应用PCR-RFLP法作脊灰炎病毒型内分析的研究

用PCR-RFLP法对近年来从麻痹病人分离到的26株脊灰炎病毒(PV)作了型内分析研究。16株PV₁的RFLP图式呈现多样性,毒株的图式可与Sabin1型疫苗株完全相同或不同,某些毒株亦可无电泳条带出现。7株PV₂与3株PV₃的RFLP图式则分别与疫苗株Sabin2型和3型完全相同。全面分析这些RFLP后,我们认为16株PV₁为野毒株,而7株PV₂及3株PV₃则可能是疫苗相似株。鉴于近年来广西的麻痹病例仍主要由PV₁所致。故此,加强突击普服OPV运动及作好分离毒株的型内分析已成为消灭脊灰炎的关键。     

小鼠诱导转基因传代细胞对AFP粪便标本中脊灰和其他肠道病毒的分离鉴别研究

报告４６份ＡＦＰ粪便标本用Ｌα、ＲＤ和Ｈｅｐ－２三种细胞作病毒分离，阳性率分别为２６．０９％、６０．８７％、４３．４８％。同步分离出脊灰病毒Ⅰ型３株，Ⅱ型２株，Ⅲ型４株，Ⅰ＋Ⅱ型１株，Ⅰ＋Ⅲ型１株，混合Ｐ２＋Ｅ１株。脊灰病毒总分离阳性率为２８．９５％。非脊灰肠道病毒分离阳性率分别为０％、３６．９６％、２３．９１％。从６份第１次分离结果阴性的高危病例和高度临床病例粪便标本重新分离出１株Ⅲ型脊灰病毒和３株非脊灰肠道病毒。应用Ｌα细胞不仅能作型别鉴定，而且能区别脊灰病毒和非脊灰肠道病毒混合感染     

转移至普通小麦中中的叶锈病基因Lr43染色？…

为了生产硬红冬麦胚芽原生质系ＫＳ９２ＷＧＲＣ１６，需要把小麦抗叶锈病基因从Ａｅｇｉｌｏｐｓｔａｕｓｈｉｌ中转移到普通小麦中。通过对单体生物和具端着丝点的分析，测定出染色体和Ｌｒ４３染色体＝９２ＷＧＲＣ１６与７Ｄ单体生物染色体组的生一株杂交，Ｆ２代家系接种叶锈病真菌种族ＰＢＪＬ。在混合有１Ｄ、２Ｄ、３Ｄ、４Ｄ、５Ｄ和６Ｄ和６Ｄ的单体生物杂交中，幼苗抗病性和抗病性比率不会远远偏离于３：１，而来自Ｆ２代     

鉴定与水稻光敏核不育基因pms3连锁的AFLP-RFLP标记

运用 ＡＦＬＰ技术对农垦 ５８Ｓ×１５１４的 Ｆ２代群体构建的极端集团进行了分析,在 ２５３对ＡＦＬＰ引物中,９１％具有多态性带,有２０对引物扩增到了阳性带．阳性带经克隆后用作ＲＦＬＰ探针进行极端集团分析,其中４个具有多态性带．２个（Ｆ３和Ｖ４）表现为阳性带．Ｆ２代不育群体ＲＦＬＰ分析结果显示,Ｆ３和Ｖ４两个标记与第１２染色体上的光敏核不育基因ｐｍｓ３连锁．通过极大似然法估算,Ｆ３和Ｖ４标记距光敏核不育基因ｐｍｓ３的遗传距离分别为５.８０ｃＭ和７．７５ ｃＭ．     

两种快凝AlFeX（V，W）Si合金的组织性能

采用喷射沉积坯轧制和ＲＳ／ＰＭ粉末挤压坯轧制的２种工艺制各了Ａｌ－８．５Ｆｅ－１．３Ｖ－１．７Ｓｉ和Ａｌ－８．５Ｆｅ－１．３Ｗ－１．７Ｓｉ合金的板材，并通过透射电镜，扫描电镜和力学拉伸实验研究了板材的组织性能．结果表明，综合性能ＡｌＦｅＷＳｉ合金优于ＡｌＦｅＶＳｉ合金的喷射沉积坯轧制板材．     

