“Anti-UV Clone”柴胡细胞提取物对HaCaT和HepG2细胞生长的影响研究

实验利用噻唑蓝比色分析法(MTT法)研究"Anti-UV Clone"柴胡细胞株不同溶剂提取物对人角质上皮细胞(HaCaT细胞)和人肝癌细胞(HepG2细胞)生长的影响.实验表明,75%乙醇提取剩余物在低浓度时对HaCaT细胞的生长具有显著的促进作用,其中以加入质量浓度为2.50mg/L时效果最好,添加后HaCaT细胞的生长速率比空白对照高(43.71±1.23)%.表明该提取物中存在促进HaCaT细胞生长的活性物质.而"Anti-UVClone"柴胡细胞株石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯提取物则都会抑制HaCaT细胞和HepG2细胞的生长.其中石油醚和乙酸乙酯提取物对HaCaT细胞生长的抑制作用最强,在加入质量浓度为7.50mg/L时对HaCaT细胞的抑制率分别达(39.70±0.61)%和(40.20±0.95)%;而石油醚提取物对HepG2细胞生长的抑制作用最强,在加入质量浓度为7.50mg/L时对HepG2细胞生长的抑制率达(44.97±1.01)%.     

明日叶查尔酮对紫外线诱发HaCaT细胞损伤的防护作用

 为研究明日叶查尔酮（Angelica keiskei chalcones,AC）对紫外线诱发HaCaT细胞损伤的防护作用,采用紫外线照射损伤的HaCaT细胞,分别加入高、中、低剂量依次为20、10、5μmol/L终浓度的AC,共同培养24 h,采用3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl）-2,5-diphenyl-2-Htetrazolium bromide（MTT）比色法测定细胞增殖活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率,试剂盒法测定细胞MDA含量和SOD、CAT及Caspase-3的活性,逆转录聚合酶链式反应方法检测细胞BCL-2和Bax的mRNA表达水平。结果表明,与正常对照组比较,照射模型组细胞增殖活性、SOD、CAT活性、BCL-2 mRNA表达水平降低,而细胞MDA含量、凋亡率、Caspase-3活性以及Bax mRNA表达水平则升高;中、高剂量AC组细胞增殖活性、SOD、CAT活性、BCL-2mRNA表达水平均高于照射模型组,而细胞MDA含量、凋亡率、Caspase-3活性以及BaxmRNA表达水平则均低于照射模型组。上述各项差别均具有统计学意义（P<0.05）。研究发现,明日叶查尔酮可抑制紫外线照射诱发的HaCaT细胞凋亡,调节BCL-2和Bax的mRNA表达水平,增强细胞的抗氧化酶活性,减轻受损细胞的脂质过氧化水平,对紫外线照射导致的细胞损伤有良好防护作用。     

丹参酮ⅡA对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡的影响

以人自发性永生化角质形成细胞系(HaCaT)细胞为材料, 通过CCK8和蛋白印迹法分别测定不同剂量长波紫外线(ultraviolet A, UVA)、不同浓度丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA,TSⅡA), 以及UVA和TSⅡA共同作用下的细胞活力和促分裂素原活化蛋白激酶(mitogenactivatedprotein kinase, MAPK)信号通路蛋白(p38, JNK和Erk)磷酸化水平. 结果表明:在10 J/cm2的UVA照射下, 细胞活力为对照组的70%左右, 在20 J/cm²的UVA照射下, 细胞活力仅为对照组的55%左右; 低浓度的TSⅡA在正常情况下对细胞活力无影响, 高浓度(85 μmol/L) TSⅡA处理组的细胞活力约为对照组的70%左右. 与TSⅡA或UVA单独处理相比, 二者共同作用下细胞活力大大降低且差异极其显著. UVA照射提高了MAPK信号通路中的p38和JNK磷酸化水平, 但是对Erk磷酸化水平没有影响; 而TSⅡA可以显著提高低辐射剂量(2 J/cm²)UVA诱导下的p38和JNK的磷酸化水平. 这说明UVA促进HaCaT细胞凋亡是通过提高p38和JNK磷酸化水平来实现的; 而TSⅡA可以提高p38和JNK磷酸化水平,进一步加速UVA诱导的HaCaT细胞凋亡.     

紫外线-B增强下SNP、AsA对铜绿微囊藻保护作用

在UV-B辐射下,培养群体和单细胞的铜绿微囊藻,研究了外源的SNP(硝普钠,NO供体)、AsA(抗坏血酸)对铜绿微囊藻可溶性蛋白质含量、抗氧化保护酶活性的影响.实验结果表明:随着UV-B辐射的增强,群体和单细胞微囊藻的可溶性蛋白质含量先上升后下降,POD(过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)活性也呈现先上升后下降趋势.在经过2 h照射后,抗氧化酶的活性都大于对照所发生的变化,而群体的抗氧化酶始终保持着比单细胞更高的活性,这说明群体比单细胞更能耐受UV-B胁迫.同时SNP处理组所测得的数据均比对照组和AsA处理组大,这说明SNP能更好地协助铜绿微囊藻耐受UV-B辐射.     

