耐高COD淀粉废水的高产油脂粘红酵母的驯化和筛选

为减轻高COD淀粉废水对产油菌株粘红酵母生长的抑制,提高油脂产量,本文利用淀粉废水对该菌株进行了耐高COD梯度驯化,并采用流式细胞仪对经尼罗红染色的粘红酵母细胞进行了高油脂含量菌株的筛选。结果表明：经多次驯化后,粘红酵母耐受淀粉废水COD高达75000mg/L;流式细胞仪筛选得到一株油脂含量为25.7%（质量分数）的粘红酵母,比原始菌株油脂提高了140%。400L发酵罐实验表明,在初始COD 75000mg/L,葡萄糖质量浓度为36g/L,pH4.8及30℃条件下,培养33h后,粘红酵母生物量达25.3g/L,菌体油脂含量为29.5%,COD降至5600mg/L,降解率为92.5%。     

一株高效产油脂真菌的选育及其油脂成分分析

以早期从海洋环境中分离得到的38株海洋真菌为材料,采用苏丹黑染色法初筛,摇瓶法复筛,得到1株油脂产率相对较高(27.96%)的菌株MD2,经鉴定,该菌株为粘红酵母(Rhodotorula glutinis).再以MD2为出发菌株,经紫外诱变、亚硝基胍诱变和紫外-亚硝基胍复合诱变,最终得到突变菌株MD2-1;采用酸热法提取粘红酵母MD2-1的菌体油脂,测定了其产脂能力,并采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)测定其脂肪酸组成.结果表明:MD2-1的产脂能力较强,油脂质量达菌体干质量的45.32%,较MD2提高17.36%;MD2-1菌体油脂中检测出9种脂肪酸,其脂肪酸组成与植物油近似,其中10-十八(碳)烯酸占脂肪酸总量的71.53%,为10-十八(碳)烯酸工业化生产提供菌种资源,为其规模化生产奠定基础.     

味精废水中粘红酵母和螺旋藻混合培养生产油脂

研究了在味精废水中混合培养粘红酵母和钝顶螺旋藻，并生产油脂。将COD（化学需氧量）为32000mg/L的味精废水稀释5倍，pH值调节到5.5，接种10%粘红酵母，培养3d后接种10%螺旋藻。培养5d后，COD降解率为70.3%，油脂产量为216mg/L，分别是粘红酵母单独培养的1.75倍和5.42倍，螺旋藻单独培养的2.36倍和7.64倍。混合培养也利于废水中NH₄⁺-N、还原糖以及谷氨酸的去除。     

大豆蛋白废水生产单细胞蛋白的菌种选择及其培养条件

针对大豆蛋白生产废水的水质特性,选择了产朊假丝酵母(Candida utilis)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)、白地霉(Geotrichum candidum link)、解脂假丝酵母解脂变种(Candida lipolytica)和扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fiburiger)等5种工业生产酵母,作为以大豆蛋白废水生产单细胞蛋白(Single Cell Protein,SCP)的菌种,并通过摇瓶培养实验,对其培养生长条件进行了研究。结果表明,白地霉的最佳培养条件为C/N37(马铃薯-葡萄糖培养基),pH6.5,25℃,180r/min;产朊假丝酵母为C/N5(麦氏琼脂培养基),pH6,25℃,180r/min;热带假丝酵母为C/N37(马铃薯-葡萄糖培养基),pH5.5,25℃,210r/min;解脂假丝酵母为C/N37(马铃薯-葡萄糖培养基),pH5.5,25℃,180r/min;扣囊拟内孢霉为C/N37(马铃薯-葡萄糖培养基),pH6,25℃,180r/min。5种酵母菌基本都适合生长在含糖量较高,pH偏酸性,温度在25℃左右的环境当中,比较适合利用大豆蛋白废水生产SCP,为菌种的复配提供了依据,为实现利用大豆蛋白废水生产SCP奠定了基础。     

粘红酵母RG发酵产油脂动力学模型的构建

对粘红酵母RG摇瓶发酵产油脂的发酵动力学进行了研究.利用Origin 7.5软件拟合求出菌体生长、油脂合成和基质消耗的动力学模型参数.结果表明:实验数据与动力学模型能较好地拟合,所构建模型能较好地反映粘红酵母RG发酵产油脂的过程.     

