双酚A对SPF雄性SD大鼠生殖器官的病理损伤作用及其对Bcl-2和Bax表达的影响

20只22日龄SPF雄性SD大鼠,随机分为对照组和试验组(双酚A染毒组),每组10只.试验组给按5 mg/kg体重双酚A(BPA)灌胃,对照组按等体积植物油灌胃,1次/d.灌胃28 d后,称量大鼠体重;无痛处死后剖检,取睾丸,称量睾丸湿重并计算睾丸系数;采用石蜡切片技术,观察睾丸、附睾的组织病理学变化;采用免疫组织化学方法检测睾丸和附睾中Bcl-2及Bax蛋白表达量的变化.结果显示:BPA染毒组睾丸重量和睾丸系数明显低于对照组(P＜0.01);组织病理学观察可见,BPA染毒组睾丸曲细精管内生精细胞和支持细胞明显变性坏死,附睾中精细胞退变、液化.免疫组织化学观察发现BPA染毒组睾丸和附睾中Bax蛋白表达量明显高于对照组(P＜0.05),而Bcl-2蛋白表达量却明显低于对照组(P＜0.05),Bcl-2/Bax也显著低于对照组(P＜0.01).上述结果表明BPA可引起SPF雄性sD大鼠生殖器官睾丸和附睾的严重的不可逆损伤,造成损伤的机制一方面是直接引起生精细胞和精细胞的坏死液化,另一方面还可通过促进Bax蛋白的表达,同时抑制Bcl-2蛋白的表达以致引起生殖细胞的大量凋亡,结果导致睾丸和附睾结构的严重损伤.     

棕色田鼠睾丸和附睾胚后发育中的雌二醇表达

应用免疫组织化学方法研究了产后1日龄、10日龄、25日龄、45日龄及60日龄(成体)5个发育阶段的棕色田鼠(Microtus mandarinus)睾丸和附睾中雌二醇(estradiol,E2)的表达.结果表明:1日龄,睾丸生殖母细胞有E2阳性表达.10日龄,生殖母细胞E2表达减弱(P<0.05).25日龄,E2表达主要见于精子细胞.45日龄,精母细胞和精子细胞中有E2表达.60日龄,精原细胞、精母细胞、精子细胞及精子中均有E2表达,精母细胞和精子细胞表达较强,精原细胞表达较弱.在胚后发育过程中,1日龄和10日龄间质区细胞的E2表达最强,25日龄和45日龄E2表达减弱,60日龄E2表达最弱(P<0.05).1日龄至60日龄附睾上皮细胞和连接组织均有E2表达,60日龄附睾管内有大量精子,且有明显的E2表达.这些结果说明,棕色田鼠从出生到性成熟过程中,生殖细胞和间质细胞有E2生成.在精子发生的各阶段,雌激素通过其受体可能对生精细胞的分化和增殖有直接调控作用,对间质细胞的发育也存在着调节作用.同时,附睾的发育和精子的成熟也受到雌激素的调节.     

RT-PCR法检测大鼠组织中GLUT8基因表达特异性

采用半定量RT_PCR技术检测青春前期和成年大鼠的主要组织中GLUT8基因mRNA表达水平.实验结果显示,葡萄糖转运蛋白GLUT8基因在成年和青春前期大鼠的睾丸组织中都有高度表达,在心脏和肾脏组织中有少量表达,在肝、脾等组织中的表达是微量的;在成年大鼠睾丸组织中,Leydig细胞、睾丸生精细胞以及附睾的精子细胞中GLUT8基因都有大量的表达,其中以在Leydig细胞中的表达最丰富,而且GLUT8基因在睾丸生精细胞中的表达水平高于附睾的精子细胞.结果说明GLUT8蛋白主要分布在大鼠睾丸组织中,并且主要在Leydig细胞和精子细胞中参与葡萄糖转运和能量代谢与供应.     

类固醇激素受体在扬子鳄睾丸表达的免疫细胞化学研究

用免疫细胞化学方法对雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR) 在扬子鳄睾丸中进行定位研究.结果表明,三种类固醇激素受体在扬子鳄睾丸中都有分布:雄激素受体在睾丸的肌样细胞和支持细胞中呈阳性反应,雌激素受体在睾丸的间质细胞中呈 阳性反应,孕激素受体在睾丸的生精细胞中呈阳性反应.推测结果表明,雄激素受体在扬子 鳄精子发生过程有重要作用;雌激素受体可能在扬子鳄睾丸发育过程中影响睾丸间质细胞雄性激素的分泌,进而调节生精过程和精子发育成熟,孕激素受体可能通过转换成AR和ER来对精子发生进行调节.这些结果为证明性类固醇激素参与调节扬子鳄性腺生殖内分泌调控提供了重要的形态学新证据.     

