拟南芥叶肉细胞原生质体分离及影响因素

通过对拟南芥(Arabidopsis thaliana)叶肉细胞原生质体分离条件的研究,探讨了酶解法制备拟南芥叶肉细胞原生质体的分离条件和影响因素.在不同纤维素酶质量浓度、山梨醇质量浓度、酶解液pH值、酶解时间下,测定了拟南芥叶肉细胞原生质体的产量.结果表明,在20 g/L纤维素酶、140 g/L山梨醇、pH=5.8的酶解液中,酶解时间为1.5 h,原生质体产量最高.同时,在相同分离条件下测定了拟南芥幼叶和老叶的原生质体产量,结果表明,幼叶原生质体产量显著高于老叶.     

烟草K326叶肉原生质体培养再生植株及影响因素的研究

以烟草K326无菌苗为材料,成功地将烟草叶肉原生质体培养出再生植株.并同时就烟草叶肉原生质体的酶解条件、培养方法及培养基中的激素组成等因素对植株再生的影响进行了研究和探索.     

三种植物叶肉原生质体分离的比较

以四季樱草(Primula obconica),矮牵牛(Petunia hybrida)及黄花烟草(Nicotiana rustical)叶片为材料,用纤维素酶液分离原生质体,分离结果:三种植物叶肉原生质体数量,随酶液浸泡时间增长和浓度升高而增多;在同一浓度,同一时间酶解下,三种植物原生质体数量,以矮牵牛酶解数量最多,质量最好,四季樱草次之,黄花烟草较差。     

烟草和元麦叶肉原生质体吸收尼古丁机制的研究

用EA_3-867纤维素酶分离的烟草(Nicotianatabacum)和元麦(Hordeumdistichon)叶肉原生质体,分别保温在尼古丁溶液中,用紫外分光光度计测定它们对尼古丁的吸收。结果表明,这两种原生质体能迅速地吸收尼古丁;原生质体吸收尼古丁的量,随介质尼古丁浓度的升高而增多;在生理学pH范围内,介质的pH对原生质体吸收尼古丁没有多大的影响。初步认为,这两种原生质体对尼古丁的吸收是一种简单的扩散机制。     

四季樱草叶肉原生质体植株再生

以四季樱草为材料，用国产纤维素酶一步法分离叶肉原生质体。用液体浅层静置培养的方法培养原生质体。培养基为Ｂ５基本培养基附加ＺＴ０．５ｍｇ／Ｌ、２，４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ和甘露醇０．６５ｍｏｌ／Ｌ。细胞分裂旺盛，培养２天后观察到第一次细胞分裂，１０天后形成小细胞团，１５天左右添加一次新鲜的不含甘露醇的培养液，使渗透压减半。将形成直径为１－２毫米的小愈僵组织转到分化培养基上，再生成完整植株，而后将苗移栽到花盆     

烟草和元麦叶肉原生质体吸收尼古丁机制的研究

用 EA_3-867纤维素酶分离的烟草(Nicotiana tabacum)和元麦(Hordeum distichon)叶肉原生质体,分别保温在尼古丁溶液中,用紫外分光光度计测定它们对尼古丁的吸收。结果表明,这两种原生质体能迅速地吸收尼古丁;原生质体吸收尼古丁的量,随介质尼古丁浓度的升高而增多;在生理学pH范围内,介质的pH对原生质体吸收尼古丁没有多大的影响。初步认为,这两种原生质体对尼古丁的吸收是一种简单的扩散机制。     

烟草叶肉原生质体分离和纯化研究

实验比较了从烟草K326叶片分离叶肉原生质体的若干影响因素.结果表明,质壁分离的时间、酶液浓度、渗透压及酶解时间是影响原生质体产量和质量的决定性因素.研究结果对建立高效的烟草原生质体再生系统及其遗传操作有参考价值.     

