酶解时间对罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物抗氧化活性的影响

为了探究酶解时间对罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物抗氧化活性的影响,采用酸法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白,胃蛋白酶酶解3、6、9、12和24 h制备酶解物,进行紫外光谱扫描,水解度测定,以DPPH·、·OH和O2?·清除率为指标评价抗氧化活性.结果表明:最大紫外吸收峰相似,水解度与酶解时间呈正相关;9 h酶解物对三种自由基清除效果最好;罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物抗氧化活性与酶解时间有关,为罗非鱼鱼皮进一步加工利用提供理论依据.     

罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶法提取工艺及特性研究

采用单因素和正交试验优化了胃蛋白酶法提取罗非鱼鱼皮的酶解条件,并探究其溶解性能及保水性能。结果表明:酶解时间15 h、酶解温度50℃、料液比1:60、pH为2时,胶原蛋白提取率最高,为90. 3%,该法提取的胶原蛋白溶解性能及保水性能较好,且在酸性条件下溶解性能更好,可为胶原蛋白的进一步开发及应用提供理论依据。     

鲨鱼皮胶原蛋白肽成分分析

应用植物蛋白酶和动物蛋白酶来处理酶解鲨鱼皮,通过现代生物化学方法分离制备鲨鱼胶原蛋白肽,并对其组成成分进行分析,测定了它们的粗蛋白、粗脂肪、灰分、氨基酸及Cu、Zn、Fe、Ca 、Na、K、Pb等金属元素的含量.应用MALDI-TOF分析两种胶原蛋白肽分子量的分布范围.结果表明,植物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～3 ku区间,而用动物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～7 ku区间.     

酶解法提取草鱼鱼鳞胶原蛋白的工艺研究

对酶解法提取草鱼鱼鳞胶原蛋白的工艺进行了研究,以胶原蛋白提取率作为评价指标,选择选择酶解温度、pH值、加酶量、酶解时间作为考察因素,进行了正交试验,确定最佳的提取工艺方案为A2B2C3D1,即酶解温度30℃,pH值4,加酶量2％,酶解时间1h.在该条件下草鱼鱼鳞胶原蛋白提取率为92.28％.     

响应面法优化酶解提取鳊鱼鱼鳞胶原蛋白的工艺研究

采用响应面法对酶解提取鳊鱼鱼鳞胶原蛋白的工艺进行优化。在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken实验设计的原理,以酶解温度、pH值、酶解时间为自变量,以胶原蛋白含量为响应值进行响应面优化分析。结果表明:设定的3个影响鱼鳞胶原蛋白提取效果的因素,其影响大小依次为pH值酶解温度酶解时间;优化分析获得鱼鳞胶原蛋白的最佳工艺条件为:酶解温度31.32℃、pH值4.24、酶解时间1.95 h、加酶量1.5%,胶原蛋白的含量为883.64 mg/g。为了方便实际操作,将鱼鳞胶原蛋白的最优工艺条件修正为:酶解温度31℃,pH值4.2,提取时间2 h、加酶量1.5%,实际得到胶原蛋白含量为881.78 mg/g,实验结果与理论值基本吻合,说明模型的可靠性较高。     

梅花鹿茸中胶原蛋白提取制备工艺研究

本研究对梅花鹿茸不溶于任何中等极性溶剂的组分,选取木瓜蛋白酶对不溶性组分进行酶解提取制备梅花鹿茸胶原蛋白,通过单因素和正交试验以梅花鹿茸胶原蛋白提取率为指标确定最优酶解条件为:在10℃条件下,最适酶用量2%、PH值6.0、体积比1:20、酶解时间66h.按此条件提取得到的梅花鹿茸胶原蛋白提取率为54.59%。     

点带石斑鱼鱼皮和鳞片胶原蛋白的提取及理化性质的研究

以点带石斑鱼为原料,分别从鱼皮和鱼鳞中提取酸溶性胶原蛋白,并研究其纯度、热变性温度、溶解度等理化性质.结果表明:(1)鱼皮和鱼鳞中胶原蛋白的提取率分别为76.21%和2.50%;(2)经紫外可见光谱扫描、傅里叶转换红外光谱和氨基酸分析,确定所提取的胶原蛋白是Ⅰ型胶原蛋白,具有完整的三螺旋结构;(3)SDS-PAGE电泳测定证明鱼皮和鱼鳞胶原蛋白均含有α1、α2、β和γ链,α1、α2链的相对分子质量分别为2.79×105和2.87×105,纯度分别为91%和85%;(4)鱼皮、鱼鳞胶原蛋白的热变性温度分别为40.16和42.06℃;(5)等电点分别为7.12和7.15;(6)两者在酸性pH(2～4)时具有高的溶解度,并且当NaCl的质量浓度分别为10和20 g/L时,溶解度最高.     

