力竭运动前后大鼠脑皮质运动区递质性氨基酸含量的动态变化

通过观察脑递质性氨基酸的变化,进一步探索运动性疲劳的中枢机制,30只雄性SD大鼠进行了一次性力竭跑台运动,用高效液相色谱法检测了运动前后及恢复期：0．5h、1h、3h和24h大鼠脑皮质运动区Glu、Asp、GABA、Gly含量,结果发现：力竭运动后即刻Glu含量有所下降,GABA含量显著性上升至最高点;Gly含量在力竭运动后即刻、恢复0．5、1h均显著性高于安静值,恢复期0．5h达到最高点,同GABA含量变化相比具有时相差异性;Glu／GABA比值在恢复期有所增高,而Glu＋Asp／GABA＋Gly比值始终低于安静值。提示：大鼠脑皮质运动区Glu含量下降和GABA含量增高与运动中枢抑制过程有关;Gly对中枢机能的调控存在复杂的机制;观察大鼠脑中Glu＋Asp／GABA＋Gly比值,反映运动性疲劳时脑的机能状态,较Glu／GABA比值更有意义。     

柴胡-白芍对抑郁大鼠海马神经递质的影响

通过观察柴胡-白芍药对治疗抑郁模型大鼠海马中枢神经递质变化及BDNF和Trk B表达的情况,探讨其抗抑郁症的机理.采用HPLC法测定海马组织单胺类神经递质5-HT(5-羟色胺)、NE(去甲肾上腺素)、DA(多巴胺)的质量比.采用免疫组化法检测海马中BDNF(海马脑源性神经元)和Trk B(受体型酪氨酸蛋白激酶)阳性神经元面密度值的变化.结果表明,与模型组比较,柴胡白芍药对高、中剂量组海马单胺类神经递质5-HT,NE和DA质量比均显著增加,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);上调BDNF和Trk B阳性神经元面密度值(P0.05或P0.01).其作用机制可能是提高大鼠脑内海马组织和皮质组织NE、5-HT、DA质量比及上调BDNF(海马脑源性神经元)和Tr KB(受体型酪氨酸蛋白激酶)的表达.     

五参胶囊镇静催眠作用及其机制的实验研究

目的观察五参胶囊(Wu Shen Capsules,WSh C)对小鼠镇静催眠作用的影响,并探讨其作用机制.方法将ICR小鼠随机分为对照组、五参胶囊高剂量组、中剂量组和低剂量组.五参胶囊高剂量组用药量为200 mg/(kg·d~(-1)),中剂量组用药量为100 mg/(kg·d~(-1)),低剂量组用药量为50 mg/(kg·d~(-1)),给药时间为15 d,于给药结束后进行小鼠自主活动实验和协同戊巴比妥钠阈上剂量睡眠时间实验,测定5 min内各组小鼠的活动次数和站立次数,记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠持续时间.采用酶联免疫吸附法检测小鼠下丘脑5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-Hydroxyindole acetic acid,5-HIAA)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、谷氨酸(glutamine,Glu)含量,并计算5-HIAA/5-HT比值及Glu/GABA比值.结果与对照组比较,WSh C各给药组小鼠活动次数减少,睡眠潜伏期缩短,睡眠持续时间延长(P0.01),WSh C能升高小鼠下丘脑5-HIAA含量和5-HIAA/5-HT比值,降低Glu含量和Glu/GABA比值.结论 WSh C具有明显镇静催眠作用,其机制可能与调节中枢兴奋性和抑制性神经递质有关.     

耳针对脑缺血后睡眠剥夺大鼠下丘脑单胺类神经递质和细胞因子IL-1β的影响

目的:通过观察耳针对脑缺血后睡眠剥夺大鼠下丘脑单胺类神经递质和细胞因子IL-1β的影响,探讨耳针治疗卒中后失眠的作用机制.方法:取SPF级Wistar雄性大鼠,用Zea Logna等报道的大脑中动脉栓线法(MCAO)制备大脑中动脉闭塞再灌注模型,模型成功后将动物随机分为对照组、模型组、安定组和耳针组4组,再对除对照组外的其他3组动物腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)造成脑缺血后睡眠剥夺大鼠模型,安定组每日腹腔注射安定,耳针组取耳穴神门(TF4)进行皮内针埋藏,均连续治疗7 d.采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测下丘脑单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、5-羟引哚乙酸(5-HIAA)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和白介素-1β(IL-1β)的含量.结果:与对照组相比模型组大鼠下丘脑5-HT、5-HIAA和IL-1β含量减低(P0.05),DA、NE含量显著升高(P0.01);与模型组相比安定组与耳针组大鼠下丘脑5-HT和IL-1β含量显著升高(P0.01),DA、NE含量显著降低(P0.01).结论:耳针治疗卒中后失眠可能通过提高机体下丘脑5-HT、5-HIAA及细胞因子IL-1β含量,降低NE和DA的含量以调节和改善睡眠.     

