香根草愈伤组织的诱导和快速繁殖

为了寻找大批量快速繁殖香根草的有效办法,以香根草的茎段、茎节为实验材料进行愈伤组织的诱导和快速繁殖的实验.用不同浓度的6-BA、IAA、2,4-D对其不同的外植体进行试验.结果表明:在愈伤组织诱导实验中,MS培养基附加6-BA 0.5mg/L 2,4-D 2.0mg/L的激素组合对茎段愈伤组织诱导效果最佳;将产生的愈伤组织团转入分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加6-BA 3.5mg/L IAA 0.2mg/L;再生苗在MS培养基附加6-BA 3.0mg/L IAA 0.5mg/L的培养基上,进行生根培养效果较好.可见,茎段和茎节均可作为外植体.考虑到茎段数量较大,易取材,且效果明显优于茎节,认为茎段是香根草组培快繁的理想外植体.     

枸杞组培快速繁殖技术研究

通过对“宁杞2号”离体组织培养试验,及对愈伤组织诱导和生根状况的研究,进而探索了组培快速繁殖技术,通过试验筛选出了适宜的愈伤组织诱导和生根的培养基。结果表明,最佳的愈伤组织诱导培养基为：1／2MS＋BA1mg／L＋NAA1mg／L;最适的生根培养基为：1／2MS＋NAA0．6mg／L＋IBA0．2mg／L。     

中华芦荟特性与组织培养技术

通过以中华芦荟萌蘖芽或无木质化茎段为外植体进行愈伤组织和不定芽诱导，进行组培增殖，生根培养和试管苗移栽，实验中华芦荟的快速繁殖和规模生产。     

铃兰高效繁育体系条件探究①

为了解决铃兰组培过程中的污染问题,构建高效繁育体系,采用铃兰不同器官作为外植体,以愈伤组织形成率及污染率作为评价指标,比较培养基配方、抑菌剂种类和浓度对愈伤组织诱导及组培污染菌的影响,筛选出铃兰高效繁育体系。结果表明:(1)不同外植体诱导愈伤组织的能力不同,对激素的要求也有所不同,铃兰嫩芽配合附加0.3mg/L 6-BA和0.2mg/L NAA的MS培养基组合对愈伤组织的诱导效果最好;(2)浓度为0.20g/L的代森锰锌能够有效的抑制组培污染菌的形成,污染率可降低至4.70%,同时对愈伤组织的形成具有促进作用,是最佳的抑菌剂选择。     

日本结缕草茎节和愈伤组织再生体系的优化

分别以日本结缕草的成熟胚和茎节为外植体,建立并优化了2套组培再生体系.实验结果表明:利用成熟胚诱导愈伤组织,适宜诱导培养基为MS基本培养基添加2 mg/L 2,4-D配合0.2 mg/L 6-BA,诱导率为42.5%;继代培养可改善愈伤组织状态,增加胚性,其中增加培养基渗透压,并适当添加ABA(0.2 mg/L),可明显提高胚性愈伤组织比率;继代2次后的愈伤组织在3种细胞分裂素6-BA,KT,ZT适当配比的分化培养基上,分化率可达到50%~75%.在以茎节为外植体的组培体系中消毒处理和预培养是比较关键的环节;预培养时MS培养基效果优于1/2 MS,在MS基本培养基中添加0.25 mg/L KT,1.0 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA为比较适合的芽诱导培养基,诱导率可达37.9%.同时,比较了两套再生体系的优缺点,为日后日本结缕草的遗传转化奠定基础.     

两种补血草属植物愈伤组织诱导的比较

以黄花补血草和大叶补血草无菌苗叶片为外植体,采用不同激素配比诱导愈伤组织,并分化获得不定芽,以建立两种补血草无性系,为植株快繁和细胞悬浮培养提供理论依据.结果表明:以补血草无菌苗叶片为外植体进行愈伤组织诱导和分化,可实现补血草快速繁殖,黄花补血草愈伤组织的诱导和分化较大叶补血草的容易.黄花补血草最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA(0.3～0.5 mg/L) NAA(1.0～2.0 mg/L),最适分化培养基为MS 6-BA(0.3～1.0 mg/L) NAA(0.5～1.0mg/L);大叶补血草最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA(0.3～0.5 mg/L) NAA 2.0 mg/L,最适分化培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L.     