慢性宫颈炎的病毒病原研究和重组人α1b型干扰素的治疗作用

阐明人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）和单纯疱疹病毒２型（ＨＳＶ－２）感染与慢性宫颈炎的关系,考核重组人α１ｂ型干扰素治疗慢性宫颈炎的疗效和阻断ＨＰＶ－１６母婴传播的作用。方法：采用ＤＮＡ分子杂交技术、病毒分离技术,ＰＣＲ扩增技术检测标本。标本采自糜烂、正常宫颈,妊娠３９周的孕妇宫颈以及新生儿咽拭子。结果：通过对正常宫颈和糜烂宫颈ＨＰＶ－１６,ＨＳＶ－２和ＣＭＶ病毒检出率的比较,证明病毒感染与慢性宫颈炎高度相关;采用重组人α１ｂ型干扰素（ｒｈＩＦＮ－α１ｂ）治疗慢性宫颈炎一个疗程后,有效率达９３８％,显效率达６０％;ＨＰＶ－１６和ＨＳＶ－２的病毒检出率也相应明显下降。在干扰素治疗后,ＨＰＶ－１６的母婴传播率从８０％下降至２９４％。中药黄芪与干扰素有协同作用。结论：１）慢性宫颈炎与ＨＰＶ－１６,ＨＳＶ－２和ＣＭＶ病毒感染有关;２）ｒｈＩＦＮ－α１ｂ对治疗慢性宫颈炎有明显疗效;对阻断ＨＰＶ－１６的母婴传播有明显作用;３）中药黄芪与干扰素对治疗慢性宫颈炎有协同作用     

鸡副粘病毒病的病毒特性和基因型研究及疫病防制

用ＳＰＦ鸡胚分别从不同患病鸡群中分离到４株病毒,经病毒学鉴定,该病毒为禽副粘病毒Ｉ型。根据在疫毒力的国际判定标准测定,４株病毒均属于新城商年;人工感染７１周龄ＳＰＦ鸡均１００％发病致死;应用１株鹅副粘病毒制备的具有对禽副粘病毒Ｉ型共同的群特异性单抗各仅对鹅副粘病毒毒株、鸡副粘病毒毒株呈阳性反应,而对新城疫Ｆ４８Ｅ８,Ｌａｓｏｔａ等毒株不发生反应的特异性单克隆抗体;应用ＲＴ－ＰＣＲ技术对禽副粘病毒Ｉ     

中国南海软珊瑚Nephthea bayeri化学成分研究——一种类脱皮激素五 ?

从南海软珊瑚Ｎｅｐｈｔｈｅａｂａｙｅｒｉ中分离得到７种结晶性化合物，通过ＩＲ，ＭＳ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ和ＵＶ波谱技术以及化学方法、理化常数，推导了它们的结构．报道其中一种类脱皮激素的多羟基甾醇——２α，３β，１５，１６，１９－五羟基－Δ４，７－６－烯酮－２４－亚甲基甾醇     

部分取代苯定量结构-生物降解相关性(QSBR)研究

采用Ｃｈｅｍｓ３Ｄ中量子化学ＭＯＰＡＣ－ＡＭ１法计算了７种间苯胺类和８地苯酚的分子量高占有轨道能ＥＨＯＭＯ、分子最低空轨道能ＥＬＵＭＯ。用ＱＳＡＲ程序软件包查得分子体积Ｖｍ。结合分子连接性指数（＾３Ｘ,＾３Ｘ＾ｖ）对生物降解二级速率常数对数ｌｇＫｂ进行定量结构－生物降解相关性（ＱＳＢＲ）分析,通过回归分析,得到如下两个回归方程：ｌｇＫｂ＝－０．８３２－０．１１８Ｖｍ＋１．７４８＾３Ｘ＾ｖ,ｎ＝１５,Ｒ＾２＝０．８３２,ＳＥ＝０．５７７,Ｆ＝２９．７,ｐ＝０．０００。（１）ｌｇＫｂ＝０．１２４Ｖｍ＋１．７４９＾３Ｘ＾ｖ,ｎ＝１５,Ｒ＾２＝０．９９８,ＳＥ＝０．５５９１,Ｆ＝４１４８．９９,ｐ＝０．０００．（２）     

蓝舌病毒内蒙古分离株VP_2基因3′端序列的克隆及序列分析

内蒙古巴盟地区分离的蓝舌病毒株（ＢＴＶ－ＮＭ）经反转录ＰＣＲ，克隆、测序、进行计算机分析，证明该部分序列与呼肠孤病毒３ 型Ｌ３ 基因组片段有高度同源性，达９１％ ，与ＢＴＶ １７ＶＰ２ 基因比较，一致性为４７％     