中药沙苑子抗疲劳作用研究

探讨中药沙苑子对大鼠脑组织EAA,IAA含量的影响及其抗疲劳作用,为沙苑子在运动生物学方面的应用提供实验依据。建立运动疲劳动物模型,测试大鼠脑组织海马、间脑脂肪族EAA,IAA含量,Glu/GABA比值变化和大鼠运动至运动疲劳的时间。与安静对照组比较,运动对照组海马和间脑EAA含量均下降(P<0.05),IAA含量均升高(P<0.01/P<0.05);运动加沙苑子组海马EAA含量下降(P<0.05),IAA含量升高(P<0.05);间脑EAA中Glu含量下降(P>0.05),Asp含量下降(P<0.05),IAA中,GABA含量升高(P<0.01/P<0.05)。与运动对照组比较,运动加沙苑子组海马和间脑EAA含量均升高(P>0.05),IAA含量均下降(P<0.05)。与安静对照组比较,运动对照组、运动加沙苑子组两个脑区的Glu/GABA比值下降(P<0.01/P<0.05);与运动对照组比较,运动加沙苑子组两个脑区Glu/GABA比值升高(P<0.01)。运动加沙苑子组运动至疲劳的时间比运动对照组延长(P<0.05)。沙苑子可以影响海马、间脑脂肪族EAA,IAA含量及Glu/GABA比值,延缓中枢神经疲劳的发生,提高大鼠抗疲劳水平。     

酸枣仁汤对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠模型治疗机制的研究

为探究经典名方酸枣仁汤对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠大鼠的作用机制,采用8周龄的雄雌性SD大鼠各20只,每10只大鼠(雌雄各半)为一组,将40只大鼠随机分成酸枣仁汤组、地西泮组、模型组和空白组,利用腹腔注射PCPA混悬液的方法构建失眠大鼠模型,通过旷场实验和高架十字迷宫实验评价造模后大鼠睡眠行为、情绪的改变。给药两周后,通过血清学检测单胺类神经递质、氨基酸类神经递质、炎性细胞的变化。高架十字迷宫实验结果显示,与空白组相比,PCPA诱导的失眠大鼠开臂停留时间百分比(t_oc)和进入开臂次数百分比(N_oc)均下降,其中t_oc显著下降,表明模型构建成功。与模型组相比,酸枣仁汤组5-羟色胺(5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)含量显著升高,而去甲肾上腺素(NE)含量升高不明显,多巴胺(DA)、谷氨酸(Glu)含量显著降低;酸枣仁汤组促炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)含量显著降低,抗炎性细胞因子白介素10(IL-10)含量显著升高。与地西泮组相比,酸枣仁汤组DA含量降低更加显著,地西泮组肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量比酸枣仁组降低更加显著,而5-HT、GABA、NE、Glu、IL-1β、IL-10含量变化趋势相同,且无显著差异。研究认为酸枣仁汤通过增加抑制性神经递质,降低兴奋性神经递质,恢复促炎性和抗炎性细胞因子水平,从而缓解失眠症状,为酸枣仁汤治疗失眠的功效机制及遣药组方提供了科学依据。     

