薄荷愈伤组织诱导与分化研究

本文研究了薄荷愈伤组织诱导与分化的影响因素。以薄荷茎段为外植体,研究培养基、激素水平对愈伤组织诱导、增殖培养的影响;以叶片为外植体,探讨叶片的愈伤组织诱导;以茎段、叶片和叶柄为外植体材料,比较不同外植体的愈伤组织诱导率。实验结果表明:MS比1/2 MS、B5培养基更适于茎段的诱导培养,诱导率达80%;叶片愈伤组织的诱导率为100%,以MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L NAA为最佳诱导培养基;幼叶是不同外植体中诱导效果最好的,以MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基。     

虎杖愈伤组织的诱导及其白藜芦醇含量的变化

为了利用细胞工程开发虎杖悬浮细胞培养、积累白藜芦醇,必须探索虎杖松散型愈伤组织的培养基及其培养条件.以灭菌虎杖茎段、叶片、茎尖等为外植体,探讨9种激素组合在琼脂和珍珠岩固体培养基上诱导愈伤组织的出愈时间、出愈率、在继代培养中分化状况和白藜芦醇含量变化.结果表明:珍珠岩作为支撑物,诱导的愈伤组织比琼脂好;含有NAA或KT的培养基,诱导形成的愈伤组织在继代中均可分化;①号培养基(MS+2,4-D 4.0 mg/L+6-BA 2.0mg/L+3%蔗糖)对幼叶、茎段和茎尖等都有出愈时间早、出愈率高和愈伤组织生长速度快、松散,适宜于悬浮细胞的培养;愈伤组织白藜芦醇的含量与其外植体来源呈正相关,其中,由幼茎形成的愈伤组织白藜芦醇舍量(鲜重)最高,达到160 μg/g.     

一品红愈伤组织的诱导与分化

以一品红的茎段、叶片、苞片及叶柄作外植体接种于Ms附加不同激素的培养基中,研究愈伤组织的诱导效果以及不同激素组合对愈伤组织分化出芽的影响。结果表明,在起始培养中以Ms BA 0．1 mg／L NAA0．1mg／L 2,4-D 2 mg／L的效果最好,最易诱导出愈伤组织,其中苞片的诱导效果优于其它外植体。在BA与NAA不同浓度组合中,茎段的诱导效果最好,其次是叶柄和苞片,叶片的诱导效果较差。愈伤组织分化产生芽的频率较低,继代培养中易出现各种颜色的次生代谢物。     

紫花苜蓿耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究不同激素对紫花苜蓿2号愈伤组织的诱导效果,筛选出最佳诱导愈伤组织培养基;以茎尖、茎段及叶片作为外植体,确定了叶片作为紫花苜蓿组织培养的最佳外植体;在1/4、1/3及2/3 3种不同海水培养基上分别诱导出紫花苜蓿耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株.     

青钱柳愈伤组织不定芽诱导技术

以青钱柳成熟种子培养无菌苗,再用无菌苗叶和茎段为外植体进行组织培养,观察了愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,分析了不同培养基和生长调节物质对青钱柳愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,茎段和叶片的诱导率最高分别达到90.00%和86.70%;(2)激素及其浓度对愈伤组织诱导均有显著影响。当加入TDZ质量浓度为0.5 mg/L时,叶愈伤组织诱导率达95.00%;而加入TDZ质量浓度为0.1 mg/L时,茎段诱导率达92.85%;(3)叶愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的培养基上,不定芽的诱导频率最高,达53.85%,这实现了青钱柳由愈伤组织分化形成不定芽和萌发增殖的过程,但萌发率较低。     

青钱柳愈伤组织不定芽诱导技术

以青钱柳成熟种子培养无菌苗,再用无菌苗叶和茎段为外植体进行组织培养,观察了愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,分析了不同培养基和生长调节物质对青钱柳愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,茎段和叶片的诱导率最高分别达到90.00%和86.70%;(2)激素及其浓度对愈伤组织诱导均有显著影响。当加入TDZ质量浓度为0.5 mg/L时,叶愈伤组织诱导率达95.00%;而加入TDZ质量浓度为0.1 mg/L时,茎段诱导率达92.85%;(3)叶愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的培养基上,不定芽的诱导频率最高,达53.85%,这实现了青钱柳由愈伤组织分化形成不定芽和萌发增殖的过程,但萌发率较低。     

香根草愈伤组织的诱导和快速繁殖

为了寻找大批量快速繁殖香根草的有效办法,以香根草的茎段、茎节为实验材料进行愈伤组织的诱导和快速繁殖的实验.用不同浓度的6-BA、IAA、2,4-D对其不同的外植体进行试验.结果表明:在愈伤组织诱导实验中,MS培养基附加6-BA 0.5mg/L 2,4-D 2.0mg/L的激素组合对茎段愈伤组织诱导效果最佳;将产生的愈伤组织团转入分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加6-BA 3.5mg/L IAA 0.2mg/L;再生苗在MS培养基附加6-BA 3.0mg/L IAA 0.5mg/L的培养基上,进行生根培养效果较好.可见,茎段和茎节均可作为外植体.考虑到茎段数量较大,易取材,且效果明显优于茎节,认为茎段是香根草组培快繁的理想外植体.     

