茶多酚对小鼠小肠黏膜组织结构及5-羟色胺分泌的影响

目的:研究茶多酚(TP)对小鼠小肠黏膜组织结构及5-羟色胺(5-HT)分泌的影响.方法:昆明种小鼠28只,随机均分为A,B,C,D组.A组为对照组,以蒸馏水灌胃,剂量为0.20 mL/d;B,C,D组以茶多酚灌胃,剂量分别为0.50、1.00、2.00 mg/d,连续灌胃30 d.于第31 d取小鼠血清放免测定5-HT含量;取小鼠小肠以甲醛固定后制作石蜡切片,H-E染色示肠黏膜组织结构变化,免疫组化染色示肠黏膜内5-HT分泌细胞数量变化.结果:与A组相比,B,C,D组小鼠血液5-HT含量较低,小肠绒毛疏松,肠腺萎缩,黏膜内5-HT分泌细胞数量明显较少.结论:连续服用TP对小鼠小肠黏膜组织结构和5-HT分泌均有抑制性影响.     

小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞

利用免疫组化技术和甲苯胺蓝(TB)染色技术,对小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性细胞(5-HT+细胞)、肥大细胞(MC)和5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞(5-HT+MC)进行了研究.结果表明:小鼠胃肠中5-HT+细胞多分布于黏膜上皮细胞之间、腺泡上皮细胞之间和固有层内;MC多分布于黏膜层和黏膜下层结缔组织之中;小鼠胃和小肠中分别有49%和47%的MC与免疫组化染色的邻片中5-HT+细胞在位置上相对应,该部分MC为5-HT+MC;小鼠胃和小肠中分别有24%和20%的5-HT+细胞为MC.本文从形态学的角度证明了小鼠胃肠道MC可分泌5-HT,MC是消化道5-HT的来源之一.     

当归对宫内缺氧新生大鼠海马CA3区神经元的影响

探讨宫内缺氧对新生大鼠海马CA3区神经元的影响及当归注射液的保护作用.将孕期14 d的SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14 d开始每天一次经尾静脉注射生理盐水8 mL/kg(连续7 d),后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h(连续3 d:孕期第14 d、15 d、16 d);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.孕鼠分娩后立即取新生鼠大脑组织,常规石蜡切片,经神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)免疫组织化学染色后行图像分析.缺氧组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的积分光密度(Integrated Optical Density,IOD)值较对照组减少(IOD缺氧组:4.9±1.10;IOD对照组:6.2±1.59,P＜0.05);当归治疗组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组增加(IOD治疗组:6.9±2.60, P＜0.05).结论:一定程度的缺氧可刺激海马CA3区神经元变性;当归注射液对宫内缺氧新生大鼠海马CA3区神经元可能具有保护作用.     

支链氨基酸增强小鼠的游泳能力对其血氨和5-羟色胺变化的研究

目的探讨支链氨基酸（Branched-chain amino acids,BCAAs）对训练小鼠抗疲劳运动能力的影响。方法50只小鼠随机分为实验组（B1、B2、B3、B4）和对照组（C）。实验组分别灌胃补充BCAAs0.45、1.25、3.75和10g/kg.d,对照组灌胃生理盐水。各组小鼠5周递增负荷游泳训练后进行力竭游泳并取材。观察BCAAs对小鼠脑组织5-羟色胺（5-HT）、血氨（PA）和力竭游泳时间的影响。结果实验组小鼠血氨含量升高,脑组织匀浆中5-HT含量下降,但力竭运动游泳时间均显著延长。结果血氨浓度随剂量的增加而增大,C与B1组相比血氨水平无显著性差异,但明显低于B2、B3、B4组（P〈0.01）;C组小鼠5-羟色胺浓度显著高于实验组（P〈0.01）,实验组间随着补充剂量的增大5-羟色胺浓度减小;实验组小鼠力竭游泳能力明显强于对照组（P〈0.01）。实验组间,B2、B3组小鼠力竭时间明显长于B1组（分别为P〈0.05,P〈0.01）,B4组力竭时间与B1、B2、B3组相比则下降。结论BCAAs能够对抗运动性疲劳的发生发展,增强运动能力,但具有量效关系。     

家兔消化道5-HT免疫反应阳性肥大细胞

利用免疫组化技术和组织化学(甲苯胺蓝和中性红)技术,对家兔消化道5-HT免疫反应阳性细胞、肥大细胞(MC)进行了研究,并通过邻片法比较探讨了2种细胞的对应关系.家兔食管部呈免疫组化阴性反应,其余部位均有免疫反应阳性细胞;在胃和肠中5-HT阳性细胞多分布在粘膜上皮和固有层,MC主要分布在粘膜和粘膜下层结缔组织中.有18%～48%的MC与免疫组化染色的邻片中5-HT阳性细胞在位置上相对应,它们为5-HT阳性MC,有7%～20%的5-HT免疫反应阳性细胞为MC.结果表明家兔消化道中有分泌5-HT的MC,MC是消化道5-HT的来源之一.     

