不同诱导子对曼地亚红豆杉内生真菌产紫杉醇的影响

从曼地亚红豆杉树皮中分离得到1株链格孢属(Alternaria sp.)内生真菌MF5。初期马铃薯葡萄糖(PD)培养基液体培养结果显示,MF5的发酵产物中检测到的紫杉醇质量浓度约为0.58 mg/L。为了提高MF5发酵产物中紫杉醇含量,考察添加CuSO_4、茉莉酸甲酯(MeJA)、赤霉素(GA_3)和红豆杉浸出液对MF5产紫杉醇的影响。结果表明:添加4%红豆杉浸出液,对MF5进行发酵培养,发酵产物中紫杉醇质量浓度为(2.47±0.07) mg/L;在此基础上,添加CuSO_4、MeJA、GA_3 3种诱导子也能够提高MF5产紫杉醇的能力,且同时添加3种诱导子时,MF5发酵物中紫杉醇含量最高,达到(12.58±0.80) mg/L。本研究证实了3种诱导子和红豆杉浸出液均可促进内生真菌代谢产生紫杉醇,为后续真菌发酵法生产紫杉醇打下基础。     

两种辅料对固态发酵红曲米莫纳可林K与红曲色素产量的影响

红曲霉在发酵过程中会产生莫纳可林K(MK)和红曲色素(MPs)等多种对人体有益的次级代谢产物。为同时在红曲米固态发酵产物中获得一定量的MK和MPs,实验在大米基质基础上,分别添加豆粕、豆渣两种辅料,对红曲霉MPs-7进行固态发酵培养,分析两种代谢产物产量,并对辅料影响机制进行了探究。结果表明:在发酵基质中添加两种辅料均促进了MK的产生,但同时抑制了MPs的产生。豆粕添加量为质量分数15%时,发酵产物MK产量最高,但几乎无MPs产生;豆渣添加量为质量分数15%时,提高MK产量的同时也保证了一定的MPs产量,且成本比豆粕低,更适合作为辅料添加到红曲霉固态发酵基质中。研究表明:基质含氮量会影响红曲霉固态发酵过程中菌丝体量的积累,从而影响次级代谢产物的产量。     

抗大豆尖孢镰刀菌新型固体生物农药的研制

以抑菌圈直径为指标,采用牛津杯法测定青霉TS67菌株的胞外代谢产物对大豆尖孢镰刀菌(Fusari-um oxysporum)的抑制活性,对该菌株的固体培养基成分及其配比进行优化,同时对pH、温度、含水量、接种量及最佳培养周期等生长条件进行测定.实验结果表明:青霉TS67菌株的最佳固体培养基配方为麸皮6g,黄豆粉3g,KH2PO40.3g,KCl 14.5mg,MgSO4.7H2O 14.5mg,FeSO4.7H2O 0.29mg,水29mL;将1.3mL 2×106 CFU/mL的青霉TS67菌株孢子悬液接种于40g最佳培养基上,pH6～7,28℃进行固体发酵培养96h,获得含有菌丝、孢子、代谢产物的固体培养物,该培养物的磷酸缓冲液浸提物能够有效抑制大豆尖孢镰刀菌的生长.     

巨孢球囊霉的富集培养研究

以玉米、三叶草为寄主植物,不同比例的土沙混合物(1∶1;3∶2;3∶1)为培养基质分别接种2种巨孢球囊霉真菌孢子,富集培养100 d后取样调查.结果表明,玉米和三叶草都能与珠状巨孢球囊霉和玫瑰红巨孢球囊霉共生形成丛枝菌根,锥虫蓝染色菌根显微结构清晰;菌根侵染率三叶草高于玉米;不同寄主植物和培养基质对AM真菌富集培养产孢的影响有明显差异.以三叶草为寄主,土沙比为1∶1时,玫瑰红巨孢球囊霉产孢率最高,达211个/100 g基质.     

