葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅰ)——激素对胚培养的影响及培养基的筛选

选用巨峰、里扎马特和无核白葡萄的幼胚接种在附加了GA3、IAA、6-BA等的不同激素水平的MS培养基上进行培养,结果表明花后60d的巨峰和花后50d的无核白的幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA2.0mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上分别得到了44.0±8.9%和96.0±8.9%的发育率与31.9±6.4%和37.5%的成苗率;花后60d的里扎马特幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA0.5mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上得到了76.0±8.9%的发育率和63.5±5.5%的成苗率.筛选出了适合不同品种的最佳胚培养、萌发以及成苗培养基,为葡萄新品种的选育提供了新的方法与技术依据.     

里扎马特葡萄胚培养技术的研究

选用里扎马特葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3、IAA、6-BA的不同激素水平MS培养基上,进行胚培养,以研究里扎马特葡萄的胚培养技术.结果表明,里扎马特葡萄胚在花后60 d培养效果最好,在附加GA30.5 mg/L、IAA1.5 mg/L的MS培养基上得到了(84.0±8.9)%的发育率和(76.7±2.9)%的成苗率(p<0.01).     

巨峰葡萄胚培养技术的研究

选用巨峰葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3I、AA、6-BA的不同激素水平MS培养基上进行胚挽救,以研究葡萄的幼胚培养技术.结果表明,巨峰葡萄在花后60 d效果最好.在附加GA30.5 mg/LI、AA1.0 mg/L、6-BA0.5 mg/L的最佳培养基上得到了(76.0±16.7)%的发育率和(69.1±13.1)%的成苗率.     

秋葵幼胚培养试验初步研究

以秋葵幼胚为试材,筛选较适合幼胚萌发和成苗的培养基,并研究胚龄分别为开花后4 d、6 d、8 d、10 d的幼胚萌发率和成苗率.结果表明,秋葵幼胚萌发和成苗的适宜培养基分别为Qz(Ms+0.1 mg/mL BA+1.0 mg/mL GA3)和QG(Ms+0.5mg/mL GA3);开花后8 d的幼胚萌发率和成苗率最高.由此建立秋葵幼胚培养的方案.     

无核白葡萄胚挽救机理的研究

选用无核白葡萄在开花后35￣60d,取其胚接种在含有GA3+IAA+6-BA的不同激素水平MS培养基上,进行胚挽救,以探讨研究无核葡萄的胚挽救机理.结果表明无核白在开花后50d胚挽救效果最好.在附加GA30.5mg.L-1+IAA1.5mg.L-1+6-BA 0.5mg.L-1的MS培养基上得到了84%的发育率和31.9%的成苗率(50d);开花后60d的发育率最高,得到了100%的发育率,却未得到成苗,说明在胚挽救中幼胚的不同部位其发育与败育过程不同步.对无核葡萄胚挽救适期的确定依据提出了新的见解.     

2种红豆杉的离体胚培养

建立了2种红豆杉的离体胚培养和植株再生系统.结果表明,4℃保存和流水冲洗能够在一定程度上破除红豆杉胚的休眠,不同培养基对种胚培养的影响没有明显的差别,经过低温处理的种胚萌发率由41.7%提高到69%,成苗率由33.3%提高到44.8%;流水冲洗预处理对种胚萌发也有促进作用,处理2 d后种胚的萌发率和成苗率都有明显的提高.     

奥迪亚无核葡萄及其杂交组合幼胚发育动态与胚培养研究

以奥迪亚无核葡萄及其杂交组合为试材,进行葡萄果实、胚珠生长发育动态测定,研究胚珠、胚败育的时期并进行胚培养,目的是为无核葡萄胚挽救杂交育种提供理论支撑.实验结果表明,奥迪亚无核葡萄及其杂交组合果实外观大小(纵/横径)达到最大并开始变软为接种的最佳时期,说明其胚挽救的最佳时期为花后42-49d.     

早熟蟠桃的胚培养

为克服早熟蟠桃品种胚发育不成熟导致的杂种出苗率低的问题,实验采用胚培养技术挽救杂种胚,以美国红蟠作母本,贵妃红、早露蟠和英勒尔作父本,配置杂交组合,果实商品成熟期采集杂种胚,经过60d的低温层积（层积）处理,灭菌后接种在添加不同浓度激素的—玛培养基上进行胚培养。结果表明：配方MS＋2mg/L6-BA＋1mg／L IBA有利于蟠桃杂种胚芽的生长分化;配方MS＋1mg／L 6-BA＋1mg／L IBA有利于蟠桃杂种胚培苗多丛芽诱导增值生长。     

柑桔幼胚培养的直接体细胞胚发生与植株再生

将柑桔幼胚分离接种于MS固体诱导培养基上诱导了体细胞胚直接高频发生并再生植株，初步建立了柑桔体细胞胚直接高频发生的实验系统。研究结果表明，柑桔幼胚在附加1mg／LIAA和20mg／LBA的MS培养基上的直接体细胞胚诱导频率最高。     

