洛阳地区规模化鸡场隐孢子虫流行病学分析

为了掌握洛阳地区鸡隐孢子虫病的流行状况,自2011年5月至2011年7月,利用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法对伊川县、孟津县、偃师市、老城区、涧西区等5个县区6个规模化鸡场的238份粪便样品进行隐孢子虫卵囊检查。检查结果显示:洛阳地区鸡场隐孢子虫总阳性率为13%(31/238),主要集中在10～50日龄的雏鸡。发现两种不同形态的卵囊,根据卵囊形态结构、大小及寄生部位,初步鉴定一种为贝氏隐孢子虫;另一种为火鸡隐孢子虫,对人具有感染性。研究结果表明:正确处理鸡场粪便,是预防周边居民和其他动物感染隐孢子虫病的必要措施。     

隐孢子虫病在淮南地区婴幼儿人群感染的研究

为了调查淮南地区婴幼儿隐孢子虫病流行情况 ,探索出适应本地区该病的最佳染色诊断方法。主要运用了文献 [1 ]的四种染色方法对隐孢子虫病进行实验诊断研究 ,结果发现淮南地区婴幼儿人群中有隐孢子虫病流行 ,发病率 3.45 %。经 X2 检验显示 :金胺——酚染色——改良抗酸染色法比较适合本地区该病的临床诊断     

重庆市猪隐孢子虫病流行病学调查与虫种鉴定

用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法调查了荣昌、大足、壁山、永川、江津、合川、潼南、垫江及涪陵等9个县14个猪场共1 790份粪样.掌握了重庆市猪隐孢子虫(Cryptosporidium)的感染情况.结果表明:①14个猪场均感染了隐孢子虫,隐孢子虫的平均感染率为16.93%,阳性率最高的猪场为43.48%;仔猪感染率为12.52%,后备猪为22.26%,种猪为17.72%.②经鉴定,所获虫体为猪隐孢子虫(Cryptosporidium suis).     

微小隐孢子虫表面抗原CP23DNA疫苗免疫山羊诱导免疫应答及保护性研究

观察微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum)子孢子表面抗原CP 23 DNA疫苗免疫山羊诱导其产生免疫应答和保护性作用。将重组质粒pCR3.1-23经鼻粘免疫怀孕山羊，用ELISA测定IgG和IgA抗体滴度，用C.parvum卵囊经口对其后代攻虫感染。抗CP23抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中，且抗体滴度随免疫时间延长而增高。C.parvum卵囊经口感染后代，试验组山羊后代与对照组相比，卵囊排出数量减少，排出时间缩短，微小隐孢子虫表面蛋白CP 23 DNA疫苗能诱导山羊产生特异性免疫应答并对其后代有一定免疫保护作用。     

大理地区牛奶中抗酸阳性细菌的调查

目的:探讨大理地区牛奶中抗酸阳性细菌的携带情况,为结核病的防治提供理论依据.方法:选取大理市及周边地区主要奶源供应点,抽取未经消毒处理的新鲜牛奶样本57份,离心后用酸处理,取沉渣涂片.抗酸染色、镜检,同时接种于罗氏培养基上培养,分离抗酸阳性细菌.结果:直接涂片中未见抗酸阳性细菌,罗氏培养基上分离到2株抗酸阳性菌,阳性率为3.5%.结论:大理地区牛奶中检出抗酸阳性细菌,希望有关部门加强牛奶的消毒处理及奶牛结核病的防治.     

消化道人芽囊原虫感染小鼠形态观察

通过观察感染小鼠消化道中人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B．h)的生长繁殖状况及形态特点,为进一步研究B．h的生理学特性及致病机制提供依据．用含106个B．h的虫体液经直肠感染免疫功能低下ICR小鼠,消化道内容物苏木素染色后光镜下观察和透射电镜观察．在感染小鼠消化道内容物中发现了与粪便及培养物不同的B．h形态．结果表明,提示体内外不同的生长环境对B．h的形态变化产生较大的影响,这种不同的形态可能与其致病性密切相关．     