乌头组培快繁的技术探讨

用普通ＭＳ培养基进行乌头组培快繁的研究,乌头的愈伤组织容易形成,培养基中附加ＢＡＩｍｇ／ｌ和ＫＴｌｍｇ／Ｌ可以从叶腋产生健壮的苗,从愈伤组织诱发出根需附加ＫＴｌｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ,但达到快速繁殖的目的仍存在一些问题。     

车窝草嫩叶无性系建立的研究

研究了车窝草嫩叶愈伤组织的诱导、分化、试管苗生根、移栽、扦插所需要的条件，建立起优良植株的无性系及快速繁殖技术．结果证明，诱导嫩叶愈伤组织的理想培养基是MS＋BA0．4mg／L＋2，4-DO．4mg／L；愈伤组织分化的理想的培养基是MS＋BA0．5mg／L；生根的理想培养基是1，2MS＋IAA0．4mg／L～0．8mg／L，以炉灰渣为试管苗的移栽扦插基质，移栽成活率为100％，扦插成活率为95％；田间栽培的试管菌长势好于实生苗。     

半夏疏松愈伤组织诱导的研究

获得生长快速，疏松型愈伤组织是植物细胞悬浮培养的前提．用半夏叶片作外植体，采用单因子法，在添加不同浓度的2，4-D和BA的MS固体培养基上诱导半夏愈伤组织，比较愈伤组织的诱导率、性状和长势，其中当MS 3.0mg／L2，4-D 0．5mg／LBA时，愈伤组织诱导率和长势最好，为疏松愈伤组织系．结果表明：相同激素，不同浓度配比对愈伤组织诱导率、长势和发生的性状有明显的影响．     

红叶李组织培养快繁技术

通过培养红叶李的不同外植体，建立适宜的组织培养条件和快繁技术，为红叶李的组培繁殖提供技术参考。采用MS为基本培养基，添加不同浓度的激素，以茎尖、腋芽、茎段和叶片作为外植体进行培养。结果表明：茎尖和腋芽既能诱导芽的生长又能诱导愈伤组织，且诱导效果较好，而茎段仅能诱导产生愈伤组织，叶片的诱导效果不明显。BA1．0mg／L 2，4-D0．5～2．0mg／L组合的诱导效果最佳，单芽在BA1．0mg／L IBA0．5～2．0mg／L培养基中继代培养都能诱导产生丛芽，诱导率达70％。     

翅果油树组织培养染色体制片方法的探讨及其染色体稳定性研究

本实验从解离条件、取材时间、培养时间、预处理药剂与时间等方面探讨了翅果油树愈伤组织染色体观察的制片方法,并在细胞水平上对翅果油树愈伤组织的染色体稳定性进行了研究.得出了翅果油树愈伤组织的最佳制片方法.翅果油树的染色体在组织培养过程中存在着一定程度的变异,且其变异率随继代次数的增加呈上升趋势.但细胞学的变异只能解释少数较极端的无性系变异,更多的无性系变异则有待于从DNA水平和生化水平进一步研究.     

蚕豆子叶愈伤组织的生长与分化

利用蚕豆(Vicia faba)未成熟种子的幼龄子叶为外植体,以MSB_5为基本培养基,可较好的克服蚕豆组织和细胞培养中遇到的诱导率低、生长缓慢、褐化死亡等困难。第一代或继代一次的蚕豆幼龄子叶的愈伤组织可分化出幼芽和根。继代两次以上的愈伤组织则失去分化能力,但仍能继代培养,现已继代培养两年之久,可作为植物细胞工程的原始材料加以利用。     

西红花愈伤组织的诱导与花柱愈伤组织的继代、悬浮培养

以西红花的球茎,叶片和花柱为外植体诱导愈伤组织,叶片诱导培养形成白色膨大组织,球茎培养得到松散型白色愈伤组织,诱导球茎愈伤的培养基为5mg/L 6-BA 8mg/L NAA,在球茎愈伤组织中的紫外部分没有检测到西红花甙,西红花醛和西红花苦甙,在花柱愈伤组织中检测到西红花醛,适合于继代和悬浮培养,经悬浮培养后,在培养液中可检测到西红花醛和西红花苦甙,悬浮培养有利于次和一代谢的积。     