日本黄姑鱼鱼皮免疫活性肽的酶解制备工艺研究

为研究日本黄姑鱼鱼皮免疫活性肽酶解工艺,以日本黄姑鱼鱼皮为原料,以小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的相对增殖率为评价指标,筛选最优酶种并考察pH、温度、时间、加酶量、液料比对小鼠巨噬细胞RAW264.7相对增殖率的影响。再经单因素实验,响应面分析法对其酶解工艺进行优化。结果表明,最优酶种和酶解条件为中性蛋白酶,pH 7.0,温度45.5℃,时间5.5 h,加酶量1 500 U·g-1,液料比10:1 (mL·g-1),所得酶解产物作用于RAW 264.7的相对增殖率为57.47%。本研究为日本黄姑鱼鱼皮的高附加值利用提供依据。     

从鸡骨中提取骨胶原的酶解工艺研究

以鸡骨为原料,研究了胃蛋白酶酶解提取骨胶原的工艺.原料先用乙醚脱脂,然后用0.5 mol/L的盐酸溶液处理24 h以除去杂质,再以乙酸溶液为酶解溶剂来提取骨胶原.研究结果表明,最佳酶解条件为:温度45℃,乙酸溶液浓度0.7 mol/L,酶解时间36 h.在此工艺条件下,胶原蛋白含量为63.98%,钙含量为39.07 mg/g.     

电感耦合等离子体发射光谱法测定不同来源胶原蛋白肽中Ca,P,Na及K元素的质量分数

采用密闭高压微波消解法联合电感耦合等离子体发射光谱法分别测定了市场占有率较高的猪皮、牛皮、及鱼皮等3种来源的胶原蛋白肽中K,Ca,P及Na元素的质量分数。结果表明:鱼皮来源的胶原蛋白肽中Ca,P及Na平均质量分数分别为14.05,10.10及63.81 mg/kg,高于猪皮及牛皮来源的胶原蛋白肽;牛皮来源的胶原蛋白肽中K元素平均质量分数为18.67 mg/kg,高于猪皮及鱼皮来源胶原蛋白肽;相同来源的胶原蛋白肽中K,Ca,P及Na元素分布跨度均较大。胶原蛋白肽因其来源和制备工艺的不同,其元素组成差异较大,作为原辅料在食品工业中选择应用时,建议进行矿物质质量分数的分析并批检。     

日本鳗鲡胰蛋白酶的分离纯化及性质分析

通过硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析、Phenyl-Sepharose疏水柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤柱层析等方法,从日本鳗鲡（Anguilla japonica）肝胰腺中分离纯化得到胰蛋白酶,SDS-PAGE显示其分子质量为21.5 ku。以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物,胰蛋白酶最适温度和最适pH值分别为40 ℃和8.5。动力学实验表明,Km值和kcat值分别为3.1 μmol/L和59.9 s-1。丝氨酸蛋白酶抑制剂Pefabloc SC、PMSF、benzamidine、STI等对其有特异抑制效果。底物特异性结果显示,该酶特异分解Arg和Lys残基的C端。肽质量指纹图谱获得5个片段,共76个氨基酸残基,与基因文库中的日本鳗鲡胰蛋白酶氨基酸序列完全相同。说明本研究所纯化的蛋白质为胰蛋白酶。     

龟皮胶原蛋白的提取及结构表征(Ⅰ)

采用酶法从乌龟皮中提取胶原蛋白,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法检测龟皮胶原蛋白多肽产品分子量的分布,并将龟皮胶原蛋白和Ⅰ型胶原蛋白样品进行液相色谱分析(HPLC),比较其氨基酸成分和含量.SDS-PAGE电泳结果分析表明龟皮胶原为Ⅰ型胶原蛋白,分子量约为288ku.龟皮胶原蛋白中,甘氨酸的含量最高,占总量的24.69%;其次是谷氨酸、精氨酸和丙氨酸,分别为9.95%、8.08%和9.31%;天冬氨酸、赖氨酸、丝氨酸、苏氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、酪氨酸等含量在5.58%～1.28%之间;组氨酸和蛋氨酸的含量最低,仅占0.79%和0.09%.由于龟皮胶原蛋白的含量高于Ⅰ型胶原蛋白,且与Ⅰ型胶原蛋白的氨基酸含量差异显著,因此,龟皮胶原蛋白可以作为一种重要的皮胶原进行开发和利用.     