南方红豆杉愈伤组织诱导研究

文章研究了从南方红豆杉的幼叶及幼茎,在MS、B5、N6及SH4种培养基上的诱导愈伤组织的情况,并对愈伤组织的诱导条件进行优化,结果表明以幼叶及幼茎作为外植体在MS培养基上产生愈伤组织的速度较快,7d即有愈伤组织发生,但愈伤组织也容易褐化;而B5和N6培养基愈伤组织机构紧密,褐化少。不同部位外植体诱导愈伤组织有差异,茎、叶容易诱导愈伤组织,根的诱导率差。外植体大小对于愈伤组织影响显著,带有部分叶的茎段不能够形成愈伤组织,带有根的茎段则可以诱导愈伤组织。     

外源激素对龙葵愈伤组织形成和器官发生的影响

龙葵不同部位的外植体在愈伤组织形成过程中所需的外源激素浓度不同。茎尖外植体在附加6—BA0.1—2.0(mg/L)、NAA0.1—2.0(mg/L)的Ls培养基上可高频率地诱导出愈伤组织。培养基中只加6—BA(2.0mg/L)或NAA(2.5mg/L)一种外源激素也可诱导出愈伤组织,但诱导所需的时间较长。较高的6—BA浓度(2.0mg/L)有利于子叶外植体形成愈伤组织,较高的NAA(2.0mg/L)有利于胚轴形成愈伤组织。器官分化过程决定于诱导愈伤组织时培养基中的激素成分。     

林茜草愈伤组织诱导与组培苗的快速繁殖研究

研究林茜草的茎段培养分化技术,探索林茜草快速繁殖适合培养条件;摸索出诱导林茜草愈伤组织的最佳培养方法,为林茜草人工栽培用以提取其所含代谢药用成分的工业化生产提供原材料.根据植物组织培养方法,将林茜草茎段用不同浓度的生长调节剂培养基配方培养,使其诱导林茜草的茎、叶、进行愈伤组织诱导.结果表明,MS+2.4-D 2mg.L-1+KT 0.1mg.L-1培养基适于诱导愈伤组织发生;MS+6-BA 1.5mg.L-1培养基可诱导林茜草茎段能迅速分化为幼苗;MS+2.4-D 2mg.L-1+KT 0.1mg.L-1培养基与MS+6-BA 1.5mg.L-1培养基先后使用,可诱导林茜草生根形成完整植株.     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

大叶饲料槐高频再生体系建立及试管苗工厂化生产

通过叶片外植体愈伤组织诱导和直接不定芽再生途径，建立了大叶饲料槐的高频再生系统，采用正交试验筛选出愈伤组织最适诱导培养基为；MS附加0．5mg／L 6-BA和1．0mg／L NAA；愈伤组织分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．2mg／L NAA。叶片外植体直接分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．1mg／L NAA；试管苗在1／2MS附加0．2mg／L IBA、0．1mg／L NAA和2g／L AC的培养基上生根率高达100％，移栽成活率达90％，从而实现了大叶饲料槐的工厂化生产．     

Effects of pigment glands and gossypol on somatic cell culture of upland cotton (Gossypium hirsutum L.)

The effects of pigment glands and gossypol on the somatic cell culture of upland cotton were studied, using the materials as follows: three pairs of glanded and glandless upland cotton near isogenic lines, TM-1, and Coker 312. The results showed that the pigment glands and gossypol contents in the explants had great inhibiting effect on the induction and growth of callus in somatic cell culture of upland cotton, and the induction rate of callus and the single callus weight of glandless cotton were much higher than those of their glanded near isogenic lines. It was easier to obtain regeneration plants from glandless cotton than from their glanded near isogenic lines. There was a significant inverse correlation between the gossypol contents in the explants and callus induction rate, with the correlation coefficient of -0.84. The vitro gossypol in the medium had some inhibiting effect on the induction and growth of callus, especially for the glandless cotton. However, a certain concentration of vitro gossypol in the medium (0.1 mg/L) was an aid to the steadiness growth of callus in glandless cotton somatic cell culture, with a high rate of embryogenic cells which was in favor of plant regeneration, and it was also relatively easy to obtain regeneration plants when they were transferred into differentiation medium with 0.1 mg/L of vitro gossypol, even for some cultivars which are difficult in somatic cell culture. In addition, the gossypol content and its variation in the seedlings and callus during culture of Coker 312 were discussed, as well as the relationship between gossypol variation in the explants and its somatic cell culture. The probability of vitro gossypol used in cotton somatic cell culture for the improvement of somatic cell culture was suggested.     

