抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织的诱导及增殖

以抗松材线虫病赤松未成熟合子胚为外植体,研究了合子胚发育阶段、激素种类及浓度以及碳源等对胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:发育至2~4阶段的合子胚为胚性愈伤组织诱导的适宜外植体,2,4-D和6-BA是最优激素组合,麦芽糖比蔗糖、葡萄糖更有利于胚性愈伤组织的诱导。抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织诱导率总体较低,以DCR为基本培养基,添加2 mg/L 2,4-D和1 mg/L 6-BA时诱导率最高为5.0%,诱导的胚性愈伤组织在增殖培养基上能够稳定增殖。     

不同激素对蜡梅Chimonanthus praecox愈伤组织诱导的影响

本实验研究了6-BA、2,4-D、IAA、NAA、IBA、KT对蜡梅Chimonanthus praecox愈伤组织诱导的影响,以及探索愈伤组织诱导的最适培养基配方.激素筛选实验结果表明2,4-D能诱导蜡梅分化出愈伤组织.在2,4-D浓度梯度实验中,设计了0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L 7个浓度,结果表明浓度为0.25~1.0 mg/L的2,4-D诱导愈伤组织的效果最好.在6-BA浓度梯度实验中,也设计了0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L 7个浓度,均未诱导出愈伤组织,表明6-BA不能单独诱导出蜡梅愈伤组织.以葡萄糖、6-BA和2,4-D三因素组合正交实验共设置了25个组合,得到诱导蜡梅愈伤组织的最适培养基配方为:1%葡萄糖+0.25 mg/L2,4-D+1.5 mg/L6-BA.     

柳杉种子合子胚的愈伤组织诱导及植株再生

为探索柳杉种子合子胚的愈伤组织诱导技术,选取柳杉4个家系,采集其尚未完全成熟的种子进行愈伤组织的诱导,并经器官发生再生途径得到再生植株。利用6-BA、2,4-D等激素种类及其浓度的正交设计,研究各因素及其交互作用对柳杉种子合子胚愈伤组织诱导的影响。结果发现:柳杉4个家系的愈伤组织诱导量在8月中旬采种时呈明显上升,至8月底时各家系的子叶胚愈伤诱导率达到最高,其中57号家系愈伤诱导率最高,达92%。柳杉4个家系,在不同激素组合中愈伤诱导率存在着一定的差异。其中57号家系子叶胚在DCR+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L培养时,愈伤组织诱导率达到最高,且诱导出来的愈伤组织状态为白色、干燥、无针状突起,结构紧密。愈伤组织在DCR培养基上成功获得再生植株。     

2,4-D和6-BA对水稻愈伤组织培养力的影响

以梗稻“日本晴”成熟种子诱导愈伤组织,统计愈伤诱导率及绿苗分化率,分析培养基中2,4-D和6-BA的不同浓度配比对培养力的影响,得到二者的最适配比,愈伤组织的质量和组织培养中再生植株的频率都有较大提高．实验结果表明：2,4-D是诱导愈伤组织必不可少的因子,与6-BA配合使用对愈伤组织的培养效果更好．对“日本晴”而言,当2,4-D为2．0mg／L,6-BA为0．5mg／L时愈伤组织的诱导率最高;当2,4-D为2．0mg／L,6-BA为0．2mg／L时,绿苗分化率和培养力最高．     

12个草地早熟禾品种愈伤组织诱导体系的研究

 以生产中常见的12种草地早熟禾(Poa pratensis L.)成熟种子为外植体,对其愈伤组织诱导及愈伤组织增殖生长体系进行了优化试验.结果表明,在愈伤组织诱导试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织诱导率在60%~93%之间,2,4-D质量浓度3 mg/L时12个早熟禾品种的愈伤组织诱导率均值最高,达到86%;在2,4-D基础上添加少量6-BA(0.1~0.2 mg/L)后,不同品种愈伤组织诱导率在30%~92%之间,12个品种的愈伤组织诱导率均值有所降低(3.1%~25.4%).在愈伤组织增殖试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织增殖率在38%~164%之间,12个早熟禾品种的愈伤组织增殖率均值在3 mg/L 2,4-D时最高,达到81%;在3 mg/L 2,4-D基础上施加少量的6-BA(0.05~0.2 mg/L)后,愈伤组织增殖率均值有所降低,但存在品种的差异性.研究结果还显示,热激处理对部分草地早熟禾愈伤组织诱导及增殖有一定的促进作用.     

