致病疫霉菌株交配型的检测及其检测方法的比较

致病疫霉(Phytophthora infestans)是马铃薯晚疫病的病原体,可导致马铃薯大面积减产。致病疫霉的有性生殖可以产生卵孢子,由于其抗逆性较强,利于致病疫霉渡过不利的生存环境,给马铃薯晚疫病的有效防治带来巨大的困难。致病疫霉的有性生殖属于异宗配合,即A1、A2交配型同时培养时才会产生卵孢子。因此,快速而有效地检测致病疫霉菌株的交配型将为致病疫霉有性生殖分子机理的研究及致病疫霉的防治奠定基础。通过直接配对法、纸盘法和分子标记法三种方法,对5株来源不同的致病疫霉菌株进行了交配型检测。三种方法的检测结果均表明,菌株HQK8-3、2PO-D、USA1的交配型与ATCC标准菌株64093的交配型一致,为A1交配型,而菌株2PO82001、P7723的交配型与ATCC标准菌株32835的交配型一致,为A2交配型。说明三种方法均可有效鉴定致病疫霉交配型,但三种方法各有优缺点,应根据实验条件,采取合适的方法进行菌株交配型测定。     

辣椒疫霉菌拮抗细菌的筛选、鉴定及防效测定

从天津、河北、山东、山西、福建、河南及江苏等地蔬菜根际土壤中分离细菌1万余株,从中筛选出对辣椒疫霉菌Phytophthora capsici有明显拮抗作用的细菌802株,进一步用立枯丝核菌Rhizoctonia solani、番茄灰霉菌Botrytis cinerea及瓜果腐霉菌Pythium aphanidermatum为靶标筛选出对以上病原真菌有较好拮抗作用的菌株62株。对辣椒疫病防效温室盆栽实验结果表明,6个菌株防效在70%以上,其中菌株TB1340防效最高,达到82%。菌株TB1340生物学特性测定结果表明其具有较强的产生几丁质酶、纤维素酶和β-1,3-葡聚糖酶活性。经16S rRNA基因序列分子鉴定结合形态学观察,菌株TB1340被初步鉴定为芽孢杆菌Bacillus sp.。     

云南省水稻稻瘟病菌有性交配型分布和2套近等基因系的鉴别能力

水稻稻瘟病是世界范围内的毁灭性病害。稻瘟病菌有性态的研究将为病菌的遗传学和病害的生态学奠定基础 ,致病类型鉴定对水稻新抗病基因发掘和抗病品种布局具有重要意义。本文采用对峙培养和接种的方法对云南省稻瘟菌的交配型分布、和近等基因系上鉴定能力进行了研究。2 6 1个来自云南各地州、市、县的稻瘟病菌株与交配型标准菌株杂交试验表明 ,其中 6 3个菌株能进行有性交配并形成典型的子囊壳和子囊孢子 ,占总菌株的 2 4 .14 % ;其中 6 2个菌株为MAT1型 ,仅 1个来自牟定县的菌株A牟 0 1 1 1为MAT2型。测定了15个可育菌株在CO39、丽江新…     

烯酰吗啉、甲霜灵-锰锌对辣椒疫霉的抑菌活性

采用菌落生长速率法,测定了烯酰吗啉、甲霜灵-锰锌对辣椒疫霉的抑制活性.试验结果表明:甲霜灵-锰锌对辣椒疫霉菌丝生长的抑制EC50,EC95值分别为172.78,2208.51 mg/L;烯酰吗啉对辣椒疫霉菌丝生长的抑制EC50,EC95值分别为7.24,34.98 g/L.烯酰吗啉对辣椒疫霉菌丝生长比甲霜灵-锰锌有较高的抑制活性,甲霜灵-锰锌对辣椒疫霉菌丝生长的抑制效果不明显.     

