硒对梨形四膜虫细胞生长和分裂的毒性作用

本文主要探讨了硒(以亚硒酸钠形式)对梨形四膜虫生长和分裂的抑制作用。首先研究了不同组份的培养液对四膜虫生长的影响,发现在无机盐溶液中加入细菌或酵母组成的培养液,在使用上不如(月示)胨培养液便利。在0.1％(月示)胨培养液中,获得抑制细胞分裂的最低硒浓度是1.4ppm,完全抑制的硒浓度为140ppm。随着培养液中硒含量的增加,细胞世代时间延长。用放射性~(75)Se示踪法和x射线荧光分析证实了硒进入了四膜虫细胞内。去除硒后,细胞恢复生长繁殖。     

梨形四膜虫(Tetrahymena pyriformis)的一个新株BJ4的分离、培养和同步分裂的诱导

四膜虫是一种分布很广、能在无菌的培养液中生长并大量繁殖的纤毛虫。自从Scher-baum和Zeuthen用“温度休克”的方法诱导四膜虫同步分裂获得成功以来,在其他几株四膜虫,用同样的诱导方法,也都实现了分裂的同步化(表Ⅰ)。我们在1964年曾用采自北京的梨形四膜虫BJ1诱导同步分裂,取得很好的效果,同步分裂的细胞数达80％以上。可惜     

四膜虫乳酸、乳酸脱氢酶同工酶及培养液溶解氧的研究

原生动物四膜虫 Tetrahymena shanghaiensis Sl 是一种好氧性生物,但是在少氧甚至缺氧的培养液里能够存活而且存活相当长的时间。在不同的生理状态下生长的四膜虫,经测定其培养液中溶解氧的含量是不同的,在四膜虫生长的前对数期时,其培养液里溶解氧已有很大减少,长期保持和衰老期的四膜虫溶液中的溶解氧接近零或非常少;四膜虫乳酸的含量也有差别,长期保持溶液中的四膜虫细胞乳酸含量要比衰老期、对数期都大;四膜虫乳酸脱氢酶同工酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表明在不同状态下该酶蛋白带有明显差别,主要反映在对数生长期细胞的蛋白带不同于衰老期、长期保持的细胞所具有的蛋白带。     

四膜虫乳酸、乳酸脱氢酶同工酶及培养液溶解氧的研究

原生动物四膜虫 Tetrahymena shanghaiensis Sl 是一种好氧性生物,但是在少氧甚至缺氧的培养液里能够存活而且存活相当长的时间。在不同的生理状态下生长的四膜虫,经测定其培养液中溶解氧的含量是不同的,在四膜虫生长的前对数期时,其培养液里溶解氧已有很大减少,长期保持和衰老期的四膜虫溶液中的溶解氧接近零或非常少;四膜虫乳酸的含量也有差别,长期保持溶液中的四膜虫细胞乳酸含量要比衰老期、对数期都大;四膜虫乳酸脱氢酶同工酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表明在不同状态下该酶蛋白带有明显差别,主要反映在对数生长期细胞的蛋白带不同于衰老期、长期保持的细胞所具有的蛋白带。     

三价铬和六价铬对梨形四膜虫生长的影响

本文采用梨形四膜虫S1作为生物体材料,探讨了三价铬和六价铬对细胞生长的影响。实验结果表明Cr(Ⅲ)在10ppm以下,对梨形四膜虫生长有促进作用,但是Cr(Ⅵ)在1ppm以上时对梨形四膜虫的生长即产生抑制作用,我们又观察到Cr(Ⅵ)在10ppm时对梨形四膜虫的生长,开始有强抑制作用,在30小时以后,四膜虫细胞呈现突跃式的增长,我们对此现象作了初步探讨。     