烟草叶肉原生质体再生壁形成中的呼吸途径Ⅱ.TCA途径

壁的再生是原生质体生命活动中最重要的行为之一。这种行为是建立在代谢基础上的。前文我们已报道了再生壁形成中,EMP(糖酵解)和HMP(戊糖支路)呼吸途径起了重要作用,但对于TCA(三羧酸循环)途径尚未研究。本文系报道应用TCA呼吸途径的抑制剂丙二酸钠对烟草叶肉原生质体再生壁形成中的作用进行的研究结果。材料与方法选择烟草(Nicotiana tabacum)叶片为材料,按前法分离叶肉原生质体。原生质体的培养按前法进行。丙二酸钠附加于NT培养基中,经高压灭菌后接种。检查原生质体细胞壁的再生,用荧光增白剂VBL染色荧光法。细胞面积的计算按前法。     

玉帘的组织和原生质体培养

玉帘不同外植体培养，诱导出胚性、中间型和非胚性３种类型的愈伤组织，并再生植株，由胚性愈伤组织与叶肉细胞分离出原生质体，进行培养，启动了细胞分裂并形成了多细胞团，同时，还研究了影响玉帘组织培养以及原生质体分离和培养的诸因素。     

细叶黄芪叶肉原生质体植株再生

生物系遗传和细胞研究所所长郝水教授及其博士生安利佳等人,在《植物学报》1991年第一期上,发表了《细叶黄芪叶肉原生质体植株再生》的学术论文。近年来,豆科植物原生质体培养的研究进展很快,目前已有13属约33种豆科植物原生质体再生植株。其中,大豆、赤豆、百脉根、多变小冠花等有经济价植的豆科植物,已由我国学者通过原生质体培养再生植株。细叶黄芪(Astragalus tenuis)是一种豆科目草,关于它的离体培养,国内尚未见报道。作者进行了细叶黄芪叶肉细胞的分离培养,并得到再生植     

PP333对水稻幼苗的生长_叶片结构和抗冷性的影响

用PP333处理水稻幼苗,可改善秧苗素质,例如秧苗矮壮,假茎宽,叶鞘细胞短宽,叶片增厚,叶肉细胞变大,叶脉增粗,叶绿素含量高,发根力强,抗冷性也有所提高.同时,在密播多肥条件下,经过PP333处理,秧苗仍粗壮,故可节约秧地.     

一株降解小麦秸秆丝状真菌的筛选、鉴定及初步研究

利用涂布平板法从腐烂秸秆及枯枝烂叶中分离出71株丝状真菌.通过比较菌株秸秆粉降解产物对小麦生长的促进作用,获得一株可有效降解秸秆并促进小麦生长的菌株2-5-2.对其进行形态分析和rRNA序列鉴定,结果显示,该菌株为木霉属真菌.该菌株可产生纤维素酶、木质素酶、半纤维素酶、几丁质酶、蛋白酶、壳聚糖酶.平板对峙培养显示,该菌对多种病原真菌的生长有抑制或阻碍作用.固态发酵培养时,纤维素酶、半纤维素酶酶活在第11d达到最高;第28d,纤维素降解率达到21.13%,半纤维素降解率达到28.53%.     

水分胁迫对银杏叶片叶肉细胞超微结构的影响

应用温室盆栽方法,研究了土壤水分胁迫对4个银杏品系1年生实生苗叶片超微结构的影响,结果表明:(1)在正常土壤水分条件下,银杏各品系叶肉细胞及细胞核正常,核膜清晰,少数叶绿体中含淀粉粒和嗜锇颗粒,细胞质中含较多电子密度强的黑色物质;(2)在土壤含水量为田间持水量60%的水分条件下,银杏各品系叶肉细胞及细胞核基本正常,核膜基本清晰,叶绿体片层较清晰,叶绿体含少量嗜锇颗粒和淀粉粒,叶绿体外膜、细胞核膜和细胞壁上附着电子密度强的黑色物质;(3)在土壤含水量为田间持水量40%的条件下,银杏各品系叶肉细胞核膜大部分消失,多数叶绿体模糊,片层开始紊乱,所含嗜锇颗粒有增大、增多趋势;(4)在土壤含水量为田间持水量20%的条件下,银杏各品系细胞核膜基本消失或消失,多数叶绿体外膜变得模糊,片层基本消失,叶绿体中嗜锇颗粒明显增多,少数叶绿体中虽含有片层却出现膨胀现象;(5)从各品系叶肉细胞超微结构的综合情况分析,44号和11号品系耐旱能力强于32号和55号品系。     