红豆杉胚源细胞株的培养和紫杉醇的生产

研究了建立适用于紫杉醇生物合成的红豆杉 ( Taxus chinensis)胚源细胞株的方法 .红豆杉成熟种子 ,用自来水冲洗 9d,培养 1 0 d,萌发率可达 1 0 0 %.已萌发的种胚在诱导培养基中培养 6d,愈伤组织的诱导率达 1 0 0 %,使用红豆杉茎源细胞株看护培养诱导出的愈伤组织使愈伤组织的继代成活率提高一倍 .红豆杉茎源细胞株生长 1 5d的条件培养液也能使愈伤组织继代成活率提高 60 %.对建立的胚源细胞株进行了筛选和培养 ,其中细胞株 E2和 E3生长快 ,紫杉醇含量也较高     

提高九叶青花椒发芽率和成苗率的试验研究

运用正交设计及统计分析方法研究了脱粒方式(A)、采种时间(B)、脱脂程度(C)和播种后覆盖处理(D)对九叶青花椒发芽率和成苗率的影响.结果表明:①影响九叶青花椒发芽率和成苗率的主导因子是脱粒方式(A)和采种时间(B);②脱脂程度(C)和播种后覆盖处理(D)会影响苗木出苗整齐度.③提高九叶青花椒发芽率和成苗率的最佳处理组合为A1B2C1D1,即种子采收后放在阴凉通风处阴干脱粒,过白露节10d后采收,脱粒后的种子用水浸泡2d后用碱水浸泡半天,播种后先覆盖一层稻草再覆盖地膜.     

以红宝石无核葡萄为亲本胚挽救育种技术的研究

为了提高无核葡萄胚挽救中幼胚的成苗率,对以红宝石无核葡萄为母本,巨玫瑰、玫瑰香和希姆劳特葡萄为父本的杂交胚珠进行胚挽救,分析不同父本、取样时间和培养基对杂交胚珠胚挽救效果的影响.结果表明,在胚的离体培养中,以巨玫瑰葡萄作父本更有利于胚的发育和萌发,红宝石无核×巨玫瑰、红宝石无核×希姆劳特和红宝石无核×玫瑰香杂交胚珠的最佳取样时期均为授粉后61 d,相应的胚萌发率分别为20.55%、6.56%和9.60%.分析不同发育培养基和萌发培养基对胚挽救效果的影响,适合红宝石无核×希姆劳特和红宝石无核×玫瑰香杂交胚发育的为N1培养基(Nitsch+1.5 mol/L IAA+0.5 mol/L 6-BA+0.5 mol/L GA3+60 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1 g/L活性炭,pH值为5.8),胚发育率分别为8.00%和13.92%.适合胚萌发成苗的为W1培养基(WPM+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1.5 g/L活性炭,pH值为5.8).通过根尖染色体倍性鉴定,确定红宝石无核×巨玫瑰的9株杂交幼苗中,4株为三倍体幼苗,5株为二倍体幼苗.     

青钱柳离体胚的培养及快速繁殖

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计对影响其萌发、快速成苗的各种因素进行研究,并进行了诱导增殖试验.结果表明,基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和成苗最关键的因素.离体胚萌发的最佳培养基组合为WPM GA3(10 mg/L) 蔗糖(30 g/L),萌发率可达100%;适宜成苗的培养基组合是WPM GA3(5 mg/L) 麦芽糖(30 g/L),培养60 d的无菌苗移栽成活率为100%;最适的增殖培养基为WPM 6-BA(0.5 mg/L),平均增殖系数为3.45.     

花生体细胞胚发生发育过程中淀粉代谢的动态变化

将花生实生苗的幼对接种于MS固体诱导培养基上诱导体细胞胚发生 ,用PAS染色法观察了体细胞胚发生发育过程中的淀粉代谢的动态变化 .结果表明 ,在体细胞胚的发育过程中 ,淀粉表现出两次积累高峰 ,第一次在胚性细胞团中 ,淀粉粒大而密集 ;随着胚性细胞的分裂 ,淀粉逐渐被消耗 ,到多细胞原胚期胚体内淀粉趋于消失 .球形胚期 ,淀粉粒又开始积累 ,出现第二次积累高峰 ;到成熟胚期 ,淀粉积累只限于生长点区域淀粉的两次积累高峰为体细胞胚的发育提供了物质和能量基础     

葡萄霜害调查及防治措施

<正> 石河子垦区于1992—1993年连续两年在5月上旬发生不同程度晚霜,正值葡萄萌芽及嫩梢开始迅速生长发育之时.气温骤降至-3—-5℃,给本区葡萄造成危害,尤其是乌伊公路沿线更为严重.为了摸清霜冻规律,寻求预防和应急措施,我们于1992年5月8日至5月15日到145团及石河子郊区的优良生食葡萄园进行不同品种、不同部位、不同芽类、不同出土日期的抽样冻害调查,同时还调查了采用防护林和霜前熏烟的防霜作用,各种情况随机取样10株,现将调查结果报告如下:调查结果与分析1、不同品种对霜冻的抵抗力我们在145团良繁站果园对巨峰,里扎马特、喀什哈尔、无核白等四个生食品种进行了抗霜冻性调查.结果测得幼芽冻害率分别为80.5%、86.9%、65.9%及60.3%.结果表明品种不同,抗霜冻的能力不同,有大粒种巨峰弱于小粒种无核白,外来种里扎马特弱于本地种喀什哈尔的趋势.今后在栽培中为了减少霜害损失,应着重发展本地种,而对于已栽植的外地引来大粒种则要加强防冻措施.     

