开口箭对小鼠5-羟色胺分泌的影响

目的:采用灌胃、石蜡切片、免疫组化染色和ELISA等方法,探讨开口箭对小鼠5-羟色胺(5-HT)分泌的影响.方法选取20²2g健康昆明小鼠20只,均分成A,B,C,D 4组,分别以蒸馏水和0.25、0.50、1.00mg/mL的开口箭灌胃,0.20mL/次/d,连续灌胃7d.第8d对全部小鼠摘眼球取血,ELISA检测血清5-HT质量浓度;取血后立即处死小鼠,取十二指肠,4%甲醛固定,石蜡切片,免疫组化染色,镜下统计5-HT阳性细胞数量.结果与A组相比,B,C,D组小鼠血液5-HT质量浓度逐渐降低,十二指肠肠壁组织中5-HT阳性细胞数也明显减少.结论开口箭会下调小鼠5-HT的分泌.     

小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞

利用免疫组化技术和甲苯胺蓝(TB)染色技术,对小鼠胃肠道5-羟色胺免疫反应阳性细胞(5-HT+细胞)、肥大细胞(MC)和5-羟色胺免疫反应阳性肥大细胞(5-HT+MC)进行了研究.结果表明:小鼠胃肠中5-HT+细胞多分布于黏膜上皮细胞之间、腺泡上皮细胞之间和固有层内;MC多分布于黏膜层和黏膜下层结缔组织之中;小鼠胃和小肠中分别有49%和47%的MC与免疫组化染色的邻片中5-HT+细胞在位置上相对应,该部分MC为5-HT+MC;小鼠胃和小肠中分别有24%和20%的5-HT+细胞为MC.本文从形态学的角度证明了小鼠胃肠道MC可分泌5-HT,MC是消化道5-HT的来源之一.     

双酚A对小鼠肠道黏膜结构影响的观察

为检测双酚A（BisphenolA）对小鼠小肠结构的影响,选用50只30g左右雌雄不拘,但同品系的昆明小白鼠作为试验对象。将小鼠随机分为5组,分别为双酚400、300、225mg/kg体重组、空白对照组和溶剂对照组。各组按0.1mL/100g体重灌喂小鼠。于给药后第6天全部处死,取十二指肠和空肠进行固定,用H.E.染色观察肠黏膜结构,并检测肠黏膜绒毛长度和宽度。同时,计数上皮内杯状细胞（GC）的数量变化;用Gomori氏改良法检测肠黏膜碱性磷酸酶（AKP）活性的变化。结果表明：各试验组小鼠空肠绒毛长度和宽度明显低于对照组,且差异显著（P〈0.05）;各试验组小鼠十二指肠和空肠黏膜上皮内杯状细胞（GC）的数量均显著低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;各试验组小鼠十二指肠和空肠黏膜单位面积内AKP阳性物所占面积的百分比均显著低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）。由此推断双酚A对小鼠小肠黏膜结构有一定的损害作用,可能会影响其消化吸收功能。     

支链氨基酸增强小鼠的游泳能力对其血氨和5-羟色胺变化的研究

目的探讨支链氨基酸（Branched-chain amino acids,BCAAs）对训练小鼠抗疲劳运动能力的影响。方法50只小鼠随机分为实验组（B1、B2、B3、B4）和对照组（C）。实验组分别灌胃补充BCAAs0.45、1.25、3.75和10g/kg.d,对照组灌胃生理盐水。各组小鼠5周递增负荷游泳训练后进行力竭游泳并取材。观察BCAAs对小鼠脑组织5-羟色胺（5-HT）、血氨（PA）和力竭游泳时间的影响。结果实验组小鼠血氨含量升高,脑组织匀浆中5-HT含量下降,但力竭运动游泳时间均显著延长。结果血氨浓度随剂量的增加而增大,C与B1组相比血氨水平无显著性差异,但明显低于B2、B3、B4组（P〈0.01）;C组小鼠5-羟色胺浓度显著高于实验组（P〈0.01）,实验组间随着补充剂量的增大5-羟色胺浓度减小;实验组小鼠力竭游泳能力明显强于对照组（P〈0.01）。实验组间,B2、B3组小鼠力竭时间明显长于B1组（分别为P〈0.05,P〈0.01）,B4组力竭时间与B1、B2、B3组相比则下降。结论BCAAs能够对抗运动性疲劳的发生发展,增强运动能力,但具有量效关系。     

复方中药对流感病毒 A / PR / 8 / 34( H1N1)感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响

