饲用大豆肽发酵新工艺及开发应用研究

蛋白质是维持动物正常生理功能、发挥生产性能的重要营养物质.现代肽营养理论认为：蛋白质只有一部分是以氨基酸形式吸收的,大部分是以小肽形式被动物小肠消化吸收的,甚至5～16氨基酸组成的小肽也可以完整吸收;蛋白质在消化道内的消化终产物相当部分是小肽而非游离氨基酸．为实现大豆肽的工业化生产与应用,各国科技工作者进行了大量的探索性研究,我国大豆肽的研究和开发起步较晚,但近几年研究逐渐活跃起来．     

用酶解猪血蛋白作食品添加剂对学龄前儿童营养效果的初步研究

对34例学龄前儿童在糕点中添加水解蛋白质进行试验期为三个月的营养效果试验,结果表明,在食品中添加酶解猪血蛋白(氨基酸与小肽混和物)对学龄前幼儿的生长发育、体重和血红蛋白都有较好的效应。     

氨基酸在小肠的转运

消化道内的吸收,乃是指各种食物的消化产物以及水分和盐类等物质通过上皮细胞进入血液和淋巴的过程。它提供了多细胞机体的营养,所以具有很大的生理意义。机体每天摄入的蛋白质,经胃蛋白酶和胰蛋白酶消化水解,在小肠中以氨基酸和小肽的混合形式存在,其中以小肽为主,而在门静脉血液中却以氨基酸为主,只含有少量的小肽,小肠是氨基酸吸收     

非蛋白氨基酸的应用和功能研究进展

自然界中从细菌到人类的所有蛋白质主要都是由20种氨基酸组成的,这20种氨基酸称为蛋白氨基酸,也称为基本氨基酸或标准氨基酸.非蛋白氨基酸是指除组成蛋白质的20种常见氨基酸以外的含有氨基和羧基的化合物.非蛋白氨基酸多为蛋白氨基酸的类似物或取代衍生物,如甲基化、磷酸化、羟化、糖苷化、交联等等.除此之外,还包括β、γ、δ氨基酸及D-氨基酸.非蛋白氨基酸多以游离或小肽的形式存在于生物的各种细胞或组织中.     

一种合成脱氢肽的新方法

由N端保护的氨基酸或肽与β-羟基-α-氨基酸酯在三苯基膦、三乙胺、四氯化碳的存在下直接缩合,一步就可得到C端含脱氢氨基酸的肽类.在L-苏氨酸甲酯的情况下,全部生成Z型脱氢氨基酸.其可能的反应历程是N端保护的氨基酸或肽与β-羟基-α-氨基酸酯首先缩合形成肽键,然后进一步脱水生成产物.当用同样试剂处理Boc-L-ILe-L-Ser-L-ILe-OMe时,则形成肽类噁唑啉.影响反应方向的主要因素是α—C—H键质子酸性和酰胺N—H键质子酸性的相对强弱.     

N端6-甲基辛酰基化修饰对小肽KTKKKFLKKT结构的影响

得到生物活性肽的三维结构,有助于预测和理解其功能机理．研究发现对小肽KT—KKKFLKKT的N端进行6-甲基辛酰基化修饰后,其细胞毒性增强．用nnPredict服务器预测,发现该小肽具有α螺旋二级结构序列特征．为研究此修饰造成该小肽细胞毒性增强的分子机理,用AM—BER软件对该小肽进行全原子折叠模拟,发现其最低能量结构确实形成右手α螺旋,再对该结构的N端进行6-甲基辛酰基化修饰后,以分子动力学模拟计算,发现6-甲基辛酸可通过与氨基酸侧链间的疏水作用破坏小肽最低能量结构的α螺旋,增强了该小肽疏水相互作用,这可能是此修饰造成该小肽细胞毒性增强的原因所在,这为指导实验研究其细胞毒性分子机理和进一步修饰设计奠定了基础．     

猪PSMD13基因的克隆与表达谱分析

为了研究猪PSMD13基因功能,采用SMART-RACE技术对猪PSMD13基因5′和3′端进行扩增,并对其进行序列分析和组织表达分析。结果表明,得到猪PSMD13基因全长1476bp的cDNA序列,其基因编码376个氨基酸,与人、小鼠、蛙、鲐鱼的PSMD13氨基酸序列分别有97%、94%、77%、85%的同源性,含有1个PINT保守结构域和1个类似的PCI domain结构域,无信号肽序列。组织表达分析结果表明,猪PSMD13在背最长肌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、卵巢、子宫、睾丸、胚胎和脂肪等组织均有表达。     

