里氏木霉液体发酵选择性合成果胶酶

在摇瓶液体发酵的条件下研究了碳源、氮源、酵母汁和营养盐等因素对里氏木霉选择性合成果胶酶的影响规律,并测定了酶学性质。结果表明:从经济角度考虑宜选用脱汁橘皮粉制备果胶酶;在Mandels营养盐中添加1.0 g/L蛋白胨适合于里氏木霉产果胶酶;以25 g/L脱汁橘皮粉液体发酵48 h,果胶酶活力最高值达到32.6μmol/(min.mL),其中纤维素酶和木聚糖酶的活力被分别控制在0.18、0.63μmol/(min.mL)。该果胶酶的最适pH为6.0,最适温度为50℃,以16μmol/(min.g)的果胶酶振荡水解10 g/L商品果胶粉50 h,酶解得率达80.3%。高效液相离子色谱的分析结果显示果胶酶的主要水解产物为单体半乳糖醛酸,含量达总水解产物的82.5%以上。     

产原果胶酶菌株X4的鉴定及其培养基的优化

采用分子生物学的方法对前期实验中获得的一株产原果胶酶菌株X4进行了鉴定. 为了提高菌株X4所产的原果胶酶量, 采用响应面法优化了菌株X4的培养基组分. 结果显示, 菌株X4为Bacillus polyfermenticus, 其主要生长影响因子为淀粉、酵母提取物、胰蛋白胨. 在本实验条件下获得的最优培养基配方为淀粉3.45 g/L, 酵母提取物3.29 g/L, 胰蛋白胨5.68 g/L, 所产原果胶酶的酶活最高为51.35 U/mL, 是优化前的2.74倍.     

碱性果胶酶生产菌株的产酶条件优化

对自行筛选的碱性果胶酶生产菌培养条件进行了优化.考查了碳源、氮源浓度和接种量对发酵产酶的影响.经单因素实验和正交试验研究,该菌株最佳产酶条件组合为:果胶添加量0.3％、NaNO3添加量0.6％、接种量6％.在此条件下,碱性果胶酶酶活力达到6 079 U/mL.     

果胶酶发酵液后处理条件

对黑曲霉变异株JB513产果胶酶发酵液后处理的条件做了探索.结果表明,乙醇沉淀法适于果胶酶的沉淀,最适条件为pH5.0,乙醇含量为65％.得到的果胶酶干粉的活力为700μmol·min~(-1)/g,总活力回收率达67.6％;苯甲酸钠及甘油对液体果胶酶有良好的稳定作用.     

产果胶酶菌株的筛选鉴定及其产酶条件的研究

为筛选果胶高效降解菌株,结合HC比值(透明圈H与菌落直径C的比值)和果胶酶活力测定,从桔子园土壤和腐烂的水果等处筛选得到1株产果胶酶活力较强的菌株M3,结合菌株形态特征观察和ITS rDNA基因序列分析,确定该菌株为聚多曲霉(Aspergillus sydowii).经发酵产酶试验可知,该菌株的最适发酵产酶条件为培养温度30℃,初始pH4.5,接种量(体积分数)7%,培养时间4 d.在该条件下发酵,果胶酶活力可达42.01 U.mL-1.     

褐藻胶裂解酶发酵工艺优化及其中试放大

对产微球茎菌（Microbulbifer sp.）ALW1发酵产褐藻胶裂解酶5 L罐发酵工艺进行优化,建立褐藻胶裂解酶的高产发酵工艺。结果表明:海藻酸钠质量浓度为1 g/L时效果最好,浓度减半或加倍都会使酶活力下降;25 ℃比20 ℃更利于产酶;pH值控制在7.5时比自然条件下发酵产酶高峰提前,产酶量变化不大;在此基础上,对罐上工艺进行中试放大,20 L发酵罐酶活力最高为57.0 U/mL,200 L罐酶活力最高为43.5 U/mL,500 L罐酶活力最高为38.3 U/mL,分别是小试水平的39.6%、30.2%、26.5%。     

几种效应物对黑曲霉果胶酶活力的影响

研究了几种效应物对黑曲霉果胶酶活力的影响。结果表明：变性剂脲与SDS对果胶酶活力的抑制作用呈现出浓度效应，0．5mmol／L SDS能使酶活力下降95．9％，5mol／L的脲能使果胶酶活力下降95．6％；三种伯醇和丙酮对果胶酶活力具有抑制作用，15％的甲醇、乙醇、正丙醇和丙酮可分别使果胶酶活力下降18．8％、25．5％、36．1％和84．4％；而乙二醇和丙三醇对酶活力的影响表现为激活效应，15％的乙二醇和丙三醇可分别使酶活性提高22．9％和6．9％；Cu^2＋和Fe^3＋对果胶酶活力的抑制作用呈浓度梯度效应，EDTA对酶活力没有影响，说明果胶酶为非金属酶类。     

