抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织的诱导及增殖

以抗松材线虫病赤松未成熟合子胚为外植体,研究了合子胚发育阶段、激素种类及浓度以及碳源等对胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:发育至2~4阶段的合子胚为胚性愈伤组织诱导的适宜外植体,2,4-D和6-BA是最优激素组合,麦芽糖比蔗糖、葡萄糖更有利于胚性愈伤组织的诱导。抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织诱导率总体较低,以DCR为基本培养基,添加2 mg/L 2,4-D和1 mg/L 6-BA时诱导率最高为5.0%,诱导的胚性愈伤组织在增殖培养基上能够稳定增殖。     

玉米自交系幼胚离体培养及植株再生研究

采用4种不同类型的玉米自交系为供试材料，用MS和AG培养基进行诱导培养。获得胚性愈伤组织，结果表明，基因型和外植体的发育时期对愈伤组织的诱导率有很大影响；不同的2，4-D浓度及山梨醇浓度影响愈伤组织的保持和质量改善；6-BA浓度为2mg／L时，有利于再分化培养，在再分化培养中，获得了再生植株。     

外源激素对防风体细胞胚发生和发育的影响

目的探讨生长素和细胞分裂素对防风体细胞胚发生和发育过程的影响。方法组织培养和石蜡切片。结果0．5mg／L2，4-D是诱导胚性愈伤组织最适宜的生长素浓度，0．5mg／LNAA在胚性愈伤组织的长期继代培养中替代0．5mg／L2，4-D可减少畸形胚的发生，NAA浓度降至0．2mg／L时促进体细胞胚的发生和分化；生长素加一定比例的细胞分裂素(6-BA或KT)可有效促进体细胞胚的发生；通过逐步降低生长素和细胞分裂素的浓度，可促进体细胞胚的分化和生长；体细胞胚在无附加激素或附加激素浓度分别低于0．2mg／LNAA和0．5mg／L6-BA的MS培养基上，均能发育成完整的植株。结论一定浓度的生长素是诱导防风胚性愈伤组织的关键因素，细胞分裂素在体细胞胚的发生和发育过程中起协同作用。     

激素对青稞胚愈伤、分化培养的影响

青稞转基因技术是继传统育种后必经的育种方法。本试验以青稞"昆仑12号"为研究材料,研究了不同浓度梯度的2,4-D对青稞胚的愈伤组织诱导率及不同浓度梯度的6-BA对青稞胚愈伤组织分化诱导率的影响。结果表明,最佳的2,4-D和6-BA浓度均为2 mg/L。为青稞转基因奠定了基础。     

冬小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化

以4个冬小麦品种的成熟胚为外植体进行离体培养，研究了品种、不同激素组合以及不同预处理等因素对愈伤组织形成及分化的影响．结果表明，代表不同基因型的品种是影响离体培养的重要因素，成熟胚愈伤组织的诱导使用4mg／L的2，4-D浓度较为有利，在MS KT1mg／L 6-BA2mg／L培养基上分化率较高．低温及CaCl2预处理对成熟胚愈伤组织的影响与小麦品种有关．     

水稻佳辐占成熟种胚培养及其悬浮细胞系的建立

以优质早籼稻佳辐占成熟种胚为材料．研究外植体大小、激素对成熟种胚愈伤组织诱导率的影响，并高频快速建立起水稻胚性悬浮系．结果表明：在外植体较大并只添加2，4-D-种激素时，就可获得较高的愈伤组织诱导率，2，4-D浓度为1．5mg／L时，诱导率达95％；浓度为2mg／L时．诱导率可达100％．佳辐占成熟种胚组织培养最佳的条件为适当大小的外植体和添加浓度为2mg／L2，4-D．以4周龄的胚性愈伤组织为材料可高频快速建立起均质、分散性好的水稻胚性悬浮系，5周龄以上的胚性愈伤组织较难建立起水稻胚性悬浮系．     