致病疫霉产孢子囊培养基及诱导方法的筛选

致病疫霉(Phytophthora infestans)A2交配型菌株P7723不易产生孢子囊。为了获得大量的孢子囊,试验研究比较了5种不同培养基及7种不同诱导方法对致病疫霉孢子囊产量的影响。研究结果表明:5种培养基中只有燕麦培养基(OMA)和大豆培养基(BA)能产生孢子囊,分别为(106±6.29)、(273±6.86)个/cm~2,其余培养基均未产生孢子囊。在7种诱导孢子囊产生的方法中,40℃处理、菌丝丛水培处理(10%V8)、皮氏溶液处理和土壤浸出液处理4种方法能诱导原本不产生孢子囊的3种培养基产生孢子囊;其中,40℃处理的诱导效果最好。此外,40℃处理也使原本产生孢子囊的OMA、BA培养基上的孢子囊量显著增加。在所有培养基的不同处理中,40℃处理的CA培养基上菌株产生的孢子囊量最多,可达到(767±7.98)个/cm~2。试验为研究致病疫霉菌生长发育过程中的基因表达分析及遗传转化奠定了基础。     

电镜观察疫霉菌对辣椒组织细胞的侵染机理

本文主要介绍了用透射电镜研究辣椒疫霉菌病对辣椒组织细胞侵染后的形态发生。侵染后的幼苗外部出现典型症状:茎部褐变、枯萎、叶片腐烂。疫霉菌主要侵染地表以下的主根和根茎部,致使植株萎蔫、坏死。电镜结果证实了疫霉菌侵染在辣椒茎部的韧皮薄壁组织细胞。疫霉菌的茵丝细长,是无隔膜菌丝,其内有核和核仁及电子密度高的深色物质和空泡。     

抗生素AGPM高产菌株选育及其蛋白差异分析

从土壤中分离得到一株能产生新型抗生素AGPM的藤黄灰链霉菌菌株,利用紫外线和硫酸二乙酯对新型抗生素AGPM产生菌藤黄灰链霉菌099菌株进行了联合诱变处理,最终得到了一株高产菌株TD0551,其抗生素AGPM产量可达到16．45mg/L,为出发菌株的2．1倍,应用蛋白质二维凝胶电泳技术分析了藤黄灰链霉菌的蛋白质组,比较了高产菌株与低产菌株在分泌AGPM过程中的蛋白质组差异。结果表明,在高产菌株的蛋白样品中有11个特异点,而在低产菌株的蛋白样品中有3个特异点,这些蛋白特异点可能与新型抗生素AGPM的合成有关。     

小麦体细胞胚发生中蛋白质组分和过氧化物酶同工酶的变化

用PAGE及薄层找扫描方法分析了小麦体细胞胚发生和发育的不同阶段蛋白质组分和过氧化物酶酶谱的变化。胚性愈伤组织,从球形胚、梨形胚,盾片胚到成熟胚不同发育时期蛋白质电泳图谱相似,与对照(非胚性愈伤组织)明显不同。前者有18KD,49KD,78KD的蛋白质组分,其含量随发育进程而上升。对照则无这些蛋白质组分或含量很低,但含有特异的14KD蛋白质。胚性愈伤组织和体细胞胚的不同发育时期过氧化物酶同工酶酶谱极其相似,都具有C_2、C_6、C_93条特异酶带,但活性有差异。对照不存在这3条酶带。再生苗的蛋白质电泳图谱和过氧化物酶同工酶酶谱介于胚性和非胚性组织之间。     

河北省和黑龙江省马铃薯晚疫病菌SSR基因型分析

用SSR分子标记,对致病疫霉群体结构进行分析,完善了中国研究晚疫病菌的分子标记体系。利用两个SSR引物Pi4B和Pi4G对来自河北和黑龙江两个省份的58个马铃薯晚疫病菌株基因组DNA进行SSR基因型鉴定,分析其遗传多样性。河北省的菌株共鉴定出4个SSR基因型:D-03,F-01,G-02和F-06。其中,F-06是首次报道的新的SSR基因型。黑龙江的菌株共鉴定出2个SSR基因型。在两省的菌株中,基因型F-01所占比例都最大,且占绝对优势。不同交配型可存在于同一SSR基因型中,同一SSR基因型的菌株对甲霜灵的敏感性存在差异。聚类结果还显示占被测菌株群体最大比例的F-01基因型与国外的对照菌株的亲缘关系较远。     

不同国槐根茎腐烂病镰刀型致病菌的同工酶分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对分离于聊城地区国槐根茎腐烂病的24个镰刀菌菌株进行了可溶性蛋白质和同工酶电泳图谱分析及聚类分析,明确了镰刀菌生理分化的物质基础.研究表明,镰刀菌在可溶性蛋白质和EST、SOD、PPO、POD等同工酶存在差异,不同菌株之间某些同工酶谱带数和同一迁移率谱带的亮度和色泽差异非常显著,说明镰刀菌不同种或同种不同菌株间的多态性可在同工酶水平上得到反映.研究还发现,同工酶的变化与镰刀菌的种类以及侵染部位密切相关.     

