诱导型一氧化氮合酶在大鼠肾脏缺血预处理第二窗的保护作用

目的：观察肾脏缺血预处理对缺血／再灌注损伤的第二窗保护作用，探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的作用机制。方法：对大鼠肾动脉进行4次循环的5min夹闭／5min放开造成缺血预处理，24h后进行45min夹闭／24h放开造成缺血／再灌注损伤模型。观察缺血预处理后缺血／再灌注的大鼠血清肌苷、尿素氮变化，Paller法评分观察肾组织损伤情况；检测缺血预处理后血清一氧化氮(NO)及肾组织iNOS活性的变化。结果：缺血预处理能显著降低缺血／再灌注损伤时血清肌苷、尿素氮水平，减轻肾组织损伤程度；氨基胍能阻断缺血预处理的第二窗保护作用；缺血预处理后24h血清NO及肾组织iNOS活性升高。结论：缺血预处理对缺血／再灌注损伤有第二窗保护作用，此作用可能与缺血预处理后iNOS活性升高生成的NO有关。     

VEGF在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的表达变化

目的 研究局灶性脑缺血再灌注中心区、半影区VEGF表达的动态变化及意义．方法 采用线检法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型．采用神经病学评分、TTC染色、光镜检测对模型予以评价．在此基础上采用免疫组化技术，观察缺血3h及缺血3h再灌注3，6，24，72h缺血中心区及半影区VEGF表达的动态变化，以及观察相应时间点缺血中心区及半影区病理组织学变化．结果 正常对照组及假手术组VEGF呈阳性表达，缺血3h及缺血3h再灌注3，6h中心区及半影区VEGF表达明显增强，缺血3h再灌注24，72h缺血中心区VEGF表达接近正常，而此时半影区呈升高趋势，24h达到高峰，72h有所下降(与假手术组相比，P＜0．05)．相应神经元的病理组织学变化也随再灌注时间的延长而加重．结论 正常脑组织中VEGF呈弱阳性表达，缺血半影区随缺血再灌注时间延长表达增强．随着缺血再灌注时间延长，中心区神经细胞以坏死为主，半影区以神经细胞以凋亡为主．提示VEGF对脑缺血损伤后的神经细胞有保护和修复作用．     

局灶性脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的研究

目的研究局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及其大鼠脑组织不同时间病理学改变情况.方法随机选取66只成年Wistatr大鼠,按照随机数字法分3组,对照组(假手术组,n=6)、观察1组(脑缺血组,n=24)、观察2组(脑缺血再灌注组,n=36).采用线栓法制造大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,手术后HE染色,并分别采用TUNEL法和电镜观察大鼠缺血灌注损伤后神经元凋亡情况和细胞凋亡形态的变化.结果大鼠缺血再灌注后0~63 h时其神经功能损伤最为严重,伴随时间的延长逐渐能得到轻微缓解和改善,再灌注24 h后神经功能明显好转,之后再次出现加重的趋势.研究发现:再灌注后神经元会出现凋亡,TUNEL阳性细胞集中在灌注后病灶中心的边缘区域以及皮层区.结论线栓法制备动物脑组织缺血灌注模型能有效用于脑组织缺血再灌注后的临床分析,局灶区的神经元以凋亡、坏死为主,其中轻度脑缺血主要以神经凋亡为主,中重度缺血主要以坏死为主.     

早期应用膳食纤维对重型颅脑损伤大鼠肠屏障的影响

目的：研究早期应用膳食纤维对重型颅脑损伤大鼠肠屏障的影响。方法：Wistar大鼠200只,采用Marmarou方法致重型颅脑损伤,随机分为盐水组、能全力组、膳食纤维组,另设假手术组,分别在致伤复苏后6、12、24、48、72h处死动物,取门静脉血测血浆微量内毒素的变化,取小肠回盲部观察细胞凋亡变化。结果：致伤复苏后各组内毒素值明显高于对照组,小肠粘膜细胞凋亡指数增加,上述变化以伤后12～24h最显著,至72h不能恢复;早期添加膳食纤维至伤后48h对上述各观察指标有明确改善,能全力组至48h后有改善作用。结论：早期单独添加膳食纤维作为肠内营养对重型颅脑损伤大鼠肠屏障有保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注碱性成纤维细胞生长因子蛋白表达的研究