摘要:目的 观察复方中药对流感病毒 A / PR / 8 / 34( H1N1) 感染小鼠淋巴细胞功能和细胞因子的影响。 方法 90只 BALB / c 小鼠随机分为 6 组,每组 15 只,分别为空白对照组、模型对照组、盐酸金刚烷胺对照组( 100 mg / kg) 、复方中药高剂量组(1. 5 g / kg) 、中剂量组(0. 75 g / kg)与低剂量组(0. 375 g / kg)组。 中药组连续灌胃 2 d 后,空白对照组滴鼻生理盐水,其他 5 组小鼠滴鼻流感病毒感染建立流感病毒小鼠模型,模型建立 4 h 后空白对照组和模型对照组灌胃去离子水,药物组灌胃不同剂量药物,连续 5 d。 灌胃结束后无菌取血,小鼠安乐死,取胸腺和脾脏,计算胸腺指数和脾脏指数;采用 MTT 测定各组的 T、B 淋巴细胞转化率;ELISA 检测肺组织中的细胞因子 IL-6、IL-10、TNF-α 和 IFN-γ 水平。 结果 与空白对照组相比,模型对照组胸腺指数和脾脏指数,T、B 淋巴细胞 A 值, IL-10 和 IFN-γ显著下降, TNF-α 和 IL-6 显著升高( P<0. 01) ;与模型对照组相比,复方中药中剂量组胸腺指数和脾脏指数,T、B 淋巴细胞 A 值,IL-10 和复方中药高剂量组 IFN-γ 显著增高,复方中药中剂量组 IL-6 显著下降( P < 0. 05) ,复方中药中、低剂量组 TNF-α 显著下降,IFN-γ 显著升高( P<0. 01) 。 结论 复方中药通过调节机体淋巴细胞功能和细胞因 子分泌水平,从而改善肺部炎症,是治疗病毒性流感的作用机制之一。     

水苏碱对葡聚糖硫酸钠诱导的炎性肠病的保护作用及其机制

为了研究水苏碱(stachydrine,Sta)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的炎性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的保护作用及其机制.将42只同一批次、体重无明显差异的雄性C5 7BL/6J小鼠随机分为7组,即对照组(control)、模型组(model)、地塞米松(dexamethasone,DXM)组、水苏碱低中高剂量组(Low-Sta,Mid-Sta,High-Sta)以及水苏碱毒性组(Sta toxicity),每组6只.模型组、地塞米松组和水苏碱低中高剂量组采用DSS水溶液(0.03 g/mL)代替正常饮水进行造模,对照组和水苏碱毒性组采用正常饮水喂养.同时DXM组每天灌胃地塞米松水溶液(1 mg/kg),水苏碱低中高剂量组每天分别灌胃水苏碱水溶液(5、10和20 mg/kg),模型组和对照组每日灌胃等量的生理盐水,水苏碱毒性组每天灌胃高剂量(20 mg/kg)的水苏碱水溶液.7 d后处死小鼠,取各组小鼠结肠测量长度并进行苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin,HE)和高碘酸希夫氏染色(periodic acid schiff reagent staining,PAS),观察结肠组织的病理改变以及对照组和水苏碱毒性组肝肾的病理变化;采用蛋白印迹技术(Western Blotting,WB)检测结肠组织中炎症相关蛋白白介素6(IL-6),核因子-κB(NF-κB)和氧化应激相关蛋白如核转录因子2(NRF2)、血红加氧酶1(HMOX1)、醌氧化还原酶1(NQO1)和闭合蛋白(occludin)及膜周蛋白(zonula occludens,ZO)的表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中IL-6,IL-17a和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的含量;采用流式细胞术检测结肠细胞中活性氧(ROS)阳性细胞的比例.结果显示:水苏碱毒性组小鼠的肝肾及小肠的HE染色结果与对照组相比未见灶性坏死,未见明显纤维化,未见细胞结构破坏及炎症,没有明显差别;与对照组比较,模型组小鼠的结肠长度明显缩短,并且HE结果显示模型组小鼠的肠隐窝结构破坏严重,黏膜下层出现明显的水肿以及炎细胞的浸润,PAS结果显示出模型组的糖蛋白含量显著降低,而在地塞米松和水苏碱处理后上述症状出现了明显的好转;ELISA结果显示,相较于对照组,模型组小鼠血清中的IL-6,IL-17a和TNF-α等促炎因子的含量显著增高(P＜0.001),相较于模型组,地塞米松组和低中高剂量水苏碱组的促炎因子的含量显著降低(P＜0.05).WB结果显示,水苏碱可显著缓解因DSS诱导所致的结肠中IL-6和NF-κB蛋白含量升高,并同时提高了NRF2,HMOX1,NQO1,Occludin和ZO-1蛋白的表达量;流式细胞术检测ROS结果显示,相较于对照组,模型组的ROS阳性细胞比例显著增高,但在地塞米松和低中高剂量的水苏碱处理后,ROS阳性细胞的比例均明显降低(P＜0.05),具统计学意义.以上结果表明,水苏碱可能通过抑制炎症因子的表达和抗氧化应激来缓解DSS诱导的小鼠炎性肠病.     