澄清型欧李原汁的研制

以"农大4号"欧李原汁为材料,从10种商业果胶酶中筛选出对欧李原汁酶解效果最好的D酶和J酶,并对筛选出的果胶酶最佳反应条件进行优化,确定了D酶的最佳酶解条件为添加10 m L/L的果胶酶D在40℃下反应3 h,J酶的最佳酶解条件为添加14 m L/L的果胶酶J在40℃下反应2 h。将果胶酶酶解过的欧李果汁添加壳聚糖进行澄清试验,筛选出了壳聚糖的最佳反应条件为添加8 m L/L的壳聚糖在40℃下反应40 min。最后将澄清的欧李原汁进行调配,经品评比较,获得的最佳欧李原汁调配方案为不添加Ca CO3,添加9%白糖、3%葡萄糖,调节p H值至3.8。     

降解胆固醇的假单胞菌DGC-2的发酵培养基和培养条件

从动物粪便样品中分离出一株胆固醇氧化酶活力较高的DGC-2菌株,经鉴定为假单胞菌.利用单因子实验和正交试验对DGC-2菌株产胆固醇氧化酶摇瓶发酵的培养基及培养条件进行优化.其产酶的最适培养基为:蔗糖5 g/L,酵母粉3 g/L,牛肉膏1 g/L,吐温-80 1 g/L,胆固醇1 g/L,NH4NO31 g/L,KH2PO40.25 g/L,MgSO4.7H2O 0.25 g/L,FeSO40.001 g/L;最适培养条件为:初始pH6.5,接种量8.0%(v/v),32℃培养50h.在最适培养基及最适培养条件下,胆固醇氧化酶的活力可达到712 U/L.     

新疆罗布泊周边胀果甘草内生芽孢杆菌BLG-542产碱性纤维素酶最佳条件的研究

文章以罗布泊胀果甘草中分离出的78个菌株中初步筛选出7株产碱性纤维素酶的菌株为研究对象,进行产碱性纤维素酶最佳优化条件的研究.碱性的胀果甘草内生芽孢杆菌菌株接种于CMC-Na为碳源,复合蛋白胨为氮源的培养基中,分析研究菌株产碱性纤维素酶的最佳条件优化.通过从78株本实验室于2006年保藏的罗布泊胀果甘草内生菌中筛选出能产生胞外碱性纤维素酶的7株菌,其中酶活力最高的菌株为BLG-542.本研究主要以酶活力最高的菌株BLG-542为出发菌株进行研究.经过对产酶条件优化,获得了胀果甘草内生菌产碱性纤维素酶最佳配方培养基:D-木糖10g/L,复合蛋白胨10g/L,可溶性淀粉10g/L,酵母粉5g/L,K2 HPO4 1g/L,MgSO4 0.2g/L,NaCl 20g/L,Na2CO3 10g/L;实验产酶最佳接种量为6％,最佳培养温度为37℃,最佳培养时间为48h,产酶最佳PH为9.0;菌种生长最佳PH为7.6,经过优化产酶条件纤维素酶活力从优化前的3.8U/mL提高到6.26 U/mL,是优化之前的1.8倍;该研究表明特殊生态环境的植物内生菌与次生代谢产物、活性物质、酶类有密切的关系,环境除对内生菌酶的产生极其活性影响外,还影响着内生菌的次生代谢.该地区植物内生菌均有潜在的应用价值.     

黑曲霉As 3.3883菌种的诱变及其发酵条件探索

本文报导了黑曲霉As 3.3883经诱变可得一高产果胶酶的变异株JB513.该变异株经液体发酵制取果胶酶的最适条件是:起始pH 4.0,接种量2×10~4个/mL,通气量为培养基占摇瓶体积的1/5,发酵温度为30℃,发酵时间84h.其时,发酵液的果胶酶活力达11.9μmol·min~(-1)/mL(小试250mL),及12.0μmol·min~(-1)/mL(中试500L).同时发现该发酵液具有纤维素酶的活性.     

桐粕降解菌DBTM6培养条件及降解酶活性的研究

采用单因素试验法对桐粕降解菌DBTM6菌发酵的主要影响因素碳源、氮源、温度、转速、初始pH值等进行了研究,通过正交试验对其发酵培养基在摇瓶阶段进行了优化,并在优化后的条件下测定了该菌的生长曲线及其产生的蛋白酶、果胶酶和纤维素酶的活性.结果表明:该菌株最适培养基各成分质量分数为:玉米粉2.0%,蛋白胨0.5%,NaCl 0.5%,最适条件:温度为40℃,pH为6.0,转速为200 r/min.在最适培养条件下测定了DBTM6菌的纤维素酶活力为3.5717 U/mL,果胶酶活力为1.1415 U/mL,蛋白酶活力为36.358 3 U/mL,比活力分别为13.8545U/mg,4.4279 U/mg,141.0331 U/mg.     

