Hg~(2 )、Cd~(2 )对鱼类嗅觉的毒性及Ca~(2 )的解毒作用

以罗非鱼为实验对象 ,采用电生理学和组织学方法系统研究了 4种不同浓度的 Hg2 、Cd2 污染液对鱼类嗅觉功能和嗅觉器官结构的损伤 ,以及 Ca2 对 Hg2 或 Cd2 的解毒作用 ,结果表明 :1)Hg2 、Cd2 均可抑制罗非鱼嗅电图 ( electro- olfactogram,简称 EOG)反应 ,抑制效应随离子浓度的升高和污染时间的延长而增大 .Hg2 的 IC50 值为 67.73μg/ L,Cd2 为 33.91μg/ L,Cd2 的抑制效应大于 Hg2 .2 ) Ca2 Hg2 、Ca2 Cd2 混合液 (含 80 mg/ L Ca2 )对 EOG的抑制作用均小于同浓度单一金属离子的抑制作用 ,表明 Ca2 对 Hg2 或 Cd2 均有一定的解毒效应 ,其中 Ca2 对 Hg2 的解毒效应大于 Cd2 .3)光镜研究显示 ,分别浸浴在 10、50 μg/ L Hg2 或 Cd2 4种污染液 15d后的罗非鱼嗅上皮均有不同程度的损伤 .在低浓度组 ,损伤主要是非感觉区粘液细胞出现增生现象 ;高浓度组的嗅上皮局部出现空泡化 ,嗅上皮边缘出现缺口并有细胞溢出 .在含 80 mg/ L Ca2 的 10 μg/ L Hg2 或Cd2 混合组中 ,嗅上皮基本无损伤 ;在含同样浓度 Ca2 的 50μg/ L Hg2 或 Cd2 混合组中 ,未见嗅上皮空泡化 ,仅观察到嗅上皮细胞出现皱缩     

二种石斑鱼对氨基酸刺激的EOG反应

研究二种石斑鱼嗅上皮对10种氨基酸刺激的嗅电图(EOG)反应,结果表明,二种石斑鱼的EOG波形相似,当丙氨酸浓度为10~(-4)mol/1时,赤点石斑鱼的平均EOG振幅为1.01±0.51mV,青石斑鱼为1.08±0.31mV;二种石斑鱼对丙氨酸刺激的剂量-反应关系可用双对数回归方程表示:赤点石斑鱼为logR=0.20log C+0.75,青石斑鱼为log R=3.22 logC+0.82,其电生理阈值分别为10~(9.9) mol/1和10~(-9.6)mol/1;10种氨基酸对二种石斑鱼的相对刺激有效性(RSE)基本一致,但存在种间差异。     

胡子鲶嗅感受器对氨基酸刺激的电反应

本文用记录水下嗅电图的方法,研究了胡子鲶嗅感受器对19种氨基酸(10~(-8)M)刺激所产生的相对效应,其中三种最有效的氨基酸的顺序是:L-半胱氨酸〉L-谷氨酰胺〉L-旦氨酸。它们的嗅电图反应幅值和刺激浓度呈幂函数的关系。经回归分析,计算了三者的浓度—反应直线回归方程。评定了三者的电生理阈值。     

中华乌塘鳢对性外激素嗅电反应的比较

用电生理方法研究中华乌塘鳢嗅上皮对PGE2、PGF2α、17α P和17α,20β P4种人工合成激素和对性成熟中华乌塘鳢贮精囊、精巢、卵巢和性未成熟卵巢4种提取液的嗅电反应(Electro olfactogram,EOG),观察嗅觉对不同刺激物的敏感性以及性成熟度对EOG的影响,以探讨中华乌塘鳢嗅上皮对何种性外激素最为敏感及嗅觉敏感性与性成熟度的关系.结果表明:性成熟鱼嗅上皮对4种人工合成激素的EOG大小顺序为:PGE2>PGF2α>17α P>17α,20β P,雄鱼对PGE2、PGF2α的EOG明显大于雌鱼(P<0.05);性成熟鱼嗅上皮对4种提取液的EOG大小顺序为:性成熟贮精囊液>性成熟精巢液>性成熟卵巢液>性未成熟卵巢液,它们之间的相对刺激有效性(Relativestimuluseffectiveness,RSE)差异在雄鱼为显著(P<0.05),在雌鱼则为极显著(P<0.01);性成熟鱼嗅上皮对性外激素的敏感性明显高于性未成熟鱼(P<0.01).     