餐饮废水的微生物降解技术初步研究

通过对餐饮废水中的微生物进行培养、分离,以黄豆油降解率为指标筛选得到两个高效菌种,编号为F11和F19.经初步鉴定,F11为浅白隐球酵母(Cyrptococeus albidus),F19属葡萄球菌属(Staphylococcus).利用紫外分光光度法测定废水中油脂的含量,结果显示浅白隐球酵母和葡萄球菌在48 h内对黄豆油的降解率分别为98.2%和93.8%.对两个菌株进行产脂肪酶验证,结果表明两株菌都具有较高的产脂肪酶能力.     

利用淀粉废水培养面包酵母的研究

以淀粉废水经水解所得的糖液为培养液,利用二代种子酵母的菌种,在一容积为25 L的塔式发酵器内进行了面包酵母的连续培养试验。试验结果为:在冲稀速度D=0.224 h~(-1)下,酵母在发酵液中的浓度C=13.04 g/L(菌体干重),酵母对糖的利用率Y_(X/S)=0.323。这可同目前国内外以糖蜜为原料生产面包酵母的指标相媲美。经本工艺处理的淀粉废水,COD去除率达70％,从而大大减少了废水对环境的污染负荷。     

共固定化多菌种双轮发酵生产保健红醋的研究(Ⅰ)--共固定化多菌种酒精发酵条件的研究

对采用固定化多菌种进行酒精和醋酸的双轮发酵生产保健红醋的工艺进行了研究 .第一轮发酵以德氏根霉、酿酒酵母与产香酵母共固定化细胞对大米原料进行糖化和酒精发酵 .试验结果表明 :根霉、酿酒酵母与产香酵母共固定化细胞的最佳菌种量配比为 4∶3∶2 ;固定化细胞粒子接入量为 10 % ;第一轮糖化及酒精发酵的最适温度为 30～ 33℃ ,发酵时间为 70h左右 .     

米根霉脂肪酶的制备及其在餐厨废弃油脂转化中的应用

利用脂肪酶把餐厨废弃油脂转化成为生物柴油能够达到绿色化、资源化处理餐厨垃圾的目的。从米根霉CICC3005 c DNA文库扩增得到脂肪酶基因(proROL),并克隆到毕赤酵母组成型表达载体p GAPZαA中,电转入毕赤酵母X-33中构建重组毕赤酵母,SDS-PAGE电泳发酵液上清,结果显示重组酶的相对分子质量约为35 000。以橄榄油为底物测得脂肪酶活性为(426.6±0.8)U/m L。利用重组的米根霉脂肪酶对餐厨废弃油脂进行转酯化反应,以乙醇为酰基受体制备脂肪酸乙酯,在水含量为5%,醇油摩尔比为4∶1,酶添加量为10%的条件下得到脂肪酸乙酯的最高得率为49%。     

粘红酵母处理味精废水的研究

对粘红酵母处理味精废水的条件进行研究。结果表明最佳处理条件为：进水COD浓度为10000mg/L,pH为6.16,发酵温度为32℃,发酵时间为72h,接种量为15%。该条件下可使味精废水COD的去除率达80.53%以上,利用发酵后的菌体,可提取单细胞蛋白,提取油脂,具有一定的应用潜力。     

高产耐热3''''-磷酸二酯酶菌种的选育及酶性质的研究

以粘红酵母(Rhodotorula glutinis)Q0402为出发菌株,经紫外谤变,得到一株粘红酵母QX0402.5 L发酵罐的发酵液中3'-磷酸二酯酶酶活力可达250 U/mL,为文献报道过的最高酶活力的2.5倍.所产生的3'-磷酸二酯酶在70℃下保温1 h,酶活力仍有50%以上.该酶最适反应pH为5.4,最适反应温度为60℃,反应3 h的反应转化率为56.37%,底物浓度可以提高到3%,生产效率为文献报道的3倍.     