C57Black／6小鼠全脑缺血后海马神经元损伤的研究

目的:C57black/6小鼠采用双侧颈总动脉夹闭的方法制造全脑缺血模型并进行研究,为这种新的模型在脑缺血研究中的应用提供试验依据.方法:双侧颈总动脉夹闭10 min及30 min诱发全脑缺血模型,术后28 d处死小鼠,制作石蜡切片进行HE染色;术后1 d,3 d,5 d,7 d处死小鼠,制作冰冻切片进行TUNEL及PI免疫染色.结果:在全脑缺血中,10 min组和30 min组小鼠海马CA1区均存在神经细胞受损现象,30 min组神经受损情况严重,30 min组海马CA1区锥体细胞存在明显的凋亡和坏死两种死亡形式.结论 30min全脑缺血更易于引起C57Black/6小鼠海马CA1区神经细胞坏死,30 min全脑缺血试验动物模型更能模拟临床脑缺血.     

复方中药对流感病毒 A / PR / 8 / 34( H1N1)感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响

摘要:目的 观察复方中药对流感病毒 A / PR / 8 / 34( H1N1) 感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响。 方法 90只 BALB / c 小鼠随机分为 6 组,每组 15 只,分别为空白对照组、模型对照组、盐酸金刚烷胺对照组( 100 mg / kg) 、复方中药高剂量组(1. 5 g / kg) 、中剂量组(0. 75 g / kg)与低剂量组(0. 375 g / kg)组。 中药组连续灌胃 2 d 后,空白对照组滴鼻生理盐水,其他 5 组小鼠滴鼻流感病毒感染建立流感病毒小鼠模型,模型建立 4 h 后空白对照组和模型对照组灌胃去离子水,药物组灌胃不同剂量药物,连续 5 d。 灌胃结束后无菌取血,小鼠安乐死,取胸腺和脾脏,计算胸腺指数和脾脏指数;采用 MTT 测定各组的 T、B 淋巴细胞转化率;ELISA 检测肺组织中的细胞因子 IL-6、IL-10、TNF-α 和 IFN-γ 水平。 结果 与空白对照组相比,模型对照组胸腺指数和脾脏指数,T、B 淋巴细胞 A 值, IL-10 和 IFN-γ显著下降, TNF-α 和 IL-6 显著升高( P<0. 01) ;与模型对照组相比,复方中药中剂量组胸腺指数和脾脏指数,T、B 淋巴细胞 A 值,IL-10 和复方中药高剂量组 IFN-γ 显著增高,复方中药中剂量组 IL-6 显著下降( P < 0. 05) ,复方中药中、低剂量组 TNF-α 显著下降,IFN-γ 显著升高( P<0. 01) 。 结论 复方中药通过调节机体淋巴细胞功能和细胞因 子分泌水平,从而改善肺部炎症,是治疗病毒性流感的作用机制之一。     

核因子-кB与窒息新生鼠缺氧缺血性脑损伤相关性研究

[目的]观察新生鼠窒息后不同时间段脑组织NF-кB动态变化,以探讨NF-кB信号途径在新生鼠窒息后缺氧缺血性脑损伤中的作用.[方法]出生7 d新生鼠随机分为对照组(A组)和窒息组(B组);制备新生鼠窒息模型,并于窒息后1、3、5和7 d取脑组织行石蜡切片.采用免疫组织化学方法检测窒息新生鼠脑组织NF-KB p65活性表达水平.[结果]窒息组各组脑组织NF-кB的表达均较A组显著增强(P＜0.05),以5 d时升高最明显,并伴有神经细胞坏死及凋亡现象.[结论]NF-кB可能通过炎症反应机制介导窒息后脑损伤过程.     

