一种硫酸盐还原菌的亚硫酸盐还原酶基因(dsrA)的克隆和序列分析

硫酸盐还原菌是一类具有重要生态学意义的微生物，从一种具有还原六价金属铬能力的复合硫酸盐还原菌SRBⅢ中克降了它的亚硫酸盐还原酶A亚基的完整基因，该序列带有亚硫酸盐还原酶-亚硝酸盐还原酶中保守的CX5CXNCX3C的序列，与巳报道的同类基因相比，该基因与脱硫脱硫弧菌（Essex6株）的异化型硫酸盐还原菌最为接近，核苷酸序列的同一性为89%，氨基酸序列的同一性约为94%。     

Desulfovibrio dechloracetivorans strain SF3三价铁还原酶的定位和性质的研究

生理和生化实验结果表明Fe(Ⅲ)-EDTA是SF3偏好的一种可溶性三价铁.连二亚硫酸盐还原后的SF3经过可溶性三价铁氧化后,其紫外可见光谱显示c型细胞色素参与了三价铁的还原过程. 铁还原酶的定位实验说明87%的铁还原酶活性定位于细胞可溶性组分,74%的活性分布于原生质体中,这种分布情况可能与一种和其他细菌不同的铁还原机制有关. SF3的铁还原酶在25 ℃, pH 7 4时显示最高活性,并且在氧气中表现出较强的稳定性.     

一株胞外产亚硫酸盐还原酶功能菌的分离及酶学性质的初步研究

分离筛选出一株产亚硫酸盐还原酶活能力高的细茵,初步鉴定该茵属于脱硫弧菌属,该菌兼性厌氧,产胞外亚硫酸盐还原酶.对分离菌所产亚硫酸盐还原酶进行初步的酶学性质研究发现:该酶在条件为25～40℃、pH7～8范围内时,酶活性较高;酶的最适温度为30℃、最适pH为7.7;该酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,80℃下放置2h,酶活仍可保留55%左右,在pH 4～10的条件下,酶活可达60%以上.     

氧化还原酶催化还原硝基化合物的研究进展

用纯化的氧化还原酶催化还原污染环境的硝基化合物,反应条件温和、容易控制。归纳了几种可以催化还原硝基化合物的氧化还原酶的结构、生理作用和还原硝基化合物的过程机理;对氧化还原酶催化还原硝基化合物的研究前景进行了展望。     

硫酸盐还原菌产亚硫酸盐还原酶的发酵工艺研究

对硫酸盐还原菌产亚硫酸盐还原酶的发酵工艺条件进行了研究,主要内容包括碳源、氮源、温度、起始pH、装液量及发酵周期等.通过单因素实验研究表明,以可溶性淀粉为碳源,以尿素作为氮源,选C∶N比为1∶3,在初始pH 7.0的条件下,接种量为5%,装液量为1∶3,35℃摇床培养42h,酶活力可达到16.2U/mL.     

亚胺还原酶(IRED)制备手性胺的研究进展

手性胺是一类非常重要的结构单元,广泛存在于天然产物、药物分子及农用化学品中。亚胺还原酶(IRED)是一类可将前手性的亚胺不对称还原为相应胺化合物的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)依赖的氧化还原酶。随着生物信息学和数据库的发展,人们发现了一系列新型的可用于不同合成途径的IRED生物催化剂。着重介绍亚胺还原酶在结构和机制的最新研究进展,以及这些酶的合成应用,为进一步研究亚胺还原酶提供良好借鉴。     

Rhodobacter sphaeroides 偶氮还原酶三级结构同源建模与分析

利用同源建模方法构建了Rhodobacter sphaeroides偶氮还原酶AZR的三级结构模型.结果表明,AZR为α/β型结构的黄素氧化还原蛋白,5个相互平行的β折叠形成分子中间的平面,5个α螺旋分列于平面的两侧;在β折叠的C端非共价结合的黄素单核苷酸(FMN)作为氧化还原反应中心.根据序列对齐分析,将依赖黄素的偶氮还原酶分为两个家族,但结构对比分析表明,它们具有类似的三级结构和活性区域.对AZR的结构研究为发现新的偶氮还原酶和深入研究其功能奠定了基础.     

新型磺酰类醛糖还原酶抑制剂的合成及活性研究

以2,4-二甲苯胺为原料,设计并合成了一系列环外磺酰胺(酯)类衍生物,对目标化合物的醛糖还原酶(ALR2)抑制活性进行了测定,并利用分子对接方法研究了抑制剂与醛糖还原酶蛋白的结合模式. 结果显示环外磺酰类化合物8a-d, 12a-b, 16a-b具有良好的体外醛糖还原酶抑制活性,分子模拟预测其能与酶蛋白的活性位点空腔较好结合. 化合物8a-d是一类新型醛糖还原酶抑制剂,活性良好,并可作为先导化合物探索活性更高的醛糖还原酶抑制剂.      