烤烟品种NC297内生细菌中拮抗烟草黑胫病的生防菌筛选及种群组成分析

 从来自烤烟品种NC297的970株内生细菌中,以烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae) 为靶标,共筛选出165株拮抗菌,这些内生细菌对黑胫病菌的抑菌率在9.55%~55.96%之间.内生细菌的生物量在苗期、团棵期、开花期和成熟期中无显著差异,但拮抗菌数量呈上升趋势.对165株拮抗菌的16S rRNA基因序列进行RFLP分析共产生12种带型.根据RFLP带型选取41株进行16S rRNA基因序列测定和系统发育分析.结果表明这165株生防内生细菌归于3大类群:Proteobacteria,Actinobacteria和Firmicutes.Firmicutes类群中的芽孢杆菌属(Bacillus)是优势属,共6种RFLP带型,159个菌株,包括Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum,Bacillus methylotrophicus,Bacillus tequilensis,Bacillus aryabhattai,Bacillus cereus和Bacillus mycoide.Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum和Bacillus.methylotrophicus是Bacillus中分离频率最高的2种内生拮抗菌,共149株,占该属菌株数的90.30%.其余6个菌株分别属于6个种:Brevibacillus reuszeri,Streptomyces finlayi,Streptomyces atroolivaceus,Erwinia rhapontici,Enhydrobacter aerosaccus和Stenotrophomonas rhizophila.     

十亚甲基-1,10-双(氢化诺卜基二甲基溴化铵)的合成及对9种病菌的抑菌活性

由含氢化诺卜基的叔胺N,N-二甲基氢化诺卜基胺与1,10-二溴癸烷反应合成得到一个双子季铵盐:十亚甲基-1,10-双(氢化诺卜基二甲基溴化铵).用质谱和核磁共振分析(氢谱与碳谱)表征了合成产物的结构; 采用菌丝生长速率法在5种质量浓度下测试了合成产物对9种植物病原菌的抑菌活性.结果表明:合成的化合物对9种植物病原菌均具有较好的抑制活性,其远高于阳性对照物百菌清.其中对松枯梢病病原菌(Diplodia pinea)、烟草黑胫病菌(phytophthora parasitica var. nicotianae)的抑制率最高,在质量浓度分别为200.0、100.0、50.0、25.0、12.5 mg·L^-1的条件下,均为100%; 当质量浓度大于等于50.0 mg·L^-1时,对七叶树壳梭孢菌(Fusicoccum aeculi)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)和西瓜枯萎病菌(Fusarium oxyporum f. sp. niveum)的抑制率均为100%.     

烟草内生细菌Atp-oe的防治作用及发酵研究

筛选获得的烟草内生细菌Atp-ce在温室试验中对烟草黑胫病的防效可达69.23%.通过对烟草内生细菌Atp-oe发酵动力学的研究,拟合出了细菌生长曲线模型,得到最佳优化发酵参数.     

稻草还田对烟草主要病虫害发生的影响

本文调查了稻草还田对烟草主要病虫害—烟草普通花叶病、青枯病、黑胫病、根黑腐病、赤星病、烟蚜、小地老虎、野蛞蝓及斜纹夜蛾发生的影响。结果表明 ,经过稻草还田的烟田主要病虫害的发生程度明显轻于常规的田块 ,说明稻草还田能明显减轻烟草主要病虫害的发生。     

Antimicrobial activities of isoalantolactone, a major sesquiterpene lactone ofInula racemosa

Isoalantolactone, a major constituent of Inula racemosa (Compositae) was tested for its antimicrobial action against five bacteria, six human and six plant pathogenic fungi. The lactone showed absolute toxicities at 500 m g/mL against 3 soil borne phytopathogenic fungi (Gaeumannomyces graminis var. tritici, Rhizoctonia cerealis and Phytophthora capsici) with the MICs determined to be 100, 100 and 300 m g/mL, respectively. At the MICs, isoalantolactone exhibited its fungistatic nature of toxicity. The lowest fungicidal concentrations of the lactone to G. graminis var. tritici, R. cerealis and >. capsici were shown to be 150, 150 and 350 m g/mL, respectively. Moreover, isoalantolactone displayed weaker antibacterial activities against Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas fluorecense, Sarcina lentus and Staphylococcus aureus with MICs of 125, 425, 150, 150 and 100 m g/mL, respectively. The investigation disclosed the strong inhibition of isoalantolactone to the phytopathogenic fungi, raising a possibility that the lactone could be considered as a starting point for the project aiming at the development of new fungicide(s).     