六品系猪SLA-2多肽结合区分子结构差异研究

为研究我国饲养的不同品系猪sLA_2抗原多肽结合区分子结构差异,设计引物,克隆了六品系猪SLA-2基因cDNA全长序列,用分子生物学软件分析其基因特征,比较各品系猪SLA-2分子结构差异,并通过同源模建显示变异住点的空间位置．结果表明,六品系猪SLA-2cDNA全长为1119bp,其中3-1097为编码区,共编码364个氨基酸,分别在第125,188,227,283位置出现半胱氨酸残基,含有2对链内二硫键．六品系猪SLA-2胞外区氨基酸差异主要集中在α1区的62-70及77-82和口2区的143-156．同源模建显示,这些变异位点均位于SLA-2多肽结合区的口螺旋结构上,推测可能与动物的抗病毒免疫特性有关．可为猪品系的改良及抗病毒免疫研究提供参考．     

猪抑胃肽/葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽(GIP)基因的克隆与组织表达分析

本研究采用RT-PCR方法,克隆长白猪(Landrace)GIP基因全长cDNA序列,并对其在家猪组织中的表达情况进行分析.结果显示:长白猪GIP(pGIP)cDNA全长435bp,编码144个氨基酸GIP的前体蛋白;该前体蛋白含有信号肽序列,经蛋白酶水解后产生GIP成熟肽.与人、小鼠GIP表达图谱类似,GIP mRNA也在长白猪小肠及肾脏中有较高水平表达.     

芋螺毒素(conotoxins)的研究进展

芋螺毒素是近年来研究得较多的一类海洋生物神经毒素,化学结构独特,是约含10～30个氨基酸残基的小肽,能特异地与神经受体结合.本文介绍有关芋螺毒素的发现,神经作用研究及分子生物学研究等方面的研究历史,及其在神经生物学和新药开发等方面的应用前景.     

大白杂生长肥育猪的营养需要量

本文是讨论大白杂一代生长肥育猪的营养需要量.作者进行过68组、376头的饲养试验.根据这些试验的结果用回归分析的方法,导出三个非线性回归方程,每个回归方程表示日增重与消化能、可消化粗蛋白和日粮粗纤维含量的关系.并从各个分量方程分别计算出小猪、中猪和大猪三个阶段的营养需要量的最佳值,提出大白杂一代生长肥育猪的营养需要量,供生产实践和验证参考.     

鹿血抗氧化活性肽分子量测定及其氨基酸组成分析

分离提纯了鹿血酶解产物中的抗氧化活性肽,并用高效液相色谱(HPLC)体积排阻法(SEC)测定分子量,分析其氨基酸组成.经SephadexG-25和DEAE-52柱层析纯化,得到了带有较弱负电荷的抗氧化活性肽.HPLC分析结果表明,该抗氧化活性肽为低分子量肽类物质,且是以相对分子量为876,463,146Da为主的小肽混合物.氨基酸组成分析表明,该肽所含17种氨基酸中以亮氨酸、赖氨酸和丙氨酸的质量分数较高,分别为17.2%、12.3%和12.1%,人体必需氨基酸(缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、赖氨酸)的含量为52.7%.     

超滤分离对马氏珍珠贝肉蛋白酶解液特性的影响

研究了马氏珍珠贝肉蛋白酶解液在超滤过程中膜通量的变化及超滤前后感官评价、肽分子量分布以及氨基酸的变化,对超滤膜的选择性及分离效果进行了评价和分析.实验结果表明,马氏珍珠贝肉蛋白酶解液在超滤过程中,随着超滤时间的延长,膜通量不断减小,透过液的鲜味明显提高,腥味和苦味基本消失,透过液中含有分子量大于截留分子量（5000 Da）的多肽,超滤膜实际有效截留分子量约为7000 Da~8000 Da,分子量小于4500 Da左右的多肽在透过液中得到有效富集.超滤处理后,同一氨基酸在总氨基酸和游离氨基酸中含量的变化均不一致,透过液肽态氨基酸中鲜味氨基酸占总氨基酸比例高于原酶解液,而苦味氨基酸和疏水性氨基酸占总氨基酸的比例均低于原酶解液.     

