应用噬菌体检测对虾发光病致病菌哈维氏弧菌的可行性研究

探讨了应用哈维氏弧菌噬菌体检测对虾发光病致病菌哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的方法和可行性.实验表明,从对虾育苗场分离的哈维氏弧菌噬菌体对对虾发光病致病菌哈维氏弧菌的噬菌作用具有相当高的特异性,它不能裂解同样来源的溶藻弧菌、副溶血性弧菌、光合细菌,却能特异地裂解本实验所用的不同来源的哈维氏弧菌,噬菌斑出现率可达80%~100%,并且噬菌斑的出现率与虾苗发生发光病的发病程度有一定的相关性,可应用于哈维氏弧菌的检测和对虾发光病致病菌的诊断.     

对虾养殖中弧菌数量与对虾“红腿病”“黄鳃病”关系研究

对虾养殖中弧菌数量与对虾“红腿病”“黄鳃病”关系研究苏永全，蔡心一，翁卫华，王军（厦门大学海洋学系，亚热带海洋研究所）黄淑莘（马尾水产饲料公司福州）弧菌是养殖虾池和对虾消化道的正常菌群之一￣［１］，但其中的某些种如鳗弧菌（Ｖ．ａｎｇｕｔｌ－ｌａｒｕｍ...     

我国海水养殖贝类弧菌病研究进展

综述了弧菌的致病机理,对我国主要养殖贝类的危害以及对其检测方法的进展,提出了养殖贝类弧菌病的一系列防治措施,另外对贝类弧菌病的研究方向也进行了探讨和展望。     

对虾病原体鳗弧菌抗血清制备及其血清反应

对鳗弧菌抗血清学制备及其血清反应的研究结果表明，应用免疫注射法，先去除鞭毛抗原，可以获得对虾“黄鳃病”鳗弧菌的高效价的抗血清，其血清效价可以达到５１２０，这为对虾病原菌制备抗血清，提供了一个很好的技术和方法．     

对虾病原体鳗弧菌抗血清制血及其血清反应

对鳗弧菌抗血清学制备及其血清反应的研究结果表明，应用免疫清射法，先去除鞭毛抗原，可以获得对虾“黄鳃病”鳗弧菌的高效价的抗血清，其血清效价可达到５１２０，这为对虾病原菌制备抗血清，提供了一个很好的技术和方法。     

引起舟山地区凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病病原的分离与鉴定

2014-2019年期间,从舟山地区疑似发生急性肝胰腺坏死综合病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)对虾体内共分离到30株病原菌。通过16S r RNA基因及gyrB、rpoA等基因同源性检索分析对30株分离菌进行了鉴定;同时运用Nested-PCR方法筛选并鉴定了菌株pirABVP基因携带情况;选取代表性菌株,以浸泡感染方法进行了致病性试验。分离菌鉴定结果显示:从舟山地区凡纳滨对虾肝胰腺中分离到的病原菌主要以副溶血弧菌、坎贝氏弧菌及欧文斯氏弧菌为主;其中10株菌携带pirABVP毒力基因;本实验选取4株pirABVP基因阳性菌和1株pirABVP基因阴性菌进行了感染试验;致病性试验显示,携带pirABVP毒力基因的4株菌可使健康对虾发病,出现急性肝胰腺坏死病的典型症状,且持续暴露于病原菌的实验对虾的最高死亡率可达95%,比短时间暴露组死亡率高40%左右;发病虾肝胰腺及肠道组织出现了肝胰腺小管崩塌及肠绒毛脱落等严重的病理变化。研究表明,携带pVA1质粒的副溶血弧菌、欧文斯氏弧菌和坎贝氏弧菌等多种弧菌诱发了舟山地区对虾AHPND,养殖环境中的AHPND致病菌持续存在会导致对虾死亡率处于高水平状态。     

斑节对虾病原菌河流弧菌(I型)的研究

从患"红体综合症"的斑节对虾(penaeus monodon)体内分离到一株细菌6101号,回归感染证实了其致病性,经形态观察以及生理生化特性检测,鉴定为河流弧菌(I型)．提取河流弧菌6101号胞外产物,分析其酶成分,定量检测了胞外产物中蛋白酶、酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶的活性,将提取的河流弧菌6101号胞外产物对健康斑节对虾进行致死试验,证实其胞外产物所具有的毒性甚于该菌的菌悬液．电镜观察致死对虾肝组织细胞严重受损,从细胞病理方面进一步证实了病原菌胞外产物的致病性．     