α-羟基酸类物质的酶法还原

手性纯α-羟基酸类化合物是合成手性药物和农药的重要中间体.多种酶催化过程都能用于α-羟基酸类物质的合成.酮还原酶是最有应用价值的工具酶之一.文章对酮还原酶还原合成α-羟基酸类物质进行综述.     

二氧化硫暴露诱发谷子幼苗硫同化作用增强

二氧化硫(SO₂)是一种常见的大气污染物，对我国北方地区种植的谷子有一定影响。文章以谷子(Setaria italica L.)“长农44”号的幼苗为材料，采用静态熏气法研究SO₂对谷子硫同化作用的影响。结果表明，10 mg·m^-3SO₂暴露72 h植株地上部分生物量无明显改变；30 mg·m^-3 SO₂暴露72 h时植株地上部分生物量低于对照，硫同化途径中的亚硫酸盐还原酶(SiR)和O-乙酰丝氨酸裂解酶(OASTL)基因表达水平和酶活性均显著提高，硫同化产物半胱氨酸显著增加，但硫酸根(SO₄^2-)还原基因SiAPS转录下调；30 mg·m^-3 SO₂暴露组谷子叶片谷胱甘肽含量提高，谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性显著增强，还原型/氧化型谷胱甘肽比值明显提高。结果表明，一定浓度的SO₂可使谷子幼苗硫同化作用增强，促进含硫抗氧化...     

应用于粉刺治疗的植物单体5α-还原酶抑制剂活性筛选

建立一种简单的5α-还原酶抑制剂体外筛选模型, 用于20种植物单体物质的5α-还原酶抑制活性检测, 以寻求对粉刺治疗有效的药物. 以睾酮为底物、NADPH为供氢体, 对5α-还原酶体外测定体系进行了优化, 并测定了20种中草药标准品的5α-还原酶抑制活性. 确定了5α-还原酶反应的最适底物浓度为25 μmol/L, 最适反应温度为37 ℃, 最适反应pH值为6.5. 确定了知母总苷、连翘素、蛇麻酮对5α-还原酶有抑制作用, 其半数抑制常数(IC50)分别为12.4、20.8和45.6 μg/mL. 知母皂、连翘素和蛇麻酮在抗粉刺领域具有潜在应用价值.     

热带假丝酵母XYL1基因的克隆及序列分析

木糖还原酶(XR)是D-木糖代谢途径中的关键酶,催化还原D-木糖成木糖醇.已报道的热带假丝酵母(Candida tropicalisIF0 0618)木糖还原酶只能利用NADPH,而本研究中的热带假丝酵母(C.tropicalisAY92045)木糖还原酶能够同时利用NADH和NADPH作为辅因子,有利于细胞内的辅酶平衡和木糖醇的产生.经克隆测序与Blast X比较其与已报道C.tropicalis木糖还原酶基因XYRA和XYRB的差异,分析改变的氨基酸位点对结合辅酶的影响,并为下一步研究该酶性质及构建高     

生活污水生物脱氮反硝化过程中电子竞争对N_2O产生的影响

目前,已有研究主要认为较小的COD/N是导致污水反硝化过程中N2O产生的关键因素,但有少部分研究发现即使在较小的COD/N下也没有发生N2O的累积.本研究利用SBR反应器,以实际生活污水为研究对象,考察了不同COD/N下各类电子受体类型(NO-3、NO-2、N2O及其组合)中氮氧化物的还原情况,进而探索反硝化过程中N2O产生的机理.结果表明:(1)在反硝化过程中,NO-3还原酶(Nar)、NO-2还原酶(Nir)、NO还原酶(Nor)以及N2O还原酶(Nos)均会发生对电子的竞争;(2)4种氮素还原酶对电子的竞争既会出现在碳源充足时,也会出现在碳源受限时;(3)COD/N的增加能够提高电子受体的还原速率和电子消耗速率,但在电子竞争环境下,N2O是否会发生积累取决于电子在Nos上分布的多少而不是COD/N的高低.     

