华北大黄愈伤组织培养及土大黄苷含量研究

为有效保护和利用华北大黄野生资源,以野生华北大黄为材料,探讨了不同种类、不同质量浓度的植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及增殖效应,并采用高效液相色谱对愈伤组织及野生植株中土大黄苷含量进行了分析.结果表明:MS培养基中单独添加不同质量浓度的6-BA,不利于愈伤组织的增殖;培养基中单独添加不同质量浓度的NAA和2,4-D,对...     

长筒石蒜组织培养中器官发生的MSAP分析

采用甲基化敏感扩增多态性技术,从64对MSAP选扩引物中,选出扩增清晰、可辨且可重复的51对MSAP引物组合,扩增获得长筒石蒜种子胚、愈伤组织、苗等3个不同发育时期的DNA胞嘧啶甲基化修饰水平及MSAP扩增图谱。结果表明,种子胚基因组中有68.0%(全甲基化50.2%、半甲基化49.8%)、愈伤组织60.0%(全甲基化52.2%、半甲基化47.8%)、苗64.3%(全甲基化40.8%、半甲基化59.2%)的CCGG/GGCC位点发生胞嘧啶甲基化。3个不同时期甲基化的水平互有差异,依据超甲基化/去甲基化的修饰机理分析,甲基化水平的变化或许导致了长筒石蒜不同的器官发生。     

曼陀罗愈伤组织培养及药用成分莨菪碱的分析

为解决野生资源不足,满足临床上对东莨菪碱和莨菪碱的需求,以曼陀罗嫩茎为外植体进行了愈伤组织的诱导培养和继代培养,并对愈伤组织中的生物碱、东莨菪碱和莨菪碱进行了分析.结果证明:MS+2,4-D1.0mg.L-1是曼陀罗愈伤组织诱导和继代培养的理想培养基.由愈伤组织提取的生物碱中含有东莨菪碱和莨菪碱.实验培养的曼陀罗愈伤组织为东莨菪碱和莨菪碱的工厂化生产奠定了基础.     

柴胡栽培种ZQ-T干根药材的AFLP鉴别

以干根药材为材料,采用AFLP技术进行了柴胡栽培种ZQ-T的鉴别.首先以3个柴胡栽培种干根样品混合DNA为模板进行AFLP分析,筛选出3对引物,经3次重复其DNA指纹图谱一致.然后以3对引物分别进行了7个栽培种的AFLP分析,每对引物均能从ZQ-T中扩增出特异条带,将ZQ-T鉴别出来;通过聚类分析,当遗传相似性系数分别为0.81、0.86、0.97时(引物分别为E-AAC/M-CTA、E-AGG/M-CTG和E-AGG/M-CAA)可将7个柴胡栽培种完全区分开.结果表明:AFLP可以较好地揭示柴胡种质资源的遗传差异,并可用于柴胡栽培种干根药材的鉴别.     

人参SQS基因的干扰载体构建及转化人参愈伤组织

以5年生人参为材料, 根据人参SQS基因设计正义及反义片段引物, 构建了SQS基因干扰表达载体; 利用农杆菌转化法转化人参愈伤组织, 对获得的抗性愈伤组织进行PCR检测及实时定量PCR检测, 并对抗性愈伤组织的皂苷进行HPLC分析. 实验结果表明, 与非转化人参愈伤组织相比, 转化后的愈伤组织SQS基因表达量降低, 皂苷含量有所变化. SQS是人参皂苷生物合成途径的关键酶, 抑制SQS基因的表达, 可调控人参皂苷含量变化.     

翅果油树组织培养染色体制片方法的探讨及其染色体稳定性研究

本实验从解离条件、取材时间、培养时间、预处理药剂与时间等方面探讨了翅果油树愈伤组织染色体观察的制片方法,并在细胞水平上对翅果油树愈伤组织的染色体稳定性进行了研究.得出了翅果油树愈伤组织的最佳制片方法.翅果油树的染色体在组织培养过程中存在着一定程度的变异,且其变异率随继代次数的增加呈上升趋势.但细胞学的变异只能解释少数较极端的无性系变异,更多的无性系变异则有待于从DNA水平和生化水平进一步研究.     

北柴胡愈伤组织及不定根诱导研究

以从田间采集的北柴胡和用当年产种子所得的实生苗为实验材料,比较了外植体种类、大小和采样时期等因素对愈伤组织诱导的作用;以从大田栽培北柴胡的带侧芽茎段及根愈伤组织为材料,研究了不同培养基和激素对不定根诱导的影响.结果表明,诱导愈伤组织的适宜起始材料是幼嫩根段;长度1.0 cm左右的根外植体有利于愈伤组织的诱导和生长;4月上旬采样有利于愈伤组织的诱导和生长;在添加IBA 0.5 mg/L的1/2MS培养基中,带侧芽茎段不定根的诱导率可达97.3％,生根效果也最好;在B5培养基中加入二苯基脲双磺酸钙1.0mg/L后,不定根诱导率达到94.2％,根粗壮且生长快.     