中国对虾育苗池水中哈维氏弧菌的检测

１９９６年４月～５月,在山东莱州市在大华育苗池,山东即墨市丰城育苗场发病发育池,环境水体及活体饵料中共采集８０份样品,用间接ＥＬＩＳＡ技术对其进行苗期对虾病原菌－哈维氏弧菌的检测,结果表明,发病育苗池中哈维氏弧菌的检出率（５８．３％）明显高于正常育苗池（２０．４％）,证实丰城对虾育苗场暴发的流行病与育苗水体中的哈维氏弧菌有关,大华育苗场育苗水中也检测出哈维氏弧菌,但大华育苗场未发病,说明哈维氏弧菌     

海洋噬菌蛭弧菌对对虾病原菌及其他细菌的寄生作用

用宿主双层琼脂平板法，测定海洋噬菌蛭弧菌对２５株对虾病原菌和大肠杆菌、枯草杆菌、绿脓杆菌及金黄色葡萄球菌的寄生作用，结果表明噬菌蛭弧菌菌株不同寄生的范围不同，但所有供试寄主细菌都能被某些蛭弧菌寄生，形成清晰的噬斑．用相差显微镜和电镜观察蛭弧菌的形态及噬菌过程     

溶藻弧菌对水产动物致病性及其防治的研究进展

溶藻弧菌是一种常见的海洋伺机性病原体,是引起人类、水生动物细菌性疾病的重要病原之一。与其它病原微生物一样,弧菌的致病性与其产生的多种毒力因子息息相关,毒力基因是产生各种毒力因子的物质基础。本文对溶藻弧菌的病原学、致病机理及其防治等方面的最新研究成果进行了综述。     

河口区中国对虾养殖防病新模式的研究

养殖中国对虾(Penaeus chinensis)的试验塘,以防病养虾塘养殖管理模式加以管理,养殖周期为87～159d,取得较好的产量．虾塘水水质稳定,池水中浮游动物丰富,浮游植物量与浮游动物量比值为1．2～5．4,细菌总数、弧菌数量变化不大,底泥中弧菌数量不随养殖时间的延长而增加,细菌总数则反之;池水主要理化因子符合要求,对虾饵料系数较低,生长比较正常．     

检测海洋弧菌的酶联免疫吸附试验研究

研究建立中国对虾病原菌－副溶血弧菌的间接酶联免疫吸附试验快速检测技术，间接ＥＬＩＳＡ技术中的副溶血弧菌的特异抗血清由家兔制备，羊抗兔ＩｇＧ用碱性磷酸酶标记，酶的底物为对磷酸基硝基苯。将该技术标准化后，测定了抗血清与１３株其它副溶血弧菌菌株２９株其它弧菌标准菌株的交叉反应，并进行了苗期对虾样品中副溶血弧菌的检测。     

多种细菌与凡纳滨对虾肝胰腺坏死症(HPNS)爆发有关

近年来,在中国南方超过50%以上的凡纳滨对虾养殖场在养殖30 d后爆发1种疾病,导致80%以上的养殖对虾死亡。患病对虾临床症状为肝胰腺萎缩坏死、活动力减弱、对虾在池塘底部死亡,发病初期水面和池塘边观察不到病虾,因此养殖者通常将该病称为"偷死病"。患病对虾肝胰腺萎缩坏死是主要症状,因此,我们称这种对虾疾病为对虾肝胰腺坏死症(hepatopancreas necrosis syndrome,HPNS)。2012年3月-2013年10月,我们在中国南方广东、海南和广西3个省的12个养殖地区采集具有HPNS症状的凡纳滨对虾进行了组织病理观察、病毒检测与人工感染、细菌分离鉴定与人工感染研究。组织病理学研究表明具有HPNS症状的病虾肝胰腺坏死,在部分区域肝胰腺管细胞消失,肝胰腺小管间结缔组织减少。对305尾HPNS对虾进行11种对虾病毒PCR检测,并采用人工病毒感染方式感染健康对虾,感染对虾不表现HPNS症状。从63尾HPNS病虾的肝胰腺、血淋巴和肠道分离鉴定383株细菌,这些细菌分别属于10个属,49种细菌,每尾对虾均混合感染多种细菌,其中38尾对虾中分离到副溶血弧菌,34尾对虾中分离到蜡样芽孢杆菌,20尾对虾中分离到苏云金芽孢杆菌,19尾对虾中分离到霍乱弧菌。选取副溶血弧菌和苏云金芽孢杆菌分别采用注射和浸泡方式感染健康对虾,感染对虾均出现HPNS症状。结果表明多种细菌与凡纳滨对虾HPNS爆发有关。     