柴胡皂甙d(SSd)对K562细胞增殖的抑制作用

目的研究从柴胡中提取的单体成分柴胡皂甙d对K562细胞生长的影响.方法分别用不同质量浓度的SSd作用于K562细胞株,于不同时间段分别计数其平均细胞数,并绘制相应生长曲线,计算平均抑制率.药物作用后24,36,48 h,计算分裂指数.结果用药后K562细胞的细胞数、分裂指数均下降,下降幅度与剂量呈正相关.结论 SSd能抑制K562细胞增殖,这种抑制作用呈时间和剂量依赖关系(P<0.05).     

乳苣水提取物对人肺癌细胞SPCA-1生长的影响

为了探讨乳苣水提取物对体外培养的肺癌细胞SPCA-1的影响,分别用质量浓度为0.5、1、1.25和1.5 g/L(mg/m L)的乳苣水提取物处理SPCA-1细胞,24 h后通过CCK-8法检测发现,与对照组(未处理)相比,处理组细胞增殖活力均显著下降(P0.001).流式细胞仪检测(AnnexinⅤ-FITC/PI染色)发现随着处理浓度的增加,处理组细胞凋亡率都显著提高(P0.05),且呈剂量依赖关系.为了探索乳苣是否对体内肿瘤有抑制作用,构建了SPCA-1细胞的裸鼠皮下瘤模型,通过观察喂食乳苣水提取物后皮下瘤的生长情况发现,与未喂食乳苣水提取物的对照鼠相比,喂食5周后的实验组的瘤体得到明显的抑制.实验结果表明乳苣水提取物能够抑制体外和体内生长的SPCA-1细胞,可以作为一种潜在的预防和治疗肺癌的药物做进一步研究.     

藏雪莲水提取物对小白鼠抗氧化作用的研究

为了研究藏雪莲水提取物的抗氧化作用,将100只小白鼠随机分为高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照组,连续24 d分别灌服不同剂量的藏雪莲水提取物和生理盐水,测定肝、肺、心肌和骨骼肌内T-SOD活性和MDA的含量。结果发现藏雪莲水提取物能提高肝、心肌、骨骼肌中T-SOD活性,从而降低MDA的含量,说明藏雪莲水提取物具有较高的抗氧化作用。     

He-Ne激光和增强UV-B辐射对小麦幼苗氮代谢的影响

为研究He-Ne激光对增强UV-B辐射后损伤的修复作用,采用5 mW.mm-2He-Ne激光辐照、10.08 kJ.m2.d1的UV-B辐射及二者组合对舜麦1718号小麦幼苗进行处理,测定各处理组小麦幼苗硝酸还原酶活性、一氧化氮合成酶含量和膜透性的变化.分析结果显示:He-Ne激光辐照可使UV-B辐射后小麦幼苗硝酸还原酶活力升高1.2倍,显著改善了增强UV-B辐射后硝酸还原酶活性降低的程度;而一氧化氮合成酶(NOS)含量B组和BL组分别高于CK组45.1%和17.8%,现促进作用.     

紫外辐射诱导植物细胞DNA损伤的彗星检测

单细胞凝胶电泳(彗星检测)已广泛应用于动物细胞DNA损伤检测.该文报道了单细胞凝胶电泳应用于UV-B诱导植物细胞DNA损伤的检测.通过对动物细胞的单细胞凝胶电泳实验方法的改进,获得了在植物细胞中应用的最佳条件.以植物细胞原生质体为材料,并结合T4 Endonu lease V的运用,显著提高了UV-B诱导植物细胞DNA损伤提高彗星检测的敏感性和特异性.植物细胞DNA损伤的彗星图像经CASP软件处理并量化,结果表明:UV-A和UV-B均能诱导发生DNA单链断裂;UV-A在一定的剂量下诱导少量嘧啶二聚体的形成,而UV-B则强烈诱导嘧啶二聚体的产生.     

对以高锰酸钾为氧化剂的饮用水工艺流程的细胞毒性评价

用2项细胞生物学指标--细胞增殖活性和细胞凋亡率比较了一个饮用水工艺流程各阶段有机提取物作用于细胞的毒性.实验数据表明:经强氧化剂高锰酸钾处理水后产生的有机提取物,对细胞毒性较大,但经系列水工艺处理后(机加池→煤滤→炭滤→出厂→管网),加氯出厂水和管网水的水质转好,说明该饮用水工艺流程有效地去除了对细胞具有毒性的一些污染物质.     