柔嫩艾美尔球虫厦门株(Eimeria tenella)生物学研究

采用单卵囊分离方法从厦门地区饲养的鸡盲肠中获得艾美尔球虫,经显微观察、测量和感染实验,从寄生部位、卵囊形态、孢子化时间和潜伏期等指标测定,实验结果:采用琼脂板方法分离和挑选单卵囊方法进行感染效果理想,单卵囊感染小鸡成功率为60%.该球虫寄生在鸡盲肠部位,其余部位未发现,卵囊形态长卵圆形,长25.80(23.5～28.5),宽20.86(18.5～23.5),长/宽:1.23(1.21～1.27),27℃条件下孢子化时间为20 h.,潜伏期为146 h.与国内一些株进行比较存在差别,确定该艾美尔球虫为柔嫩艾美尔球虫(Eimeriatenella),并定名为柔嫩艾美尔球虫厦门株.     

同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR的建立及应用

目的 建立同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR方法,并进行初步应用。方法 比对NCBI上发表的MVM和MPV基因组序列,设计1对引物和探针,可同时检测MVM和MPV。考察MVM-MPV引物探针的特异性和灵敏度,并对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测。结果 MVM-MPV荧光定量PCR方法最佳线性范围为109～104拷贝/μL,标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99,灵敏度为101拷贝/μL,特异性强。应用MVM-MPV探针对178份小鼠粪便DNA检测,结果为2份阳性样本,经MVM、MPV特异性探针鉴定,2份阳性样本均为MPV感染。阳性样本经全基因组测序后与NCBI网站上MPV(NC_001630.1)序列比对,一致率为96%。结论 建立的MVM-MPV荧光定量PCR方法,能够有效快速地同时检出小鼠细小病毒和小鼠微小病毒。     

广西发现人肉孢子虫病

1988年8月作者在广西某地收集53人的粪便,以2.5％重铬酸钾液浸泡,暂时保存。粪渣过筛、沉淀,以37％(W/V)ZnSO_4液漂浮,镜检肉孢子虫孢子,同时对蠕虫卵也作鉴定和统计,发现有6人感染肉孢子虫,自然感染率为11.3％。虫种鉴定为人肉孢子虫。其它蠕虫的感染率为蛔虫62.3％;钩虫35.8％;鞭虫49.1％和带绦虫1.9％。还检查了18头黄牛肉,在17头肌肉中查到肉孢子虫孢囊,黄牛肉孢子虫自然感染率为94.4％。经鉴定,有3种肉孢子虫孢囊:枯氏肉孢子虫,自然感染率为94.4％,犬为终末寄主;毛肉孢子虫,自然感染率44.4％,终末寄主为猫;人肉孢子虫,自然感染率27.8％,人、狒狒、猕猴和黑猩猩等为终末寄主。9个部位肌肉检查结果为食道肌(25.0％)、肋肌(25.0％)、后腿肌(9.1％)。前腿肌、背肌、膈肌、头部肌、尾部肌和心肌未检到孢囊。     

黑河市城乡小学生蛔虫感染情况调查报告

为了解我市小学生蛔虫感染状况，我站在一九九0年3──4月份，对黑河市第一小学及幸福乡之路小学两所学校学生进行了蛔虫感染情况抽样调查报告如下：一、调查对象和方法1、对象：对黑河市第一小学和幸福乡之路小学7—13岁学生共1228人进行调查。2‘方法：取学生新鲜粪便，用直接涂片法，显微镜下检查虫卵、直涂法明性者采用饱和盐水漂浮集卵，发现蛔虫卵者，即为阳性，三张涂片无蛔虫卵者为阴性。二、调查结果本次共调查了H所小学，1228名学生的粪便，蛔虫感染者232人，总感染率为18．9％，男女生感染率分别为19．3％，（119／615），18．4…     