长毛对虾的幼体发育形态及其与东方对虾、日本对虾的比较

本文对长毛对虾胚后各发育期的形态特征作了较详细的描述,并与东方对虾和日本对虾进行了比较,为对虾人工育苗提供科学资料。     

1株副干酪乳酸菌S-4对致病弧菌的抑制特性研究

针对弧菌病害的防治,选取了一株副干酪乳酸菌(Lactobacillus paracasei)S-4对4种致病弧菌进行体外拮抗实验,并在此基础上比较了不同发酵时长及稀释倍数的上清液对弧菌的抑制作用,同时探究了抑菌物质特性及进行共培养拮抗实验.结果显示:副干酪乳酸菌S-4对4株致病弧菌均具有显著的抑制作用.副干酪乳酸菌S-4生长过程中,0~16 h的上清液无抑菌活性,20 h后开始表现出对4株弧菌的抑制作用;36 h时的上清液对创伤弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌的抑制率大于95.42%,且该上清液3倍稀释后的抑菌活性无显著降低,为最佳收获时间;72 h时的上清液对溶藻弧菌的抑制率达到95.72%,6倍稀释后的抑菌活性无显著降低,为抑制溶藻弧菌的最佳收获时间.进一步探究菌株间的相互拮抗表明:副干酪乳酸菌S-4在共培养4~6 h就表现出明显的抑菌活性,比上清液提前12 h产生抑制效果,在培养初期就能有效抑制弧菌的生长.生化分析表明:抑菌物质对过氧化氢酶、蜗牛酶、胃蛋白酶不敏感,与多肽类物质无关,酸碱中和后抑菌活性完全消失,推测为有机酸.本研究表明:副干酪乳酸菌S-4对4株常见致病弧菌具有较强抑制作用,在水产养殖中具有潜在应用价值.     

成虾发光病病原体的分离鉴定及防治技术研究

成虾养殖中也经常发生发光病，危害同样十分严重．研究证明，哈维氏弧菌(Vibroharveyi)也是成虾发光病的主要致病菌．注射、投喂、创伤、浸泡等几种感染方式都会造成对虾大量死亡，但感染速度和发光程度有明显的差别．侵入虾体内的发光菌的数量对对虾的成活率有明显的影响．致病菌与幼苗发光病的药物敏感性相似，仅对少数药物敏感，2种药饵可减少损失率，但防治工作应以预防为主，综合处理．     

创伤弧菌触发吞噬细胞细胞骨架重排和诱导细胞凋亡的研究进展

创伤弧菌(Vibrio vulnificus,V.vulnificus)感染是一种少见而又致命性的重要疾病.由于起病急、死亡率高,创伤弧菌感染的有效预防和治疗受到严峻的挑战,促使人们对创伤弧菌的致病机制进行更为深入地研究.吞噬细胞在机体抗感染免疫中起着重要的作用.由于感染后触发宿主吞噬细胞骨架改变及诱导其凋亡是多种病原菌入侵的机制之一,与疾病的发生、发展和结局有着密切关系.本文就创伤弧菌感染后,触发吞噬细胞细胞骨架改变及诱导细胞凋亡的研究进展作一综述.     

中国对虾血淋巴抗菌活力的测定

采用溶藻胶弧菌、副溶血弧菌、哈维氏维菌、嗜水气单胞菌对中国对虾血浆样品、血细胞溶解物（ＨＬＳ）样品的抗菌活力进行了测定。表明中国对虾血浆样品对四种细菌均表现出一定的抗菌活力。其中,三种弧菌活细胞数在孵育１ｈ时呈现最低;嗜水气单胞菌活细胞数在孵育４ｈ时最少,在三种弧菌中,血浆样品对哈维氏弧菌表现出的抗菌活力最强,而对副溶血弧菌表现出的抗菌活力最弱。血细胞溶解物样品对三种弧菌几乎没有表现出抗菌活力;嗜     

破译对虾病毒遗传密码

国家海洋局第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室在中国工程院院士徐洵教授的领导下,经过几年的不懈努力和刻苦攻关,终于成功地测定了造成多年来虾病爆发与流行的"罪魁祸首"--对虾白斑杆状病毒(WSBV)基因组的全部序列,从而在世界上率先破译了虾病病毒的遗传密码,而国际同行仅完成了对虾病毒1%的测序工作.这不仅标志着我国基因组研究从人到动物、到农作物之后,又向海洋生物延伸,而且为防治虾病和发展对虾养殖业奠定了分子生物学基础.     

厦门养殖对虾主要病原生物

作者在１９８９～１９９１年间，对厦门中郊区养殖对虾的主要病原生物进行调查，结果表明：亲虾黑鳃病的主要病原菌为镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ）；细菌性病害的主要病原菌为弧菌属（Ｖｉｂｒｉｏ）、气单胞菌属（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）和假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）；对虾白毛病的病原生物有聚缩虫（Ｚｏｏｔｈａｍｎｉ－ｕｍ）、独缩虫（Ｃａｒｃｈｅｓｉｕｍ）、钟虫（Ｖｏｒｔｉｃｅｌｌａ）和丝状细菌。