Hg^2＋、Cd^2＋对鱼类嗅觉的毒性及Ca^2＋的解毒作用

以罗非鱼为实验对象,采用电生理不和组织学方法系统研究了4种不同浓度的Hg^2 、C^2 污染液对鱼类溴觉功能和嗅觉器官结构的损伤,以及Ca^2 对Hg^2 或Cd^2 的解毒作用,结果表明：1）Hg^2 、Cd^2 均可抑制罗非鱼嗅电图（electro-olfactogram,简称EOG）反应,抑制效应随离子浓度的升高和污染时间的延长而增大,Hg^2 的IC50值为67．73μg/L,Cd^2 为33．91μg／L,Cd^2 的抑效应大于Hg^2 ,2）Ca^2 ＋Hg^2 、Ca^2 ＋Cd^2 混合液（含800mg/LCa^2 )对EOG的抑制作用均小于同浓度单一金属离子的抑制作用,表明Ca^2 对Hg^2 或Cd^2 均有一定的解毒效应,其中Ca^2 对Hg^2 的解毒效应大于Cd^2 ,3）光镜研究显示,分别浸浴在10、50μg/LHg^2 或Cd^2 4手足 15d后的罗非鱼嗅上皮均有不同程度的损伤,在低浓度组,损伤主要是非感觉区粘液细胞出现增生现象;高组的嗅上皮部出现空泡化,嗅上皮边缘出现缺口并有细胞溢出,在含80mg/LCa^2 的10μg／LHg^2 或Cd^2 混合组中,嗅上皮基本无损伤;在含同样浓度Ca^2 的50μg／LHg^2 或Cd^2 混合组中,未见嗅上皮空泡化,仅观察到嗅上皮细胞出现皱缩。     

短讯

一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途江苏大学的“一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途”被授予发明专利.该发明涉及植物蛋白的开发利用领域,以大蒜脱除大蒜油或大蒜素之后得到的包含大蒜蛋白质的残余物为原料,通过加蛋白酶采用酶法水解,制成富含活性肽的蛋白酶解物.采用单酶水解和双酶水解的方法,可以在温和的条件下,将大蒜残余物如干渣粉中蛋白质酶解成2~10肽的活性多肽和氨基酸类物质.该酶解液的制备方法包括:大蒜干渣粉碎→酶解→灭酶→离心→过滤→超滤→酶解物.酶解物通过后续加工可以制成不同的液剂和粉剂制品.…     

文冠果降血压肽的制备及其活性研究

以文冠果蛋白为研究对象,采用酶解法制备文冠果蛋白酶解肽,并对其体外抗高血压活性进行研究。以水解度为指标确定酶解条件。蛋白水解物经超滤得到分子量为1k Da,1~5 k Da和5 k Da 3个区段的多肽组分,测定其对血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)的抑制率。最佳酶解条件为:底物质量浓度40g/L,加酶量8%(质量分数)(碱性蛋白酶),酶解时间175 min,酶解温度55℃和酶解p H 9.0,此条件下水解度最高为22.97%;3种多肽组分中1k Da的ACE抑制率最高为83.43%,其半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.394 mg/m L。文冠果蛋白酶解多肽具有显著的体外抗ACE活性,可作为降血压肽的开发原料。     

一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途

江苏大学的“一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途”被授予发明专利．该发明涉及植物蛋白的开发利用领域，以大蒜脱除大蒜油或大蒜素之后得到的包含大蒜蛋白质的残余物为原料，通过加蛋白酶采用酶法水解，制成富含活性肽的蛋白酶解物．采用单酶水解和双酶水解的方法，可以在温和的条件下，将大蒜残余物如干渣粉中蛋白质酶解成2—10肽的活性多肽和氨基酸类物质．该酶解液的制备方法包括：大蒜干渣粉碎→酶解→灭酶→离心→过滤→超滤→酶解物．酶解物通过后续加工可以制成不同的液剂和粉剂制品．该酶解物可以通过对血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）的抑制作用用于降低高血压患者的血压，同时具有提高免疫、调节血脂以及抗衰老的功能．     

大豆肽酶解制备工艺研究

以大豆豆粕为反应底物,用复合蛋白酶将其进行水解,对反应条件（底物浓度、反应温度、pH值、反应时间、酶用量）等工艺参数进行了系统的研究分析,并总结大豆肽含量及大豆蛋白水解度与各影响因子之间的关系。研究结果表明：反应温度为50℃,pH值为6～8,底物浓度为25%,添加复合酶量为3 000 U/g,反应时间为24 h,在此条件下酶解液中肽得率最高为49.76%。提供一种复合酶酶解制备多肽的方法,以豆粕为原料,经单酶及多酶协同水解→纯化→超滤→浓缩→喷雾干燥或冷冻干燥,制成粉末状肽制品的方法。     