白色念珠菌的鉴定和培养

介绍了白色念珠菌的简易分离和鉴定方法：先将菌种接种于沙堡氏培养基上,待长出菌落后,挑取单少接种于玉米玉脂（或玉米吐温８０）培养基上形成厚膜孢子,然后再结合糖发酵或其它生化试验加以鉴定。此方法简便易行,且阳性率高。另外,对沙堡氏培养基进行了改良,并对白色念珠菌在７种改良培养基上的生长情况做以比较,结果表明,在葡萄糖蛋白胨酵母膏琼脂培养基上菌落生长最好,葡萄糖蛋白胨琼脂培养基和葡萄糖酵母膏琼脂培养其次     

应用PCR技术检测结核菌的临床研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对２４４例呼吸疾病患者临床标本进行结核菌ＤＮＡ检测，并同时与涂片抗酸染色结果进行比较。结果显示：１１２例结核标本涂片和ＰＣＲ检测阳性率分别为１６．１％和５２．７％，两者差别有显著性（Ｐ＜０．０１）。９４例涂阴结核标本ＰＣＲ阳性达４５．７％。结果表明应用ＰＣＲ技术检测结核杆菌ＤＮＡ具有快速敏感、特异性较高等优点，尤其对涂阴病人具有较大诊断价值     

Aberrant DNA methylation patterns in cultured mouse embryos

Mouse early embryos undergo genome-wide demethylation and remethylation events during pre-implantation development. Abnormal methylation reprogramming is thought to be associated with development arrest. Using immunofluorescence staining with an antibody against 5-methylcytosine (MeC), we examined the genome methylation patterns of mouse embryos cultured in vitro. The results did not show the difference in staining patterns between development-blocked two-cell embryos that cultured in vitro and the two-cell embryos that were freshly collected from the donor mice. But in vitro-arrested morulae displayed a strong positive staining when compared to the morulae freshly collected from the donor mice. At the blastocyst stage, although most embryos showed the expected methylation patterns, with highly stained inner cell mass (ICM) and weekly stained trophectoderm (TE), a proportion of embryos were dimly stained in both ICM and TE. These results indicated that the methylation profile of the embryos could be changed by culturing in vitro when the embryos were in the transition from morulae to blastocyst.     

东北梅花鹿肠道纤维素降解微生物的分离筛选

食草动物依赖胃肠道微生物分解利用天然木质纤维素物质。为获得高效纤维素降解菌，本文将东北梅花鹿粪便样品，经过研磨，重悬于羧甲基纤维素钠（CMC-Na）作为唯一碳源的富集培养基中，进行富集培养和筛选，用革兰氏碘液染色显示纤维素水解圈，通过纤维素水解圈直径（D）和菌落直径（d）比值，初步判断纤维素降解菌降解纤维素能力．筛选出106株纤维素降解微生物，包括72株细菌、22株真菌和12株放线菌．细菌16S rDNA和真菌ITS序列测序结果显示，这些纤维素降解菌主要集中分布于变形菌门（Proteobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）、放线菌门（Actinobacteria）和子囊菌门（Ascomycota）．本文提供了一种快速有效的反刍动物肠道纤维素降解微生物的筛选方法，为东北梅花鹿肠道微生物高通量测序结果提供实验数据支持．      

空间环境对黑色素瘤B16细胞体内增殖及免疫原性的影响

初步探讨空间环境对黑色素瘤B16细胞增殖及免疫原性的影响。选择4株经体外实验筛选出生物学性状变异明显的第20颗返回式卫星搭载的空间培养B16细胞,检测其体内增殖能力及免疫原性的变化。将筛选出的4株空间培养B16细胞接种于C57BL/6小鼠,其中一组接种于腹腔,观察荷瘤小鼠生存期;另一组接种于腋下皮肤,检测小鼠出瘤时间。接种至2周时,处死,分离荷瘤小鼠移植瘤和血清。称重荷瘤小鼠移植瘤,观察空间培养B16细胞增殖能力;利用HE染色法观察荷瘤小鼠移植瘤切片细胞形态;采用放射免疫分析法(Radioimmunoassay,RIA)测定荷瘤小鼠血清白介素-2(InterLeukin-2,IL-2)浓度,观察空间培养B16细胞免疫原性变化情况。与对照细胞相比,1株空间培养B16细胞的荷瘤小鼠生存期明显缩短,出瘤时间明显延长。HE结果显示:此株空间培养B16肿瘤组织内有淋巴细胞浸润;RIA结果显示:3株空间培养B16细胞荷瘤小鼠血清IL-2浓度明显增加。空间环境的复合因素可诱导B16细胞增殖能力及免疫原性产生变化。     