几种野生豆科锦鸡儿属(Caragana Fabr.)植物离体培养过程中器官分化和内源植物激素含量的关系

通过对内蒙古自治区三种野生豆科锦鸡儿属植物——柠条(C.korshinskii)、狭叶锦鸡儿(C.stenophylla)和黄刺条(C.frutex)的组织培养,从它们的上胚轴、下胚轴(或幼茎)上直接诱导出芽并获得了幼苗,从后两种植物的胚轴(或幼茎)的愈伤组织中也诱导出芽,并使其生根,获得再生小植株。本文着重研究了激素对这三种植物的愈伤组织生长和分化的影响,并对脱分化和已有器官分化的两个时期的愈伤组织的内源生长素和细胞分裂素的活性进行了测定,发现两个时期愈伤组织中内源激素系统有明显不同,推测这种变化与愈伤组织的诱导和分化有一定的关系。     

晋产北柴胡试管植株的RAPD分析

以植物组织培养技术建立的9种晋产北柴胡(Bupleurum chinense DC.)试管植株为材料,用CTAB法提取北柴胡试管植株叶片的总DNA,以随机引物进行非特异性扩增,计算了遗传相似系数与遗传距离,并进行了聚类分析.从20条随机引物中挑选出3条扩增条带清晰、重复性好的引物OPC-8、OPD-8和OPE-10,共检测出22条DNA谱带,其中多态性条带18条(占82%).结果表明,9种北柴胡试管植株间均存在不同的遗传差异,根据绘制的聚类图可将9种不同类型的北柴胡聚类为4组.说明RAPD多态性分析从分子水平上一定程度反映出不同类型晋产北柴胡之间的遗传多态性.     

蒙古黄芪不同外植体愈伤组织中黄芪甲甙含量比较

用蒙古黄芪幼苗的不同部位作为外植体，进行诱导和培养愈伤组织，并采用薄层扫描法测定了这些愈伤组织及野生和栽培蒙古黄芪根中的黄芪甲甙含量。结果表明：蒙古黄芪四种外植体在适宜的培养基上均能被诱导产生愈伤组织；其中用叶片诱导的愈伤组织中黄芪甲甙含量最高，分别为野生根的3倍、栽培根的3～5倍。     

唐鱼野生与养殖群体遗传多样性的随机扩增多态DNA(RAPD)分析

应用随机扩增DNA多态性(RAPD)技术对唐鱼野生与养殖群体的遗传多样性进行了分析。从40个10BP引物中选取15个用于群体遗传多样性分析,共检测出93个位点,其中46个(49.46%)呈多态;两群体的多态位点比例分别为43.01%和41.94%;用香农指数量化的遗传多样性指数,野生群体(0.23)略高于养殖群体(0.20),平均遗传多样性指数为0.22,群体内和群体间的遗传变异比例分别为85%和15%;群体的遗传相似度高达0.96,彼此间的遗传距离仅为0.04。研究表明,唐鱼目前的种质资源状况令人堪忧,恢复唐鱼有效种群大小、丰富物种遗传多样性是资源保护的基础。     

激光诱导沙田柚变异的RAPD研究

选用经初步筛选的２０个短序列引物（１０ｎｔ）和随机抽取的２个随机长序列引物,对激光诱导产生的无核沙田柚（处理组）及未经激光处理的有核沙田柚（对照组）进行了ＲＡＰＤ（随机扩增多态性ＤＮＡ）分析。结果有６个引物扩增出了共２０条多态性片段,从而表明在沙田柚的处理组与对照组之间,存在ＤＮＡ分子水平上差异,也就是说在激光诱导沙田柚无核化的过程中,已经引起了沙田柚后代基因组的显著变异,且这种诱导所引起的性状改     

应用RAPD鉴定红菇组织分离菌株的探索试验

用组织分离技术从野生红菇（Ｒｕｓｓｕｌａ ｓｐ．）子实体中中分离得３个菌株。用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）对红菇子实体和分离菌株的ＤＮＡ多样性进行分析,以确定３个分离菌株与子实体之间的亲缘关系。实验使用１６个随机引物检测４０多个位点,计算它们之间的相似性。实验结果表明３个分离菌株和红菇子实体之间的ＤＮＡ相似性非常高,红菇子实体和对照菌株「凤尾菇（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｓａｊｏｒ－ｃａｊｕ）和金针     

基于RAPD标记的罗布麻野生居群遗传多样性分析

利用RAPD技术对采自我国8个省份的9个罗布麻野生居群进行遗传多样性分析.从80条随机引物中筛选出17条引物,共扩增出157条带,其中多态性带108条.物种水平的多态位点百分率(PPB)为68.79%,Nei’s基因多样性指数H为0.2296,Shannon’s多态性信息指数I为0.3390.居群间的遗传分化系数Gst为0.8841,即11.59%的遗传变异来自于居群内,88.41%的遗传变异来自于居群间,居群间的遗传分化水平远高于居群内.居群间遗传距离与聚类结果显示各居群间的亲缘关系与地理分布不完全相关.针对现有罗布麻的遗传多样性现状,建议加强对现有自然居群的保护.     

