小麦-黑麦杂种体细胞无性系高配对突变体的细胞学和AFLP分析

以小麦-黑麦未经组织培养直接结实杂种及幼胚无性系变异再生杂种为材料,观察再生杂种的花粉母细胞减数分裂中期Ι染色体配对情况,发现杂种幼胚无性系变异再生杂种中存在一些配对频率大幅度提高的突变体,表现在有多个二价体及三价体、四价体.利用原位杂交技术对未经组织培养直接结实杂种及高配对无性系杂种染色体的组成和结构分析,结果显示经过无性系变异提高了W-R、R-R间的联会,表明组织培养对小麦和黑麦染色体配对造成了一定影响;进而利用基因组AFLP技术研究亲本和两种类型的杂种DNA序列上的差异,结果表明各种类型的杂种F1代均发生了广泛的基因组改变,主要表现为小麦、黑麦两亲本片段的缺失,且高配对无性系杂种基因组的变异大于未经组织培养直接结实杂种.本研究为进一步探究高配对变异的分子机理并利用该变异进行染色体重组奠定了基础.     

节节麦-小麦双倍体的合成、形态及细胞学稳定性

对节节麦×小麦杂种胚愈伤组织再生植株的细胞学观察表明,胚再生植株染色体数目稳定(2n=28),杂种胚培养植株和胚再生植株花粉母细胞中期染色体构型平均分别为15.30Ⅰ+6.35Ⅱ和15.40Ⅰ+6.28Ⅱ. 杂种F1自交不孕,与小麦回交结实率0.88%,F1花粉可染率为2.30%. 利用改良浸根法对杂种F1加倍处理,加倍率为80%. 节节麦-小麦双倍体穗形偏向小麦,后代染色体数目2n=40～59,其花分母细胞减数分裂中期Ⅰ存在6～7个单价体、20～21二价体、1～2个多价体. 两个组合的双倍体平均结实率为73.33%、67.19%,单株最高结实率可达93.8%. 通过连续选择,可选育出结实率较高、稳定的节节麦-小麦双倍体或部分双倍体.     

节节麦与黑麦间杂种F1胚再生植株及其双二倍体细胞遗传学分析

将节节麦与黑麦杂交,利用Fl胚愈伤组织培养再生杂种植株,对胚再生杂种F1进行秋水仙素加倍获得了节节麦和黑麦的双二倍体(1)DRR),杂种F1(DR)的减数分裂中期Ⅰ(PMCMI)染色体构型平均为2n=10．16Ⅰ 1．86Ⅱ 0．12Ⅲ 0．00625Ⅳ,该双二倍体(DDRR)的减数分裂中期Ⅰ(PMCMI)染色体构型平均为2n=8．676Ⅰ 9．318Ⅱ 0．019Ⅲ 0．004Ⅳ,C1的结实率平均为2．118％．该双二倍体可作为一个新的物种以及作为改良小麦的种质材料。     

云南松小孢子母细胞减数分裂的研究

以小孢子材料为对象,全程观察并分析了云南松减数分裂各个时期染色体行为及特征.云南松减数分裂构型为11.72II0 0.24II1 0.04I,配对指数为98.67%,环状二价体的频率和配对指数高于其他裸子植物.染色体交叉平均数目(2.42)和染色体异常分裂现象频率(4%)远低于其他裸子植物.云南松在减数分裂过程中染色体的行为表现出高度保守性,与其高度保守的有丝分裂核型较一致.这也说明云南松所在的松属是松科中较原始的类群.     

杂交鹅掌楸体胚系统的遗传稳定性研究

以1999年建立的杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生体系为研究材料，进行长期继代培养的胚性细胞系的增殖能力及再生植株遗传稳定性研究。结果表明：建立的体细胞胚胎再生体系经过3a甚至6a的继代培养，能够保持旺盛的体胚发生能力；染色体计数发现多数细胞系的再生植株遗传稳定性较好，为二倍体再生植株，仅在一个细胞无性系当中发现所有再生植株均为四倍体。     

四倍体小麦×纤毛鹅观草属间杂种的胚援救及无性系建立

通过活体-离体胚培养在N6无机+5mg/L IBA的培养基上成功地获得了纤毛鹅观草和5个四倍体小麦种(品种)的属间杂种植株及愈伤组织,并建立了杂种植株和胚愈伤组织再生植株无性系. 采用这种培养技术,5个杂交组合的成苗率达12.7%,成愈率达27.4%,有效地克服了纤毛鹅观草和四倍体小麦杂种胚发育小的问题. 对传统胚援救和愈伤组织诱导的方法及远缘杂种中胚发育与亲本形态的关系进行了讨论.     