有氧运动对焦虑模型大鼠神经递质、Hb、BU、Cr、NO含量及NOS活性的影响

通过测试有氧运动对焦虑模型大鼠脑神经递质和血红蛋白、血尿素氮、肌酐含量、血清NO及NOS活性的影响,探讨了有氧运动对大鼠焦虑症状调适作用的机制。大鼠随机分为安静组(QG)和模型组(MG组),将MG组随机分为模型自然恢复组(MNR组)、模型有氧运动恢复组(MAER组)。MAER组和MNR组分别进行28d有氧运动恢复和自然恢复后,测试大鼠脑组织5-羟色胺(5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)、多巴胺(DA)含量和血红蛋白(Hb)、血尿素(BU)、肌酐(Cr)含量、血清NO及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果显示:经过28d的恢复,MAER组和MNR组的脑组织5-HT、DA和GABA含量均存在显著性差异(P0.05)。MAER组的5-HT、DA含量分别下降16.60%、26.37%,GABA含量上升21.57%;MAER组大鼠血清NOS活性和NO含量恢复效果明显,接近QG组水平。MAER组NOS活性和NO含量与MNR组比较均有极显著性差异(P0.01),分别上升38.28%和46.81%。MAER与MNR组的Hb、Cr和BU含量有极显著性差异(P0.01),MAER组的Hb、Cr含量分别上升38.19%、36.69%,BU含量下降37.41%。结果表明,有氧运动能够提高大鼠脑组织GABA和血液Hb、Bu、Cr、NO含量及NOS活性,增强运动能力,降低大鼠脑组织5-HT、DA含量,改变焦虑模型大鼠行为,促进焦虑状态的缓解或者消除。     

不同穴位处方麦粒灸对失眠大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

目的:观察不同穴位处方麦粒灸对失眠大鼠下丘脑5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)质量分数的变化,探讨麦粒灸治疗失眠症的作用机理.方法:将SD大鼠36只随机分为6组即对照组、模型组、安定组、麦粒灸1组(取百会、神道、心俞穴),麦粒灸2组(取三阴交、神门穴),麦粒灸3组(取申脉、照海穴),模型组以腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立大鼠失眠模型,安定组给予腹腔注射安定,麦粒灸各组分别按穴位给予麦粒灸治疗,每组连续治疗6 d后检测大鼠下丘脑5-HT、5-HIAA、NE、DA的变化.结果:模型组5-HT和5-HIAA质量分数明显低于对照组(P＜0.01);麦粒灸各组5-HT、5-HIAA明显升高,NE、DA明显降低,与模型组和安定组比较差异有显著性(P＜0.05,P＜0.01);麦粒灸各组之间比较,麦粒灸2组优于麦粒灸1组(P＜0.05),麦粒灸3组与麦粒灸1组、麦粒灸2组比较均无显著性差异(P＞0.05).结论:麦粒灸可能是通过提高失眠大鼠下丘脑5-HT、5-HIAA质量分数,降低NE、DA质量分数而改善睡眠;麦粒灸2组作用优于麦粒灸1组,说明取三阴交、神门穴治疗失眠症疗效更好.     

生巴戟天与盐巴戟天改善三氯化铝诱导的老年痴呆小鼠学习记忆能力的研究

目的比较生巴戟天与盐巴戟天对老年痴呆模型小鼠脑组织去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MAD)的影响.方法将50只小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、生巴戟天组和盐巴戟天组.除对照组外,其余各组通过灌胃给予AlCl3(200mg·kg-1)建立老年痴呆模型,连续50d.生巴戟天组、盐巴戟天组小鼠分别灌胃给予6g·kg-1的生巴戟天、盐巴戟天水提物,阳性对照组小鼠灌胃给予32mg·mL-1吡拉西坦,对照组与模型组分别灌胃给予等体积的生理盐水.采用Morris水迷宫法评价学习记忆能力,采用高效液相色谱-电化学法检测小鼠脑组织中NE,DA和5-HT含量,采用考马斯亮蓝测定法测定小鼠脑组织中SOD和MAD活性.结果与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期显著增加(P<0.05),穿越次数显著减少(P<0.05),脑组织NE,DA,5-HT含量与SOD活性显著下降(P<0.05),MAD活性显著升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组、生巴戟天组、盐巴戟天组小鼠的逃避潜伏期显著减少(P<0.05),穿越次数显著增加(P<0.05);脑组织NE,DA,5-HT含量与SOD活性显著增高(P<0.05),MAD活性显著降低(P<0.05);盐巴戟天组小鼠脑组织NE,DA,5-HT含量与SOD活性明显高于生巴戟天组(P<0.05),MAD活性明显低于生巴戟天组(P<0.05).结论生巴戟天与盐巴戟天水提物均能提高抗氧化能力,提高单胺类神经递质含量,起到改善老年痴呆小鼠学习记忆能力.盐巴戟天对老年痴呆小鼠学习记忆能力能改善作用显著优于生巴戟天.     