青钱柳幼胚愈伤组织的诱导

以青钱柳幼胚为外植体,研究了不同幼胚期、基本培养基种类、植物生长调节剂种类及其浓度配比对愈伤组织诱导的影响。结果表明,不同发育期的幼胚诱导出的愈伤组织在形态上差异较大,青钱柳种子发育至子叶胚中期较适合愈伤组织的诱导。青钱柳幼胚愈伤诱导时基本培养基以改良DKW效果最佳,诱导率达到了88.89%,且无褐化现象;含2,4-D与KT组合的培养基较适宜愈伤组织的诱导,其中2,4-D(0.5 mg/L)+KT(2.0 mg/L)和2,4-D(1.0 mg/L)+KT(1.0 mg/L)的组合对青钱柳幼胚诱导愈伤组织效果最佳,诱导率分别为80.00%和78.33%。     

激素对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响

比较了2,4-D和Picloram对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响．实验结果表明,培养基中加入2,4-D的诱导效果优于Picloram,2,4-D加入量为6mg／L时,诱导的愈伤组织的分化效果最好．对不同小麦品种幼穗愈伤组织诱导和植株再生的比较结果表明,鄂恩1号、鄂麦11、鄂麦12和山农1355等有较高的植株再生率。其中前3个材料植株再生率达90％以上;从幼穗、幼胚和成熟胚的比较结果来看,幼穗的愈伤组织诱导率和植株再生频率高于幼胚的和成熟胚．     

一品红离体培养及体细胞胚高频率发生的研究

一品红苞片为外植体进行离体培养,以MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1固体培养基愈伤诱导率及相对生长量最高。此培养基中继代的愈伤组织转入MS+2,4-D 1.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+水解酪蛋白80 mg.L-1固体培养基时体细胞胚分化率最高。加入活性碳1 g.L-1有利于高频率体细胞胚发生。MS培养基优于N6和B5培养基,有利于高频率体细胞胚发生。胚性愈伤组织及时转入液体培养基中悬浮振荡培养有利于高频率体细胞胚发生。     

加工番茄的花药培养技术

为确定适宜于加工番茄花药愈伤组织诱导的最佳取材时期和激素组合,以2个加工番茄品种的花药为材料,以醋酸洋红液为染液,压碎法制片,用体视显微镜观察小孢子的发育时期;以MSB培养基为基本培养基,附加不同浓度的植物激素2,4-D、NAA、KT、6-BA、ZT、TDZ进行花药培养,研究不同植物激素组合对加工番茄花药愈伤组织诱导的影响。结果表明:番茄花蕾纵径为5.25-6.19 mm,横径为2.09-3.20 mm,绝大多数的小孢子发育时期处于单核靠边期;不同基因型加工番茄愈伤组织的诱导率不同,品种CK8的诱导率为18.63%,品种CK3的诱导率为14.19%;0.5 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L TDZ是最适宜愈伤组织诱导的激素组合,诱导率为56.52%,其次是0.1 mg/L2,4-D+2.0 mg/L 6-BA的组合,诱导率为56.36%;番茄花药愈伤组织在MS+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/LKT培养基上可形成胚性愈伤组织;4℃低温预处理花蕾的适宜时间为2-5 d。     