玉米胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

采用生产上推广的14个基因型的玉米为材料,由幼胚诱导出胚性愈伤组织并再生植株。其中原齐722×5003等单交种在适宜条件下,胚性愈伤组织的诱导率可达90%,愈伤组织分化苗频率高于80%。在加有1ppm 6BA 和0.1%活性碳的改良 N_b 培养基上,分化出的幼苗长成健壮的小植株。接种幼胚的大小和基因型、基本培养基成份及蔗糖浓度、激素种类和浓度等对胚性愈伤组织的诱导、继代和分化幼苗均有明显的影响。另外,将培养7-8天的幼胚抉碎,可显著提高胚性愈伤组织的诱导率,并能使较大的幼胚产生胚性愈伤组织。随着胚性愈伤组织继代次数的增多,再生植株中畸形苗频率也升高     

小麦Ⅱ型胚性愈伤组织的获得及培养特性研究

从小麦品系“鄂35816”幼穗愈伤组织中得到了Ⅱ型胚性愈伤组织。根据愈伤组织的状态和生长速度提高继代频率，可促使I型向Ⅱ型胚性愈伤组织转变，并保持植株再生潜能；1．0－2．0mg／L，2，4－D、CaC.2H2O3．0mmol/L和KH2PO43．0mmol/L的组合有利于Ⅱ型胚性愈伤组织的生长和植株再生。     

大花君子兰幼嫩子房培养再生植株的研究

以大花君子兰(Clivia miniata)的幼嫩子房组织为外植体,在附加2mg/LKT和lmg/L2,4-D的MS基本培养基上培养,诱导愈伤组织的频率可达90％以上,诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后可以“一次成苗”。胚性愈伤组织在2～6年的继代培养过程中,其增殖生长与苗的分化同时进行,分化频率随着继代培养的延长而上升,经长期继代培养后,已建立了具有持久高分化潜力的胚性愈伤组织无性系,由无性系不断分化产生的大量再生植株,移栽到盆钵中能够成活,并且生长良好。     

日本结缕草茎节和愈伤组织再生体系的优化

分别以日本结缕草的成熟胚和茎节为外植体,建立并优化了2套组培再生体系.实验结果表明:利用成熟胚诱导愈伤组织,适宜诱导培养基为MS基本培养基添加2 mg/L 2,4-D配合0.2 mg/L 6-BA,诱导率为42.5%;继代培养可改善愈伤组织状态,增加胚性,其中增加培养基渗透压,并适当添加ABA(0.2 mg/L),可明显提高胚性愈伤组织比率;继代2次后的愈伤组织在3种细胞分裂素6-BA,KT,ZT适当配比的分化培养基上,分化率可达到50%~75%.在以茎节为外植体的组培体系中消毒处理和预培养是比较关键的环节;预培养时MS培养基效果优于1/2 MS,在MS基本培养基中添加0.25 mg/L KT,1.0 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA为比较适合的芽诱导培养基,诱导率可达37.9%.同时,比较了两套再生体系的优缺点,为日后日本结缕草的遗传转化奠定基础.     

The cytogenetics and fiber properties of an allohexaploid betweenGossypium hirsutum andG. somalense

Cytogenetics and fiber properties were studied on the Gossypium hirsutum×G. somalense F₂ hybrid and later generations. The cytological analyses of pollen mother cells (PMCs) were made at meiotic metaphase Ⅰ. The results indicated that the hybrid was a new allohexaploid, its chromosome number determined as 2n=6x=78, and genome group as 2[(AD)₁E₂]. Chromosomal configurations of the hexaploid averaged 0.15Ⅰ+ 38.72Ⅱ+ 0.11Ⅲ + 0.02Ⅳ per cell, 85.09% PMCs having 39 bivalents, and only 11.84% PMCs having 1 to 2 multivalents, indicating that heterogenetic recombinations of chromosomes occurs between (AD)₁ and E₂, nevertheless, the frequency is lower. The hexaploids are self-fertile and the progenies remain the hexaploids, whose fibers are light brown and have higher strength by measurement of HVI 900 system. The fiber strength increases 42% than that of upland cotton variety. Therefore, it is possible for the hexaploid to be an important germplasm resource to improve fiber strength of cotton.     