目的 检测大鼠局灶性脑缺血再灌注后中心区、半影区bFGF的蛋白表达动态变化及意义。方法 采用线检法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，采用神经病学评分，TTC染色，光镜检测对模型予以评价，并用免疫组化法观察缺血3h再灌注3，6，24，72h缺血中心区、半影区bFGF表达的动态变化，并观察相应时间点、相应区域病理组织学变化．结果 在正常组及假手术组bFGF呈弱阳性表达．缺血3h及缺血3h再灌注3，6h中心区、半影区表达明显增强．与假手术组比较，差异显著(P＜0、05)、缺血3h再灌注24，72h缺血中心区bFGF表达下降，但仍较正常对照组高，此时半影区表达呈持续升高趋势，24h达高峰，72h有所下降。而相应病理变化为：缺血3h可见轻重不等的神经细胞变性坏死，缺血3h再灌注中心区及半影区随缺血再灌注时间延长，病理组织学变化逐渐加重．结论 正常脑组织中bFGF呈弱阳性表达，缺血中心区及半影区随缺血再灌注2d内随时间延长表达增强，与神经细胞缺血改变加重呈正相关．提示bFGF对脑缺血损伤后的神经细胞有保护和修复作用。     

大鼠弥漫性神经轴索损伤后AQP4的表达

目的:复制大鼠DAI损伤模型,应用Gless染色法观察轴索损伤的病理形态学变化,分析DAI损伤的发生机制,对AQP4表达在DAI的诊断和损伤时间推断中的应用价值进行探讨.方法:雄性SD大鼠60只,体重250~300g.随机分为正常对照组和实验组,实验组又按不同时间分为伤后0.5h、1h、3h、6h、12h、1d、3d、7d及10d组.按Marmarou法复制大鼠DAI损伤模型,应用湿重干重法,测定脑组织的水含量,脑组织常规取材后在进行Gless神经纤维轴索染色观察基础上,应用免疫组织化学染色方法观察AQP4的表达.结果:Gless染色在伤后0.5h可见轴索损伤的形态学变化,12h见明显的轴索收缩球,1~2d收缩球明显增多,3d后出现恢复期变化.大鼠DAI损伤后1~3h出现脑水肿,24~72h脑水肿达高峰,随后逐渐消退.AQP4的表达与脑水肿的发生、发展有明显的相关性,其表达量在损伤后6h增加,3d达高峰,10d后基本恢复正常.结论:AQP4与DAI的发生、发展有明显的相关性,对DAI的诊断和损伤时间的推断有一定的应用价值.     

3.0TASL-fMRI评价灯盏花素对大鼠对比剂急性肾损伤的保护作用

目的:应用3.0T动脉自旋标记磁共振成像技术(ASL-f MRI)评估灯盏花素对大鼠对比剂急性肾损伤(CIAKI)的保护作用.方法:将60只SD大鼠随机分为对照组和灯盏花素组,对照组于注射对比剂前、后连续注射生理盐水7 d,灯盏花素组于注射对比剂前、后连续注射灯盏花素注射液7 d(每天1次),并且于注射对比剂前、注射对比剂后20 min、24、48、72 h和7 d共6个时间点进行3.0T ASL-f MRI扫描,测量大鼠肾脏外髓部肾脏血流量(Renal Blood Flow,RBF)值,取大鼠肾脏病理检查,HE染色后评价外髓部肾小管损伤情况,分析和比较两组RBF值以及病理损伤变化.结果:对照组大鼠肾脏外髓部RBF值注射对比剂20 min后RBF值升高,持续至48、72 h后回落至低于注射对比剂前,直至7 d组;灯盏花素组注射对比剂20 min后RBF值持续升高至72 h、7 d后回落至近注射对比剂前水平.注射对比剂后72 h灯盏花素组与对照组两者比较差异有统计学意义(P0.05),余时间点两者比较差异无统计学意义(P均0.05).病理结果表明对照组注射对比剂后20 min后肾脏外髓部肾小管即出现损伤,24~48 h损伤减轻,72 h损伤又加重,但低于20 min,7 d后损伤加重,与20 min组相仿;灯盏花素组注射对比剂后20 min肾脏外髓部肾小管严重损伤,24~48 h损伤减轻,逐渐低于对照组损伤程度,72 h损伤又加重,但低于对照组,7 d后损伤减轻.注射对比剂后,除24 h组两者损伤无统计学差异(P0.05)外,余时间组两者间差异均有统计学意义(P值均0.05).结论:3.0T ASL-f MRI技术可以评估CIAKI引起的肾血流灌注水平,在一定程度上反映灯盏花素注射液对大鼠CIAKI的治疗反应.     