丝状蓝藻Calothrix sp.PCC7601原生质球的分离和再生

采用溶菌酶、纤维素酶和果胶酶混合处理法，首次较好地分离具活力的丝状蓝藻的原生质球。通过再生培养，跟踪显微观察了原生质球的再生过程，并且获得了再生藻株。为丝状蓝藻的转基因工作提供了一种潜在的受体细胞。     

水稻纹枯病菌人工接种方法的研究

对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AGI-IA)7种人工接种方法进行试验，首次评价了各自优缺点．结果认为：“稻秆离体接种法”是比较理想的人工方法，其特点是快速、简便、发病速度适中、病情调查方便，病原菌容易控制．其次是盆栽苗接种法、叶片离体接种法，菌丝悬浮液较差。     

新型植物生长调节物质-Lepidimoide的生理作用及其与其它植物激素生理作用的比较

以燕麦、萝卜和水稻幼苗为材料，分析Lepidimoide的生理作用，并与其它激素的生理作用进行比较．研究结果表明：1Lepidimoide促进燕麦胚芽鞘切段的伸长，单侧处理燕麦胚芽鞘能产生弯曲生长，但作用效果略低于生长素；2Lepidimoide处理萝卜子叶能使叶绿素含量增加，但效果略低于BA，混合使用时作用效果高于单独使用BA或Lepidimoide；3Lepidimoide能促进水稻幼苗伸长，效果与GA3相似，但低浓度时效果不佳，混合使用时有一定的增效作用．上述结果表明，Lepidimoide是一种促进型生长调节物质，其作用与BA和GA3相似．     

Electrofusion of tobacco protoplasts in space

Electrofusion of plant cell protoplasts is a techniqueto induce fusion between protoplasts by the reversibleelectric breakdown of their plasma membranes. This method is reliable and not toxic compared with chemicalfusion. Some somatic plant cell hybrids have been suc-cessfully produced by this method[1—5]. However, it is notwidely applied in agriculture due to the low yield of vi-able hybrids[6]. The reasons resulting in the low yield ofhybrids might be as the followings: (1) different densit…     

蓝光对水稻幼苗生长及干物质积累的影响

研究蓝光对水稻幼苗生长及干物质重量的影响。结果表明，与白光及黑暗处理幼苗相比，蓝光处理的水稻幼苗较矮，第２叶鞘较短，第１叶片开张角度增大，叶片平展加快。     

石蒜单染色体的显微分离及体外扩增

建立了石蒜单染色体的分离及体外扩增的方法。石蒜根尖经卡诺固定液固定后，再用果胶酶和纤维素酶酶解处理，制得标本，在倒置显微镜下，用自制的毛细管针挑取目的的染色体。将分离的石蒜染色体放入0．2mLEppedorf管中，经蛋白酶K处理后，进行DOP－PCR扩增，获得DNA片段。琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物的长度大约为100－5000bp。此法为构建石蒜单染色体基因组库和筛选其特异性探针奠定了基础。     

Preparation of exine-detached pollen inNicotiana tabacum

A method of preparing exine-detached pollen inNicotiana tabacum was established. Anthers containing early-middle binucleate pollen were cold-pretreated at 4–6°C for 7–14 days, and were suspended in 0.3 mol/L sucrose solution for 2 days. During this process, the exine of most pollen grains dehisced. Then they were transferred into an enzyme solution containing 1% cellulase, 1% pectinase, 0.1% pectolyase, 1 mol/L mannitol, 0.3 mol/L sorbitol, 0.5% potassium dextran sulphate and K3 medium macro elements. After 15–20 min enzymatic maceration, the exine was detached resulting in the release of exine-detached pollen. Factors affecting preparation of exine-detached pollen were investigated, including cold-pretreatment, osmoticum concentration and enzymes used. Xia Huijun: born in Oct. 1963, Ph.D. Current research interest is in plant reproductive biology Supported by the National Natural Science Foundation of China