利用Giemsa C-带和45S rDNA FISH的方法鉴定百合杂种

利用Giemsa C-带和染色体荧光原位杂交(45S rDNA FISH)的方法对‘Royal Lace’בHigh Class’的杂种后代分别进行了鉴定。结果表明：‘Royal Lace’的染色体数2n=3x=36,‘High Class’的染色体数2n=2x=24。杂种后代的染色体数出现2n=3x=36和2n=4x=48两种类型。经Giemsa C-带和45S rDNA FISH方法对两个亲本和具2n=4x=48的杂种后代分析结果表明,杂种后代的根尖染色体C-带可观察到来自双亲的可以特异追踪的染色体带纹。FISH分析表明,杂种后代中分别有两条来自‘Royal Lace’和‘High Class’的染色体。两个亲本的荧光原位杂交点数分别为10和9。杂种后代染色体为2n=36的个体有14个杂交信号,可以确定两条来自‘Royal Lace’,另外3条来自‘High Class’。杂种后代中2n=48的个体的杂交信号点为19,从而证实所获得的杂种后代的真实性。同时,对于2n=48,而杂交信号为19 的多倍体起源于未减数分裂的2n雄配子体的可能性进行了探讨。综合研究结果表明,Giemsa C-带和45S rDNA FISH方法可以准确地对百合的杂种真实性进行鉴定。     

参附注射液对大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡的影响

通过观察参附注射液对缺血再灌注心肌超微结构和细胞凋亡参数的影响 ,探讨参附注射液拮抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制 .使用结扎 /松解左冠状动脉前降支缺血 60min,再灌注 2 4 0min复制缺血再灌注动物模型 .Sprague_Dawley(SD)大鼠 40只随机分为 5组 :对照组(Ⅰ组 ,n =8) ,缺血再灌注组(Ⅱ组 ,1 /R组 ,n =8) ,参附组 (Ⅲ组 ,n=8) ,红参组 (Ⅳ组 ,n =8) ,附子组 (Ⅴ组 ,n =8) .Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ各治疗组在缺血前 1 0min经静脉分别注射参附注射液 (1 0mg/kg)、红参注射液 (9mg/kg)、附子注射液 (1mg/kg) ,Ⅰ组、Ⅱ组在缺血前 1 0min经静脉注射同等容积生理盐水 .测定心肌组织丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)值 ;电镜观察心肌细胞超微结构变化 ;TUNEL法原位标记凋亡心肌细胞 ,免疫组化和图像分析技术检测心肌细胞内Bcl_2、Bax蛋白表达 .与Ⅱ组比较 ,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ各治疗组 ,心肌组织MDA明显降低 ,有极显著差异(P <0 .0 1 ) .III组与IV组、V组之间比较 ,MDA降低 ,有显著性差异 (P <0 .0 5) .SOD活性明显升高 ,有显著差异 (P <0 .0 5) .心肌超微结构病变明显改善、减轻 .心肌细胞凋亡指数和Bax蛋白含量显著减少(P <0 .0 1 ) ,Bcl_2蛋白含量显著增多 (P <0 .0 1 ) .参附注射液具有抗大鼠心肌缺血再灌注损伤作用 ,     

青藏高原东缘风毛菊属中两种植物的核型报道

利用压片法研究青藏高原东缘两种风毛菊属(Saussurea DC.)植物的染色体数目和核型,结果表明,紫苞雪莲(S.iodostegia)和抱茎风毛菊(S.chingiana)的染色体数目和核型分别为2n=2x=32=18m+14sm,2n=2x=28=24m+2sm+2st.根据Stebbins提出的核型分类原则,这2个种的核型都为2A型.2个种的染色体中均未发现随体.     