硒对衣藻细胞群体生长的促进作用及其对汞的拮抗

作者以衣藻为材料,观察硒对其群体生长的促进作用以及硒对汞的拮抗。结果表明,1ppm及5ppm的SeO_2对衣藻细胞群体的生长有促进作用,细胞的耗氧量及谷胱甘肽过氧化物酶的活性均高于对照组(不含SeO_2)。但如培养液含硒量为10ppm以上时,衣藻群体的生长就将受到抑制。衣藻细胞在含HgCl_21.5ppm的培养液中48小时后几乎全部褪色死亡,但在含HgCl_2 1.5ppm,同时含SeO_2 5ppm的培养液中,衣藻细胞生长正常,群体生长曲线和不含HgCl_2和SeO_2的培养液(对照组)相似,说明5ppm SeO_2可以拮抗1.5ppm HgCl_2的毒性。     

JAL1杂交瘤细胞的批量培养研究

研究了不同葡萄糖、谷氨酰胺浓度下JAL1细胞的生长、糖耗、乳酸及氨的生成、单抗合成等代谢过程及该株细胞的基本代谢规律，同时对该株细胞生长和单抗生产的动力学方面进行了研究，在细胞培养箱中，采用方瓶批量培养杂交瘤细胞，培养条件为pH7.0-7.5，温度37℃，5％CO2。实验表明，在不同浓度葡萄糖、谷氨酰胺的培养液中，细胞的活性细胞密度、总细胞密度、细胞活性上均有不同，相应地，对细胞的最大比生长速率、葡萄糖最大比消耗速率、乳酸最大比生成速率以及单抗最大比合成速率也有不同程度的影响。实验结果还表明，该株细胞的单抗分泌是属于负生长耦联型的。     

牛轮状病毒的分离与细胞培养特性

探讨牛轮状病毒(BRV)的细胞培养方法,为研发诊断试剂盒和疫苗提供依据.将RT-PCR阳性样品在MA-104细胞及Vero细胞上进行培养,盲传4代后MA-104细胞出现病变(CPE),主要表现为细胞脱落,出现拉网现象,部分出现死亡.这表明轮状病毒能够在MA-104细胞上生长,并引起细胞病变;而Vero细胞无病变.用胰酶处理的病毒接种MA-104细胞,用含2μg/mL、3μg/mL和5μg/mL三种(A、B和C)不同浓度胰酶的培养液在MA-104和Vero细胞对犊牛轮状病毒传代培养.将分离培养的病毒经聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果表明BRV在C组培养液中分离培养最好,聚丙烯酰胺凝胶电泳图显示病毒核酸呈4∶2∶3∶2排列,与参考株NCDV相似,呈典型A群轮状病毒的特征.     

生物微量元素与化学元素周期律

本文选用一种世界性的淡水纤毛虫——梨形四膜虫SI株作实验的细胞模型,研究周期表中IA-VIA及稀土各元素对细胞生长繁殖的影响。发现在相同主族元素中,当它们以一定的化学方式存在时,大体上其营养作用自上而下地减弱,而毒性则按同一顺序增加;在相同周期内,也大体上元素的营养作用从左至右减弱,或者毒性按同一顺序增加。对于稀土元素系列,轻稀土元素的有益营养作用优于重稀土元素。从而得出其大致的规律性。     

一种贮存昆虫细胞系的简便方法

将６株昆虫细胞系贮存在４－１００℃冰箱中，其中２株细胞紧密贴附培养瓶壁生长的细胞系的贮存时间分别超过４个月和５个月，３株细胞疏松附壁生长的细胞系的贮存时间２个月，以上细胞系贮存后的复苏状况良好。在贮存期间更换培养液有助于延长贮存时间。细胞不贴附瓶壁的细胞系贮存６０天后不能复苏。     

三角褐指藻的培养条件研究

对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)进行了培 养条件研究,结果表明,在20 ℃下,采用去除氮源的No.4基本培养液,起始pH值为8.0,(N H2)2CO为氮源,氮浓度为0.01 mol/ L时,对藻细胞的光合自养生长极为有利,培养10 d,其生物量达441 mg/L.过高的碳酸氢钠 浓度(>0.04 mol/L)易引起培养液pH值的过大改变而导致培养液中出现沉淀,在培养液中加 入葡萄糖有利于藻细胞的生长,光合自养生长生物量浓度较低,混合营养明显促进藻细胞的 生长,且培养液中同时含质量分数0.2%葡萄糖和0.04 mol/L碳酸氢钠后藻生物量达1 630 mg /L,因此光合异养生长明显促进藻细胞的生长.     