人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤细胞B16的增殖抑制的研究及对Bcl-2/Bax表达的影响

摘 要 目的：研究人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤细胞的增殖抑制作用及对Bcl-2/Bax表达的的影响。方法：1.MTT法测定人参水溶性总蛋白对黑色素瘤B16细胞株的增殖抑制率。2. RT-PCR（Real-time PCR）法检测Bcl-2、Bax基因的mRNA表达情况。3.Western blot测定凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果：1.人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞株有明显的增殖抑制作用,其抑制率随着加药浓度的增加而升高,并与加药浓度呈现一定的量效关系。2.随着人参水溶性总蛋白浓度的增高（0,100,500,1000ug/mL）,RT-PCR检测的Bcl-2 mRNA相对表达量逐渐降低,Bax mRNA相对表达量逐渐升高,当加药浓度为1000ug/ml时,Bcl-2的相对表达量最低,为0.20±0.05,Bax的相对表达量最高,为16.83±0.07;与对照组相比,Bcl-2和Bax基因的相对表达量差异均有统计学意义（P＜0.05）。3.经Western blot测定,各组Bcl-2蛋白的表达均低于对照组,各组Bax蛋白表达均高于对照组,且随着加药浓度的增加,Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,Bax蛋白表达量逐渐升高。结论：人参水溶性总蛋白可以抑制小鼠黑色素瘤B16细胞株增殖,其分子机制可能与调控Bcl-2/Bax凋亡蛋白的表达有关。     

CREBBP在小鼠睾丸发育过程中表达模式的研究

睾丸是雄性动物最为重要的生殖器官,主要由曲细精管和间质构成。雄性哺乳动物持续的精子发生依赖于精原干细胞。精原干细胞通过有丝分裂自我更新,并在一些因子的诱导下启动分化进一步发育为精母细胞。研究睾丸中各细胞基因的表达调控对男性不育和睾丸生殖细胞肿瘤的治疗具有十分重要的意义。本研究利用RT-PCR、免疫组织化学及免疫荧光双染的方法主要研究了CREBBP在小鼠睾丸中的表达模式,结果显示CREBBP主要在精原细胞中表达,并在增殖状态的精原细胞中有表达,但在分化后启动了减数分裂的细胞中未检测到阳性信号。因此我们推测CREBBP可能参与了精原细胞的增殖,为后期精原细胞自我更新机制的研究提供理论基础。     

Apelin-13 侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的 影响及机制研究

摘要: 目的 研究 Apelin-13 侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法 侧脑室埋管后, 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,脑缺血 2 h 后侧脑室注射给药。再灌注 24 h 后进行 Zea-Longa 神经功 能评分;TTC 染色法测定大鼠脑梗死面积;试剂盒测定大鼠脑组织内诱导型一氧化氮合酶( inducible nitric oxide synthase,iNOS)和谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase,GSH-PX) 的活性;Western blot 法测大鼠脑组织 Bcl-2、Bax 和 Caspase-3 三种蛋白的表达水平。结果 Apelin-13(1. 0 μg·kg － 1 )侧脑室给药能改善大脑的神经功能, 减少脑缺血面积,降低 iNOS 活性,增加 GSH-PX 活性,增加 Bcl-2 的表达,减少 Bax 和 Caspase-3 的表达。结论 Apelin-13 对缺血再灌注脑组织保护的可能机制包括降低 NO 水平,加强自由基清除,以及调节凋亡相关蛋白表达。     

铅对小鼠睾丸生精细胞凋亡及Caspase-3,Bcl-2和Bax基因表达的影响

为了研究铅致小鼠睾丸生精细胞凋亡及其对Caspase-3,Bax和Bcl -2基因表达的影响.25只雄性小鼠随机分成5组:0h对照组、12h染铅组、24h染铅组、36h染铅组和48h染铅组,每组5只,实验组按照100mg/kg的剂量腹腔注射醋酸铅溶液,5组小鼠分别于0h、12h、24h、36h、48h后脊柱拉断处死,取其睾丸组织,用苏木精-伊红染色及免疫组化技术检测睾丸组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白Caspase -3,Bcl -2和Bax的表达.结果显示:细胞凋亡相关基因Caspase -3,Bcl -2和Bax的表达较对照组差异显著,Caspase -3和Bax在染铅毒后表达量一直上升,Bcl -2的表达量一直下降,差异性随染铅时间的不同而有变化.铅负荷至一定程度时可致小鼠睾丸细胞凋亡,且呈一定量效关系(P＜0.01),这种作用可能与Bcl -2基因低表达和Caspase-3与Bax基因高表达有关.     