芦荟添加剂对猪育肥性能和肉质的影响

芦荟作为生长肥猪的饲料添加剂,以不同的浓度添加于猪饲料中喂养生长肥猪,测定其平均日增重(ADG)和全期的增重/料耗,对猪肉品质和猪肌肉营养成分氨基酸的分析等。结果表明:芦荟饲料添加剂能显著增加生长肥猪的重量,减少料重比;用芦荟添加剂喂养的生长肥猪的猪肉在脂肪率、失水率和贮存损失率与对照组相比显著降低,在熟肉率、猪背最长肌的磷酸肌酸激酶(CPK)和猪背最长肌的磷酸葡萄糖异构酶(GPI)的值与对照组相比显著升高;在氨基酸的总量、必需氨基酸的量和鲜味氨基酸的量都比对照组高。因此增加了猪肌肉的营养,改善猪肌肉的品质。     

低分子量促肝细胞生长素的提取及活性分析

采用膜过滤结合层析法从猪胎肝中提取纯化低分子量促肝细胞生长素,并采用MTT法,测定促肝细胞生长素对人肝癌细胞Hp G2的增殖影响,结果表明,8 k Da小肽在1.5和15μg/m L时可有效促进Hp G2的增殖,当浓度达到150μg/m L时,可抑制Hp G2的生长,该研究为肝病营养功能组件提供理论与技术基础,也为促细胞生长素的临床应用提供理论依据.     

利用转基因毕赤酵母高表达小分子药用多肽的研究

天然小肽Gsp有明显的降血糖功效,由59个氨基酸残基组成.其编码基因由本实验室设计、合成,并重组构建成表达质粒pPIC9-Gsp. 经电穿孔将该质粒转化为毕赤酵母GS115(His4- mut+),挑选His+ muts型菌株进行重组蛋白胞外表达研究.表达蛋白经Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分析确定了相对分子质量的正确性,其氨基酸测序显示与天然多肽序列一致,并经紫外扫描分析确定了表达量为344mg/L左右.     

家猪信号转导及转录激活因子基因3、5a及5b的克隆、剪切变体鉴定及组织表达图谱分析

本研究以家猪为材料,克隆了家猪STAT3、STAT5a、STAT5b基因的cDNA全长,序列分析显示:家猪STAT3基因cDNA编码770个氨基酸的蛋白,与人、牛、大鼠、小鼠STAT3氨基酸序列一致性高达99%;STAT5a基因cDNA编码799个氨基酸的蛋白,与人、牛、大鼠、小鼠氨基酸序列一致性分别为分别为96%,97%,95%,和95%;STAT5b基因cDNA编码787个氨基酸的蛋白,与人、牛、大鼠、小鼠氨基酸序列一致性高达98%.同时,还鉴定到STAT3的一种新剪接变体以及STAT5a的三种剪接变体.采用RT-PCR方法,我们进一步检测了这些基因mRNA在成年家猪各组织中的表达情况.STAT3在除了心脏和肌肉以外的其他被检测组织中均有较高的表达水平;STAT5a在肝脏、肾脏、脾脏、肺和卵巢中有较高的表达水平;STAT5b在所有被检测的组织中均有表达.     

新N3S型配位结构的小肽分子合成及其合成方法研究

通过5步反应设计合成了5个新N3S型配位原子的小肽或类肽化合物.探讨了多肽的合成方法,改进了巯基的保护策略,提出了新颖的活泼酯与氨基酸的反应条件,与文献值相比反应收率提高了35%. 5种多肽配体的结构经过IR,1HNMR,13CNMR,MS或元素分析的确证.     

植物叶蛋白的研究

随着世界人口的剧增和人们生活水平的提高,人类对优质蛋白质的需求越来越大,加速新蛋白质资源的开发势在必行.植物叶蛋白因具有来源广泛、营养丰富、不含动物性胆固醇等特点而备受关注.叶蛋白酶解技术的研究可改善植物叶蛋白青草味重、溶解性差等功能上的不足. 综述了近年来植物叶蛋白的制备方法,叶蛋白及叶蛋白肽的营养特性,并阐述了叶蛋白肽的研究展望,以促进国内叶蛋白及叶蛋白肽的研究与开发.     

富硒大豆低聚肽口服液的制备及其主要成分分析

富硒大豆蛋白经过酶解、超滤、调配、杀菌等工艺,制备成富硒大豆低聚肽口服液,分析了产品中的硒含量、大豆低聚肽含量及氨基酸组成,其中硒含量2.45 mg/100 ml,大豆低聚肽含量(分子量1000 D以下)达到638.25 mg/100 ml,含有Se-Cys在内的19种氨基酸,研究结果为富硒大豆低聚肽产品的质量标准制定提供了一定的理论依据.