蛹虫草菌丝对高血脂调节作用的研究

探讨蛹虫草菌丝对高血脂小鼠调节血脂的作用,135只KM小鼠随机分为9组(n=15只/组):正常对照组、高脂模型组、阳性对照组、加热和不加热蛹虫草菌丝液组(低0.14 g/kg·bw/d、中0.28 g/kg·bw/d、高0.56 g/kg·bw/d). 除正常对照组灌胃等容积的蒸馏水外,其它组均每天早上灌胃高脂乳剂16.5 mL/kg,晚上灌胃给予不同的受试物(33.0 mL/kg),实验持续21 d. 每7 d称量小鼠体质量1次,实验第0天、7天、14天剪尾取血检测血清胆固醇(TC),实验第21天摘眼球取血后解剖小鼠,检测血清TC、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并计算低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝指数. 结果表明:实验第21天,加热和不加热的蛹虫草菌丝液组和金水宝阳性对照组均显著降低高血脂小鼠血清TC和TG水平(P<0.05),并显著降低小鼠肝指数(P<0.01).     

板蓝根多糖对缺乳仔鼠十二指肠形态学的影响

为研究板蓝根多糖对缺乳仔鼠肠道形态的影响,将刚出生的仔鼠,根据不同处理方法分为4组:对照组不做处理,正常饲养;其余3组每天分别灌注0.9%生理盐水、20 mg/kg板蓝根多糖、40 mg/kg板蓝根多糖.在仔鼠0、7、14、21、28日龄时分别取样.通过大体解剖技术、常规石蜡切片、HE染色等方法,经Moticom成像系统测量不同组别仔鼠十二指肠的绒毛长度和隐窝深度,计算V/C值.结果显示:0～21日龄仔鼠使用中浓度板蓝根多糖灌胃可以使其十二指肠绒毛长度显著性增长,隐窝深度降低,V/C值增大;21～28日龄仔鼠高浓度板蓝根多糖灌胃可使其十二指肠绒毛长度显著性增长,隐窝深度降低,V/C值增大;对照组和0.9%生理盐水灌胃组十二指肠的绒毛长度和隐窝深度变化不大,V/C值亦无明显增大.可得结语,板蓝根多糖可以促进缺初乳仔鼠小肠形态发育,使其十二指肠绒毛长度显著性增长,隐窝深度降低,V/C值增大,且板蓝根多糖对缺初乳仔鼠小肠形态发育的促进作用随其日龄增加而增加.     

开口箭醇提物抗慢性咽炎活性研究

观察开口箭醇提物治疗慢性咽炎的大鼠血清IL-1β及TNF-α等指标变化,以进一步探讨其治疗机理.将48只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、开口箭醇提物低、中、高剂量组和阳性组(西瓜霜组),每组8只,采用浓氨水喉头喷雾诱发的大鼠急性咽炎模型,于第40～47天分别用喉头喷雾器给大鼠咽部喷蒸馏水、低剂量开口箭醇提物(0.16g/kg)、中剂量开口箭醇提物(0.24g/kg)、高剂量开口箭醇提物(0.32g/kg)、西瓜霜含片液(1.40g/kg).实验第47d取6组动物的股静脉血检测白细胞和粒细胞数目、IL-1β及TNF-α含量;同时,取咽部粘膜及粘膜下组织分成两份分别进行病理形态学观察.结果显示开口箭醇提物均能有效降低模型大鼠血液白细胞和粒细胞数目、IL-1β及TNF-α含量,改善模型大鼠咽部组织病理形态.说明开口箭醇提物在缓解咽部炎性症状、改善咽部病理组织形态方面,具有独特优势.     

北五味子木脂素抗焦虑作用及机制的研究

目的研究北五味子木脂素(Schisandra Chinensis Baill Lignans,SCL)抗焦虑的作用及机制.方法采用明暗箱试验和高架十字迷宫试验,观察北五味子木脂素低、中、高剂量(35,70,140 mg/κg)灌胃给药7 d后对小鼠行为的影响;另设空白对照组(给予生理盐水)和地西泮(2 mg/κg)阳性对照组.用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清γ-氨基丁酸(GABA)的含量.结果明暗箱试验和高架十字迷宫试验结果显示:北五味子木脂素中、高剂量组具有显著的抗焦虑作用(P0.05),并呈剂量依赖关系,这种抗焦虑作用可被氟马西尼所拮抗.酶联免疫吸附试验显示:中、高剂量组小鼠血清中γ-氨基丁酸(GABA)的含量显著增高.结论北五味子木脂素有显著的抗焦虑作用,其机制可能是通过γ-氨基丁酸受体(γ-aminobutyric acid,GABA-R)而发挥作用.     