河北省丝孢菌的研究：Ⅱ.弯孢属

对弯孢属(Curvularia Boedijn)的分类学作了简短的阐述。报道了河北省弯孢属真菌的10个种,其中4种为国内新记录种,5种为河北省新记录种。国内新记录种是枝孢弯孢(C.brachyspora Boedijn),香茅弯孢(C. cymbopogonis Grove & Skolko),中隔弯孢(C. intermedia Boedijn)和管突弯孢(C. protuberata Nelson & Hodyes);河北省新记录种是须芒草弯孢(C. andropogonis (zimm.)Boedijn),苍白弯孢(c.pallescens Boedijn),棒状弯孢(C. clavata Jain),膝曲弯孢(C. geniculata(Tracy & Earle)Boedijn)和近缘弯孢(C. affinis Boedijn)。文中有种的鉴定特征描述和分种检索表。     

红曲霉固体发酵生产洛伐他汀条件的研究

红曲能够降低血压与血脂,这与其发酵产物洛伐他汀有关,而红曲霉固体发酵产洛伐他汀产量较低,因此有必要探究洛伐他汀高产的最适条件.本实验从固体角度出发,以大米为培养基质,首先比较东北大米、湖北香米、糯米三种大米对洛伐他汀产量的影响,选出最佳培养基质,然后分析碳源、氮源、无机盐、接种量以及发酵时间5个因素对洛伐他汀产量的影响,并挑选出碳源、氮源、无机盐进行正交试验设计,最终得出最适培养基为:以湖北香米为培养基质,可溶性淀粉3%、硝酸钠2%、磷酸二氢钾0.2%,最适发酵条件为:接种量2m L/100m L发酵液、发酵时间8d.本研究对红曲霉固体发酵高产洛伐他汀具有指导意义.     

几种真菌的诱孢实验初报

在常规人工培养条件下产生繁殖体及繁殖孢子的球壳孢目的真菌,通过预培养后扫刷营养体,经过光诱导能产生繁殖体及繁殖孢子;在常规人工培养条件下不产生繁殖体及繁殖孢子的从梗孢目的真菌,通过预培养后扫刷营养体,在常规培养条件下也能产生繁殖体及繁殖孢子.     

菊芋小孢根霉固态发酵纤溶酶的工艺优化

从酒曲中分离得到一株纤溶酶产生菌,经鉴定为菊芋小孢根霉.现对其固态发酵工艺的碳源、氮源、碳氮比、初始pH、含水量、无机盐、接种量、发酵时间、发酵温度和培养基厚度进行研究.结果表明,该菌株固态发酵工艺为:麸皮与豆粕比例2﹕1,初始pH,5.0,含水量(干基)1,mL/g,MgSO4,10,mmol/kg,(NH4)2,SO4200,mmol/kg,FeSO4,3,mmol/kg,接种量为6×106,g-1,培养基厚度为2,cm,29,℃恒温发酵72,h.最佳发酵条件下酶活力为684.39,U/g,是未优化时产酶量的8.2倍.通过对培养基的优化研究,使产酶量大幅提高,说明菊芋小孢根霉固态发酵纤溶酶具有工业潜力,也为工业化提供数据基础.     

双曲孢菌(Nakataea sigmoidea Hara)生物学特性初步研究

为了研究双曲孢菌(Nakataea sigmoidea Hara)在不同环境及营养条件下的产孢特性，分别在黑暗条件和光照条件下，通过改变环境因子(pH值、温度、固体培养、液体培养)和营养因子(碳源、氮源、天然、合成)来进行产孢培养试验。结果表明，双曲孢菌在黑暗条件下，不同环境因子和不同营养因子下均不能产生分生孢子；在自然光条件下，1．5％水琼脂、Czapek培养基上，菌核和菌丝均能产孢。碳氮比对菌核萌发产生分生孢子有显著影响(P＜0．01)，以碳氮比为10：1时，产孢牢最高，达54．23％。紫外灯照射10min可刺激双曲孢菌产孢。     

几种真菌的诱导产孢试验

几种在常规培养条件下不产生繁殖体的真菌的诱导产孢试验结果表明:大茎点菌属[Macrophoma(Sacc.)BerleseetVoglino]、茎点霉属[PhomaSacc.]、壳球孢属[MacrophominaPetrak]的真菌,通过预培养、扫刷营养体、光诱导后能产生分生孢子器及分生孢子;轮枝菌属[VerticilliumNeesexWallr.]、头孢属[CephalosporiumCorda.]的真菌,通过预培养、扫刷营养体后,在有光或无光条件下均能产生分生孢子梗及分生孢子.     