柳杉种子合子胚的愈伤组织诱导及植株再生

为探索柳杉种子合子胚的愈伤组织诱导技术,选取柳杉4个家系,采集其尚未完全成熟的种子进行愈伤组织的诱导,并经器官发生再生途径得到再生植株。利用6-BA、2,4-D等激素种类及其浓度的正交设计,研究各因素及其交互作用对柳杉种子合子胚愈伤组织诱导的影响。结果发现:柳杉4个家系的愈伤组织诱导量在8月中旬采种时呈明显上升,至8月底时各家系的子叶胚愈伤诱导率达到最高,其中57号家系愈伤诱导率最高,达92%。柳杉4个家系,在不同激素组合中愈伤诱导率存在着一定的差异。其中57号家系子叶胚在DCR+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L培养时,愈伤组织诱导率达到最高,且诱导出来的愈伤组织状态为白色、干燥、无针状突起,结构紧密。愈伤组织在DCR培养基上成功获得再生植株。     

籼稻9311成熟胚再生体系

建立9311水稻高效再生体系，将有利于人们以9311水稻为受体进行遗传改良及籼型水稻基因功能的研究．报道了9311成熟胚高效再生途径．以9311成熟胚为外植体，设计了5类（N6DP，N6DA，MSDP，MSDA和MSDAP）共13种不同愈伤组织诱导培养基，比较了9311成熟胚在不同培养基中愈伤组织的诱导以及初始愈伤组织被继代后的表现．结果显示：9311成熟胚在添加2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）的所有培养基中都能够形成愈伤组织；将最初被诱导的愈伤组织进行继代培养，在前4类培养基上诱导的初始愈伤组织，不论被分别继代于与原培养基成分相同的新鲜培养基上，还是被继代于MSDAP培养基上，继代后的愈伤组织都相继褐化死亡，而将从MSDAP培养基上诱导的初始愈伤组织继代在MSDAP培养基上，愈伤组织很少出现褐化现象，并且能够较快地增殖．由此表明，MSDAP培养基是9311成熟胚合适的愈伤组织诱导培养基和增殖培养基．采用MSDAP培养基培养，9311水稻成熟胚愈伤组织诱导率达87．5％．分化率为46．7％．再生植株的比例为23．3％、     

龙眼不同愈伤组织培养方法的探讨及细胞观察

试验中以龙眼"红核子"品种胚性愈伤组织LC2细胞系为材料,研究不同条件对龙眼胚性愈伤组织生长的影响以及龙眼非胚性愈伤组织培养体系的建立,并通过显微镜观察比较龙眼胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的形态学差异。试验结果表明,高9cm、直径6cm、瓶口内径5cm的玻璃培养瓶在接种量约为30mg/瓶时龙眼胚性愈伤组织生长最好;龙眼非胚性愈伤组织以MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+活性炭0.5 mg/L培养效果最好;细胞观察表明,龙眼胚性愈伤组织较非胚性愈伤组织细胞更规则,有更多的内含物。     

不同苜蓿栽培品种再生体系的差异性比较

通过对10种不同苜蓿的栽培品种再生体系的比较研究,以及再生条件的优化,筛选出易于再生的费纳尔,金皇后,赛特6号3个苜蓿栽培品种．结果表明：胚性愈伤组织诱导培养基：改良Ms＋2,4-D2mg／L＋6-BA0．5mg／L＋蔗糖3％,胚性愈伤组织诱导率为65％～92％;胚状体诱导培养基：SH＋2,4-D2mg／L＋6-BA0．5mg／L＋LH300mg／L＋蔗糖3％;胚状体诱导率为42．3％～83．4％;胚状体再分化培养基：SH＋GA30．5mg／L＋LH300mg／L＋肌醇60mg／L蔗糖3％;胚状体萌发率为20％～75％;生根培养基：1／2Ms＋NAA0．3～0.5mg／L＋蔗糖2％,生根率为91％,移栽成活率93％．     