白菜型油菜与诸葛菜属间杂种F1可孕性细胞遗传学分析

通过胚胎培救和快速繁殖，首次成功地获得了白菜型油菜与诸葛菜的远缘杂种。杂种植株具有期望的染色体数２ｎ＝２２。杂种具有较好的结实性。对杂种Ｆ１的细胞学表明；杂种不仅艰形成减数配子，而且还可形成未减数配子。     

大蕉胚性培养物及其原生质体再生植株的染色体分析

 采用看护培养法对大蕉胚性细胞悬浮系（Embryogenic cell suspensions, ECS）来源的原生质体进行培养,并研究了不同品种的看护细胞对原生质体培养的影响,以及大蕉ECS及其原生质体再生植株的染色体数目。结果发现,采用贡蕉ECS作为看护细胞时,大蕉原生质体培养15 d后细胞分裂频率达到8.5%,培养30 d后细胞团形成率为0.35%;而以大蕉ECS作为看护细胞时,全部原生质体褐化,不能正常发育。染色体检测结果表明,大蕉ECS的染色体数目不稳定,除含有正常的三倍体染色体数目的细胞（2n=3x=33）外,还出现大量染色体数目异常的细胞。其中绝大部分细胞含有多倍和非整倍的染色体数目,仅14.5%的细胞含正常三倍体染色体数目;但通过ECS原生质体培养获得的再生植株具有正常的三倍体染色体数目（2n=3x=33）。     

Ogura CMS紫菜苔与萝卜双二倍体的获得及细胞遗传学研究

以Ogura CMS紫菜苔(AA,2n=20)为母本,以不同萝卜品种(RR,2n=18)为父本进行杂交,获得了大量的属间杂种。从杂种F_1中发现了2株染色体自然加倍的双二倍体。在形态上双二倍体与未加倍的杂种F_1相似,都表现父本萝卜的白花性状,蜜腺正常,低温下子叶及真叶均不缺绿。在减数分裂中期Ⅰ双二倍体多数细胞形成19个二价体,后期Ⅰ时染色体以19:19的方式分配到两极,最后形成具有19条染色体的配子。通过对可染花粉比例、全株种子粒数及平均每个有效角果种子粒数的比较发现,虽然双二倍体的花药比未加倍的杂种F_1发育要好得多,但是双二倍体的育性还是低于未加倍的杂种F_1,尽管未加倍的杂种F_1在减数分裂时多数染色体以单价体的形式存在,同时也有二价体、三价体甚至四价体的形成,并且存在落后染色体和染色体桥。推测Ogura CMS紫菜苔×萝卜属间杂种F_1的育性除了减数分裂染色体的配对有关之外,与双亲染色体上基因的相互作用也有重要关系。对该杂种的遗传及育种意义进行了讨论。     

百里香属植物染色体分析

为探明我国野生百里香属植物的染色体特点,采用常规压片法对4种2个变种百里香属植物进行了染色体数目及核型分析研究。6种材料的中期染色体核型公式如下:短节百里香,2n=2x=24=18m+6sm;黑龙江百里香,2n=2x=24=20+4sm;地椒,2n=2x=24=16m+8sm;地椒展毛变种,2n=2x=26=14m+12sm;地椒亚洲变种,2n=2x=24=18m+4sm(1sat);百里香染色体为小染色体,染色体数为2n=26。我国百里香属植物的染色体基数为12和13,其核类型为2B。根据以上结果结合形态及地理分布区域,初步推测我国百里香属植物可能是属于百里香属Serpyllum组,同时认为作为地椒展毛变种的新凯居群在我国百里香属植物中的分类地位应给予重新确定。     

山东6种植物的染色体研究

对山东6种植物进行了染色体研究．白英(Solanum lyratum Thunb．)染色体数目为2n=24。核型公式K(2n)=2x=24=20m 4sm,核型“1A”;葎草(Humulus scandens(Lour．)Merr．)染色体数目为2n=16,核型公式K(2n)=2x=16=8m 8sm,核型“2A”;白刺花(Sophora vicifoliaHance．)染色体数目为2n=18。核型公式K(2n)=2x=18=2M 14m 2sm,核型“1A”;有斑百合(Lilium concolor var ．pulchellum(Fisch．)Regd．)染色体数目为2n=24,核型公式K(2n)=2x=24=4m 2sm 6st 12t,核型“3A”;野韭(Allium ramosum L.)染色体数目为2n=16 1B,核型公式K(2n)=2x=16=12m 2sm 2st 1B,核型“2A”;狼尾花(Lysimachia barystachys Bge．)染色体数目为2n=24,核型公式K(2n)=2x=24=14m 10sm,核型“2A”。     

中药月见草的染色体数目和核型分析

本文对月见草(Oenothera biennis L．)的染色体进行了研究,结果显示,染色体数目为2n=14,核型公式为K(2n)=2x=14=14m(2sat),相对长度组成为2n=14=6M2 8M1,核型为“1A”型。