开口箭均一多糖 TCP-C1-1的结构分析及其生物活性

该文从开口箭根茎部位提取分离开口箭多糖TCP-C1-1，确定其结构并对其生物活性进行研究.实验采用水提醇沉法从开口箭根茎部分离提取多糖，通过Sevage法对80%醇沉部位TCP-C进行纯化，采用DEAE-52 纤维素离子交换树脂和葡聚糖凝胶Sephadex G-200 从TCP-C中进行分离纯化得到多糖TCP-C1-1，采用高效凝胶色谱，TLC薄层层析，红外光谱核磁共振氢谱碳谱等技术对多糖TCP-C1-1结构进行分析.结果分析，从开口箭中分离纯化得到 TCP-C1-1 多糖为果糖组成的均一多糖，连接方式其为β-(2→1)连接，相对分子质量为1.52×104.TCP-C1-1具有良好的生物活性，在浓度为2 mg·mL－1时，其自由基清除率可以达到63.3%.在浓度为6.5 mg·mL－1时，其对α-糖苷酶的抑制率可以达到78.6%.在浓度为1.5 μg·mL－1时，其可以明显促进小鼠单核巨噬细胞 RAW 264.7 的增殖(p＜0.05)，并能明显抑制LPS诱导小鼠单核巨噬细胞 RAW 264.7细胞释放出的 NO.TCP-C1-1为首次从开口箭中分离得到的天然来源的菊粉类果聚糖，为初步研究为开口箭多糖成分的开发提供了一定参考.     

高效液相色谱法测定开口箭药材中绿原酸含量

以体积分数50%的甲醇溶液为溶剂,用超声提取法从开口箭药材中提取绿原酸,用高效液相色谱法检测提取液中绿原酸含量。提取条件为:超声功率240 W,超声频率40 kHz,提取温度60℃,超声提取30 min。色谱条件为:色谱柱为Inertsil ODS-3C18(4.6 mm×150 mm,5μm)柱,以乙腈-0.4%磷酸水溶液(体积比9∶91)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长327 nm,柱温30℃。绿原酸在0.255³.06μg/mL范围内与峰面积呈现良好的线性关系,y=31 388x+152.43(R2=0.999 9),平均加样回收率99.4%,RSD为2.12%(n=3)。检测结果表明,不同产地开口箭药材中绿原酸的含量有一定的差异,其变化范围在32.843.06μg/mL范围内与峰面积呈现良好的线性关系,y=31 388x+152.43(R2=0.999 9),平均加样回收率99.4%,RSD为2.12%(n=3)。检测结果表明,不同产地开口箭药材中绿原酸的含量有一定的差异,其变化范围在32.84⁶.62μg/g。该方法简便、准确、重复性好,可用于开口箭药材的质量控制。     

五味子淫羊藿混合物提取工艺及其抗疲劳作用研究

目的研究五味子与淫羊藿混合提取物(mixed Schisandra-Epimedium extract,MSEE)的最佳提取工艺,并观察其抗疲劳功效.方法采用加热回流提取法对五味子、淫羊藿进行混合提取,用正交实验法观察乙醇浓度(65%,70%,75%)、提取温度(60,65,75℃)、提取时间(1,1.5,2 h)及料液比(1∶10,1∶14,1∶18)对提取工艺的影响,并对提取物中五味子醇甲及淫羊藿苷含量进行分析,从中优选出最佳提取工艺.选取雄性ICR小鼠80只,随机分成空白对照组及150,300和600 mg/kg MSEE组,每组20只.给药30 d后,每组随机选取10只小鼠进行力竭游泳实验,记录小鼠力竭游泳时间.其余10只小鼠游泳90 min后处死,取血及肝组织,检测血清尿素氮及肝糖原水平.结果五味子与淫羊藿混合提取物最佳提取工艺:乙醇浓度为70%,提取温度为75℃,提取时间为1.5 h,料液比为1∶14.与空白对照组比较,300和600 mg/kg MSEE组小鼠力竭游泳时间均明显延长(P0.01);300和600 mg/kg MSEE组小鼠的血清尿素氮水平明显降低,而肝糖原水平则明显升高(P0.05或P0.01).结论得到MSEE最佳提取工艺,MSEE具有抗疲劳作用,可为开发具有抗疲劳功能的保健食品提供依据.     

开口箭根茎中甾体类化合物的研究

目的：研究开口箭根茎中甾体成分,寻找新的抗肿瘤活性物质.方法：运用反相常压柱色谱和制备高效液相对其甾体成分进行分离,通过理化性质和波谱分析方法鉴定其结构.结果：从开口箭根茎的乙醇提取物中分离得到6个甾体皂苷及2个甾体皂苷元,其结构分别为1β,2β,3β,4β,5β-五羟基-螺甾-△25（27）-烯-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）,1β,3β-二羟基-5β-孕甾-△16（17）-烯-20-酮-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）,1β,2β,3β,4β,5β,6β,7α-七羟基-5β-呋甾-△25（27）-烯（3）,1β,2β,3β,4β,5β,7α-六羟基-6-氧化-螺甾-△25（27）-烯（4）,3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25S）-1β,3β,5β,26-四羟基-5β-呋甾-△20（22）-烯-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）,3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25S）-1β,3β,5β,22α,26-五羟基-5β-呋甾-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）,3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25S）-1β,3β,26-三羟基-5β-呋甾-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）和3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25R）-1β,3α,26-三羟基-△5（6）-烯-5β-呋甾-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）.结论：化合物1和2为首次从该属植物中获得.     