血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的酶法制备

以扇贝裙边的酶解产物——蛋白多肽对ACE活性的抑制率作为控制水解程度的指标,确定制备ACE活性抑制肽的最佳酶种及酶解工艺技术条件.通过胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合风味酶、枯草杆菌蛋白酶5种酶酶解扇贝裙边得到的蛋白多肽对ACE抑制能力的比较发现,5种酶在不同酶解时间所得到的酶解蛋白多肽都具有一定的ACE抑制能力,其中胃蛋白酶酶解蛋白多肽的ACE抑制率最高,为91.33%;再经L9(3)4正交实验对胃蛋白酶酶解工艺条件进行优化,确定酶解反应最佳条件是酶量400 U.g-底1物,pH 2.5,温度32℃,底物浓度(原料∶水)1∶2,酶解时间3 h;试验结果还表明,单酶(胃蛋白酶)的酶解蛋白多肽比复合酶(复合风味酶)和双酶(胃蛋白酶 木瓜蛋白酶)的酶解蛋白多肽对ACE活性的抑制能力都强.     

Ca^2＋对罗非鱼EOG影响及其解毒可行性探讨

将四种浓度的Ｃａ２＋溶液和含４ｍｍｏｌ／Ｌ简Ｃａ２＋的不同浓度的Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋及其混合液，分别灌注鱼的嗅囊，研究它们对罗非鱼嗅电图（下简ＥＯＧ）的影响，并初步探讨Ｃａ２＋作为解毒剂的可行性及机制．结果表明：１）在一定浓度Ｃａ２＋范围内，ＥＯＧ振幅随Ｃａ２＋浓度的增加而增大，超此范围，则随浓度的增加而减小；２）Ｃａ２＋能使Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋中毒鱼的ＥＯＧ反应振幅接近正常值，反映其具一定解毒作用，效果顺序为Ｃｕ２＋＞Ｚｎ２＋；３）Ｃａ２＋对Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋混合液也具一定解毒作用．     

罗非鱼下脚料蛋白水解液抗氧化活性研究

抗氧化肽具有抑制自由基的生成作用,某些蛋白质通过酶解可获得具有抗氧化能力的多肽.罗非鱼片加工下脚料中存在较多的鱼肉蛋白质,以此为原料,采用4种不同种类的蛋白酶水解罗非鱼下脚料蛋白,以清除超氧阴离子(O2-·)、二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)和油脂过氧自由基的能力为考察指标,探讨不同蛋白酶及不同酶解时间酶解产物的抗氧...     

酶解法制备鱿鱼蛋白抗氧化肽工艺优化

以酶解液的还原力为抗氧化性指标,测定木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶7种蛋白酶的鱿鱼蛋白酶解液抗氧化性.实验结果表明7种蛋白酶在相同加入酶量(酶活力U/底物g)条件下,中性蛋白酶在酶解1 h、3 h、5 h所得的酶解液还原力均最高.以中性蛋白酶为实验用酶,进行三因素二次正交旋转组合实验优化出酶解法制备鱿鱼蛋白抗氧化肽的最佳酶解条件为酶加入量4 841 U/g、pH 5.3、酶解时间1.3 h.所得酶解液定性检测结果为具有抗氧化性的肽类混合物,有进一步开发应用价值.     

花生分离蛋白复合酶水解工艺优化研究

探讨了超声波辅助前处理对花生分离蛋白复合酶解的影响,比较了碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶等六种蛋白酶解物清除DPPH自由基的效果,确定碱性蛋白酶和胰蛋白酶较佳的复合比例为8∶2.在此基础上,开展响应面优化试验,以DPPH自由基清除率和水解度为指标,探讨复合酶与风味蛋白酶酶解的较佳工艺参数,并分析DPPH清除率和水解度相关性.实验结果表明,复合蛋白酶制备花生分离蛋白抗氧化肽的较佳酶解工艺为pH 8.5,温度49.36℃,酶添加量(E/S,质量分数m/m)3.40%,酶解时间203.59 min.     