马铃薯淀粉废水的生物治理研究

通过使用霉菌(黑根霉、黑曲霉、青霉、白地霉)和酵母菌(拟内孢霉酵母、产朊假丝酵母)两类菌种对马铃薯废水的处理效果进行实验研究,确定处理效果最佳的菌株为青霉菌和拟内孢霉酵母菌,发酵时间为5,d。通过正交实验得出,在50,m L马铃薯废水中分别接入2%,青霉菌和3%,拟内孢霉酵母菌后处理6,d,最终将马铃薯废水的COD值由16,286降至6,216,去除率为62.38%,。两种菌的添加量对COD去除率影响较大,呈负相关性。处理天数对COD去除率影响较小,呈正相关性。     

裂殖壶菌油脂提取方法的研究

比较了有机溶剂提取法、酸热法和超声波提取法对于裂殖壶菌油脂的提取能力．酸热法和超声波提取法的提取得率高于有机溶剂提取法．当氯仿和甲醇以1：1的体积比混合时,油脂提取得率最高．当氯仿和甲醇以2：1的体积比混合时,提取所得油脂中的DHA含量最高．但总提取得率还是以氯仿和甲醇的体积混合比为1：1时为最佳．     

高产耐热3′-磷酸二酯酶菌种的选育及酶性质的研究

以粘红酵母(Rhodotoru la g lutin is)Q 0402为出发菌株,经紫外诱变,得到一株粘红酵母QX 0402。5 L发酵罐的发酵液中3′-磷酸二酯酶酶活力可达250 U/mL,为文献报道过的最高酶活力的2.5倍。所产生的3′-磷酸二酯酶在70°C下保温1 h,酶活力仍有50%以上。该酶最适反应pH为5.4,最适反应温度为60°C,反应3 h的反应转化率为56.37%,底物浓度可以提高到3%,生产效率为文献报道的3倍。     

共固定化多菌种双轮发酵生产保健红醋的研究（Ⅰ）：？…

对采用固定化多菌种进行酒精和醋酸的双轮发酵生产保健红醋的工艺进行了研究。第一轮发酵以德氏根霉、酿酒酵与产香酵母共固定化细胞对大米原料进行糖化和酒精发酵,试验结果表明：酿酒酵母与产香酵母共固定化细胞的最佳菌种量配比为４：３：２;固定化细胞粒子接入量为１０％;第一轮糖化及酒精发酵的最适温度为３０－３３℃,发酵时间为７０ｈ左右。     

酶制剂在玉米秸秆双菌种固态发酵生产微生物油脂中的应用

以玉米秸秆为原料,利用纤维素酶和康宁木霉将玉米秸秆转化为可发酵糖,皮状丝孢酵母利用可发酵糖生产微生物油脂。采用正交试验,分别通过检测发酵物中还原糖含量和油脂产量,确定微生物油脂生产的最佳条件。研究结果表明：利用纤维素酶和康宁木霉处理玉米秸秆,在纤维素酶添加量为0.15％,康宁木霉接种量为10％,处理温度为26℃,处理时间为6 d的条件下,可获得还原糖含量为4.852 g/L的玉米秸秆降解物。利用皮状丝孢和酵母发酵玉米秸秆降解物生产微生物油脂,在皮状丝孢酵母接种量为9％,培养温度为26℃,培养时间为7 d的条件下,每100 g发酵产物中,可获得微生物油脂3.321 g。     