葡萄花药胚性愈伤组织的诱导与保持

报道了葡萄花药胚性愈伤组织的诱导与选择方法，并研究了2，4-D和6-BA对愈伤组织胚性保持和褐变的影响．结果表明，2，4-D对葡萄胚性愈伤组织的诱导与保持有重要作用；提高6-BA浓度可促进胚状体分化，但易使愈伤组织褐变。     

外源激素诱导甜瓜下胚轴愈伤组织的效应

在1/2MS的基本培养基中附加2,4-D1.0毫克/升、6-BA2.0毫克/升或2,4-D0.1毫克/升和6-BA1.0毫克/升,都能诱导甜瓜下胚轴发生愈伤组织。但是,不同激素作用下,甜瓜下胚轴愈伤组织的起源不同。2,4-D诱导维管束中薄壁细胞和紧靠维管束的一圈皮层细胞启动。6-BA诱导维管束中发生形成层以及诱导皮层细胞启动。不仅如此,2,4-D和6-BA对甜瓜下胚轴中可溶性蛋白的含量以及过氧化物酶活性影响也明显不同。在过氧化物同工酶谱的分析中发现附加6-BA时,形成的愈伤组织存在着特有的酶带。     

黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

青大1号紫花苜蓿愈伤组织的诱导

为了探讨青大1号紫花苜蓿愈伤组织的最佳诱导条件,本文以MS培养基为基本培养基,分别选用青大1号紫花苜蓿的种子、无菌苗的叶片、根为外植体,通过改变MS培养基中生长素(2,4-D)和细胞分裂素(6-BA)的配比以及光照条件,研究影响紫花苜蓿愈伤组织形成的条件因素。结果表明:在25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,选用种子为外植体,在添加40μmol/L 2,4-D和15μmol/L 6-BA的MS培养基上愈伤组织诱导率为92.5%;选用叶片为外植体,在添加45μmol/L 2,4-D和10μmol/L 6-BA的MS培养基上愈伤组织的诱导率为45%;选用根为外植体,在添加10μmol/L2,4-D和2.5μmol/L6-BA的MS培养基上愈伤组织的诱导率为40%;全日照或者全黑暗都不利于紫花苜蓿愈伤组织的诱导。继代培养发现,25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,10μmol/L 2,4-D的MS培养基上最适宜紫花苜蓿的愈伤组织继代生长。青大1号紫花苜蓿愈伤组织形成的最佳组合为:选用种子为外植体,25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,添加40μmol/L 2,4-D和15μmol/L 6-BA的MS培养基进行诱导,10μmol/L 2,4-D的MS培养基进行继代生长。     

植物激素对荞麦组织培养的研究

分别用荞麦自然苗和无菌苗的幼茎和幼叶作材料进行荞麦的组织培养,结果发现,荞麦愈伤组织诱导的最佳培养基是MS 2,4-D(7.0 mg/L) 6-BA(0.5 mg/L),幼茎的出愈率为100%,在器官诱导实验中发现MS 2,4-D(0.2 mg/L) 6-BA(4.0 mg/L)为芽诱导的最佳培养基,诱导率高达90%;根诱导最佳培养基为MS 2,4-D(4.0 mg/L) KT(0.2 mg/L),诱导率为78%.虽然荞麦自然苗和无菌苗在愈伤组织和芽诱导中无明显差异,但自然苗外殖体愈伤组织的生长和颜色与无菌苗的不同,且芽生长状况也更良好.同时,还探讨了培养基中琼脂浓度对荞麦愈伤组织诱导的影响.     