魔芋葡甘聚糖降解产物对肌原纤维蛋白的冷冻保护作用

采用酸降解、β-葡聚糖酶水解、纤维素酶水解、辐照降解、微波辅助H2O25种方式降解魔芋葡甘聚糖.以草鱼肌原纤维蛋白为研究对象,比较了不同魔芋葡甘聚糖降解产物对冻藏过程中肌原纤维蛋白的冷冻保护效果,并对不同降解产物的冰点进行测定.实验结果表明：魔芋葡甘聚糖降解产物能有效地抑制草鱼肌原纤维蛋白在冻藏过程中的蛋白质变性,其中β-葡聚糖酶水解、纤维素酶水解和辐照降解的魔芋葡甘聚糖添加量为0.5%,抗冻效果略优于商用抗冻剂.同时,魔芋葡甘聚糖降解产物作为冷冻保护剂能降低水分子的冰点和融化热焓值.     

几种鱼肌肉蛋白的电泳分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对鲤鱼、草鱼、白鲫鱼、鲢鱼、罗非鱼及鲨鱼的肌肉蛋白做鉴别分析．实验采用4种不同抽提液对肌浆蛋白和肌原纤维蛋白进行提取．肌肉蛋白经电泳后以银染色或考马斯亮蓝染色并对蛋白质图谱作对比分析．根据蛋白质条带的数量、迁移率及浓度等特点，得出各鱼种间的相似性及差异性．结果表明，以SDS-PAGE电泳法可实现对水产食品原料品种的初步鉴别．     

鲤鱼胶原蛋白的过敏原性研究

以鲤鱼鱼皮为研究对象,通过碱溶、酸溶、NaCl盐析等方法从鱼皮中分离纯化得到了胶原蛋白.SDS-PAGE分析显示,鲤鱼胶原蛋白由分子质量约为120 ku和115 ku的2条α链（α1与α2）、分子质量约为250 ku的β链以及大分子质量的γ链组成.分析比较鲤鱼胶原蛋白与鲢鱼小清蛋白的基本性质,结果显示：2种蛋白质的pH...     

鹿皮胶原的提取与性质

采用酸法和酶法从东北特产梅花鹿鹿皮中提取胶原蛋白 ,对其中的水分、灰分、氮含量、微量元素及羟脯氨酸含量、分子量、氨基酸及饱湿性和吸水性进行测定 ,并与牛皮和猪皮的胶原进行比较     

猪血激肽原的分离纯化及其对白鲢鱼鱼糜的凝胶作用

以猪血为原材料,通过硫酸铵盐析和柱层析等方法,分离纯化出2种半胱氨酸蛋白抑制剂激肽原（kininogen）.激肽原Ⅰ的得率为0.7 %,纯化倍数为613.7;激肽原Ⅱ的得率为24.1 %,纯化倍数为295.7.SDS-PAGE结果表明,激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ的分子质量分别为58 ku和116 ku.激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ对白鲢鱼（Hypophthalmichthys molitrix）鱼浆中肌原纤维蛋白降解都有一定的抑制作用,当激肽原Ⅱ添加量为鱼浆质量的0.03 %时,可以使鱼糜凝胶强度提高24 %.因此,激肽原可作为添加剂有效提高鱼糜制品的凝胶强度     

海洋底泥环境DNA提取与纯化方法比较研究

为了探索有效的海洋底泥宏基因组DNA提取与纯化方法,分别采用CTAB结合SDS法、CTAB结合玻璃珠法、SDS结合蛋白酶K法和SoilMasterTM试剂盒法提取海洋底泥宏基因组DNA,用柱式腐殖酸清除试剂盒法与电洗脱法纯化宏基因组DNA,并对宏基因组DNA的产量与纯度进行评价.结果表明:SDS结合蛋白酶K法提取率最高,DNA片段完整;SoilMasterTM试剂盒法与CTAB结合SDS法次之;CTAB结合玻璃珠法有严重降解;电洗脱法可以得到高纯度、大于42kb宏基因组DNA片段.因此,SDS结合蛋白酶K法和电洗脱法提取纯化海洋近海底泥宏基因组DNA优于其他方法.     

枯草芽孢杆菌发酵鱼粉产蛋白酶及其酶解效果

为开发以鱼粉为原料的优质饲料蛋白源以及相关保健食品,开展了用不同鱼粉为氮源发酵枯草芽孢杆菌生产蛋白酶及其酶解效果的研究,比较了不同菌种的发酵效果,确定了最佳发酵时间.通过蛋白酶活性测定和氨基态氮含量测定分析了不同菌种的产酶能力和酶活性大小及其酶解效果.结果表明,用罗非鱼鱼粉和处理过的鳕鱼鱼粉发酵商业化的工业菌种枯草芽孢杆菌产生的酶活性显著高于鲢鱼鱼粉(P<0.05),发酵后上清液中的氨基态氮含量也显著高于鲢鱼鱼粉(P<0.05),即工业化的枯草芽孢杆菌对不同鱼粉的发酵效果不同,罗非鱼鱼粉和处理过的鳕鱼鱼粉发酵效果显著优于鲢鱼鱼粉.