濒危植物延龄草愈伤组织诱导研究

通过延龄草愈伤组织诱导研究发现,延龄草根茎所产生的愈伤组织在1/2 MS BA(苄基氨基嘌呤)1.2 mg.L-1 IAA(吲哚乙酸)0.6 mg.L-1培养基中较好,诱导频率为83.33%;在1/2 MS BA 1.2 mg.L-1 IAA 1.2 mg.L-1培养基中次之,诱导频率为66.67%;在1/2 MS BA 1.2 mg.L-1 IAA 0.2 mg.L-1培养基中也能产生,但质地较差,诱导频率为22.22%;在1/2 MS BA 1.2 mg.L-1 NAA(萘乙酸)0.2mg.L-1培养基中也能产生少量.可见,以1/2 MS作为基础培养基,加入1.2 mg.L-1BA和0.6 mg.L-1IAA,以根茎为外植体进行延龄草组织培养,能产生大量的愈伤组织.研究表明,利用组织培养繁殖延龄草是一种有效、可行的途径.     

紫花苜蓿耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究不同激素对紫花苜蓿2号愈伤组织的诱导效果,筛选出最佳诱导愈伤组织培养基;以茎尖、茎段及叶片作为外植体,确定了叶片作为紫花苜蓿组织培养的最佳外植体;在1/4、1/3及2/3 3种不同海水培养基上分别诱导出紫花苜蓿耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株.     

向日葵耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究了不同激素对康地5号向日葵愈伤组织的诱导效果,筛选出了最佳诱导愈伤组织培养基;以子叶、下胚轴及真叶作为外植体。确定了子叶和下胚轴作为康地5号组织培养的最佳外植体;在含50、100、及150mmol／L NaCl不同盐浓度培养基上分别诱导出向日葵耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株．     

黄瓜组织培养与蛋白含量及抗氧化酶活性的变化

通过对黄瓜子叶组织培养,研究了黄瓜子叶外植体龄对愈伤组织诱导的影响及体内可溶性蛋白含量,CAT,POD,SOD几个生理指标的变化及其与愈伤组织诱导的关系.结果表明:接种在MS(MS+6-BA(1 mg/L)+AgNO3(2 mg/L))培养的3～5 d子叶外植体的愈伤组织诱导能力最强.子叶的抗氧化酶活性及蛋白含量与诱导愈伤组织能力之间存在明显相关性,CAT和SOD与愈伤组织诱导呈负相关,POD和蛋白含量与愈伤组织诱导呈正相关.     

2,4-D和6-BA对水稻愈伤组织培养力的影响

以梗稻“日本晴”成熟种子诱导愈伤组织,统计愈伤诱导率及绿苗分化率,分析培养基中2,4-D和6-BA的不同浓度配比对培养力的影响,得到二者的最适配比,愈伤组织的质量和组织培养中再生植株的频率都有较大提高．实验结果表明：2,4-D是诱导愈伤组织必不可少的因子,与6-BA配合使用对愈伤组织的培养效果更好．对“日本晴”而言,当2,4-D为2．0mg／L,6-BA为0．5mg／L时愈伤组织的诱导率最高;当2,4-D为2．0mg／L,6-BA为0．2mg／L时,绿苗分化率和培养力最高．     

根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究

采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.     

消毒剂对小麦组织培养的影响

通过对家用洗涤剂和升汞设置不同的处理时间梯度,比较了家用洗涤剂和升汞作为消毒剂对小麦幼胚、幼穗组织培养效果的影响,结果表明,体积分数为10%的白猫洗涤剂消毒处理20min与质量分数为0.1%的升汞消毒处理10min具有等同、高效的灭菌效果和组织培养效果,在单个组合中的抗污染率、愈伤组织胚性率、生根率、植株再生频率和绿点分化频率最高均可达100%,且显著高于所设置的其他各个梯度时间的处理效果;不同外植体的比较结果证实了幼胚的植株再生频率和每团愈伤组织的出苗数都显著高于幼穗.