葡萄离体培养中胚状体发生的研究Ⅰ.胚状体发生的组织细胞学观察

以葡萄（ＶｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａＬ．）的花药和花丝为实验材料，观察了葡萄离体培养中胚状体的发生发育过程．结果表明：（１）葡萄的花药和花丝经诱导都可形成胚性和非胚性两类不同的愈伤组织，与外植体来源无关，胚状体经胚性愈伤组织产生．（２）胚状体多起源于胚性愈伤组织表层或表层以下的单个细胞，这些细胞核大，细胞质浓，染色深，在表层者易于脱落而处于单个离散状态，它们的第一次分裂有均等分裂，也有不等分裂，经２细胞、３细胞、多细胞原胚等阶段发育为成熟的胚状体．（３）葡萄胚状体具有与双子叶植物合子胚相似的发育过程     

玉米幼胚高培养力基因型的筛选

以132个玉米基因型的幼胚为外植体,研究了基因型对幼胚愈伤组织诱导和继代的影响及基因型、分化培养基成分和液体培养基振荡处理对愈伤组织再生苗率的影响。结果表明:郑22×昌7-2、综3×HiⅡA、97-7×郑22等24个基因型产生了容易再生植株的Ⅱ型愈伤组织,其中仅有郑22×昌7-2、综3×HiⅡA、97-7×郑22等11个基因型再生出了植株;郑22×昌7-2、综3×HiⅡA和97-7×郑22这三种基因型再生苗率较高,是较为合适的幼胚培养材料;分化培养基成分对再生苗率有明显影响;液体培养基振荡处理有利于植株再生。     

刺槐体细胞胚发生的同步化调控

为了建立一个高频率、同步化发生的体细胞胚培养系统,以二倍体刺槐为材料,对影响刺槐体细胞胚同步化发生的培养基渗透压、培养基中添加的植物生长调节剂、低温等培养环境条件以及悬浮培养结合看护培养方法进行了研究,建立了刺槐体细胞胚同步发生体系.结果表明:1)4 ℃低温条件下处理7 d的胚性愈伤组织,最有利于刺槐体细胞胚的同步化诱导,同步化率可达37.3%;2)培养基中蔗糖质量浓度为50 g/L最适宜调控刺槐的体细胞胚同步化发生,同步化率可达35.0%;3)培养基中的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)质量浓度为0.1 mg/L时最适宜体细胞胚同步化的调控,体细胞胚发生的同步化率可达43.6%,同时对畸形胚的发生有较好的控制作用;4)将悬浮培养的胚性细胞用50目筛(孔径0.28 mm)过滤,将留在筛上的细胞团接种到铺有滤纸的半固体体细胞胚诱导培养基上(培养基为MS(Murashige & Skoog)+NAA(naphthylacetic acid)0.5 mg/L+ BA(benzyladenine)0.5 mg/L+2-吗啉乙磺酸(MES)500 mg/L+谷氨酰胺 500 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+蔗糖 30 g/L+琼脂3 g/L),培养21 d后,球形胚大量发生,占到总胚状体数目的67.3%.本结果可为其他植物种类的体细胞胚同步化调控研究提供参考.     

小麦耐盐变异体的筛选——Ⅰ.小麦体细胞胚性无性系的建立

利用春小麦11个品种,通过幼穗和幼胚离体培养,研究了基因型,外植体和培养基成分对愈伤组织诱导率和分化率的影响.结果表明,不同基因型的愈伤组织诱导率和分化率差异明显.幼穗长度以10～14mm 时接种为宜,幼胚以开花后11～14d 接种效果最好.诱导培养基的效果以 MB>MS>N_6>LS,2,4-D 以2mg/L 较为合适,不宜加6BA 和 NAA,但加适量甘氨酸和谷氨酰胺有利于愈伤组织的诱导.分化培养基中加少量6BA 和 NAA 是必要的,而且 ZT 的作用优于 KT.通过以上研究,从中筛选出了3个能长期保持较高再生植株潜力的体细胞胚性无性系.     

胚胎分割、分割胚的体外培养及移植

用玻璃微针对小鼠胚胎进行分割,分割的裸半胚经体外培养和移植到受体后,获得由半胚发育的仔鼠。小鼠早期胚胎(2细胞,8细胞阶段)在链霉蛋白酶中软化透明带后,用直径为0.5μm的玻微针徒手对胚胎进行切割。切割的半胚体外培养24～48h,观察半胚的活力、发育率、发育阶段及胚泡的大小与未切割的正常胚胎进行比较。共切割胚胎342枚,切割后成活的半胚为411枚,半胚成活率为60.08％(411/682)。2细胞和8细胞阶段切割的半胚,成活率分别为