一株产紫杉醇真菌发酵条件的研究

研究了在一株产紫杉醇真菌的发酵培养中，初始糖浓度、碳源、氮源和前体饲喂对生物量和紫杉醇合成的影响。结果表明，一定氮源和前体饲喂对紫杉醇产量提高有显促进作用。在发酵过程中补加糖也有一定影响。     

造纸污泥同步糖化发酵生产燃料乙醇

以卫生纸厂初级污泥作为生物质原料,采用同步糖化发酵法生产燃料乙醇,对其工艺条件进行了优化,并考察了3种非离子表面活性剂(Tween-20、Tween-60、Tween-80)对造纸污泥同步糖化发酵的促进效果.结果表明:合适的工艺条件为反应温度36℃、底物质量浓度100 g/L、酵母接种量6%(体积分数)、纤维素酶用量25 FPU/g;Tween-20能显著促进造纸污泥的同步糖化发酵,添加0.2%的Tween-20时,乙醇产率提高14%;上述工艺条件下反应48 h的乙醇质量浓度达19.5 g/L,是理论值的63.9%.对同步糖化发酵前后污泥及发酵液的主要化学成分进行分析,发现大量纤维素已糖化发酵成乙醇,仅少量半纤维素发生水解,水解产物木糖不能被酵母有效利用发酵成乙醇.扫描电镜分析显示造纸污泥经同步糖化发酵后,长条状的纤维大多被破坏,同时出现了大量椭球状的酵母细胞.     

丝状真菌Sr18发酵过程中的形态学研究

通过扫描电镜对Sr18菌发酵过程中菌丝生长的形态进行观察，结果表明：在适宜的摇瓶培养条件下所形成的菌球直径多在1．5～2．0mm，内、外部菌丝较丰满，粗细均一，内部无明显空洞，菌体生理活性较强，其发酵滤液稀释为原浓度1／2的杀线虫活性可达90％以上；减少接种量或改变培养基配方多形成直径为4～5mm的空心大菌球，内层出现较明显空洞及大量干瘪菌丝，中间层含大量分生孢子头和孢子，代谢物的杀虫活性降到77．17％-25％；加大接种量降低转速则易形成直径小于1mm实心致密菌球，菌丝粗细不均匀，杀虫活性仅为67．5％。5L发酵罐发酵则多形成松散的菌丝团，菌丝丰满，粗壮，菌体生理活性状态良好，积累代谢产物能力强，杀虫活性为95％以上。     

通气提高Klebsiella oxytoca HP1发酵产氢

研究了Klebsiella oxytoca HP1在不同通气条件下的生长和放氢特性．批式发酵实验结果表明：通氩气放氢效果最好，通二氧化碳放氢效果最差．提高氩气通气速率能显著提高产氢量。0．25L／Lmin条件下的产氢量达到1155mL是不通气时的2．41倍，但通气也影响延迟期的长短。氩气通量应该与微生物生长阶段相匹配．代谢产物分析表明：K．oxytoca HP1呈混合酸发酵特性，主要代谢产物有乙酸、乙醇、乳酸和2，3-丁二醇，氩气通气速率明显影响丙酮酸节点的代谢途径和通量，从高通气条件到不通气条件，代谢主要途径按乙酸途径→乙醇途径→乳酸途径的次序转变，通气速率是K．oxytoca HP1发酵产氢的重要调控因子．     

中国南海红树内生真菌Microsphaeropsis sp.二氢异香豆素类化合物研究

 首次研究了一株南海红树内生真菌Microsphaeropsis sp.的次级代谢产物。从该菌的培养液的乙酸乙酯相中分离获得8个二氢异香豆素单体化合物,运用现代波谱技术鉴定其结构分别为4 hydroxy 8 O methylmellein (1),mellein (2), 4 hydroxymellein (3), 5 hydroxymellein (4), 4 hydroxy 3,5 dimethylmellein (5), 5 methylmellein (6), 7 hydroxymellein (7), 5 carboxymellein (8)。其中,化合物1为从自然界发现的新天然产物,化合物 4,5,6,7,8 为首次从海洋真菌Microsphaeropsis sp.中分离得到的化合物。     