外源GSH对NaCl胁迫下番茄幼苗生长及AsA-GSH循环的影响

采用营养液栽培法,研究叶片喷施还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)和谷胱甘肽合成抑制剂(BSO)对NaCl胁迫下番茄幼苗植株生长、叶片丙二醛(MDA)和H2O2含量、抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环中抗氧化酶活性及氧化还原水平的影响。结果表明:外源喷施GSH通过显著提高NaCl胁迫下番茄幼苗还原力水平和叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、AsA-GSH循环中抗坏血酸过氧化物酶(APX)、脱氢抗坏血酸还原酶(DAHR)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性,有效提高了活性氧清除能力,显著缓解了NaCl胁迫对番茄幼苗生长的抑制。外源喷施GSSG虽然降低了GSH/GSSG比值,但由于通过上调了AsA/DHA比值和SOD、AsA-GSH循环关键酶活性,一定程度缓解了NaCl胁迫对番茄幼苗生长的抑制作用。喷施BSO显著降低了NaCl胁迫下番茄幼苗叶片的还原力水平和SOD、GR、APX和MDHAR的活性,导致H2O2清除能力降低,从而进一步抑制了NaCl胁迫下番茄幼苗的生长。     

对苯二酚对亚硫酸盐的稳定作用

通过除氧试验和空气氧化试验,研究了对苯二酚对亚硫酸盐的稳定作用。结果表明,自由基链反应引发剂铜离子能够加速亚硫酸盐与氧的反应,自由基链反应终止剂对苯二酚能够通过消除亚硫酸盐氧化过程中生成的自由基而抑制反应,水的ｐＨ值、碱度和硬度成分则无影响。试验结果为亚硫酸盐氧化的自由基机理提供了有力的证据,也为亚硫酸盐的贮存失效提供了有效的防止方法。     

对苯二酚对亚硫酸盐的稳定作用

通过除氧试验和空气氧化试验,研究了对苯二酚对亚硫酸盐的稳定作用.结果表明,自由基链反应引发剂铜离子能够加速亚硫酸盐与氧的反应,自由基链反应终止剂对苯二酚能够通过消除亚硫酸盐氧化过程中生成的自由基而抑制反应,水的pH值、碱度和硬度成分则无影响.试验结果为亚硫酸盐氧化的自由基机理提供了有力的证据,也为防止亚硫酸盐的贮存失效提供了有效的方法.     

甾体5α-还原酶抑制剂的高效液相色谱法体外筛选模型

报道了一种用高效液相色谱法(HPLC)筛选甾体5α-还原酶抑制剂的体外模型.将甾体5α-还原酶液、睾酮溶液、辅酶(NADPH)与5α-还原酶抑制剂(非那甾胺和爱普列特)在37℃下反应30 min,反应终止后,通过HPLC测定反应前后底物睾酮量的变化来分析酶的活性,进而由酶活性的降低来判断抑制剂对5α-还原酶的抑制作用.将实验数据按Lineweaver-Burk倒数作图,求得甾体类抑制非那甾胺抑制常数Ki=4.32±0.38μmol/L,爱普列特抑制常数Ki=1.14±0.23μmol/L.实验所得的数据和图形均说明了本实验所采用的高效液相色谱法作为一种甾体5α-还原酶抑制剂体外筛选模型是简便可行的.     

1，1-二氯乙烷微生物降解菌群的生理学鉴定

从纽约哈得逊河河底淤泥样品中富集分离得到的微生物菌群,在厌氧条件下,可将1,1-二氯乙烷通过还原脱氯的呼吸代谢方式降解生成一氯乙烷.这个微生物菌群可以利用氢气、甲酸、乙酸、苯甲酸和延胡索酸作为电子供体进行还原脱氯生长,并能以丙酮酸发酵的呼吸方式生长,但丙酮酸不能用来作为电子供体进行还原脱氯.通过对其他氯代化合物是否能作为电子受体的实验,发现只有1,1-二氯乙烷能被脱氯.在培养基中加入亚硫酸盐可完全抑制二氯乙烷的还原脱氯,但硫酸盐、硝酸盐和延胡索酸盐的加入却不影响还原脱氯.在以氢气作为电子供体进行还原脱氯时,每摩尔氯原子的还原相应地使细胞干重增加(4.402±1.241)g.同时对富集分离的菌群进行16S rRNA基因序列分析发现,在脱氯生长方式下,该微生物菌群中Dehalobacter细菌占主导地位.     

利用试纸法-酶法检测食品硝酸盐含量研究

传统的镉柱法检测硝酸盐含量,操作时间长,且镉的挥发对人体产生毒性.本实验通过硝酸盐还原酶将硝酸盐还原为亚硝酸盐,再利用已经研制出的亚硝酸盐检测试纸对亚硝酸盐进行检测,从而得出硝酸盐含量.     

对苯二酚对亚硫酸盐防腐蚀效果的影响

通过除氧试验、腐蚀试验和电化学试验，研究了对苯二酚对亚硫酸盐防腐蚀效果的影响。结果表明，对苯二酚使亚硫酸盐几乎失去了除氧作用，但却提高了亚硫酸盐在含氧水中对２０ｇ钢的防腐蚀性能，使钢的自腐蚀电位更剧烈负移并使阴极极化增加。