不同纬度野生大豆种群间的遗传变异

选用了经初步筛选的２０个短随机序列引物和２个长随机序列引物对５个不同纯度来源的野生大豆进行了ＤＮＡ随机扩增,其中有１９个引物扩增出多态性片段,区获得７０个ＲＡＰＤ多态性片段,平均每个引物３．６８条,运用自编的计算机程序对扩增进行聚类分析。     

我国部分家鸭和野鸭遗传多样性及亲缘关系的AFLP分析

利用AFLP技术分析我国8种常见家鸭和2种野鸭基因组DNA的多态性，在选取的17对引物中，有9对能得到重复性好的多态性扩增条带．每对引物扩增带数在44-83之间．共得到513个标记位点，其中498个为多态位点，多态位点比率达97．1％；根据AFLP图谱计算了不同样品间的遗传距离（D）和相似性系数（GS）．家鸭品种间的遗传距离在0．331～0．589范围内，绿头鸭、斑嘴鸭与家鸭品种（系）间的遗传距离分别在0．298～0．520和0．316～0．522之间．方差分析表明两组数据不存在显著差异（p〉0．05），由此得知绿头鸭和斑嘴鸭在家鸭品种的形成过程中都作出了贡献．并根据D值绘制了它们的聚类图谱．     

金华地区野生大豆小种群的分子生态学研究

为了阐明小地区范围内野生大豆种群的遗传分化情况,应用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）方法,对浙江金华地区５个一年生野生大豆种群,进行了分子生态学研究。用根据ＲＡＰＤ数据计算得 Ｓｈａｎｎｏｎ指数估计了５个野生大豆种群的遗传多样性。发现大部分的遗传变异存在于野生大豆种群间,只有少部分的遗传变异存在于种群内。     

双棘黄姑鱼人工繁育群体遗传多样性的RAPD分析

采用22个随机引物对双棘黄姑鱼人工繁育群体的遗传多样性水平进行随机扩增多态DNA（RAPD）分析，共检测出248个位点，其中有104个多态位点，平均多态位点百分率P为41．9％；其个体间的平均遗传距离L为0．0657，平均相似系数S为0．9343，Shannon遗传多样性指数H0为0．2829．通过与其他一些鱼类的RAPD研究结果进行对比，对双棘黄姑鱼人工繁育群体的遗传多样性水平进行了分析评估,文中同时就人工繁育及鱼类种质资源的可持续利用问题进行了初步讨论．     

Genetic diversity in Penaeus chinensis shrimp as revealed by RAPD technique

The random amplified polymorphic DNA analysis was used to estimate genetic diversity in one successively cultivated stock and three wild stocks of Penaeus chinensis shrimp, two of which were collected from the spawning and wintering grounds in the west coast of Korean Peninsula, and one from the feeding ground in the China coast of the Yellow Sea. A random primer kit was employed to scan the genomic DNA in 20 individuals of each index stock. A total of 110 reproducible RAPD markers were obtained, 68.2 % of which showed a sound eonformability within all the individuals detected, implying that the genetic variability in P. chinensis is relatively low. The proportions of polymorphic loci among these four stocks ranged from 20% to 33.3%, while the degrees of genetic polymorphisms varied from 0.0093 to 0.0307. The genetic variability of inter-stocks was higher than that of intra-stock. The genetic diversity in different stocks differed from each other; that is, a less genetic differentiation in the spawning and wintering stocks from the west coast of Korean Peninsula was revealed and their genetic diversities were higher than that of the spawning stock in the Bohai Sea and the China coast of the Yellow Sea. As detected, the genetic diversity in the successively cultivated stock was the lowest among these four stocks. Through genetic distance analysis between a random pair of individuals, a dendrogram of the above-mentioned four stocks was constructed by unweighted pair group method with arithmetic mean. The results based on cluster analysis well fitted with the geographical distribution of P. chinensis in the Bohai and Yellow Seas.     

油蒿种群遗传分化的RAPD分析

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)方法对油蒿(Artemlsia ordosica Krasch．)的5个种群进行了研究．用15个随机引物扩增出297条清晰谱带，其中285条为多态性谱带．利用POPGENE 32软件对数据进行处理，结果如下：(1)油蒿有着丰富的遗传多态性，多态位点百分率达96％，各种群多态位点百分比在84．6％～90．9％之间．(2)油蒿的种群间分化较小Gat=0．1364，86．36％的遗传变异存在于种群内，各种群的遗传一致度都在96％以上(3)聚类分析显示，地理分布近的种群被聚到了一起，反映了油蒿种群的遗传分化和地理距离有着一定的相关性．