微生物共培养产生新颖活性次生代谢产物的研究进展

微生物源天然产物是药物先导化合物的重要资源之一.近年来,利用微生物共培养产生各类天然产物的研究发展迅速.微生物共培养是一种通过模拟（微生物）栖息地/栖息环境以激活可能的沉默生物合成基因簇并进而诱导微生物产生新次生代谢物的有效方法.与菌株纯培养相比,共培养不仅增加了次级代谢产物的种类多样性,而且其生物活性及产量也得到了提高.文章就近5年来真菌与真菌、真菌与细菌、细菌与细菌等3种类型的微生物共培养研究成果进行了综述,同时简要介绍了用于分析共培养作用机制的多组学技术,并在此基础上探讨了微生物共培养相互作用机制研究的进展及挑战.综述旨在为微生物共培养的深入研究提供借鉴,并为微生物药物的开发提供新思路.     

表观遗传试剂诱导滇重楼内生真菌Hypomyces sp.CLG4次生代谢产物的研究

采用高效液相色谱(HPLC)分析添加HDACI,500μM恩提诺特的H.sp.CLG4.培养萃取物与对照的差异,硅胶柱层析、反相柱层析、半制备高效液相等色谱方法对添加表观遗传试剂的Hypomyces sp.CLG4.次级代谢产物进行分离纯化,并利用现代波谱分析方法对化合物进行结构鉴定.研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)表观遗传调控对分离自滇重楼菌寄生属菌株(Hypomyces sp.CLG4)产生次生代谢产物的影响.HPLC分析表明,恩替诺特可以诱导该菌株产生更为丰富的次生代谢产物,分离得到6个化合物,分别鉴定为:R-6-hydroxymellein(1),6-demethylkigelin(2),(3R)-6-methoxymellein(3),(3R)-6,7-dimethoxymellein(4),pyrolin(5),terrein(6).可见,组蛋白去乙酰化酶抑制剂的表观遗传调控可以显著提高菌株Hypomyces sp.CLG4.产生次生代谢的能力,化合物1～3、5和6为首次从该菌株中分离得到.     

青藏高原珍稀大型真菌亚东木耳菌丝发酵条件研究

为了更好地开发利用西藏珍稀大型真菌亚东木耳,对亚东木耳菌丝生长和次级代谢条件进行研究。考察了不同培养基成分和培养条件对亚东木耳菌丝生长速度、生物量和次级代谢产物产量的影响。结果表明,可溶性淀粉、酵母浸粉和CaCl₂分别为亚东木耳生长代谢的较佳碳源、氮源和无机盐,维生素B₁、B₂对菌丝生长无明显促进作用。较佳培养温度为26℃,较佳培养时间为63d,菌丝生长较佳初始pH值为7.0,较佳次级代谢初始pH值为6.0。HPLC图谱分析结果表明,次级代谢产物种类多达200余种,其中初始pH值和温度条件对次级代谢多样性的影响较为明显。     

红树林内生镰刀菌732#代谢产物Enniatin发酵条件研究

红树林内生真菌732#可产生具有抗癌活性的新化合物enn iatin G。出于对enn iatin G的兴趣,通过ITS法测序分析,对732#种属进行了鉴定,得出732#属于Fusarium属真菌。为了增加732#的代谢产物量,以菌丝质量浓度(干质量)和enn iatin质量浓度为检测指标,用正交法确定了适合732#生长的最佳碳源、氮源及温度,再用单因素变换法对732#培养条件进行了优化,得出,在含w=2.5%葡萄糖,w=0.8%蛋白胨,起始值为pH6,20%人工海水的GTY培养基中发酵10 d,菌丝质量浓度(干质量)和enn iatin质量浓度可达最大值。