玉米秸杆发酵生产蛋白饲料的研究

利用产生纤维素酶的菌种与不同的酵母菌，使玉米秆转化为具有高蛋白含量和生物活性的蛋白饲料。通过生物糖化、发酵实验，分离出适合玉米秆发酵的菌种，生产出含糖量高的蛋白饲料。结果表明：单株菌种中，用绿色木霉糖化后含糖量可达334．36mg／g，白腐真菌 绿色木霉 黑曲霉等糖化效果最好，糖化后含糖量可达389．56mg／g。从牛胃内含物中分离出的假丝酵母、牛胃白、牛胃红均有较好的产蛋白率，其中以假丝酵母最佳，3种菌有较好的共生性。     

采用阶段处理和多菌种固态发酵玉米秸秆的研究

目的 采用阶段处理和多菌种固态发酵玉米秸杆，提高玉米秸杆的饲料营养价值。方法 利用氨化法和白腐真菌Lx对玉米秸秆进行前处理，将康宁木霉和选育出的高活性黑曲霉Sy，瘤胃细菌X4，酵母Y2，接种于前处理过的玉米秸杆上进行多菌种共发酵。由正交试验得出最适培养条件。结果 在发酵温度30℃，pH5，发酵9d后，粗蛋白含量达24．61％，粗纤维降解率为48．37％。结论 该法为利用玉米秸杆生产蛋白饲料提供了新途径。     

利用大豆乳清废水生产单细胞蛋白的酵母筛选

大豆乳清废水是大豆分离蛋白（ISP）生产过程中排放的高质量浓度有机废水,其COD质量浓度高达10 000 mg/L以上,C、N、P含量丰富,且无有毒物质,用于培养工业酵母,不仅可以使废水COD质量浓度得到大幅削减,降低后续废水处理的难度和费用,同时还可以回收具有较高营养价值的单细胞蛋白（SCP）.以白地霉（Geotrichum candidum link）、产朊假丝酵母（Candida utilis）、热带假丝酵母（Candida tropicalis）、解脂假丝酵母解脂变种（Candida lipolytica var.lipolytica）和扣囊复膜孢酵母（Saccharomycopsis fibuligera）5种常见的工业酵母菌,通过摇瓶发酵,进行了大豆乳清废水的SCP生产实验研究.结果表明,被试五种酵母菌均能在该废水中快速增殖,适宜的接种量介于0.3-0.4 g/L之间.其中,C.lipolytica var.lipolytica在废水COD质量浓度11 150 mg/L、初始pH值为6.17、25℃、180r/min等条件下,发酵12 h的细胞产量最大,达2.35 g/L,对废水COD的去除率达48.3%;在对数期的细胞增殖速率、收获SCP的蛋白质含量和蛋白质产量分别为0.3589 g/（L.h）、39.7%和0.88 g/L,均居于被试五种酵母之首.从生产SCP和去除废水COD角度考虑,C.lipolytica var.lipolytica和S.fibuligera是利用大豆乳清废水生产SCP的最适生产菌种.     

米根霉、法夫酵母双菌共发酵淀粉生产虾青素的初步研究

对米根霉、法夫酵母共发酵淀粉生产虾青素进行了研究．摇瓶试验结果表明，米根霉、法夫酵母共发酵淀粉生产虾青素适宜的培养基为淀粉50g／L、1gKH2PO4/L、1g CaCl2／L、1g酵母膏/L、0.5gMgSO4／L、5g（NH4）2SO4/L，控制培养基初始pH为8．0、发酵温度为22℃及同时接种米根霉和法夫酵母有利于虾青素的合成，5L罐试验结果表明虾青素合成滞后于糖的利用，且分成两个增长阶段，虾青素的最大产量达2．48mg／L．这些试验结果不仅证实了共培养米根霉和法夫酵母发酵淀粉生产虾青素的理论可行性，而且为进一步利用淀粉为原料生产虾青素提供了试验参考．