化学模拟生物固氮——Ⅺ 固氮酶铁钼辅基模拟物的生物活性

据固氮酶厦门模型Ⅱ合成的固氮酶铁钼辅基模拟物与缺陷型棕色固氮菌uw-45提取液重组后,在完全的酶促反应条件下,具有明显的生物催化活性,其还原乙炔为乙烯的转化数通常在3—6(分~(-1))之间,相当于天然铁钼辅基活性的1—2％左右;还原分子氮为氨的转化数在1.5—3(分~(-1))左右,可用普通微量氨扩散法和Nessler比色法检出。重组模拟物的乙炔转化数与氮转化数之比值符合于棕色固氮菌活性固氮酶相应的转化数之比。经柠檬酸盐处理后,以氯为外配位基的模拟物的重组活性可显著提高。     

固氮酶催化作用机理及其化学模拟

固氮酶是某些微生物在常温常压下固氮成氨的主要催化剂,其催化机理和化学模拟是国际上长期致力研究的对象。尽管人们已经揭示了固氮酶催化活性中心——铁钼辅基（FeMo-co)MoFe7S9（R-高柠檬酸）的结构,然铡,有关FeMo-co生物合成的详细途径和其中包含的钼铁转移和利用;固氮酶在哪些活性位和按什么模式结合N2,C2H2、CO等多种底物或抑制剂;以及其中涉及的电子和质子传递过程等许多问题,至今尚有待解决。本文将综述这些问题的研究进展和厦门大学固氮组最近五年来的相关研究工作。     

棕色固氮菌中固氮酶钼铁蛋白八聚体的制备及其性质

棕色固氮菌中固氮酶钼铁蛋白以八聚体形态存在,并研究了其提纯、活性和基本性质,从而提出了八聚体钼铁蛋白的结构与功能的关系及生物学意义。     

棕色固氮菌钼铁蛋白的分子量及钼铁含量

棕色固氮菌固氮酶钼铁蛋白的分子量有一些报导见表4,但存在着严重分歧,至今仍未统一,影响结构研究工作进展。我们用凝胶过滤法对二次结晶钼铁蛋白和二次柱分离钼铁蛋白(二者均为圆盘电泳均一,比活性在1000毫微克分子/分毫克蛋白以上)进行了分子量测定工作。测定结果,分子量为225000。     

苯硫酚对固氮酶催化活性的影响

研究了苯硫酚对棕色固氮菌固氮酶催化底物还原活性的影响．结果表明；当反应体系中固氮酶钼铁蛋白与苯硫酚的摩尔比为1:4时．固氮酶的乙炔还原活性比对照组下降了62．3％，下降的幅度随着苯硫酚浓度的升高而增大；但在乙炔存在的情况下，固氮酶的放H2活性随着苯硫酚的浓度的升高而升高．在氩气氛下，苯硫酚浓度的升高对固氮酶放H2活性的影响不明显．这一现象有可能是由于苯硫酚取代与铁钼辅基的Fe1原子连接的半胱氨酸的巯基而引起的．     

活性氧自由基对固氮酶（钼铁蛋白）的损伤

本文报道了棕色固氮菌固氮酶（钼铁蛋白）经四甲基乙二胺－过硫酸铵体系产生的活性氧自由基（Ｏ，·ＯＨ）作用后，Ｍｏ，Ｆｅ原子脱落，金属原子簇被打碎，α螺旋度下降，可见吸收光谱明显降低，凝胶电泳谱带加宽，荧光强度下降的情况．实验表明，Ｏ，·ＯＨ对钼铁蛋白的影响具有比氧钝化更严重的不可逆损伤作用。     

固氮酶铁钼辅基模拟物中无机硫含量的测定

本文提出测定铁钼辅基模拟物中无机硫含量的测定方法。样品用溴处理使无机硫定量氧化为硫酸根,后加铬酸钡使析出等当量铬酸根,用分光光度法测定。分析方法简易快速,精密度和准确度均优。     

固氮酶活性中心模型和铁钼辅基模拟体合成的研究进展

前阶段(1973—1976),我校蔡启瑞教授以固氮酶的十来种底物作为化学探针,并根据络合催化原理,直接推断N≡N,n—R—C≡N,n—R—N≡C,n—R—C≡CH等固氮酶的底物分子是按μ_3(η~2)方式配位络合在三核活性中心上的(但从当时已知的科学实验,尚未能确断活性中心究竟含一个或两个钼),并进一步推断两个这样的三核活性中心通过共用钼而骈联在一起,成为骈联双座的结构,从而提出了第一个立方烷原子簇结构的固氮酶活性中心模型。1977—1978年,又进行了两次演进,于1978年7月首先提出钼上不含有机硫配位体的骈联双座双立方烷的固氮酶活性中心模型,即“厦门模—Ⅲ型”[S Fe_3S_2(L)]Mo[(L′)S_2Fe_3S]。其中L和L′代表两个活动的配位体。这模型能较好地说明许多实验事实,并为合成铁钼辅基模拟体指出了方向(上述这一模型和“厦门模型—Ⅱ”、“福州模型—Ⅱ”的关系,详见文献[2]b和[3])。     