人体与动物隐孢子虫和肠道原虫的考察

人体与动物隐孢子虫和肠道原虫的考察洪凌仙，杨文川，彭文峰，崔宏江（生物学系）隐孢子虫是人兽共患的一种球虫类原虫，寄生宿主广泛，包括鱼类、爬行类、鸟类、乳动物及人类．Ｎｉｍｅ在美国首次报道人体隐抱子虫病例［‘ｊ，此后世界各国陆续发现人体的病例，并认为隐...     

2014年春季北京地区啮齿类实验动物健康状况的病理学调查和分析

目的 2014年5月本实验室对北京市14家单位的啮齿类实验动物的健康状况进行病理学调查。方法采集啮齿类实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠后经10%福尔马林固定,通过石蜡切片H.E.染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色于显微镜下观察。结果绝大多数实验用鼠为健康状态,仅部分非健康动物出现不同程度的肝细胞肿胀(32.6%)、轻度肺脏病变(24%)、肾脏蛋白样渗出物和管型(13.2%)。本次抽检结果与前两年抽检结果相比较,肝脏脂肪染色阳性率(6.2%)低于2013年春秋季的17.1%和6.25%,以及2012年春秋季的26.7%和14.8%,有降低的趋势。值得引起注意的是,肾脏病变从2010年春季在小鼠(2%)和2011年春季在大鼠(20%)中偶发,发展至今,已经在小鼠(6%)、大鼠(12%)和豚鼠(20%)中普遍存在,从偶发病变发展成为常发病变,应加强防范。结论本次调查结果表明北京地区啮齿类实验动物基本为健康状态,少数动物出现组织病理学变化可能与饲养环境、饲料营养成分以及运输、处死时的应激有关,宜提高饲养管理水平和避免应激来加以改善。     

两株小鼠诺如病毒的分离与鉴定

摘要: 目的了解江苏地区常用实验小鼠诺如病毒( murine norovirus,MNV) 的感染情况及进化特征。方法在江苏地区抽取三个实验动物中心的实验小鼠,采集直肠及内容物样本,应用ＲT-PCＲ 方法检测MNV OＲF2 特异性基因( 547bp,MNV nt5104-5650) 。阳性样本经ＲAW264. 7 细胞分离病毒,对MNV 分离株的VP1 基因进行扩增,将其连接在pEASY-Blunt 载体上,转化至大肠杆菌Trans1-T1 感受态细胞,通过Kanamycin 抗性筛选,挑取菌落进行PCＲ鉴定,鉴定为阳性的克隆送检测定其VP1 基因序列,构建系统发生进化树。结果共检测小鼠直肠内容物30 份,检出MNV 阳性样本4 份,包括ICＲ 小鼠( 2 /8) 、BALB/c 小鼠( 1 /12) 和C57BL/6J 小鼠( 1 /10) ,感染率为13. 3%;ＲAW264. 7 细胞接毒盲传三代,两只ICＲ 小鼠样品接种的细胞产生明显细胞病变( CPE) ,表现为细胞圆缩聚集,大部分脱落死亡,而C57BL/6J 和BALB/c 小鼠样本接种ＲAW264. 7 细胞无CPE; 应用VP1 特异引物经ＲT-PCＲ 检测,表现CPE 的细胞样本出现特异条带,测序结果显示分离到的2 株MNVVP1 核酸序列均为1626bp,与引物设计参考毒株S7-P2( GenBank 登录号: AB435514) VP1 基因大小相同,进化树图表显示检测到的2 株MNV 属同一独立小分支与参考株BJ10-2062、CＲ4 最为相近。结论此次抽检的实验小鼠MNV 感染率为13. 3% ( 4 /30) ,考虑可能在同一设施内传播。常用实验小鼠携带病毒的生物学意义有待进一步研究。