幼叶组织培养在小麦远缘杂交育种中的意义

本文研究了自交不结实或结实率低的小麦×小偃麦、小麦×黑麦和小黑麦×黑麦杂种F_1的幼穗、幼叶、幼茎的组织培养。从幼穗和幼叶的愈伤组织中分化出了再生苗。在实验过程中,比较了不同培养基和不同外植体的诱导和分化的差异。以MS 2mg/L 2,4-D 2.5mg/L Tordon的出愈率最高,以MS 2mg/L 6-BA 0.2mg/L IAA对愈伤组织的分化最为有利。从幼穗再生苗中还得到一株叶片呈白绿条纹的突变。     

白术胚轴和胚根直接分化不定芽的再生体系

为了建立白术Atractylodes macrocephala Koidz.通过胚轴、胚根外植体直接分化不定芽的高效离体再生体系,研究了外植体类型、植物生长调节剂种类及质量浓度对不定芽直接分化的影响.研究结果表明,以白术无菌苗的胚轴、胚根为外植体,在分化培养基上可直接诱导不定芽分化,其中胚轴不定芽分化率最高可达91.18%,每个外植体产生芽的数量最高可达13个;诱导不定芽分化的最佳培养基为MS(Murashige and Skoog)+ TDZ(thidiazuron)1.5 mg/L+ NAA(naphthylacetic acid)0.2 mg/L.将分化的不定芽培养于附加IBA(indol 3-butiric acid)0.5 mg/L的1/2 MS培养基中诱导生根,生根率达66.66%以上.本研究为药用植物白术的工厂化育苗和脱病毒以及利用植物基因工程技术进行品质改良提供了有效的再生途径.     

影响籼稻愈伤组织再生频率的若干因素

以籼稻品种特青的幼胚作为外植体,对影响植株再生的几个因素包括诱导培养基、预分化培养、干燥处理、通气状况和蔗糖浓度进行了研究．结果表明,MS＋2,4－D2mg／L是较为合适的诱导培养基,预分化培养,干燥处理,良好的通气环境以及降低分化培养时的蔗糖浓度均有助于意伤组织的分化．     

影响籼稻愈伤组织再生频率的若干因素

以籼稻品种特青的幼胚作为外植体,对影响植株再生的几个因素包括诱导培养基、预分化培养、干燥处理、通气状况和蔗糖浓度进行了研究,结果表明,ＭＳ＋２, ４－Ｄ ２ｍｇ／Ｌ是较为合适的诱导培养基,预分化培养,干燥处理,良好的通气环境以及降低分化培养时的蔗糖浓度均有助于愈伤组织的分化．     

不同基因型小麦成熟胚盾片组织培养效果研究

不同基因型及其外植体的愈伤组织诱导和植株分化研究是建立高效植株再生和遗传转化系统的基本条件。文章首次以去胚的成熟胚盾片为外植体材料,对10个小麦基因型进行了离体操作。结果显示:愈伤组织诱导率平均可达96.5%,10个基因型的愈伤组织都能分化出绿苗,分化频率最高可达10.5%,没有白苗化现象;根的分化与绿点、绿苗的分化之间具有显著的相关性;鄂恩1号的植株再生能力显著优于其它基因型,其植株再生系统已具备了遗传转化的基本要求。     

苜蓿不同品种愈伤组织诱导、分化和再生能力的比较研究

以新疆大叶、甘农1号、甘农3号和陇东4个苜蓿品种的下胚轴、子叶和子叶节为外植体,比较了不同苜蓿品种及外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究了不同浓度及配比的植物生长调节物质对愈伤组织诱导和芽分化再生的影响。结果表明,4个苜蓿品种再生能力依次为新疆大叶>甘农3号>甘农1号>陇东苜蓿,下胚轴外植体在愈伤诱导培养基(MS 2mg/L2,4-D 0.2mg/LZT)上出愈率分别为94%,83%,71%和58%,胚性愈伤组织在分化培养基(MS 0.2mg/LZT 50mg/L谷氨酰胺)上分化率分别为15.8%,9.2%,7.1%和4.5%;下胚轴再生能力优于子叶节和子叶;丛生芽在生根培养基(1/2MS)上生成完整的根;各品种的再生苜蓿植株均成功移栽到土壤中,成活率100%。上述4个苜蓿品种分化再生能力的阶段性研究结果为今后通过基因工程方法改良苜蓿奠定了基础。     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。