白藜芦醇对辐射损伤后小鼠肠粘膜免疫屏障的保护作用

探讨白藜芦醇对受60Co γ线照后小鼠肠粘膜免疫屏障的保护作用.方法: 选用BALB/c雄性小鼠90只,用8Gy 60Co γ射线进行全身一次性照射,照射前2 h 白藜芦醇组灌服给药1 次,分别于照后1、2、3d麻醉后解剖,取全小肠,制备肠粘液,测定免疫球蛋白sIgA(Secreted immunoglobulin A,分泌型免疫球蛋白A)含量;取肠系膜淋巴结,测定淋巴细胞凋亡指数;取门静脉血,测定内毒素含量.结果:白藜芦醇可明显减少受照后小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞的凋亡,提高肠粘液中免疫球蛋白sIgA的含量,降低门静脉血中内毒素含量.结论:白藜芦醇对受60Co γ线照射后的小鼠肠粘膜免疫屏障有明显的保护作用,能抑制肠道细菌移位和肠内内毒素的吸收.     

奶牛抗热应激中草药添加剂对小鼠热耐力的影响

对奶牛抗热应激中草药添加剂对热应激小鼠机体耐力的影响进行试验研究.实验分为3部分,即高温致死试验、游泳试验和耐缺氧试验.试验的小鼠分为A、B、C、D4个处理,分别喂以不同添加剂浓度的饲料21d(A组:0.5g/10g体重、B组:0.25g/10g体重、C组:0.13g/10g体重、D组:0g/10g体重),每日光暗节律各12h,自由摄食与饮水.试验结果表明,A、B组体重增加显著高于C、D组(P<0.01),A、B、C组小鼠死亡数显著少于D组(P<0.05),受热90min后,A、B、C组小鼠肛温比D组分别低0.3℃、0.3℃、0.5℃(P<0.05),说明该添加剂具有一定的提高小鼠热耐力作用.     

结核分支杆菌Ag85B DNA疫苗构建、免疫原性及其保护效力

构建结核分支杆菌分泌蛋白Ag85B编码基因的DNA疫苗,研究其免疫原性和保护效力.构建该DNA疫苗并经鉴定后,应用Qiagen试剂盒大量纯化无内毒素的质粒DNA.将C57BL/6小鼠随机分为4组,分别3周间隔3次用生理盐水（A）、载体质粒（B）、卡介苗（C）、Ag85B DNA疫苗（D）免疫小鼠,通过ELISA方法检测血清中抗Ag85B抗体及其亚型.第三次免疫后28 d用结核分支杆菌H37Rv攻击,观察小鼠体重变化,攻击4周后检测细胞因子IFN-γ、IL-12,进行肺组织病理检查及菌落计数等.经Ag85B DNA疫苗免疫的小鼠特异性抗体IgG均显著高于对照组,而且IgG2b均高于IgG1和IgG2a.结核分支杆菌攻击后各组小鼠体重变化呈现不同趋势,A、B组小鼠体重从第3周开始下降;C组体重总体呈上升趋势;D组体重第2周开始下降,之后维持不变.MTT法检测脾淋巴细胞增殖实验中D组的刺激指数显著高于其它组;D组小鼠脾淋巴细胞转化率也显著高于A、B组.肺组织菌落计数C组最低,其次是D组.大体病理结果显示C组和D组肺组织病变较A、B组轻.A、B组肺泡腔内有较多渗出液,肺泡壁充血、水肿.C组肉芽肿数目最多.上述结果表明Ag85B DNA疫苗具有较强的免疫原性,呈TH1型细胞介导的免疫应答.Ag85B DNA疫苗的免疫保护效力不如BCG,有待进一步研究其应用价值.     