青钱柳幼胚愈伤组织的诱导

以青钱柳幼胚为外植体,研究了不同幼胚期、基本培养基种类、植物生长调节剂种类及其浓度配比对愈伤组织诱导的影响。结果表明,不同发育期的幼胚诱导出的愈伤组织在形态上差异较大,青钱柳种子发育至子叶胚中期较适合愈伤组织的诱导。青钱柳幼胚愈伤诱导时基本培养基以改良DKW效果最佳,诱导率达到了88.89%,且无褐化现象;含2,4-D与KT组合的培养基较适宜愈伤组织的诱导,其中2,4-D(0.5 mg/L)+KT(2.0 mg/L)和2,4-D(1.0 mg/L)+KT(1.0 mg/L)的组合对青钱柳幼胚诱导愈伤组织效果最佳,诱导率分别为80.00%和78.33%。     

2,4-D和6-BA对水稻愈伤组织培养力的影响

以梗稻“日本晴”成熟种子诱导愈伤组织,统计愈伤诱导率及绿苗分化率,分析培养基中2,4-D和6-BA的不同浓度配比对培养力的影响,得到二者的最适配比,愈伤组织的质量和组织培养中再生植株的频率都有较大提高．实验结果表明：2,4-D是诱导愈伤组织必不可少的因子,与6-BA配合使用对愈伤组织的培养效果更好．对“日本晴”而言,当2,4-D为2．0mg／L,6-BA为0．5mg／L时愈伤组织的诱导率最高;当2,4-D为2．0mg／L,6-BA为0．2mg／L时,绿苗分化率和培养力最高．     

前胡组织培养和细胞悬浮培养中胚状体发生及植株再生

前胡的种子幼苗切段在含有1mg/l2,4-D的(1/2)MS 固体培养基(大量元素减半)上,诱导产生愈伤组织。诱导两个半月的愈伤组织,在含有1mg/l6-BA+0.5mg/lIBA 或无激素的(1/2)MS 固体培养基上,分化出胚状体,再生成完整植株。愈伤组织在液体培养基中振荡分散及过滤制备成悬浮培养物,在含1mg/l2,4-D的液体培养基中,胚性细胞不断增殖。转移至含有0.05mg/l 2,4-D+0.05mg/l 6-BA 的(1/2)MS 液体培养基中,分化出胚状体,发育成完整植株。     

超甜玉米幼胚愈伤组织诱导研究

以超甜玉米自交系P13、P2、P0、P8为材料,研究了影响愈伤组织诱导的关键因素。结果表明.基因型是影响超甜玉米幼胚愈伤组织诱导的关键因素,P13、P2比P8、P0较易诱导愈伤;幼胚长为1-2mm时,胚性愈伤诱导率最高;2,4-D抑制芽生长,NAA促进芽生长,P13在高浓度的2,4-D（10mg·L^-1）配合高浓度的NAA（5或7mg·L^-1）情况下能够得到较理想的愈伤组织;P2在2,4-D与L-Pro配合使用情况下均有较高的愈伤诱导率和胚性愈伤率。     

杉木合子胚愈伤组织的诱导及植株再生

以杉木成熟及未成熟合子胚为外植体，研究了基本培养基、植物激素、合子胚的发育阶段等因素对杉木愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明：1／2MS＋2mg／L 2，4-D＋1．0mg／L 6-BA＋1．0mg／L KT＋30g／L蔗糖是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基；处于胚胎选择阶段或者组织与器官分化阶段的幼胚，能诱导出松软、晶莹透明的愈伤组织，诱导频率为2％～6％。成熟阶段的幼胚诱导出的愈伤组织的外观形态与成熟合子胚诱导出的愈伤组织相似，愈伤组织的诱导频率随着合子胚发育的成熟而迅速提高；DCR＋1．5mg／L 6-BA＋1．5mg／L KT＋20g／L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基。高约1．5cm的不定芽转入生根培养基，生根率可达100%。     