绒白乳菇中提取的乳菇菌素-D免疫抑制作用的研究

研究从绒白乳菇菌中分离出的一种新型倍半萜类化合物-乳菇菌素D的免疫抑制作用及机制。运用体外培养法取BALB/C小鼠脾细胞,研究乳菇菌素D对静止脾细胞、Con A(刀豆蛋白A)和LPS(脂多糖)刺激后的脾细胞(含B淋巴细胞和T淋巴细胞)增殖的抑制作用;运用MTT法经酶标仪检测吸光度,并计算刺激指数(stimulating index,SI);体外培养小鼠脾细胞,运用ELISA检测法观察乳菇菌素D对脾脏中T淋巴细胞分泌IL-2的抑制作用。结果显示该化合物对静止的脾细胞无抑制作用;对Con A和LPS刺激后的脾细胞增殖有显著抑制作用(P0.05),最大浓度药物组刺激指数SI低至0.28;高浓度的乳菇菌素D对Con A刺激的小鼠脾细胞产生的IL-2,具有显著抑制作用(P0.05)。结果显示乳菇菌素D通过抑制抗原刺激后的T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖、抑制其分泌细胞因子,从而发挥免疫抑制作用。研究结果将为开发以乳菇菌素D为母体、经结构修饰、安全低毒的免疫抑制剂提供理论基础。     

2型糖尿病患者胰岛素样生长因子1水平及相关影响因素

为了探讨2型糖尿病(T2D)患者外周血血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平与糖脂代谢水平的关系,分析T2D患者血清IGF-1的相关影响因素。通过选取2010年5月～2012年1月就诊于内蒙古医科大学附属医院、内蒙古中医院内分泌科的179例T2D住院患者作为病例组(T2D组),另选取30例内蒙古医科大学体检中心正常健康体检者作为对照组(CK组)。采集研究对象空腹外周血,应用ELISA法检测血清IGF-1水平;检测T2D患者生化血脂指标和糖代谢指标水平,利用调查问卷收集研究对象的一般资料、行为习惯和体格检查,计算体质指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感性指数(HOMA-IS)。将T2D组患者IGF-1水平按照第25、75百分位数分为低IGF-1水平组(B组)、中IGF-1水平组(C组)和高IGF-1水平组(D组),CK组为对照组(A组)进行比较的方法,研究IGF-1水平与以上指标的相关性。结果表明:T2D组与CK组IGF-1水平差异显著(P 0. 01)。A组、B组、C组和D组比较中,年龄、性别、吸烟史、饮酒史、运动情况及BMI差异显著(P 0. 05);空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2PPBS)和糖化血红蛋白(Hb Alc)差异有统计学意义;三组载脂蛋白A(Apoal)均与对照组差异显著,D组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与A组相比差异有统计学意义。相关性分析显示,血清IGF-1水平与运动情况(Spearman铁相关系数为0. 23,P=0. 001)存在关联。以IGF-1浓度为因变量的多因素Logistic回归分析中,血清IGF-1水平与胰岛素敏感性、年龄、BMI和Apoal、FPG、空腹胰岛素(FINS)及Hb Alc的交互作用正相关,与HDL-C负相关。可见胰岛素敏感性、年龄、BMI及Apoal、FPG、FINS与Hb Alc的交互作用可能为IGF-1水平的独立危险因素,HDL-C可能为独立保护因素。     

孕鼠子宫内5-HT免疫反应阳性肥大细胞的研究

以正常孕鼠和自然抗着床鼠的子宫为实验材料,采用组织化学和免疫组织化学技术,研究了小鼠子宫肥大细胞(mast cell,MC)在胚泡着床前后(孕3~7 d)表达5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的状况.结果表明:(1)绝大多数子宫MC为5-HT免疫反应阳性,阳性率在77.3%~93.6%之间;(2)自然抗着床鼠的5-HT阳性率显著高于正常孕鼠(P<0.05).实验结果提示:(1)子宫MC是孕鼠子宫内5-HT的重要来源,5-HT在着床过程中可能具有免疫调节作用;(2)子宫内MC表达5-HT量的异常与抗着床现象的发生有一定的关系.