化学模拟生物固氮——Ⅸ 铁钼辅基模型化合物的合成和性能表征

采用乙二醇基阴离子作为活插头(可通过水解除去的双配位螯形配位体),对前文提出的合成方法作了重要改进,以期所合成的铁钼辅基模型化合物中Mo~(Ⅳ(Ⅲ))第一配位界内两个不稳定的配位体处于相邻的位置,如厦门模型Ⅲ(或厦门模型Ⅱ)所要求。合成和重组活性评价结果,重组活性比使用乙腈等为活插头的提高2个数量级,化学催化活性和选择性接近于天然FeMo-co水平。     

固氮酶固氮机理研究——Ⅰ.猪心细胞色素C与钼铁蛋白重组合

以猪心细胞色素C代替棕色固氮菌铁蛋白,与棕色固氮菌钼铁蛋白重组合,实现了氮还原成氨,乙炔还原成乙烯,以及需还原剂的ATP水解反应。猪心细胞色素C与棕色固氮菌钼铁蛋白重组合亦要求一定的比例。从差示光谱上看,猪心细胞色素C与棕色固氮菌铁蛋白在波长460mμ处都有一个共同的吸收峰。实验结果表明,钼铁蛋白本身可能就是固氮酶;而铁蛋白起着电子传递体的作用。     

Asp38与果蝇醇脱氢酶的辅酶特异性

果蝇醇脱氢酶依赖于ＮＡＤ＾＋,Ａｓｐ３８是一个保守残基,它与ＮＡＤ＾＋的ＡＭＰ单位中核糖羟基作用。野生型果蝇ＡＤＨ的Ａｓｐ３８突变成Ａｓｎ３８（Ｄ３８Ｎ）后,Ｋｍ（ａｐｐ）ＮＡＤＰ值下降至１／６２,Ｋｃａｔ／Ｋｍ（ａｐｐ）ＮＡＤＰ值则增加至５９０倍（ＰＨ９．８）。     

产生任意k阶余因式的原理和方法

提出了不定导纳矩阵任意k阶余因式的有向树拓扑表示式;给出了通过混合分割产生有向树多项式的分解定理.应用它们可以方便有效地求取任意k阶余因式的拓扑表示式.用其求全符号网络函数,可扩大计算机所能拓扑分析的网络规模.用其求部分符号网络函数,可使计算机所能分析的网络规模扩大到一般数值分析程序所能处理的阶数.     

固氮酶铁钼辅基的激光喇曼光谱和电子光谱特性

??色固氮?(A.vinclandii-230)相???分离的???基(FeMo-co),以NMF为溶剂,经Sephadex LII-20凝???析,或在20 000xg下离心30 min的上清液,不含任何的氨基?,研究了FeMo-co的?光?曼光谱和电子光谱,对FeMo-co中含有与S配基耦合的S-S配基的可能性进行了讨论。     

发动机转动惯量的实验测定

发动机转动惯量是发动机系统动态模型的一个重要参数,一般需要通过试验测取发动机转速衰减曲线,再由曲线拟合而得。在文中提出一种试验曲线的全程拟合法,比以往的标定转速点拟合法可以取得更高的精度。     

老年人生活空间移动性影响要素研究进展

 老年人生活空间移动性是老年人在日常生活中能动生活状态的重要表征。在梳理老年人生活空间移动性相关概念、测度方法基础上，分析了物质环境要素和非物质环境要素对老年人生活空间移动性的影响；提炼出有效支持老年人生活空间移动性的中观环境规划、微观环境设计和政策文化扶助层面的策略；指出了老年人生活空间移动性的研究建议和发展方向。     

民间法正义观的转型

研究了国家法的抽象正义观与民间法的情理正义观,认为西方国家法的抽象正义观与东方民间法的情理正义观存在实质的不同,原因在于思维方式、超验与经验传统、政治结构的差别。在现代法治理念下,传统民间法所代表的正义观将向混合正义观转型,西方法治所代表的国家法抽象正义观是其骨架。     

关于一维非自治时滞系统点态退化的例子

给出了一维非自治时滞系统点态退化的几个例子。     

辽阳职业技术学院高尔夫学院发展现状研究

采用问卷调查法、文献资料法、数理统计法对辽阳职业技术学院二级分院高尔夫学院成立三年来招生、专业设置、教师队伍与实习实训等现状进行深入调查与分析,结果表明:在招生方面,高尔夫学院目前还未能得到家长的充分认可,招生人数不多;专业设置单一,实践教学及社会服务能力薄弱;实习实训条件较好,但仍需进一步完善;教师队伍建设相对滞后.针对上述情况,给出促进高尔夫学院稳步发展的建议.     

关于农业区划地图集中的统一协调问题

图集的统一协调,对图集质量有很大影响。本文是作者在编制北京市农业区划地图集的实践基础上,根据地图信息传输论的观点,对农业区划地图集的统一协调的内容及方法进行了探讨。试图总结编制这类图集的统一协调模式,以供读者编图时参考。