单链cDNA(sscDNA) .然后在E .coliDNA聚合酶Ⅰ与RNaseH共同作用下 ,进一步合成双链cDNA(dscDNA) .平末端dscDNA与EcoRI/NotI接头连接 ,插入λgt11表达载体 ,经体外包装后转染Y10 90 r 宿主菌 ,构建成棉铃虫脂肪体cDNA文库 .该文库的滴度为 3.5× 10 5pfu/mL ,重组率为 10 0 % ,该文库适合于筛选低丰度mRNA的cDNA克隆 .     

麻疯树胚乳cDNA文库的构建与分析

以等质量比的不同发育阶段的麻疯树（Jatropha curcas L.）胚乳为材料构建麻疯树胚乳cDNA文库.初级文库滴度为1.5×106 Pfu/mL，重组率为99.7％，插入片段大小为0.4～4 kb，平均约1 kb.全长基因的比例达到20％.推测的蛋白质序列种类主要包括贮存蛋白相关、转录表达调控相关、脂肪酸合成相关及信号传导相关等同源基因序列.编码功能基因的类型与分布情况同Joseph A White等构建的蓖麻胚乳cDNA文库基本一致，个别类型如贮存蛋白合成相关基因的比例相比较低，信号传导     

棉花腺体形成时均一化cDNA文库的构建

为克隆筛选棉花腺体形成相关的基因，运用SMART技术构建cDNA文库.首先抽提棉花腺体形成时期的mRNA，mRNA逆转录后合成cDNA，经均一化处理后，SfiⅠ酶切，连接质粒载体，电转化，成功构建了棉花腺体形成时期的cDNA文库.经鉴定原始文库滴度为5.8×105 cfu/mL，其重组率高达94%，插入片段的平均长度约为1.4 kb.     

条形码结构浅析

本文对条形码(简称条码)的一般结构及几种不同类型条码的特殊结构进行了剖析,结果表明:①条形码事实上就是一种可印制的机器语言;②各类条码的一般结构基本相同;③各类条码内部结构随码制而异;④条码信息表示的内容随应用领域而异。     

微机在罗兰A定位仪中的应用

本文讨论了针对我国沿海情况如何依据罗兰A测得的时差求出经纬度及海区信息,并对运算过程精度的提高提出了一些见解.最后讨论了全自动罗兰A定位仪的实现及会遇到的困难.     

塑料生物分解的研究进展

本文综述了水解酶、氧化还原酶对通用高分子材料的生物分解性,并在综述高分子物性(化学结构、分子量、熔点等)与分解性关系的基础上,介绍了具有生物分解性的一些合成高分子材料。     

五阶段加工硬化理论

分析了金属塑性变形过程中,位错增殖、螺型位错交滑移和刃型位错攀移过程,建立了包括五个加工硬化阶段的位错理论模型。利用计算机,在不同的变形条件下,对理论模型进行了计算,计算结果和实验结果相当吻合。     

聚丙酰胺富集─液珠萃取目视比色法测定矿石中微量金

本文拟定了一种快速测定矿石中微量金的方法。该法用聚丙酰胺分离富集金，丙酮；０．３％盐酸（１０：１，Ｖ／Ｖ）洗脱，用ＴＭＫ－ＴＢＰ液珠萃取目视比色法测定。试样分析结果表明，本法简单，快速，且灵敏度较高。     

尼龙66原料的工业开发动向

本文是一篇对尼龙66原料的工业开发动向的文献综述。着重介绍了由苯经由环已烯制备环已醇的工艺条件以及与传统方法的技术经济比较。此外,还介绍了以非苯原料制备己二酸、己二胺的开发情况和市场动向。     

事物转化的数学模型

本文通过模糊集合,对哲学中的质量互变律,差异统一律以及中介普遍存在律进行阐述。用自然语言和数学语言的有机结合来进行描述,借助模糊数学的抽象代替单纯语言的冗琐叙述,辩证法理论的描述一定会更清楚,更易理解.     

硝基腐植酸、聚磷酸盐与微量元素配合物(NPTE)复合微肥的合成研究

选择了硝基腐值酸与聚磷酸钾两种配体与植物所需微量元素合成配位化合物。该配合物是一种新型微肥,施用它可达到预期的目的。主要研究了以龙口褐煤为原料制备硝基腐植酸、聚磷酸盐与微量元素配合物的原理,反应条件及配合物的化学键性质。     

二茂铁及其衍生物在分析中的应用Ⅲ——二茂铁阳离子紫外分光光度法测定食品中微量铁

本文研究了二茂铁阳离子的紫外吸收光谱并用于食品样品中微量铁的测定.选氯仿做溶剂兼萃取剂,lN盐酸做介质.在选定的操作条件下,试剂二茂铁与Fe~(3-)发生氧化还原反应,产生的二茂铁阳离子转入水相.测其紫外吸收光谱,λ_(?)=250nm. ε=4.8×10~3.Fe~(3-)含量在0～6ppm范围内符合比尔定律. 本法用于食品样品中铁的测定,与邻菲罗啉法对照,结果是满意的.对于铁含量在1～15mg/100g的试样,误差不大于3％,相对标准偏差在5％以内.     

聚丙酰胺富集─液珠萃取目视比色法测定矿石中微量金

本文拟定了一种快速测定矿石中微量金的方法。该法用聚丙酰胺分离富集金，丙酮；０．３％盐酸（１０：１，Ｖ／Ｖ）洗脱，用ＴＭＫ－ＴＢＰ液珠萃取目视比色法测定。试样分析结果表明，本法简单，快速，且灵敏度较高。