血清饥饿法诱导人角质细胞HaCaT细胞周期同步化的研究

探讨血清饥饿法对人表皮细胞HacaT细胞周期的影响．采用无血清和低血清浓度的DMEM培养基饥饿HaCaT细胞,分别培养6h,12h,22h时,用倒置显微镜观察细胞形态,并且收集各组细胞,用流式细胞仪分析细胞周期各个时相细胞百分比．结果发现HaCaT细胞系在含0．2％FBS的DMEM培养基中培养12h,细胞仍然贴壁生长,并且可以使G0／G1期细胞百分率达到66．5％．因此,血清饥饿法可以应用于人表皮细胞HaCaT同步于G0／G1期,从而为后期药物筛选打下基础．     

杨树根系浸提液对几种农作物种子萌发及幼苗生长的影响

针对林农复合经营系统中杨树根系浸提液对几种农作物种子的萌发及幼苗生长的影响进行了研究。采用不同浓度的南林95杨和NL-80351杨根系浸提液处理几种主要的农作物种子，并进行了发芽试验。结果表明：南林95杨和NL-80351杨根系浸提液对这几种农作物种子的萌发及幼苗生长均具有一定的影响。两种杨树无性系根系浸提液对小麦、油菜、大白菜的种子萌发和幼苗生长有明显的抑制作用，浸提液浓度较高时表现尤其明显，其抑制程度从大至小分别为小麦、油菜、大白菜；相反，两种根系浸提液对棉花的萌发和幼苗生长则有显著的促进作用。其中南林95杨根系浸提液对小麦和油菜萌发及其幼苗生长的抑制作用以及对棉花萌发和高生长的促进作用均强于NL-80351杨的；但对棉花根长生长的促进作用则南林95杨弱于NL-80351杨的；南林95杨根系浸提液对大白菜种子萌发和根长生长的抑制作用强于NL-80351杨的，对其高生长的影响南林95杨主要表现为抑制，NL-80351杨则表现为促进。     

Bioeffects of different functionalized silica nanoparticles on HaCaT cell line

With the fast development of nanotechnology, all kinds of nanomaterials came forth and got to be widelyapplied because of their unique properties[1―3]. At the same time, the bioeffects from nanomaterials were universally paid attention to because people …     

Inhibiting Effects of S.acus Linnaeus Extracts on GLT-82 Tumor Cell Lines

Hailong S.acus Linnaeus was chosen as the experimental material in the experiments and changes of cell morphology, forming rate of clone and changes of division index were conducted to identify the inhibiting effects of Hailong extract on human tumor cell lines (GLT-82). Four days after medication, most of the cells changed their normal morphology of tumor cells and became round, broken and even broke into pieces. The inhibiting rates could reach 75.1% on the fourth day. The division index reduced strongly and the clone could not form or the forming rate was very low. With the extract concentration increasing and the time prolonging, the inhibiting effect increased. These results indicate that Hailong has striking anti-tumor effects and will have a perfect future in the fields of treatment and prevention of cancer.     

银屑病TNF-α及c-myc表达的变化及意义

目的 探讨银屑病的免疫机制,为银屑病的临床诊治及新药研制提供实验依据.方法 利用细胞培养技术培养HaCaT细胞,采用ELISA法检测银屑病外周血TNF-α及c-myc的表达情况以及TNF-α刺激后c-myc在银屑病HaCaT细胞中的表达情况.结果 与正常对照组比较,银屑病组外周血血清中TNF-α及c-myc的水平明显升高(P<0.01);80 ng/mL的TNF-α可刺激HaCaT细胞高分泌c-myc蛋白,组间比较差异具有统计学意义(P<0.01).结论 TNF-α是通过影响c-myc的分泌在银屑病发生、发展过程中起重要作用的.     

Inhibiting effects ofS. acus Linnaeus extracts on GLT-82 tumor cell lines

HailongS. acus Linnaeus was chosen as the experimental material in the experiments and changes of cell morphology, forming rate of clone and changes of division index were conducted to identify the inhibiting effects of Hailong extract on human tumor cell lines (GLT-82). Four days after medication, most of the cells changed their normal morphology of tumor cells and became round, broken and even broke into pieces. The inhibiting rates could reach 75.1% on the fourth day. The division index reduced strongly and the clone could not form or the forming rate was very low. With the extract concentration increasing and the time prolonging, the inhibiting effect increased. These results indicate that Hailong has striking anti-tumor effects and will have a perfect future in the fields of treatment and prevention of cancer. Foundation item: Supported by the Science Foundation of the Education Department of Heibei Province (No. 2001263) Biography: LI Chun-xiang (1968-), female, Associate professor, research direction: biochemistry and molecular biology.     

Construction and characteristics of a transformed lepidopteran cell clone expressing baculovirus p35

A transformed cell line was constructed from Mythimna separata cells Ms7311 by lipofection method. TMs7311 cells were generated using a double selection technique involving a selection in the antibiotic Zeocin, followed by a second round of selection by exhibiting cell characterization. A cell clone expressing p35 was obtained with high level of AcMNPV and recombinant proteins. Compared with wild type Ms7311 cells, the cell clone showed increased resistance to Actinamycin D-induced apoptosis and a profound resistance to nutrient development （PBS）. When the cell clone was infected with recombinant baculoviruses expressing secreted alkaline phosphatase （SEAP） and β-galactosidase, expression of the recombinant proteins from TMs7311 cells exceeded that from parental Ms7311 cells. Production of budded virus and occlusion body was significantly higher than that from parental ceils Ms7311.