细叶黄芪叶肉原生质体植株再生

生物系遗传和细胞研究所所长郝水教授及其博士生安利佳等人,在《植物学报》1991年第一期上,发表了《细叶黄芪叶肉原生质体植株再生》的学术论文。近年来,豆科植物原生质体培养的研究进展很快,目前已有13属约33种豆科植物原生质体再生植株。其中,大豆、赤豆、百脉根、多变小冠花等有经济价植的豆科植物,已由我国学者通过原生质体培养再生植株。细叶黄芪(Astragalus tenuis)是一种豆科目草,关于它的离体培养,国内尚未见报道。作者进行了细叶黄芪叶肉细胞的分离培养,并得到再生植     

“赤豆叶肉细胞原生质体培养及绿苗分化”的研究居国际领先地位

我校遗传学研究所由葛扣麟教授、王蕴珠副教授领导的,以研究生为主体的国家攻关课题组,在籽粒用豆科植物原生质体培养方面,取得了重大突破性进展.他们首次从赤豆叶肉细胞原生质体游离培养成具有分化潜力的再生愈伤组织;并首次从再生愈伤组织培养分化成植株,从而表明了在国际上激烈的科技竞争中,在豆科粮食作物原生质体培养技     

烟草叶肉原生质体再生壁形成中的呼吸途径Ⅱ.TCA途径

壁的再生是原生质体生命活动中最重要的行为之一。这种行为是建立在代谢基础上的。前文我们已报道了再生壁形成中,EMP(糖酵解)和HMP(戊糖支路)呼吸途径起了重要作用,但对于TCA(三羧酸循环)途径尚未研究。本文系报道应用TCA呼吸途径的抑制剂丙二酸钠对烟草叶肉原生质体再生壁形成中的作用进行的研究结果。材料与方法选择烟草(Nicotiana tabacum)叶片为材料,按前法分离叶肉原生质体。原生质体的培养按前法进行。丙二酸钠附加于NT培养基中,经高压灭菌后接种。检查原生质体细胞壁的再生,用荧光增白剂VBL染色荧光法。细胞面积的计算按前法。     

烟草叶肉原生质体分离和纯化研究

实验比较了从烟草K326叶片分离叶肉原生质体的若干影响因素.结果表明,质壁分离的时间、酶液浓度、渗透压及酶解时间是影响原生质体产量和质量的决定性因素.研究结果对建立高效的烟草原生质体再生系统及其遗传操作有参考价值.     

山东白花烟[Nicotiana tabacum(mutant)]叶肉原生质体培养及植株再生

从烟草属的几个种中已成功地用原生质体培养成株,但是对于一些有价值的遗传标记的突变体的原生质体培养至今还很少见有报道.本文主要研究了以我国选育的普通烟草(N.tabacum)的白花突变体叶肉原生质体培养的条件和方法.     

快捷、简单、有效的原生质体计数方法

<正>1960年Cocking用酶法首次分离出了有活性的原生质体。1971年Takebe等从烟草叶片分离原生质体,经培养获得再生植株,原生质体的研究和应用     

玉帘的组织和原生质体培养

玉帘不同外植体培养，诱导出胚性、中间型和非胚性３种类型的愈伤组织，并再生植株，由胚性愈伤组织与叶肉细胞分离出原生质体，进行培养，启动了细胞分裂并形成了多细胞团，同时，还研究了影响玉帘组织培养以及原生质体分离和培养的诸因素。     

皱叶莴苣_菜心_胡萝卜及其它几种植物原生质体分离方法的初步探索

近年来,原生质体的分离和培养已获得较大的突破,如烟草、胡萝卜、马铃薯、矮牵牛、石刁柏等多种植物已能从原生质体再生成完整的植株,有些作物已从原生质体诱导出愈伤组织,如水稻、玉米等.分离的原生质体,不但能诱导再生成完整植株,还能通过原生质体的融合或摄入外源核酸或细胞器,使具有不同类型遗传特性的原生质体形成杂交细胞,进而打破有性杂交不亲和性的界限,开辟植物遗传育种的新途径.由此可见,原生质体的制备和培养研究是植物体细胞杂交工作中的首要环节.本文对华南栽种的几种作物,初步探索了其原生质体分离的适合方法.     

发根农杆菌在植物细胞壁上受体位点的研究

刚分离的烟草和元麦叶肉原生的南体及用植物细胞壁再生抑制剂处理的上述原质体分别与发根农杆菌共培养，未发现农杆菌的附着；随着原生质体壁再生时间的延长，农杆菌的附着率逐渐的增加；用植物细胞主要组分的水解酶和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００分别处理３日龄烟草叶肉原生质体后，进行随着菌数的放射性分析，结果表明，细菌对经过胰蛋白酶和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００处理的细胞的附着率显著下降，ＴｒｉｔｏｎＸ－１００提取液中含有糖蛋     

刀豆叶肉细胞原生质体培养和绿苗分化研究成功

豆类植物是一种主要的经济和粮食作物,在国民经济中占有重要地位,因此,豆类植物原生质体培养和植株再生的课题一直是世界各国的研究热点。复旦大学遗传学研究所葛扣麟、张冬生、杨金水和宁波农业科学研究所边自雄、严成其一起完成了“刀豆叶肉细胞原生质体培养和绿苗分化”的研究。这是国内继1987年复     

烟草种间叶肉原生质体融合方法的研究

利用PEG法、高Ca2 高pH法和PEG-高Ca2 高pH法等三种原生质体融合方法,对普通烟草K326和黄花烟草叶肉原生质体进行融合,结果表明,PEG-高Ca2 高pH法的有效融合率最高,融合效果最好.并同时对影响烟草叶肉原生质体融合的其它因素进行了研究和探讨.     