Increased neurovirulence associated with a single nucleotide change in a noncoding region of the Sabin type 3 poliovaccine genome

Most of the small number of cases of poliomyelitis which occur in countries where Sabin's attenuated poliovirus vaccines are used are temporally associated with administration of vaccine and involve polioviruses of types 2 and 3 (ref. 1). Recent studies have provided convincing evidence that the Sabin type 2 and 3 viruses themselves may revert to a neurovirulent phenotype on passage in man. We report here that a point mutation in the 5' noncoding region of the genome of the poliovirus type 3 vaccine consistently reverts to wild type in strains isolated from cases of vaccine-associated poliomyelitis. Virus with this change is rapidly selected on passage through the human gastrointestinal tract. The change is associated with a demonstrable increase in the neurovirulence of the virus.     

拮抗烟草青枯病菌的烟草内生细菌系统多样性及趋化性分析

 从来自3个烤烟品种NC297、红大、K326的600株内生细菌中,以烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)为靶标,共筛出55株拮抗菌,其对烟草青枯病菌的抑菌圈直径在1~16 mm之间.对这55株拮抗性内生细菌的16S rRNA基因序列进行RFLP分析共产生6种带型.根据RFLP带型选取16株进行16S rRNA基因序列测定和系统发育分析.结果表明这55株拮抗性内生细菌属于Firmicutes和Proteobacteria两大类群的6个种:Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum,Bacillus methylotrophicus,Bacillus tequilensis,Brevibacillus parabrevis,Brevibacillus brevis和Pseudomonas aeruginosa.利用cheA基因检测方法和平板检测方法共筛选到3种具有趋化性的拮抗性内生细菌:Brevibacillus parabrevis,Brevibacillus brevis和Pseudomonas aeruginosa.     

基于16S rDNA序列和RFLP分析的病鳗分离菌株鉴定

结合16S rDNA基因序列和限制性片段长度多态性(RFLP)的分析方法,通过与GenBank库中已递交的细菌16S rDNA基因序列进行同源性比较,对分离自发病鳗鲡(欧洲鳗鲡,日本鳗鲡和美洲鳗鲡)的30株细菌进行初步鉴定和分类.结果表明,这些细菌可大致分为气单胞菌属(Aeromonas sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、邻单胞菌属(Plesiomonas sp.)、克雷伯氏菌属(Klebsiella sp.)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter sp.)、不动杆菌属(Acinetobacter sp.)和肠杆菌属(Enterobacter sp.)等7个菌属.分析认为,部分分离菌株可能是引起鳗鲡病害的疑似致病性菌株.     

An engineered poliovirus chimaera elicits broadly reactive HIV-1 neutralizing antibodies

The Sabin type 1 vaccine strain of poliovirus is probably the safest and most successful live-attenuated vaccine virus used in humans. Its widespread use since the early 1960s has contributed significantly to the virtual eradication of poliomyelitis in developed countries. We have reported previously the construction of an intertypic antigen chimaera of poliovirus, based on the Sabin 1 strain, and proposed that this virus could be modified to express on its surface antigenic determinants from other pathogens. We describe here the construction and characterization of a poliovirus antigen chimaera containing an epitope from the transmembrane glycoprotein (gp41) of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1). In antibody absorption experiments, the virus chimaera inhibited neutralization of HIV-1 by antipeptide monoclonal antibodies specific for the gp41 epitope and significantly reduced the group specific neutralizing activity of HIV-1-positive human sera. Rabbit antisera raised by subcutaneous injection of the polio/HIV chimaera in adjuvant was shown to be specific for HIV-1 gp41 in peptide-binding assays and by western blotting. Moreover, the antisera neutralized a wide range of American and African HIV-1 isolates and also inhibited virus-induced cell fusion. Monoclonal antibodies against the HIV-1 derived regions of the chimaera also neutralized HIV-1. These results establish the potential of using poliovirus for the presentation of foreign antigens and suggest that Sabin 1 poliovirus/HIV chimaeras could offer an approach to the development of an HIV vaccine.     