泥土芽孢杆菌YMTC1049菌株高温蛋白酶产酶条件的优化

 报道高温蛋白酶产生菌YMTC1049(Geobacillus sp.)产酶条件的优化过程.在基础培养基中分别添加葡萄糖、麦芽糖、酵母提取物、蛋白胨、胰蛋白胨、酪蛋白、聚胨等7种营养成分,获得对酶活影响较大的碳、氮源.用多因素正交试验设计考察了pH、酪蛋白、葡萄糖和温度对酶活的影响水平,菌株在优化发酵条件下培养24h时,上清液蛋白酶活力达312U/(mL·min).     

稀土氧化物对小鼠胚胎体外发育和胚胎移植影响的初步研究

将稀土氧化物加入人胚胎常用体外培养液 Ham'sF-10中,对2细胞小鼠胚胎进行体外培养。发现稀土氧化物浓度为50～100ppm 时,胚胎发育速度及发育率明显高于 Ham'sF-10对照组,且发育加快现象在培养的24小时内己出现,浓度200ppm以上时,促生长效应逐渐减弱;800ppm 以上时,胚胎发育受抑制也在24小时内出现。将在 Ham'sF-10和含50ppm 稀土氧化物的 Ham'sF-10培养液中培养72小时后发育的囊胚分别移植入两组各9只受体母鼠,两组的受体产仔率没有显著性差别,仔鼠未见畸形或生长异常。     

底物限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生成的影响

考察了葡萄糖或谷氨酰胺限制的批培养中杂交瘤细胞的生长、代谢和单抗生成。葡萄糖或谷氨酰胺限制时最大活细胞密度基本相同,为(1.0±0.1)×106cells/mL。葡萄糖限制时,乳酸生成减少,YLac/Glc降低,YCell/Glc增加,提示葡萄糖更多地参与三羧酸循环。谷氨酰胺限制时,氨和丙氨酸生成减少,YAmm/Gln增加,YAla/Gln减小,提示谷氨酰胺的能量利用率提高。谷氨酰胺缺失时异亮氨酸、亮氨酸、胱氨酸、缬氨酸、色氨酸、组氨酸等替代谷氨酰胺,维持细胞生长和单抗合成,产物是甘氨酸和天冬氨酸。单抗生成与细胞生长关联,并且细胞停止生长后单抗仍生成。细胞死亡阶段的qMAb约是生长阶段的一半。葡萄糖和谷氨酰胺共限制下细胞对单抗的生产能力比葡萄糖和谷氨酰胺单独限制时小。     

一株热纤梭菌的分离及其纤维素分解活性的初步研究

从牛粪中分离到一株能分解纤维素的高温厌氧梭状芽孢杆菌。该菌接触酶阴性,革兰氐染色阴性。细胞杆状或稍弯(5～10×0.6～0.8μm)。芽孢卵圆形,端生,直径为1.0～1.3μm。极生丛鞭毛,运动。老龄时菌体常呈长丝状(15～30×0.4～0.6μm)。以断裂方式繁殖。最适生长温度为60～65℃,最适pH为6.5～7.0。发酵产物有H_2、CO_2,乙酸、甲酸、乳酸和乙醇等。发酵液中无色素。在纤维素琼脂滚管中形成透明、直径为5～l5mm的圆形分解圈。该菌株在以蛋白胨为唯一碳源和氮源时不生长,能迅速利用葡萄糖或纤维二糖生长。在纤维素上生长时产生孢外纤维素酶,在纤维二糖或葡萄糖上生长时不产生纤维素酶。将在纤维二糖或葡萄糖上旺盛生长的菌接入纤维素培养基中时,需经过10天以上的延迟期才能恢复纤维素分解能力,说明该菌株的纤维素酶是诱导酶。酶的最适温度为65℃,pH为7.2。该菌株的形态、生理生化及酶学性质与Clostridium thermocgllum十分相似,鉴定为同一个种。     