烟草原生质体活力检测和细胞核染色方法的研究

本试验以烟草叶片和烟草悬浮系制备的原生质体为材料,采用不同染料对原生质体活力和细胞核进行染色效果比较.结果表明,原生质体活力观察宜采用荧光素双醋酸酯（FDA）染色法,染色效果清晰易于观察,四嘧唑蓝（MTT）法则可定量反映原生质体活力;相对于其他细胞核染料,DAPI对不同来源的原生质体细胞核染色效果均较好,能够清晰地对原生质体进行观察和计数.本研究为今后原生质体的检测提供有用的参考.     

Immunohistochemical localization of Ca2+/calmodulin-dependent kinase in tobacco

The existence of Ca²⁺/calmodulin-dependent kinase (CaM kinase, CaMK) in tobacco is verified immuno- logically and its distribution in different tissues of tobacco is studied. It has been demonstrated that CaMK is mainly distributed in early developing anthers, developing ovules and embryos, lateral root primordium, apical meristem and leaf primordium of buds and mesophyll cells and developing vascular bundles of leaves. There is enormous CaM kinase distributed in leaf epidermis fair cells and guard cells of stomas too. Little kinase is found in mature stem or root cells. The distribution properties of CaM kinase in tobacco are consistent with those of CaM, suggesting that there exists the Ca²⁺ signal transduction pathway mediated by CaM kinase in tobacco and it plays an important role in the plant growth and development.     

Electrofusion of tobacco protoplasts in space

Electrofusion of plant cell protoplasts is a techniqueto induce fusion between protoplasts by the reversibleelectric breakdown of their plasma membranes. This method is reliable and not toxic compared with chemicalfusion. Some somatic plant cell hybrids have been suc-cessfully produced by this method[1—5]. However, it is notwidely applied in agriculture due to the low yield of vi-able hybrids[6]. The reasons resulting in the low yield ofhybrids might be as the followings: (1) different densit…     

烟叶烘烤过程中呼吸速率和脱水速率的变化

烟叶烘烤过程中,点火开始后一段时间内,呼吸速率有一个明显的下降过程,变黄中后期呈现一个时间长,速率高的呼吸旺盛时期;定色前期呈现第二个时间不长,强度也相对较弱的呼吸旺盛时期,这两个呼吸高峰的演变除因外界条件的影响外,呼吸基质的变化也是主要原因,烤烟调制过程中烟叶脱水速率变黄前期脱水很少,之后逐步增强直至定色中期,这是第一次由弱变强的脱水过程,主要表现为叶肉细胞脱水,定色后期出现第二次强度较大的脱水过程,表现为维管束脱水。     

Regulatory effect of cotton leaf curl virus AC2 on virion sense promoter

The AC2 gene of cotton leaf curl virus (CLCuV) was obtained by polymerase chain reaction (PCR) . The total DNA of the CLCuV infected tomato leaves was used as template, and the amplified DNA fragment was inserted into a cloning vector. Transient expression vectors were constructed by inserting the AC2 gene into downstream region of CaMV 35S promoter. These constructs were delivered into tobacco and cotton leaf cells for transient expression by particle bombardment. The results indicated that the virion sense promoter was activated by AC2 and its activity increased remarkably. However, the activity of transactivated virion sense promoter was still lower than that of the complementary sense promoter. The expression pattern of transactivated virion sense promoter was similar to that of the complementary sense promoter, namely with high activity in both mesophyll and vascular tissues. The possibility of application of AC2 in plant genetic manipulation was also explored.     

拟南芥叶肉细胞原生质体分离及影响因素

通过对拟南芥(Arabidopsis thaliana)叶肉细胞原生质体分离条件的研究,探讨了酶解法制备拟南芥叶肉细胞原生质体的分离条件和影响因素.在不同纤维素酶质量浓度、山梨醇质量浓度、酶解液pH值、酶解时间下,测定了拟南芥叶肉细胞原生质体的产量.结果表明,在20 g/L纤维素酶、140 g/L山梨醇、pH=5.8的酶解液中,酶解时间为1.5 h,原生质体产量最高.同时,在相同分离条件下测定了拟南芥幼叶和老叶的原生质体产量,结果表明,幼叶原生质体产量显著高于老叶.     

烟草叶肉原生质体再生壁形成的电镜研究

电镜观察表明,新分离的烟草叶肉原生质体表面光滑,在质膜外没有纤维状物质,内质网和高尔基体几乎没有发育:培养1天后,线粒体明显增加,粗面内质网和高尔基体沿质膜发育,质膜变得粗糙;2天后,质膜发生折皱,高尔基囊泡向质膜外分泌它的内含物;6天后,质膜表面出现明显松散分布的再生壁。在培养基中附加200 ppm 香豆素处理,在培养1天后,质膜仍然光滑,未出现内质网和高尔基体;2天后,质膜开始变粗糙,内质网开始发育。试验表明,质膜、内质网、高尔基体在原生质体再生壁形成中起重要作用,并讨论了它们的可能作用。香豆索可能是在一定时同内,通过抑制质膜的活动和内质网、高尔基体的发育而抑制壁的再生。