猫细小病毒 PCR 检测方法的建立及初步应用

摘要: 目的 建立猫细小病毒 PCR 检测方法,应用于猫临床样本中 FPV 的快速检测。方法 根据已发表的 FPV VP2 基因序列设计合成引物,并以此建立 FPV 的 PCR 检测方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。 用建立的方法对 33 份猫临床样品进行检测。结果 建立的 FPV PCR 检测方法与猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)、猫冠 状病毒(FeCV)、猫合胞体病毒(FeSFV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为 5lgTCID50 / mL,相应的 DNA 模板浓度为 4. 9 × 102 拷贝/μL;FPV DNA 在 － 30℃冰箱放置 12 个月仍可检测出目的条带。应用 该方法从 33 份猫临床样本中检测出 21 份 FPV 核酸阳性。结论 建立的 FPV PCR 检测方法具有特异、敏感及稳定 的特点,适合于临床 FPV 的感染检测。     

猫疱疹病毒Ⅰ型( FHV-1) 抗体 ELISA 检测方法的建立与初步应用

摘要: 目的 建立猫疱疹病毒Ⅰ型( FHV-1) 抗体 ELISA 检测方法,应用于临床样品中 FHV-1 抗体的检测。方法 培养猫肾传代细胞( CRFK) ,接种 FHV-1 病毒,制备 CRFK 正常抗原和 FHV-1 特异抗原,滴定山羊抗猫 IgG-HRP 和 抗原最佳工作浓度,并进行特异性、敏感性、稳定性及精密性实验。结果 正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工 作浓度分别为 0. 05 μg /mL、10 μg /mL 和 1∶ 5 000; 正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为 8. 7% 和 5. 8% ,批间平均变异系数分别为 11. 9% 和 6. 6% ; 检测灵敏度为 1∶ 6 400; 与猫细小病毒( FPV) 、猫杯状病毒( FCV) 均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于 25% 。结论 建立的 ELISA 方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强,可用于猫 FHV-1 抗体的检测。     

猫传染性腹膜炎的研究进展

猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）是猫冠状病毒家族的成员，猫传染性腹膜炎（FIP）难以治愈，死亡率高，虽然目前学术界对于FIP已取得了不少的研究进展，但却始终没有有效的、全面的诊断和治疗方法，针对FIPV感染的药物发展缓慢。详细介绍了FIP的发生机制、相关治疗方案以及相关治疗药物对FIP治疗的有效性和差异性。     

猫疱疹病毒Ⅰ型的分离与鉴定

目的从临床疑似猫病毒性鼻气管炎的病例中分离猫疱疹病毒Ⅰ型。方法用猫肾细胞(FK-81)对临床疑似猫病毒性鼻气管炎病猫的眼鼻分泌物进行分离培养,连续传4代,对获得的培养物进行了电子显微镜观察、血凝试验、病毒核酸型试验、理化特性试验以及PCR扩增和扩增产物基因测序鉴定。结果该病毒粒子呈球形,直径为160 nm左右,有囊膜。凝集猫红细胞,不凝集猪、兔、犬、小鼠和鸡的红细胞。病毒对乙醚、酸、热、胰蛋白酶敏感,其核酸型属DNA。PCR扩增为猫疱疹病毒Ⅰ型阳性,扩增产物基因序列与Nunberg等报道猫疱疹病毒Ⅰ型的基因序列同源性为100%(登录号:M26660)。结论在国内首次成功分离一株猫疱疹病毒Ⅰ型,其形态、血凝性、理化特性、基因序列等与国外文献报道一致,为猫病毒性鼻气管炎病原学、疫苗免疫、诊断及分子生物学研究奠定基础。     

猫传染性腹膜炎的诊断

目的对临床疑似猫传染性腹膜炎病例进行分子生物学、病理学诊断。方法根据冠状病毒3'UTR保守基因序列设计一对引物,对4例病死猫的组织器官和10例腹水进行RT-PCR检测,并对扩增产物进行序列测定;同时对所有病死猫组织器官进行组织病理学诊断。结果RT-PCR扩增产物克隆测序结果与GenBank中猫传染性腹膜炎病毒基因序列同源性为97%~98%。小肠浆膜、肝脏、脾脏等组织可观察到典型的炎性肉芽肿样变、灶性坏死和炎性细胞浸润。结论证实了4只病死猫感染了猫传染性腹膜炎病毒,且10例腹水中检测到猫传染性腹膜炎病毒核酸。     

诺瓦克病毒及实验动物感染

诺瓦克病毒(Norwalk virus,NV)和诺瓦克样病毒(Norwalk-like viruses,NLV)是一组世界范围内引起的急性无菌性胃肠炎的重要病原.NV是一组形态相似、核苷酸同源性较高、抗原性略有不同的病毒颗粒.     