大鼠急性脊髓损伤后肝癌衍生生长因子的表达

目的:观察大鼠受损伤脊髓组织中肝癌衍生生长因子(Hepatoma-derived growthfactor,HDGF)表达的变化.方法:将40只成年大白鼠随机分成对照组(A组)和脊髓损伤组(B组),每组20只.脊髓损伤组采用改良的Allen’s打靶法制备,并于术后24 h处死大鼠,取损伤脊髓节段进行免疫组织化学染色.观察HDGF在正常对照组以及脊髓损伤后表达情况.以表达指数作为统计学指标,采用X2检验分析各组间的变化.结果:HDGF主要表达在神经细胞核中.15例损伤脊髓标本表现为HDGF表达指数为Ⅱ组,对照组中表达指数为Ⅱ组仅4只(P<0.05).结论:HDGF高表达于损伤脊髓组织中,提示HDGF可能参与脊髓损伤的修复.     

积雪草苷对缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究

为探讨积雪草苷对缺血再灌注损伤的保护作用及机制。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血再灌注24 h后,观察积雪草苷(80、40、20 mg/kg)对脑缺血再灌注大鼠神经功能评分,组织形态学变化和神经细胞凋亡的影响。并测定缺血脑组织抗氧化物酶超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)、蛋白质羰基含量,Real time-PCR检测缺血脑组织Caspase-3、Bcl-2和Bax m RNA表达变化。结果显示,与模型组比较,积雪草苷能显著降低缺血再灌注大鼠神经功能评分,抑制神经细胞凋亡,改善组织病理学损伤,提高脑组织SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA、蛋白质羰基水平,降低Caspase-3、Bax m RNA表达,提高Bcl-2 m RNA表达。由此可知,积雪草苷对脑缺血再灌注大鼠有显著保护作用,可能与其抗氧化、抗凋亡活性有关。     

甘草酸二铵对溃疡性结肠炎大鼠细胞凋亡的影响

为探究甘草酸二铵对溃疡性结肠炎大鼠外周血炎症细胞凋亡的影响，采用2,4,6-三硝基苯磺酸-乙醇诱导复合结肠黏膜组织致敏UC大鼠模型.将100只大鼠分为4组，即正常对照组、模型组、西药组(给药柳氮磺吡啶肠溶片)、甘草组(给药甘草酸二铵),分别于0,2,4周动态观察4组大鼠结肠组织病理形态学变化，第2,4周采用流式细胞术动态观察大鼠淋巴细胞(LPL)及中性粒细胞(PMN)的凋亡情况.结果表明：与对照组相比，模型组大鼠结肠组织HE染色后显示出不同程度的病理变化，结肠湿重及肠重指数升高；与模型组相比，第2,4周甘草组与西药组大鼠结肠组织病理损伤情况均有所减轻，第4周甘草组大鼠结肠湿重及肠重指数明显下降；与对照组相比，造模后第2周模型组大鼠血外周LPL及PMN凋亡呈延迟现象，甘草酸二铵、柳氮磺吡啶肠溶片均可促进LPL及PMN凋亡；第4周模型组大鼠LPL凋亡率仍低于对照组，凋亡呈延迟现象，西药组、甘草组的LPL凋亡率高于模型组，说明甘草酸二铵、柳氮磺吡啶肠溶片仍能提高LPL凋亡率.LPL及PMN凋亡的减慢和溃疡性结肠炎的发生、发展存在一定关系，甘草酸二铵可能通过对LPL与PMN凋亡的调控，达到缓解...     