微量元素硼对水蜜桃的生理效应

硼对水蜜桃的营养生长和生殖生长都有很大影响。土壤缺硼可导致水蜜桃生长不良和“花而不实”。不同浓度硼砂(B)处理的结果表明:土施B2两/株和叶片喷洒B0.05％(含硼元素60ppm)对缺硼土壤上水蜜桃的营养生长和生殖生长效果最佳,能提高水蜜桃叶片的硼、叶绿素含量,增大光合作用面积,提高座果率和加快幼果生长速度。80～100ppm的硼酸(含硼元素13.6～17ppm)对花粉萌发和在花粉管的生长具有促进作用,硼酸浓度超过100ppm则起抑制作用。     

汞毒害对塔胞藻生长和生理特性影响的研究

以塔胞藻(Pyramimonas.sp)为试验材料，探讨了在培养液中加入不同浓度的汞离子对微藻的生物学效应．采用的HgCl2浓度为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06ppm，接种后每9d为一轮，连续培养了3轮，结果发现，前2轮培养中随着铜离子浓度的升高，细胞的生长繁殖和细胞体积明显下降，HgCl2浓度达到0.05ppm时，细胞内的蛋白质、叶绿素含量均明显下降，可溶性糖、核酸的含量与对照相比变化不大．培养到第3轮时，塔胞藻已适应环境的变化．     

不同浓度血红蛋白对小鼠骨髓瘤细胞体外培养的影响

用含不同浓度的牛源性血红蛋白细胞培养液培养小鼠骨髓瘤细胞,通过细胞计数绘制生长曲线,计算最大增殖浓度和倍增时间,并进行比较分析.结果表明:当培养液的血红蛋白浓度在1~5 mg/dL时小鼠骨髓瘤细胞生长较好,细胞最大增殖浓度在1.2×106个/mL以上,倍增时间小于20 h,当培养液的血红蛋白浓度为6 mg/dL时细胞生长抑制,细胞最大增殖浓度和倍增时间为6.7×105个/mL和21.6 h.由此可见,培养液中血红蛋白浓度≤5 mg/dL时不影响细胞生长,达到6 mg/dL时抑制细胞生长.     

青霉“青-1”的抗生物质研究初步报告

青霉“青—1”系由青岛带来本试验室,在含蛋白质优脂培养基中生长茂盛,孢子层青绿色,菌苔甚厚,基内菌丝橙黄色,老的培养,孢子层土棕色,孢子甚多。在合成优脂培养中生长较差,菌苔薄,形成菌丝束,(2-3×1mm),孢子层青绿色,基内菌丝白色或淡棕色。“青—1”的酦酵培养基以 Czapek’s 培养基(葡葡糖30克,NaNO_3 2克,K_2 HPO_4 1.0克,MgSO_4·7H_2O 0.5克·KCl 0.5克,FeSO_4 0.01克,水1000c.c.)最为适宜,至于在胰蛋白—葡萄糖,或其他合成培养基(酒石酸盐为碳源)中,培养液抗菌性能均不如 Czapek’s 培养基。在28℃培养9日后,培养液中即呈抗菌性能,11—13日后,其抗菌性能即达最高峰。     

北极耐冷石油降解菌BJ1、BJ9和BJ19的降解特性

为对低温海域石油烃污染修复提供优良菌源,采用红外分光仪和气相色谱与质谱联用仪对北极耐冷石油降解菌BJ1、BJ9和BJ19的降解特性进行研究,结果显示:除BJ1-9外,其他混合菌群的降解率均大于单一菌株的降解率,盐度、pH、温度、初始油质量浓度、营养盐对石油降解率均有较大影响;BJ1、BJ9和BJ19以及混合菌群对柴油总烃的降解效率分别为55.25%、49.37%、50.76%和63.44%;BJ1、BJ9和BJ19以及混合菌群在单因素最好条件下对柴油芳香烃的降解效率分别为32.22%、19.87%、15.73%和7.33%;菌株在低温下优先降解短链烷烃,在7d内C18后的长链烷烃未被降解;BJ1、BJ9、BJ19和混合菌群对汽油和海燃油降解效果明显,而对原油和燃料油等降解效果较差.研究表明,该三株菌能够利用多种石油烃组分作为碳源生长并可降解多环芳烃,对碳源的利用具有广谱性.