牛病毒性腹泻病原的分子生物学与检测技术研究进展

腹泻是牛群中最常出现的疾病。病毒引起的牛病毒性腹泻是一种传染性腹泻,会给牧场造成巨大的经济损失。目前研究发现,引起牛腹泻的病毒主要有牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)、牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEnV)等。此外,牛凸隆病毒(Bovine torovirus,BToV)、牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNoV)、牛纽布病毒(Bovine nebovirus,BNebV)、牛星状病毒(Bovine astrovirus,BoAstV)及牛嵴病毒(Bovine kobuvirus/aichivirus B,BKoV)也可诱发牛腹泻。随着病原检测技术,尤其是分子检测技术的进步,许多检测方法如IEM、RT-PCR、ELISA和PAGE已用于病毒的检测和疾病诊断。本文结合国内外文献资料,对牛病毒性腹泻的病原分子生物学特征及诊断技术进行概述,以期为牛腹泻的致病原因和检测技术的进一步研究提供基础。     

信息

近来病毒学家研究发现,雪貂和家养猫也能够感染并传播SARS病毒,一个独立研究小组声称,中国动物交易商船———特别是那些从事野生哺乳动物交易的商船,具有较大携带病毒危险性。研究者们有意让猫去接触病毒,但是最后猫没有明显发病症状,但是这种病毒可在猫血液中进行复制;雪貂在     

闽南养殖九孔鲍暴发性流行病的病原研究

从1999年春季东山县九孔鲍暴发流行病的病鲍内脏提取病原粗提液,经电镜观察和回归感染实验,证实其病原主要是病毒合并细菌感染,细菌为两种弧菌,病毒为球形,其发生基质为细胞质中一种双层膜的泡状结构,观察到病原入侵后引起鲍的组织细胞产生严重的病理变化,探讨病原的入侵途径,提出预防该流行病的一些措施.     

鱼类神经坏死病毒研究进展

神经坏死病毒(nervous necrosis virus, NNV)是病毒性神经坏死病(viral nervous necrosis, VNN)的病原，可感染120余种海水鱼，感染后导致鱼类脑部与视网膜空泡化，发病死亡率最高可达100%.综述了神经坏死病毒的基因组、编码的蛋白、病毒的受体、诱导的免疫反应以及病毒的检测与防治研究，并对该疾病未来的防治手段和研究方向进行了探讨，以期对科学防治神经坏死病提供理论依据，推进石斑鱼、海鲈鱼等海水鱼养殖业的发展.     

一株Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒强毒株的分离鉴定及全基因组序列分析

目的 对一例典型草鱼出血病的病原进行分离、鉴定和全基因组序列分析.方法 采用细胞培养分离病毒、PCR检测和测序分析、电镜观察、间接免疫荧光(IFA)分析、全基因组序列测定及回归感染鉴定对采集的草鱼出血病样品进行病原分析.结果 接种病毒的细胞没有产生CPE,但电镜观察可见大量呈典型呼肠孤病毒特点的病毒粒子,PCR检测并测...     

虎皮猫初步用于抗菌素降压试验

用我厂培育的新品种猫—虎皮猫和原有的杂色猫进行了麻醉效应和降压效应试验,结果表明这两种猫均可用于药品的降压物质检查,虎皮猫由于遗传性状相对稳定,试验结果略优于杂色猫。     

(日本)实验动物34卷3期——1985年7月

原著 1.实验用猫的猫疤疹病毒和猫杯状病毒感染的血清学及病毒学的调查 /、神健一,古川敏纪,福井正信…241 (摘要)筑波大学实验动物研究中心对实验用猫进行了猫疤疹病毒(FHV)和猫杯状病毒(FCV)的血清学调查和病毒分离。1978一1981年间,调查了507只成年猫和未成年猫,年令为4个月或更大些。其中102只(占20一%)有抗FHV的Hl抗体,412只(占81 .3纬)有抗FCV的SN抗体。在142只不足4月令的小猫中,有23只 (占16.2%)检出抗FHV抗体,有76只(占53.5%)检出抗FCV抗体。作者认为小猫的这两种抗体来源于母体。在体重为2.skg (雄)和2.okg(雌)或更重些…     