雄性大鼠海马多巴胺受体的增龄性改变

采用放射配基结合分析法初步观察了大鼠海马多巴胺(Dopamine,简称DA)受体的增龄性变化及腹腔注射使DA受体不可逆失活的EEDQ(N-乙氧羰基-2乙氧基-2双氧喹啉)后,DA受体的恢复情况.结果表明老年大鼠海马DA受体结合力较青年大鼠差异不明显,注射EEDQ后两者DA受体亲和力均明显降低,但恢复时青年大鼠恢复的速度快于老年鼠者.表明老年大鼠海马DA受体比青年大鼠更容易受到伤害,恢复也更困难,这些变化可能与老年期的一些表现及老年病的学习记忆紊乱有一定关系.     

急性有氧运动对成年男性单胺类神经递质代谢物含量变化的影响研究

研究急性有氧运动对成年男性单胺类神经递质代谢物含量变化的影响,在某健身俱乐部中选择20名成年男性作为研究对象,随机将其划分成对照组和运动组。要求运动组受试者利用功率自行车进行10 min中等强度的急性有氧运动,对照组受试者不进行任何运动,其他条件和运动组相同。和对照组相比,运动组受试者尿液中VMA和HVA含量均明显升高,差异具有显著性(P0.05)。运动组DA、Ad和NE水平随着急性有氧运动时间的增加呈上升趋势;而对照组DA水平随时间的增加无显著变化;运动组DA水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。运动组DA、Ad和NE代谢物水平随急性有氧运动时间的增加而逐渐增加,而对照组DA代谢物水平随时间的增加无显著性变化;运动组DA代谢物水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。运动组5-HT水平随着急性有氧运动时间的增加有所增加,对照组5-HT水平趋势也基本保持不变,运动组5-HT水平略高于对照组,但差异无统计学意义(P0.05)。运动组5-HT代谢物水平随急性有氧运动时间的增加有所增加,对照组5-HT代谢物水平随时间的增加无显著性变化,运动组5-HT代谢物水平略高于对照组,但差异无统计学意义(P0.05)。说明急性有氧运动能够增加成年男性CA代谢物含量,对5-HT的代谢没有影响,整体看来急性有氧运动有助于成年男性机体调节。     

嗜酸氧化亚铁硫杆菌的核糖-5-磷酸异构酶的同源建模研究

采用同源建模技术和分子动力学模拟方法,构建了嗜酸氧化亚铁硫杆菌Acidithiobacillus ferrooxidans(A.f)的核糖-5-磷酸异构酶(rpiA)基因编码的蛋白质三维分子结构模型。将结构模型进行绑定位点搜索并与底物核糖-5-磷酸(R5P)进行柔性分子对接,结果显示,R5P被招募到A.ferrooxidans的RpiA的活性位点并随后被激活;残基Asp81,Thr31,Lys121,Ser30,Glu103,Asp84,Lys94,Asp118,Lys7,Gly97,Gly29,Gly95,Thr28和H2O对底物绑定或催化起重要作用,其中,Gly97,Gly29,Gly95和Thr28是新识别的残基,它们在其他生物体的RpiA中相当保守但未被发现。     

印迹膜测序法分析结核分枝杆菌抗原蛋白

把WesternBlot技术分析抗原抗体反应的高度特异性与用PVDF膜作载体进行蛋白质氨基酸序列分析的高度敏感性相结合对结核分枝杆菌 (Mycobacteriumtuberculosis,TB)的特异性、保护性抗原进行筛选和分析鉴定 ,获得了分子量为 31KDa、30KDa的抗原 这两种抗原与抗结核分枝杆菌的单克隆抗体和结核病人血清均发生阳性反应 ,而与正常小鼠血清和健康人血清呈阴性反应 用印迹膜测序法测出 31KDa抗原蛋白的N 末端序列为AlaGluValAspTrpLeuValPheAlaValSerTrpProValGly ,30KDa蛋白序列为PheSerArgProGlyLeuProValGluTry 印迹膜测序为分子生物学研究提供了一种有效的新途径     