热应激对猪肠道结构及功能的影响

观察热应激对猪肠道黏膜结构的损伤作用,以揭示热应激降低猪增重率的机理.12头小型猪随机分成热应激组和常温对照组两组.人工气候室内,热应激组模拟夏季炎热气候,气温从26～39℃24 h循环变温,在39℃时维持4 h;常温对照组在24℃下饲养.试验持续10 d,分别于热应激前、热应激第5 d和热应激结束时称重,计算各组的体重增长率.热应激10 d后39℃高温持续期结束时剖杀试验猪,取其十二指肠、空肠及回肠进行固定、石蜡切片、染色,染色和扫描电镜H.E.染色切片观察肠黏膜形态变化,并检测肠绒毛长度、宽度、隐窝深度,绒毛长度/隐窝深度;PAS染色切片检测肠黏膜上皮内杯状细胞数量的变化;用Gomori氏改良法染色切片观测肠黏膜碱性磷酸酶活性的变化.与对照组相比较,热应激组猪的体重增长率显著下降(P<0.05);热应激后猪肠黏膜结构严重损伤;各段肠的绒毛长度、宽度、隐窝深度,绒毛长度/隐窝深度均出现不同程度的降低,其中回肠绒毛长度减少较为显著(P<0.05),各肠段绒毛宽度的减少均差异显著(P<0.05);肠黏膜上皮内杯状细胞数量增多,其中回肠差异显著(P<0.05);热应激组猪的肠黏膜上皮细胞表面的碱性磷酸酶活性明显降低.热应激可引起猪肠道黏膜结构严重损伤,以致小肠的消化吸收功能严重受阻,这是造成猪热应激掉膘减重的主要机制之一.     

猕猴大肠5-羟色胺免疫活性细胞的免疫组织化学研究

以免疫组织化学ＳＰ法显示猕猴大肠含５－ ＨＴ的细胞,并用Ｗｅｉｂｅｌ体视学方法对其进行了定量分析．结果表明,猕猴大肠５－ ＨＴ免疫活性内分泌细胞的密度在结肠离心段最高,直肠密度中等,盲肠和结肠向心段最低．５－ ＨＴ免疫反应阳性细胞多分布在肠腺处,其形态多样,大多为锥形、梭形、圆形等．有些细胞的基底部有突起,突起的末端含有５－ ＨＴ阳性物质;有些细胞的５－ ＨＴ阳性物质释放到腺腔或肠腔面．     

部分肝切除大鼠肠腔细菌数量的变化及其对肠道5-HT分泌的影响

采用平板培养计数法检测大鼠肠道细菌,采用高效液相色谱紫外分光法检测大鼠血中5-HT含量,研究了部分肝切除大鼠肠腔细菌数量的变化及其对肠道5-HT分泌的影响.结果表明:与对照组相比,部分肝切除后0h、2h、6h、12h、24h、48h及72h各时间点肠道细菌数和血中5-HT含量显著增多(P<0.05或0.01);部分肝切除并灌服硫酸庆大霉素的大鼠与部分肝切除的大鼠相比,肠道细菌数和血中5-HT含量均显著减少(P<0.05或0.01).部分肝切除后肠道细菌的增多可能是5-HT分泌量增加的机制之一.     

Genetic defect in secretion of complement C5 in mice.

A genetic deficiency of the fifth (C5) component of complement1-3, a serum glycoprotein of molecular weight (MW) 220,000 (ref. 4), has been found in 39% of inbred strains of mice3. Sera of deficient mice lack detectable C5 activity and protein2,3. In addition deficient mice produce antibody to mouse C5 when injected with sera from C5 sufficient (normal) strains. Levy et al.5 showed that somatic cell hybrids between C5 deficient (B10.D2/old line) macrophages and either C5 sufficient (B10.D2/new line) mouse kidney or chicken erythroblasts secreted haemolytically active mouse C5 in vitro. Several possible molecular mechanisms to account for the findings were considered, but insufficient direct data were available to choose among them. We recently reported that mouse (CD.1 strain) peritoneal cells in culture synthesise and secrete a single chain precursor, pro-C5 (MW approximately 210,000), of the two-chain (alpha chain, 125,000 and beta chain 83,000 MW) C5 protein6. Radiolabelled precursor C5 was contained within the cells and was secreted into the tissue culture media. Using similar methods, we now find that C5 deficiency in each of five different mouse strains (AKR, SWR, DBA/2J8 A/HeJ and B10.D2/old line) is due to a failure in secretion of C5 protein and not to a failure in biosynthesis of pro-C5.     