猫免疫缺陷综合症的实验研究

<正> 作者描述了具有强烈免疫抑制作用的一株猫白血病病毒(FeLV)的鉴定、实验性感染及致病特性。该毒株从一只自然感染猫白血病病毒的猫胸腺淋巴瘤组织中分离得到。作者称之为猫白血病—艾滋病病毒(FeLVFAIDS)。25只SPF猫经鼻腔、腹腔接种这种病毒后,都能产生持续性的病毒血症及致死性和获得性免疫缺陷综合症(AIDS)。由于接种时猫年龄的不同,可发生急性免疫缺陷综合症和慢性免疫缺陷综合症。前者的接种后存活时间在3月以下,多发生于8周龄以下的猫,后者的存活时间在一年以上,多发生于15周龄以上的猫。猫白血病—艾滋病病毒诱发的免疫缺陷综合症有如下特征:接种后有一个无症状的病毒血症时期;体重逐渐下降;当淋巴组织的淋巴小结增生时,病毒     

相互关爱共享生命--第16个"世界艾滋病日"之际记人类抗击艾滋病20年

自1983年由美国国立卫生研究院(NIH)肿瘤研究所(NCI)的盖洛(Gallo)(图1)和法国巴斯德研究所的蒙塔格尼。(Montagnier)(图2)两人共同发现艾滋病病原为人类免疫缺陷病毒(human immunodeficint     

中国猫蛛属2新种记述(蜘蛛目:猫蛛科)

记述中国云南猫蛛科猫蛛属2新种:镰形猫蛛Oxyopes falcatus sp. nov. 和奇异猫蛛O.mirabilis sp. nov..模式标本保存在河北大学博物馆,文中测量单位为mm.     

猫也会耍“酒疯”

能让猫疯狂的植物是假荆芥。家猫吃了这种植物会像山猫甚至狮子一样凶猛,它们会摇头晃脑,四处乱跑,大吼大叫,一般会发疯15分钟,然后会慢慢平静下来,但不出几个小时,它们会再次发作。猫之所以会这样,是因为假荆芥里含有一种化学物质。现在还不知道这种化学物质是如何作用于猫的脑部,但这种物质有可能刺激猫的味觉器官。研究发现,有1/3的猫对假荆芥没有反应,那些吃了假荆芥就发疯的猫体内有一种特殊的基因。奇怪的是,假荆芥对于人类却有镇定作用。因此,这种植物也常被用来制作治疗偏头痛的药。猫也会耍“酒疯”     

对虾病毒性白斑病的流行病学

在福州地区分离到一种高致病性的白斑病病毒,该病毒致病性强,可感染不同品种、不同生长期和不同形体大小的个体．引发的病害潜育期短、病程短、死亡率高．病害覆盖面积广,发病时间大多集中在6月和9月,其中以6月中下旬最为集中．以长毛对虾为对象测定温度与侵染性关系,结果表明,高温可促进发病,低温可延缓发病并延长病程;在长毛对虾生长的适温范围(8～32℃)内,病毒均可侵染并造成寄主发病．病毒的感染途径主要是经口感染,通过摄食饵料和携带病原的病弱个体等方式传播,正常情况下,不会经水传播．     

猫眼内压升高对视网膜节细胞及视神经的影响

在人为升高猫IOP(眼内压)条件下,记录了视网膜节细胞反应及ONR(视神经反应),并与同时记录的ERG (视网膜电图)进行了比较,发现不同视网膜节细胞的耐压性也不同,ONR 与ERG 几乎平行消失。在两只猫上同时记录了VECP(视皮层诱发电位)与ERG,发现ERG 先于VECP 完全消失,这与家兔的类似实验比较结果不同。     

鸭病毒性肝炎的诊断与治疗研究进展

鸭病毒性肝炎是雏鸭的一种高致死、高度传播的病毒性疾病,并常和其他病毒、细菌混合感染,雏鸭一旦感染,可在鸭群中迅速传播,且病死率高,使养殖户遭受严重的经济损失.文章简要概述了鸭病毒性肝炎综合诊断方法,包括流行病学,病原检测和治疗的研究情况.