生物芯片及其应用 中国科学家谈科学

生物芯片具有高通量和微型化等特点。这种高新技术将在生物学和医学基础研究、农业、疾病诊断、新药开发、食品、环保等多个领域得到广泛的发展和应用,并将从根本上改变目前生物学研究和生物技术的观念和效率。     

丙型肝炎病毒5＇NCR转基因细胞模型及在反义核酸药物筛选和评价中的应用

为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒(HCV)药物的筛选及评价,将HCV5＇NCR-C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体,通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性鉴定,获得HCV5＇NCR调控荧光素酶的稳定表达质粒pHCV-ne04,将其转染HepG2细胞,经GA18筛选,从150个克隆中获得一个高荧光素酶活性表达的细胞株HepG2.9706.该株细胞内HCV片段的DNA及mRNA检测均呈阳性,转基因拷贝数为140.利用该细胞株,通过脂质体介导,对3条针对HCV调控基因的反义寡核苷酸(ASODNs)即HCV363,HCV349,HCV279进行了活性评价,结果显示,三种ASODNs均具有特异性的剂量依赖性抑制活性,浓度在0.5μmol/L时,三者对HCV5＇NCR调控荧光素酶表达抑制率分别为61%,55%及48%.该研究提示反义寡核苷酸有可能成为治疗HCV的新途径.     

丙型肝炎病毒5′NCR转基因模型及在反义核酸物筛选和评价中的应用

为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒（HCV）药物的筛选及评价，将HCV5′NCR－C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体，通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性鉴定，获得HCV5′NCR调控荧光素酶的稳定表达质粒pHCV-neo4，将其转染HepG2xleq,x G418筛选，从150个克隆中获得一个高荧光素酶活性表达的细胞株HepG2.9706。该株细胞内HCV片段的DNA及mRNA检测均呈阳性，转基因拷贝数为140。利用该细胞株，通过脂质体介导，对3条针对HCV调控基因的反义寡核苷酸（ASODNs)即HCV363，HCV349，HCV279进行了活性评价，结果显示，三种ASODNs均具有特异性的剂量依赖性抑制活性，浓度在0．5μmol/L时，三者对HCV5′NCR调控荧光素酶表达抑制率分别为61％，55％及48％。该研究提示反义寡核苷酸有可能成为治疗HCV的新途径。     

端粒酶hEST2基因为靶的反义寡核苷酸体外抗肿瘤活性评价

根据端粒酶在肿瘤细胞中活性较高而在正常细胞中不表达的特性，针对端粒酶催化亚基hEST2mRNA的二级结构设计了12条反义寡核苷酸，以脂质体介导进行转染，MTT染色计算细胞生长抑制率，筛选出具有较强抗肿瘤活性的反义寡核苷酸hEST212，进一步对反义寡核苷酸进行了抗肿瘤特异性，抗瘤谱和抗肿瘤作用持续性分析。结果表明，反义寡核苷酸hEST212在体外细胞水平具有良好抗肿瘤活性，有望成为一种新型抗肿瘤候选药物；同时提示端粒酶催化亚基hEST2是研究肿瘤药物的潜在靶点。     

蓝舌病毒内蒙古分离株VP_2基因3′端序列的克隆及序列分析

内蒙古巴盟地区分离的蓝舌病毒株（ＢＴＶ－ＮＭ）经反转录ＰＣＲ，克隆、测序、进行计算机分析，证明该部分序列与呼肠孤病毒３ 型Ｌ３ 基因组片段有高度同源性，达９１％ ，与ＢＴＶ １７ＶＰ２ 基因比较，一致性为４７％     

蓝舌病毒内蒙古分离株VP2基因3‘端序列的克隆及序列 …

内蒙古巴盟地区分离的蓝舌病毒株（ＢＴＶ－ＮＭ）经反转录ＰＣＲ，克隆，测序，进行计算机分析，证明该部分序列与呼肠孤病毒３型Ｌ３基因组片段有高度同源性，达９１％，与ＢＴＶ１７ＶＰ２基因比较，一致性为４７％。