Antigen chimaeras of poliovirus as potential new vaccines

Polioviruses occur as three distinct serotypes, 1, 2 and 3, and are composed of a single-stranded positive-sense RNA genome of approximately 7,450 nucleotides enclosed in an icosahedral particle of diameter 27 nm. The three-dimensional crystallographic structure of poliovirus type 1 has been determined at 2.9 A resolution, providing a detailed knowledge of the folding and arrangement of the individual virus proteins, VP1-VP4. From this and the characterization of monoclonal antibody-resistant mutants, the amino acids contributing to antigenic sites have been identified and located on the surface of the virus particle. Here we describe the construction and characterization of a poliovirus chimaera having a defined region of type 3 inserted into type 1. This virus has composite antigenicity and the substitute site is immunogenic in small animals and primates. The ability to construct such viruses has implications for the design of improved poliovirus vaccine strains or vaccines against other picornaviruses, such as hepatitis A.     

黄河三角洲地区野大豆根瘤菌生物学特性及其遗传多样性研究

野大豆具有耐盐碱、抗寒、抗病等特点,对于研究大豆遗传基因的变迁、改善大豆品质和产量具有重要作用。为了探明黄河三角洲地区野大豆根瘤菌的生物学特性及其遗传多样性,从黄河三角洲地区的14个乡镇26个采样点采集了227株野大豆,从其根瘤中分离纯化根瘤菌,进行一系列的生理生化实验、抗逆性实验、结瘤能力测定、结瘤广谱性测定、16S rDNA序列测定和RAPD分析,共分离纯化出100 株根瘤菌,其中菌株3D-21,3D-24,3K-8,3K-23VS等对酸、碱、盐、抗生素、高温、低温均有较强耐受性,且结瘤能力也较强;菌株7K-8结瘤能力较强,K-5抗逆性较强。16S rDNA序列测定表明所获菌株分属于3个属7个种,相近菌株的RAPD分析呈现明显的多态性。结果表明黄河三角洲地区野大豆根瘤菌存在着丰富的多样性,部分菌株结瘤能力和/或抗逆能力强,该研究为挖掘、利用优良菌株资源奠定了基础。     

上海地区不同植物根际荧光假单胞菌多样性

荧光假单胞菌是一种常见的植物根际促生细菌,有开发作为生物农药的潜质．以分离自上海周边地区12种植物根际的104株荧光假单胞菌为研究对象,进行了表型分类,并采用16S—rDNARFLP和REP—PCR技术,系统地研究了荧光假单胞菌的遗传多样性．结果表明：16S—rDNARFLP酶切图谱聚类分析在85％相似性水平上,可将供试菌株划分为9群;REP—PCR指纹图谱聚类分析在76％相似性水平上,可将供试菌株划分为26群,说明上海地区的荧光假单胞菌具有丰富的遗传多样性;聚类分析结果还显示出菌株间亲缘关系与其分离地和所在植物具有相关性,表明环境条件对荧光假单胞菌的发育和遗传分化有重要影响．     

不同品种香菇交配型基因的鉴定

利用原生质法单核体亲本交配型极性标记法,成功地鉴定出香菇－栽培株（Ｓ）与２野生株 （Ｑ＆Ｈ）的 ４种孢子单核体标准交配型基因,并以具有交配型基因的香菇栽培株的 ４种孢子单核体 与香菇２野生株４种孢子单核体轮配,而鉴定出香菇２野生株的４种孢子单核体相对交配型基因, 为香菇的遗传研究提供了可靠的遗传标记．结果显示栽培株Ｓ的４种孢子单核体的交配型分别为 Ａ１Ｂ１、 Ａ２Ｂ２、 Ａ１Ｂ２与 Ａ２Ｂ１,野生株 Ｑ的 ４种孢子单核体的交配型为 Ａ３Ｂ３、 Ａ４Ｂ４、 Ａ３Ｂ４与 Ａ４Ｂ３,野生株 Ｈ４４种孢子单核体的交配型为Ａ５Ｂ５、Ａ６Ｂ６、Ａ５Ｂ６与Ａ６Ｂ５．     

不同球孢白僵菌菌株DNA的RAPD分析

采用RAPD技术分析了16个球孢白僵菌菌株的遗传分化。由160个随机引物中筛选出27个引物对各菌株进行了PCR扩增。结果表明从16个 孢白僵菌菌株中共获301个RAPD标记,其中多态性标记288个,占95．7％,表明菌株间具有较丰富的遗传多态性,聚类分析把16个球孢白僵菌菌株分为三大类型（1）Blh,,Bgd和Bpy;(3)By7,F-263,RECBb01,B12和B13;（3）B7,B11,Bxs,B6,By2,Bpc和Bzs。菌株DNA多态性与采集地之间有一定的相关性,但与寄主来源,孢子形态和对松墨天牛幼虫的毒力间未表现出明显的相关性。