热应激下脑内单胺类神经递质及其受体对运动性中枢疲劳影响的研究进展

乙酰胆碱(Ach)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)等神经递质参与下丘脑的体温调节,其受体亚型的不同也有不同的调节作用。在高温环境中,多巴胺(DA)、5-HT、NE伴随大脑和核心体温的升高而增加。提高5-HTR2活性会引起体温升高,而提高5-HTR1A活性的则会引起体温降低,DAR1、DAR2两者协同作用于体温的降低。单胺类神经递质含量改变及平衡的破坏是导致运动性中枢疲劳发生的因素之一。热应激条件下机体大脑和核心温度升高,脑内热储备过多,导致中枢疲劳的发生,提高DA、NE的活性可抑制高温介导的中枢疲劳,改善热应激下运动能力,但未能证明在高温环境下长时间运动5-HT介导疲劳的特殊作用。     

脂肪酶基因结构和氨基酸序列的比较

采用PCGENE6 8软件系统对真菌脂肪酶基因和氨基酸序列进行了分析。真核生物中多数结构基因中含有内含子 ,但真菌脂肪酶基因几乎有一大半的是连续的 ;对于有内含子的基因 ,不同脂肪酶基因所含内含子数目各异。所有脂肪酶一级结构中都包含Gly X1 Ser X2 Gly保守序列 ,在真菌脂肪酶中该序列更保守 ;Ser、Asp/Glu和His3个氨基酸残基组成了真菌脂肪酶的活性中心 ;大多数真菌脂肪酶是糖蛋白 ,但也有一些不含糖基的脂肪酶 ,主要取决于脂肪酶一级结构中是否存在糖基化识别序列。     

Cloning and expression of a functional serotonin transporter from rat brain

Selective antagonism of serotonin (5-hydroxytryptamine, 5HT) and noradrenaline transport by antidepressants is a key element in the 'amine' hypothesis of affective disorders. Uptake and/or transport sites of 5HT have been reported to be reduced in platelets of patients suffering from depression and in post-mortem brain samples of depressed patients and suicide victims. To date there has been little molecular information available on the structure and regulation of 5HT transporters. Using the polymerase chain reaction with degenerate oligonucleotides derived from two highly conserved regions of the transporters for noradrenaline and gamma-aminobutyric acid (GABA), we have identified a large family of related gene products expressed in rodent brain. One of these products hybridizes to a single 3.7-kilobase RNA restricted to rat midbrain and brainstem, where it is highly enriched within the serotonergic raphe complex. Transfection with a single 2.3-kilobase brainstem complementary DNA clone is sufficient to confer expression of a Na(+)-dependent 5HT transporter upon nonneural cells, with transport selectively and potently antagonized by 5HT uptake-specific antidepressants, including paroxetine, citalopram and fluoxetine.     

补充谷氨酰胺对大鼠跑台运动后血、脑多巴胺和去甲肾上腺素的影响

本研究旨在通过补充不同剂量的谷氨酰胺(Gln)，观察大鼠力竭性运动应激时血清和脑内去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)的反应性。40只大鼠随机分为4组，分别灌服大、小剂量Gln、淀粉溶液和水，共20天。第20天，补充Gln和补淀粉的大鼠进行力竭性跑台运动，并在运动后即刻处死；补水大鼠直接处死。测定血、脑Gln、NE、DA水平。结果显示，补充Gln大剂量 运动组第10天血清Gln、DA、NE及处死时脑组织DA显性高于补淀粉 运动组：补充Gln大剂量 运动组第10天血清Gln、处死时血清NE显性高于补充Gln小剂量 运动组；补淀粉 运动组第10天血清Gln、DA和NE均显性低于安静对照组大鼠，但处死时脑组织Gln显性高于安静对照组。提示，补充淀粉和Gln均可能影响血脑NE和DA含量；补充Gln可能提高大鼠力竭性运动应激后脑组织对DA升高的耐受，并有维持NE平衡的作用，提高大鼠对运动应激的反应能力和中枢的耐受能力，且大剂量补充Gln效果较好。     

低频调制磁场对脑电节律的影响机理

神经细胞Ca2 内流及脑内5 HT、NE、DA等神经递质的变化影响了神经细胞放电速率,从而影响脑电节律.为揭示低频调制磁场对脑电节律产生影响的微观作用机理,检测了Wistar大鼠脑内神经递质的释放,电镜下观察了其神经突触形态的变化.实验结果显示,低频调制磁场作用引起大鼠脑内去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5 羟色胺(5 HT)释放显著增加(P<0.05),并观察到大鼠神经细胞内钙颗粒及释放神经递质的突触小泡数明显增加,提示低频调制磁场对人脑电节律的影响机理是其改变了Ca2 内流及脑内神经递质的释放量.