豹猫肺的组织结构观察及AQP-1、SP-A和EGF在肺中的表达

利用切片方法观察了豹猫(Prionailurus bengalensis)肺的组织结构,应用免疫组织化学方法检测了水通道蛋白-1(AQP-1)、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)和表皮生长因子(EGF)在肺中的表达。结果显示,豹猫和大多数哺乳类肺的组织结构一样,包括导气部(支气管、细支气管和终末细支气管)和呼吸部(呼吸性细支气管、肺泡管、肺泡囊和肺泡)。支气管、细支气管管壁较厚。肺泡壁的细胞结构清楚,肺泡直径约为67.52±18.63μm,肺泡隔厚度约为7.783±0.657μm。AQP-1、SP-A和EGF在细支气管、呼吸性细支气管和肺泡管等的上皮细胞中呈免疫反应阳性,三者的表达强度有差异。结果表明,AQP-1、SP-A和EGF可能发挥不同的功能,它们的协同表达可能与肺内液体转运和肺内水平衡、防御疾病及维持肺的正常生理功能有关。     

一氧化氮参与附睾上皮细胞感染后的宿主防御

 以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus感染附睾上皮细胞的体外感染模型,分别采用RT-PCR和western blot等 方法研究一氧化氮（NO）在附睾上皮细胞宿主防御中的作用。结果表明附睾上皮感染后上调iNOS RNA和蛋白水平的表达,并产生 大量的NO,采用iNOS的抑制剂L NMMA和AGE预处理后,NO水平显著降低,与空白处理组相比,抑制剂处理组的S aureus数量显著增加,这表明NO参与了附睾上皮细胞的宿主防御过程,在附睾上皮细胞的宿主防御中具有重要的作用。     

大鲵雄性生殖系统的组织学和超微结构研究

运用电镜和光镜研究了大鲵雄性生殖系统结构。研究结果表明：大鲵雄性生殖系统由精巢、输精管、输出小管、泄殖腔和泄殖腔孔组成。精巢的基本结构单位为精细管。输精管管壁由粘膜、肌层和浆膜三层组成。输出小管连接精巢和输精管,管壁结构和输精管相似。     

王锦蛇尿殖系统的组织学研究

对王锦蛇（Ｆｌａｐｈｅｃａｒｉｎａｔａ）尿殖系统的各个器官进行组织学研究的结果表明：其肾脏主要由肾单位和集合管构成，输尿管分粘膜层、肌层和外膜。卵巢外被生殖上皮，内为结缔组织构成。输卵管在形态结构上有前、中、后段的差异，睾丸外被结缔组织膜，内为曲细精管，小管内含有不同发育阶段的生殖细胞。副睾被睾丸系膜与睾丸包裹在一起，内含副睾管，输精管分粘膜层、肌层和外膜，交接囊各段的组织结构不同，远端有类似于哺乳类阴茎的海绵体和血窦，体现了爬行类与哺乳类有渊源关系。     

三疣梭子蟹雄性生殖系统的组织学研究

从组织学、组织化学两个方面研究了三疣梭子蟹的雄性生殖系统.其精巢是由无数的生殖小管盘绕成的.小管壁由位于基膜上的大部分生精上皮和少量管壁上皮构成.生精上皮不断向管腔中增殖,产生了不同的生殖带.生殖小管间充填着结缔组织,内有血管和神经等分布.前、中、后输精管壁组织结构相似,均由位于基膜上的单层柱状上皮和其外侧的环形横纹肌构成,上皮细胞具分泌功能.射精管壁亦由单层柱状上皮及内纵、外环两层横纹肌组成.精巢的发育有季节性的变化.     