中华库蚊和白纹伊蚊不同发育时期蛋白质表达差异分析

研究蚊不同发育时期蛋白质表达的差异。为抗蚊疫苗研究获得合理的免疫原提供依据SDS-PAGE电泳分析结果表明：随着发育时问的进行。中华库蚊和白纹伊蚊蛋白质条带均明显增多。同时雌雄蚊具有各自的特异性条带，雌蚊血饲后出现一明显的大分子量条带(230kDa)。并且该条带随产卵的完成明显变浅变细．表明该蛋白表达变少．总之，这些蛋白质表达差异．尤其是血饲后出现的大分子蛋白质。可以成为进一步深入研究的对象．     

辣椒疫菌越冬规律的初步研究

辣椒疫病是新疆辣椒上的重要病害,本文就新疆辣椒疫菌(P.Capsici)的越冬规律进行了初步研究。基本查明该菌在种子上不能越冬。菌丝耐寒性差,在我区也不能做为初次侵染的来源。其主要初次侵染来源是越冬的卵孢子。     

浩浩巴苗期病虫害的初步观察

浩浩巴苗期极易受病虫危害,特别是立枯病(Phytophthora parasitica)的侵染,引起萎蔫和死亡,在高湿、尤其是积水情况下更甚,是导致成苗率低的主要因素之一。此外,尚有叶斑病(Alternria sp.)、小地老虎[Agratis ypsilon(Rott)]、马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus Walker)、油桐尺蛾(B-uzura Suppressaria Guenee)等病虫为害。     

含氢化诺卜基叔胺氢卤酸盐的合成与抑菌活性研究

以5种含氢化诺卜基的叔胺分别与氯化氢、溴化氢、碘化氢反应,合成了14个氢化诺卜基叔胺的氢卤酸盐:二甲基氢化诺卜基胺盐酸盐(2a)、二甲基氢化诺卜基胺氢溴酸盐(2b)、二甲基氢化诺卜基胺氢碘酸盐(2c)、二乙基氢化诺卜基胺盐酸盐(2d)、二乙基氢化诺卜基胺氢溴酸盐(2e)、二正丙基氢化诺卜基胺盐酸盐(2f)、二正丙基氢化诺卜基胺氢溴酸盐(2g)、二正丙基氢化诺卜基胺氢碘酸盐(2h)、N-氢化诺卜基哌啶盐酸盐(2i)、N-氢化诺卜基哌啶氢溴酸盐(2j)、N-氢化诺卜基哌啶氢碘酸盐(2k)、N-氢化诺卜基吗啉盐酸盐(2l)、N-氢化诺卜基吗啉氢溴酸盐(2m)、N-氢化诺卜基吗啉氢碘酸盐(2n).对所合成的化合物进行了¹H NMR、¹³C NMR和LC-MS分析,表征了它们的结构.采用菌丝生长速率法测试了化合物2a、2b、2f、2h对5种植物病原菌生长的抑制率,结果表明它们均有较好的抑菌活性.当药液质量浓度为500 mg·L^-1时,2a、2b、2f、2h对烟草黑胫病菌的抑制率均在83%以上,其中2a的抑制率为100%; 对西瓜枯萎病菌和苦瓜尖孢镰刀病菌的抑制率均在65%以上,部分高达85%; 对轮枝镰刀病菌的抑制率均在75%以上.     

缬草属两种一变种过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了贵州缬草属两种一变种的过氧化的酶同工酶。结果表明，１．宽叶缬草Ｖａｌｅｒｉａｎａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＬ． ｖａｒ．ｌａｔｉｆｏｌｉａ Ｍｉｑ。过氧化物酶酶谱带４条，缬草Ｖ．ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．３条，蜘蛛香Ｖ．ｊａｔａｍａｎｓｉｉ Ｊｏｎｅｓ １条。２．它们的酶谱带共有５条，其中第２第为共有谱带；３．蜘蛛香与宽叶缬草，缬草的酶谱差异大。