黄柏煎剂的抗炎、抗菌作用研究

摘要: 目的 观察黄柏煎剂的抗炎、抗菌作用。方法 昆明种小鼠 50 只按体质量随机分为 5 组,小鼠连续灌胃黄 柏煎剂 7 天后小鼠左耳廓内外侧涂 20 μL 二甲苯致炎,右耳不涂作为对照,计算各组耳肿胀度及抑制率; SPF 级 SD 大鼠 40 只在左、右前肢分别埋入无菌塑料环致肉芽肿,然后按体质量随机分为 5 组并按照相应剂量连续灌胃黄柏 煎剂 7 d,计算各组肉芽肿质量; 昆明种小鼠 60 只,根据性别和体质量随机分为 6 组,分别按照相应剂量连续灌胃 黄柏煎剂 7 d。第 7 天给药 1 h 后各组小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌菌液,6 h 再给药 1 次。观察小鼠在 72 h 内的 死亡率。结果 与对照组比较,黄柏煎剂各剂量组均能不同程度的抑制小鼠耳廓肿胀度,差异具有统计学意义( P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ,其中以低剂量组的作用最好; 与对照组比较,黄柏煎剂低剂量组能显著降低大鼠肉芽肿质量 ( P ＜ 0. 05) ; 高、中剂量组有一定的降低趋势,与对照组比较,差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) ; 黄柏高、中、低剂量组 的死亡率分别是 50% 、40% 、20% 。与对照组比较,中、低剂量组可降低感染小鼠的死亡率( P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) 。 结论 黄柏煎剂具有良好的抗炎、抗菌作用。     

带状疱疹神经阻滞的对比性观察

将90例带状疱疹患者分为三组：A组为头面部及上肢患者组,采用行星状神经节阻滞;B组为胸腹部患者组,采用硬膜外隙注药;C组病变部位与B组相同,采用皮肤科常规综合治疗。结果表明：接受星状神经节阻滞和硬膜外给药,A,B组止痛优良率分别为90％和93．3％;C组优良率仅为40％。A,B组平均病程为12．4d和11．8d,C组平均病程为17．2d。A,B组与C组相比较,差异具有统计学显著性（P＜0．05）。结果表明：星状神经节阻滞和硬膜外隙注药比皮肤科综合治疗止痛效果好,且具有使患者缩短病程、康复快的临床效果。     

心肌细胞条件性 Ppara 敲除小鼠模型中他莫昔芬安全有效剂量的筛选

摘要:目的 探 究 不 同 的 他 莫 昔 芬 ( tamoxifen) 给 药 剂 量 对 小 鼠 心 肌 细 胞 过 氧 化 物 酶 体 增 殖 物 激 活 受 体 α( peroxisome proliferator-activated receptor α, PPARα)基因 Ppara 敲除效率及心脏功能的影响,建立稳定有效的可诱导型心肌 细 胞 特 异 性 Ppara 敲 除 小 鼠。 方 法 Pparafl / fl 小 鼠 与 ^Myh6-ERT2Cre 小 鼠 进 行 交 配 及 回 交 得 到Ppara ^{fl / fl}, ^myh6-ERT2Cre 小鼠及同窝对照Ppara^{fl / fl}小鼠。 将 Ppara^{fl / fl},^myh6-ERT2Cre 小鼠随机分为对照组( 腹腔注射含 20% 乙醇的他莫昔芬玉米油溶液) 、A 组(单次腹腔注射他莫昔芬 2 mg / 只) 、B 组( 20 mg / kg, 连续注射他莫昔芬 5 d) 和 C组(40 mg / kg, 连续注射他莫昔芬 5 d) ,n = 8。 两周后,采用小动物超声监测小鼠的心功能, 病理 Masson 三色染色观察心肌纤维化的情况,Real-time qPCR 和 Western blot 检测心肌组织中 PPARα 的表达改变。 结果 与对照组相比,A 组小鼠的心功能与对照组没有显著差异,但 Real-time qPCR 显示心肌中 Ppara 的敲除效率不佳;B 组,心脏超声监测和 Masson 染色结果显示此给药剂量对小鼠心脏功能没有影响,但 Real-time qPCR 和 Western blot 均显示心肌组织中 Ppara 敲除充分;而 C 组,虽然 Real-time qPCR 结果显示心肌组织中 Ppara 的敲除充分,但心脏超声和Masson 染色结果显示此给药剂量对小鼠的心脏功能有一定程度的损伤。 结论 连续 5 d 给予Ppara^{fl / fl}, ^myh6-ERT2Cre 小鼠腹腔注射 20 mg / kg 他莫昔芬可以充分诱导心肌细胞中 Ppara 的敲除,成功建立可诱导型心肌细胞特异性 Ppara敲除( Ppara△ CM )小鼠。