Spinal cord decompression reduces rat neural cell apoptosis secondary to spinal cord injury

Objective: To determine whether spinal cord decompression plays a role in neural cell apoptosis after spinal cord injury. Study design: We used an animal model of compressive spinal cord injury with incomplete paraparesis to evaluate neural cell apoptosis after decompression. Apoptosis and cellular damage were assessed by staining with terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated deoxyuridine triphosphate nick-end labelling (TUNEL) and immunostaining for caspase-3, Bcl-2 and Bax. Methods: Experiments were conducted in male Sprague-Dawley rats (n=78) weighing 300~400 g. The spinal cord was compressed posteriorly at T10 level using a custom-made screw for 6 h, 24 h or continuously, followed by decompression by removal of the screw. The rats were sacrificed on Day 1 or 3 or in Week 1 or 4 post-decompression. The spinal cord was removed en bloc and examined at lesion site, rostral site and caudal site (7.5 mm away from the lesion). Results: The numbers of TUNEL-positive cells were significantly lower at the site of decompression on Day 1, and also at the rostral and caudal sites between Day 3 and Week 4 post-decompression, compared with the persistently compressed group. The numbers of cells between Day 1 and Week 4 were immunoreactive to caspase-3 and B-cell lymphoma-2 (Bcl-2)-associated X-protein (Bax), but not to Bcl-2, correlated with those of TUNEL-positive cells. Conclusion: Our results suggest that decompression reduces neural cell apoptosis following spinal cord injury.     

川芎嗪对大鼠脑缺血-再灌注脑内NOS变化的作用

目的 :研究川芎嗪 (TMP)对大鼠脑缺血 -再灌注皮层和海马一氧化氮合酶 (NOS)变化的作用。方法 :阻断大鼠双侧颈总动脉 15min和再灌注 2 4h建立脑缺血 -再灌注损伤模型 ,用NADPH d组化技术检测脑NOS阳性细胞数目的变化和TMP对脑缺血 再灌注过程中NOS阳性细胞数目的影响。结果 :脑缺血 再灌注 2 4h后 ,皮层和海马NOS阳性细胞数目显著增多 ,TMP(2 0mg·kg-1和 4 0mg·kg-1)缺血前 30min腹腔注射 ,可明显抑制其增多 ,与NOS拮抗剂L NAME 10mg·kg-1的作用相似。结论 :TMP能降低脑内NOS的活性 ,对脑缺血可能产生保护作用     

Albumin resuscitation protects against traumatic/hemorrhagic shock-induced lung apoptosis in rats

Objective： To determine the effects of albumin administration on lung injury and apoptosis in traumatic/hemorrhagic shock （T/HS） rats. Methods： Studies were performed on an in vivo model of spontaneously breathing rats with induced T/HS; the rats were subjected to femur fracture, ischemia for 30 min, and reperfusion for 20 min with Ringer＇s lactate solution （RS） or 5% （w/v） albumin （ALB）, and the left lower lobes of the lungs were resected. Results： Albumin administered during reperfusion markedly attenuated injury of the lung and decreased the concentration of lactic acid and the number of in situ TdT-mediated dUTP nick-end labelling （TUNEL）-positive cells. Moreover, immunohistochemistry performed 24 h after reperfusion revealed increases in the level of nuclear factor κB （NF-κB）, and phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase （MAPK） in the albumin-untreated group was down-regulated by albumin treatment when compared with the sham rats. Conclusion： Resuscitation with albumin attenuates tissue injury and inhibits T/HS-induced apoptosis in the lung via the p38 MAPK signal transduction pathway that functions to stimulate the activation of NF-κB.     