超甜玉米幼胚愈伤组织诱导研究

以超甜玉米自交系P13、P2、P0、P8为材料,研究了影响愈伤组织诱导的关键因素。结果表明.基因型是影响超甜玉米幼胚愈伤组织诱导的关键因素,P13、P2比P8、P0较易诱导愈伤;幼胚长为1-2mm时,胚性愈伤诱导率最高;2,4-D抑制芽生长,NAA促进芽生长,P13在高浓度的2,4-D（10mg·L^-1）配合高浓度的NAA（5或7mg·L^-1）情况下能够得到较理想的愈伤组织;P2在2,4-D与L-Pro配合使用情况下均有较高的愈伤诱导率和胚性愈伤率。     

尖叶拟船叶藓愈伤组织诱导实验

以尖叶拟船叶藓(Dolichomitriopsis diversiformis (Mitt.) Nog.)原丝体为外植体,研究2种植物激素(2,4-D和6-BA)对其愈伤组织诱导的作用,并在显微镜下观察原丝体细胞在愈伤组织诱导过程中的变化特征.实验结果表明：植物激素对其愈伤组织的诱导是必需的,2,4-D质量浓度为1.0～1.5 mg/L时对愈伤组织诱导无影响,6-BA质量浓度为1.0～1.5 mg/L时能诱导出愈伤组织.     

外源激素诱导甜瓜下胚轴愈伤组织的效应

在1/2MS的基本培养基中附加2,4-D1.0毫克/升、6-BA2.0毫克/升或2,4-D 0.1毫克/升和6-BA1.0毫克/升,都能诱导甜瓜下胚轴发生意伤组织。但是,不同激素作用下,甜瓜下胚轴愈伤组织的起源不同。2,4-D诱导维管束中薄壁细胞和紧靠维管束的一圈皮层细胞启动。6-BA诱导维管束中发生形成层以及诱导皮层细胞启动。不仅如此,2,4-D和6-BA对甜瓜下胚轴中可溶性蛋白的含量以及过氧化物酶活性影响也明显不同。在过氧化物同工酶谱的分析中发现附加6-BA时,形成的愈伤组织存在着特有的酶带。     

粳稻成熟胚愈伤组织诱导及其分化培养体系的建立

为了促进新型高产水稻品种的抗病性,以粳稻成熟胚为外植体,通过诱导培养基、继代培养条件、分化培养路线、光照强度和蔗糖浓度的优化,建立了适合新稻18和豫粳6号的高效再生体系.结果表明:选择适宜的培养基是提高愈伤组织诱导率及愈伤组织质量的基础.新稻18和豫粳6号的水稻成熟胚诱导愈伤组织的培养基分别为MB1(MSB5+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L+KT 1 mg/L+ABA 1 mg/L)和MB2(MSB5+2,4-D 3 mg/L+6-BA 1mg/L+ABA 0.5 mg/L),愈伤诱导率分别达95.24%和91.07%;愈伤组织剥离后的继代培养基为MB3(MSB5+2,4-D 3.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L);愈伤组织的分化培养路线为三步分化法MSD0/N6B5D0→N6B5D2→MSD0,适宜的分化培养温度为33℃,光照强度为43.75μmol.m-2.s-1.新稻18和豫粳6号的愈伤分化率最高分别达到99.3%和83.33%.     

茶愈伤组织诱导的研究

以茶树苗的叶片和幼茎为外植体诱导愈伤组织,比较了不同激素组合对叶片和幼茎诱导愈伤组织的影响.结果表明,叶片和幼茎均能诱导愈伤组织,但幼茎的愈伤组织诱导率较高,叶片的愈伤组织诱导率较低.叶片、幼茎愈伤组织培养的较适培养基是MS 6-BA(0.4 mg/L) 2,4-D(2 mg/L).     

益母草试管苗愈伤组织培养及其生物碱含量的测定

以种子萌发的试管苗叶片为外植体,采用正交试验探究了其愈伤组织的形成,并测定了其生物碱含量。结果表明:1.5 mg/L 6-BA利于种子萌发,其萌发率最高达26.39%;叶片愈伤组织诱导适宜培养基组合为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+20 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,诱导率可达80.00%;适宜愈伤组织增殖激素组合为2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L 2,4-D,增殖率可达88.05%,但各激素组合对愈伤组织生物碱的含量并无显著性差异。