粳稻成熟胚愈伤组织诱导及其分化培养体系的建立

为了促进新型高产水稻品种的抗病性,以粳稻成熟胚为外植体,通过诱导培养基、继代培养条件、分化培养路线、光照强度和蔗糖浓度的优化,建立了适合新稻18和豫粳6号的高效再生体系.结果表明:选择适宜的培养基是提高愈伤组织诱导率及愈伤组织质量的基础.新稻18和豫粳6号的水稻成熟胚诱导愈伤组织的培养基分别为MB1(MSB5+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L+KT 1 mg/L+ABA 1 mg/L)和MB2(MSB5+2,4-D 3 mg/L+6-BA 1mg/L+ABA 0.5 mg/L),愈伤诱导率分别达95.24%和91.07%;愈伤组织剥离后的继代培养基为MB3(MSB5+2,4-D 3.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L);愈伤组织的分化培养路线为三步分化法MSD0/N6B5D0→N6B5D2→MSD0,适宜的分化培养温度为33℃,光照强度为43.75μmol.m-2.s-1.新稻18和豫粳6号的愈伤分化率最高分别达到99.3%和83.33%.     

草地早熟禾胚性愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立

使用MS附加2,4-D作基本培养基,对草地早熟禾进行愈伤组织的诱导和愈伤组织分化成苗试验,建立了最佳的早熟禾胚性愈伤诱导和植株再生体系.早熟禾的成熟种子经过灭菌后,接种到愈伤组织诱导培养基上,置于25±2℃,黑暗条件培养约8周~9周,有胚性愈伤组织产生.然后将愈伤组织转至分化培养基上,黑暗培养一周后,再进行光照培养,约20天后开始分化出根和芽,继续培养则长成粗壮的绿色植株.2,4-D是影响愈伤形成和植株再生的关键物质.本实验结果证明,3.0mg.L-1和0.1mg.L-12,4-D是最佳浓度组合,其诱导频率和分化频率分别为67.82%和48.81%;0.5mg.L-16-BA对根和芽的分化具有促进作用.     

红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】① 在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基; ② 添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%); ③ DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L + 6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳; ④ 在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR +蔗糖35 g/L + NAA 2.0 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。     

水稻佳辐占成熟种胚培养及其悬浮细胞系的建立

以优质早籼稻佳辐占成熟种胚为材料,研究外植体大小、激素对成熟种胚愈伤组织诱导率的影响,并高频快速建立起水稻胚性悬浮系.结果表明在外植体较大并只添加2,4-D一种激素时,就可获得较高的愈伤组织诱导率,2,4-D浓度为1.5 mg/L时,诱导率达95%;浓度为2 mg/L时,诱导率可达100%.佳辐占成熟种胚组织培养最佳的条件为适当大小的外植体和添加浓度为2 mg/L 2,4-D.以4周龄的胚性愈伤组织为材料可高频快速建立起均质、分散性好的水稻胚性悬浮系,5周龄以上的胚性愈伤组织较难建立起水稻胚性悬浮系.     

墨西哥玉米草组培体系的建立及愈伤组织切片观察

墨西哥玉米草是与玉米最近野生近缘种之一，可多茬刈割，产量高，品质好，被誉为青饲料之王，在畜牧业中扮演着重要角色，因此对墨西哥玉米草的深入研究具有重大的科研价值和经济效益．虽然墨西哥玉米草杂交体系已有较多报道，但墨西哥玉米草组培体系却鲜有研究．组培快速繁殖体系是通过生物技术对墨西哥玉米草进行品质改良的基础，因此建立高效的墨西哥玉米草组培快速繁殖体系具有重要意义．文中以墨西哥玉米草 8493 种子为实验材料，在含有2，4-D和6-BA的MS培养基上可以诱导幼苗基部的膨大节间，其在黑暗条件下两周可以诱导出愈伤组织．石蜡切片观察显示愈伤组织具备胚性愈伤特性．