脑创伤后NF-kB的作用及其细胞凋亡的基因调控

目的：探讨核因子kB（NF-kB）在脑创伤后的作用及细胞凋亡的调控基因。方法：对近年来有关NF—kB在脑创伤后的作用及细胞凋亡的调控基因的文献进行总结。结果．NF-kB在脑创伤中的作用为双重性，脑创伤后细胞凋亡的调控基因为bcl-2基因家族和Caspase基因家族。结论：NF-kB在脑创伤中是诱导细胞死亡还是促进细胞死亡，还具有分歧，bcl-2基因族和Caspase基因家族在脑创伤中的细胞凋亡起着重要调节作用。     

大鼠急性颅脑损伤后脑肿胀及钙镁离子的变化

目的研究大鼠急性颅脑损伤后脑肿胀及钙镁离子的改变,以找出颅脑损伤后病情转化的规律,为临床治疗提供依据。方法大鼠40只随机分为4组,采用自由落体致大鼠脑挫裂伤,伤后122、44、8 h分别取材,观察脑肿胀及钙镁离子的变化。结果大鼠急性颅脑损伤后脑肿胀在24 h达到高峰,钙镁离子也有相应变化。结论急性颅脑损伤后脑肿胀的变化有一定的规律可循,产生外伤性脑肿胀的病理基础为脑血管扩张充血导致微循环障碍,救治急性颅脑损伤要重视预防微循环障碍,及时脱水,纠正缺血、缺氧。     

大鼠颅脑冷冻伤后一氧化氮的变化及其对脑水肿的影响

目的：探讨脑冷冻性损伤后一氧化氮(NO)与脑水肿的关系及其对脑水肿的影响。方法：建立大鼠脑冷冻伤脑水肿模型，测定伤后伤侧脑组织水的质量分数和颈静脉血NO量，并应用一氧化氮合酶(NOS)抑制剂进行治疗。结果：伤后伤侧颈静脉血NO浓度增加，但随着脑水肿的加重，NO浓度呈进行性下降。应用NOS抑制剂可以有效减少脑组织水的质量分数。结论：NO与创伤性脑水肿的发生和发展密切相关，NOS抑制剂也许可以用于治疗脑水肿。     

miRNA-125a 靶向调控 Bcl-2 对癫痫大鼠神经元凋亡的影响

摘要:目的 探讨 miRNA-125a 靶向调控 Bcl-2 对癫痫大鼠神经元凋亡的影响。 方法 选择清洁级 SD 雄性大鼠32 只随机分为正常对照组( A 组) 、癫痫组( B 组) 、miRNA-125a antagomir control 组( C 组) 和 miRNA-125a antagomir组( D 组) 。 qRT-PCR 检测各组大鼠脑组织 miRNA-125a 表达水平;HE 检测各组大鼠脑海马组织 CA-1 区病理形态学改变;TUNEL 法检测脑海马 CA-1 区神经元细胞凋亡数;Western blot 和 qRT-PCR 法检测各组大鼠脑组织中 Bcl-2的表达水平;荧光素酶活性检测 miRNA-125a 与 Bcl-2 的靶向关系。 结果 与 A 组相比,B 组和 C 组大鼠脑组织miRNA-125a 表达升高,差异具有统计学意义( P<0. 05) ;A 组海马细胞排列整齐,细胞形态结构及层次清晰完整,核仁明显,间质无水肿;B 组可见坏死灶,细胞排列紊乱,细胞核固缩,核仁消失,细胞间隙增宽出现水肿;TUNEL 结果显示,B 组、C 组和 D 组脑海马神经元凋亡细胞数明显高于 A 组,而大鼠脑组织 Bcl-2 mRNA 及蛋白表达降低。 D 组miRNA-125a 表达与 C 组相比降低而 Bcl-2 表达增加( P<0. 05) ,且 D 组大鼠脑组织水肿现象明显减轻,海马细胞排列紊乱现象有所改善。 荧光素酶报告基因实验结果显示,miRNA-125a 和 Bcl-2 能够靶向结合。 结论 癫痫模型大鼠脑组织 miRNA-125a 可通过调控 Bcl-2 表达,进一步导致脑海马神经元损伤及大量神经元细胞凋亡;抑制 miRNA-125a 的表达水平可改善癫痫大鼠神经元损伤。