Abnormal sexual development in transgenic mice chronically expressing müllerian inhibiting substance

Müllerian inhibiting substance (MIS), also known as anti-Müllerian hormone, is a glycoprotein normally secreted by the Sertoli cells of the fetal and adult testis and by granulosa cells of the postnatal ovary. The production of MIS in the male fetus brings about the regression of the Müllerian ducts, the anlagen of the uterus, oviducts, and upper vagina. In addition, purified MIS induces the formation of seminiferous cord-like structures in fetal rat ovaries cultured in vitro, suggesting that MIS may influence testicular differentiation. We have produced transgenic mice chronically expressing human MIS under the control of the mouse metallothionein-1 promoter to investigate its role during sexual development. In females, chronic expression led to the inhibition of Müllerian duct differentiation, resulting in a blind vagina and no uterus or oviducts. At birth the ovaries had fewer germ cells than normal; during the next two weeks germ cells were lost and the somatic cells became organized into structures resembling seminiferous tubules. Apparently, these structures degenerate as they are undetectable in adult females. The majority of transgenic males developed normally. But in two lines with the highest levels of MIS expression, some males showed feminization of the external genitalia, impairment of Wolffian duct development, and undescended testes. These results suggest that MIS has several distinct roles in mammalian sexual development.     

锯齿米虾雄性生殖系统的组织学研究

锯齿米虾雄性生殖系统由精巢和输精管组成。精巢内分隔成许多生精小管,生发区位于生精小管的一侧。生殖细胞的发育是非同步的。根据外形和结构特征,整个输精管可划分成四个部分：近端输精管、中部输精管、远端输精管和末端输精管。     

粗糙沼虾雄性生殖系统的组织学研究

粗糙沼虾雄性生殖系统由精巢和输精管组成，精巢内分隔成许多生精小管。生发区位于生精小管的一侧，生殖细胞的发育是非同步的。根据其外形和结构特征，整个输精管可分成四个部分：近端输精管、中部输精管、远端输精管及未端输精管。     

TDI在小鼠睾丸及附睾中的代谢

为阐明TDI在小鼠睾丸及附睾中的代谢过程,对TDI进行体外代谢研究.应用HPLC测定TDI在小鼠睾丸及附睾中的线性范围、回收率及代谢常数.TDI在小鼠睾丸及附睾中的代谢均附合一级动力学方程,平均回收率大于96%.TDI在小鼠睾丸及附睾中代谢为有毒性的产物,为TDI的生殖毒性提供了依据.     

小鼠睾丸发育全过程的组织学观察

为系统观察小鼠睾丸组织发育过程,将生后1～57d处于不同发育时期的17组昆明种正常小鼠睾丸组织制备石蜡切片、进行H.E染色分析。结果表明:小鼠生后初期睾丸曲细精管中只有支持细胞和原始生精细胞;至生后8d时出现B型精原细胞;15d时出现初级精母细胞;23d时出现次级精母细胞及少量圆形精子细胞,此后圆形精子细胞逐渐增多;30d时圆形精子细胞发生变态;36d时大量精子开始稳定出现于曲细精管管腔中,并延续至此后各期。这意味着小鼠生精细胞在出生后经过一个相对连续的发育分化过程,至生后约36d发育成熟。这为细化小鼠睾丸组织发育和精子发生过程提供了详细资料。     

秀丽白虾繁殖生物学研究Ⅰ.雄性生殖系统的结构与发育

利用组织学方法对秀丽白虾（ Ｅｘｏｐａｌａｅｍ ｏｎ ｍ ｏｄｅｓｔｕｓ） 雄性生殖系统的结构及发育进行研究,结果表明：秀丽白虾雄性生殖系统由精巢、输精管和雄性生殖孔组成．精巢由许多生精小管组成,生发区位于小管一侧,不同区段的生精小管内精子发生不同步．精巢的发育有季节性：１２ 月～次年２月为精原细胞增殖期,３月～４ 月为精母细胞形成期,５月～８月为精子形成期,９月～１１月精巢退化,越年虾死亡．输精管可分为前、中、后、末四部分,各部管壁上皮构成有所不同,繁殖季节后,上皮细胞分泌活动明显减弱。     

塔形马蹄螺雄性生殖系统的组织学研究

塔形马蹄螺为雌雄异体,其雄性生殖系统主要由精巢和输精管组成,没有交接器,也没有其他的附属腺体．精巢由许多精小管组成;生精小管内有处于不同发育时期的精原细胞,初级精母细胞,次级精母细胞,精子细胞和精子;输精管壁的上皮细胞游离面具有纤毛;精巢的发育具有季节性．