固定化E.coli BL21(pTrc-gsh)细胞催化合成谷胱甘肽

分别以卡拉胶、明胶、海藻酸钠包埋E.coli BL21 (pTrc-gsh)细胞催化合成谷胱甘肽(GSH).从酶活收率及机械强度方面进行比较,选择卡拉胶为包埋载体,其最适pH为7.0,最适温度为40°C.相关物质对GSH的合成均有影响半胱氨酸、甘氨酸的最适浓度为20mmol/L,谷氨酸的最适浓度为60mmol/L;Mg2+/ATP为1～5(V/V)较合适;腺苷二磷酸(ADP)浓度为5mmol/L时对酶活的抑制为20%.优化条件下罐式反应器中GSH的产量为0.84g/L,操作稳定性较好;延迟加入甘氨酸时GSH产量可提高17.5%;与酵母生产ATP体系相耦联的共固定化体系在填充床中反应,GSH合成量达1.24g/L,收率比直接加入ATP提高24.2%.     

富硒大豆低聚肽口服液的制备及其主要成分分析

富硒大豆蛋白经过酶解、超滤、调配、杀菌等工艺,制备成富硒大豆低聚肽口服液,分析了产品中的硒含量、大豆低聚肽含量及氨基酸组成,其中硒含量2.45 mg/100 ml,大豆低聚肽含量(分子量1000 D以下)达到638.25 mg/100 ml,含有Se-Cys在内的19种氨基酸,研究结果为富硒大豆低聚肽产品的质量标准制定提供了一定的理论依据.     

草鱼皮酶解工艺及水解物对嗜热链球菌增殖作用研究

首次研究了水产品蛋白酶解物对乳酸菌的增殖作用。选择草鱼皮为原料,通过蛋白酶Protease P“Amano”6对其进行酶解,其水解物可以作为培养嗜热链球菌增殖的氮源。同时以水解度和水解物对嗜热链球菌的增殖效果为评价指标,并利用正交实验对酶解工艺进行了优化。结果表明,蛋白酶Protease P“Amano”6对草鱼皮最佳的酶解条件为:加酶量3%、料水比1∶3(m/V)、酶解时间7 h、pH 8.0、反应温度45℃。     

鹿茸水提取物及其蛋白酶解物对小鼠 脾淋巴细胞增殖的影响

研究了鹿茸水提取物中非蛋白成分、粗蛋白酶解物及分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.非蛋白成分和酶解物的分离分别采用HPLC法和超滤法.应用WST-8法检测各分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,采用高分辨质谱对非蛋白成分进行初步鉴定.结果显示,非蛋白成分对未经刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾细胞增殖的促进作用优于其分离组分,Fr.Ⅲ和Ⅳ对ConA诱导的脾淋巴细胞增殖有抑制作用,初步鉴定其为碱基和核苷酸的混合物.分子量大于10 kDa的肽段,单独可刺激小鼠脾细胞增殖,且对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有抑制作用.肽段分子量大小对其免疫调节活性影响较大,但并未呈现直接的相关性.肽的氨基酸组成、序列及构型等也是影响其活性的重要因素.     

蚕蛹抗氧化肽的制备及其体外抗氧化活性评价

为更客观地评价蚕蛹抗氧化肽的抗氧化能力, 以人工胃肠模拟液对不同蛋白酶酶解物的抗氧化能力进行评价, 优选获得最佳的制备用酶——碱性蛋白酶. 在此基础上,以蚕蛹抗氧化肽总还原能力为指标, 利用响应曲面法(response surface method, RSM)优化碱性蛋白酶制备蚕蛹抗氧化肽的最佳酶解工艺. 结果表明: 碱性蛋白酶的最佳酶解条件为pH=8.30, 加酶量为15.34 μL(1 902 U), 温度为50.47 ℃, 时间为2.45 h; 在此条件下优化预测得到的2 mg 蚕蛹蛋白/mL 酶解液的总还原能力为0.434, 蚕蛹抗氧化肽对·OH 和DPPH· 自由基的半数清除率IC50 分别为4.51 与4.24 mg/mL.     

大豆过氧化物酶和酯酶同工酶对锰胁迫的反应

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了2个大豆品种(华春18和浙春3号)在不同时期、不同锰浓度(0,0.01,0.10,1.00,10.00,20.00 mg/L)处理下的过氧化物酶(POD)同工酶和酯酶(EST)同工酶的变化情况.结果表明,随着锰浓度的增加,华春18的2种同工酶的酶带数和活性变化较大,浙春3号的2种同工酶的酶活性和酶带数目比较稳定.此外,大豆在中等程度的锰胁迫下能适当产生一些补偿性的酶带,但酶活性已受到一定的抑制.2个大豆品种不同时期的POD和EST同工酶酶谱对锰胁迫的反应也有差异.不同品种大豆的同工酶酶谱的变化,与其对锰胁迫的抗性有关.