果胶酶和壳聚糖对荔枝果汁澄清效果的比较

研究了果胶酶和壳聚糖对荔枝果汁的澄清作用,并通过正交试验确定了各自的最佳工艺条件,即果胶酶法:果胶酶用量为100mg/L,pH为3,温度为40℃,澄清时间为3h;壳聚糖法:壳聚糖用量0.6g/L,pH为3,温度为40℃,澄清时间为3h。从澄清效果和贮存稳定性看,两种方法都能很好地澄清荔枝果汁;但综合成本等因素来看,壳聚糖法明显优于果胶酶法。     

金属离子对尖孢镰刀菌发酵液中果胶酶活性的影响

采用发酵产酶法脱脐橙囊衣过程中,为提高酶活在培养基中添加不同金属离子,接种尖孢镰刀菌经摇瓶发酵后,测定发酵液中果胶酶系三个组分酶(聚半乳糖醛酸酶PG、果胶酸裂解酶PL、果胶酯酶PE)酶活性,探讨不同金属离子种类、添加量对果胶酶活性的影响.实验结果表明:浓度为0.06%Mg~(2+)、0.04%Fe~(2+)提高PG酶活力达205.62 U/m L、297.33 U/m L,分别比对照组提高1.07倍、1.45倍;Fe~(2+)浓度为0.08%时,PL酶活力达到283.31 U/m L,是对照组的2.83倍,Fe~(2+)对PL酶活力起促进作用;Fe~(2+)、Zn~(2+)对PE酶活力的影响有显著的促进作用,浓度为0.06%时达到最大值255.67 U/m L、200.68 U/m L,是对照组的2.40倍和1.66倍.本实验结果对优化橙汁胞生产工艺,实现安全高效低成本去除柑橘囊衣提供参考.     

海洋细菌THN1发酵产右旋糖酐酶的条件优化及酶学性质研究

为提高海洋细菌THN1产右旋糖酐酶的能力，本研究利用单因素试验和响应面试验对菌株THN1的发酵条件进行优化，并探究菌株THN1右旋糖酐酶的酶学性质。优化结果表明，菌株THN1的最佳产酶条件为麸皮5 g/L、胰蛋白胨20 g/L、NaCl 10 g/L、右旋糖酐T20 5 g/L，陈海水配置，pH值为8.2，30℃培养24 h。在此条件下，菌株THN1的发酵液酶活力达到3.71 U/mL，是优化前（初始酶活力为0.12 U/mL）的31倍。酶学性质分析表明，右旋糖酐酶的最适反应温度为40℃，在30℃条件下放置5 h酶活力基本保持稳定；最适反应pH值为7.5，在pH值为5.0-9.0的条件下相对酶活力能保持50%以上。本研究成果可为缩短右旋糖酐酶生产周期和降低成本提供数据支撑，并认为菌株THN1右旋糖酐酶在口腔护理方面具有良好的应用潜力。     

海洋弧菌NTi产琼胶酶的发酵条件优化

以琼胶酶活力为主要指标,采用单因素与响应面相结合的方法,对降解琼胶的海洋弧菌NTi(Vibrio natriegens NTi)发酵产琼胶酶的摇瓶发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,α-乳糖对菌株产酶具有较强的抑制作用,NH+4不利于菌株生长和产酶。培养基分别以3. 3 g/L琼脂、6. 33 g/L酵母膏为唯一碳源及氮源,添加20 g/L的Na Cl,发酵海洋弧菌V. natriegens NTi产琼胶酶的效果最佳。发酵过程中的p H值、接种量、装液量、温度、发酵时间最优值分别为6. 5、2%、32 m L、27℃和24 h。优化后,该菌产琼胶酶活力达到2. 81 U/m L,比优化前增加了230%。     

云芝产漆酶发酵条件的研究

研究了培养基初始pH值、通气量、温度、表面活性剂、诱导剂、金属离子对云芝(Trametes versicolor)HS-03产漆酶发酵条件的影响.研究发现培养基的初始pH、培养温度、表面活性剂、诱导剂和金属离子等因子对该菌漆酶产量均有明显的影响.结果表明,云芝摇瓶产漆酶的最佳培养条件为培养基初始pH为3.5,转速150 r/min,培养温度28℃,另加1 mL/L吐温-80,1 mL/L愈创木酚,终浓度为0.5 mmol/L的Cu2 .在该条件下,该菌的漆酶酶活力达到291 U/L,比优化前提高了8倍,同时产酶高锋也提前了5 d.     

产纤溶酶菌株的发酵条件优化

筛选了1株产纤溶酶能力较强的芽孢杆菌,对其液体发酵条件进行了优化,结果表明菌株产酶最佳的各组分质量浓度为木糖20 g/L,大豆蛋白胨30 g/L,Na2HPO41 g/L,MgSO41 g/L,CaCl20.1 g/L,吐温40为2 g/L.种龄16 h,接种量3%,发酵周期3 d,起始pH为7.0,摇床转速200 r/min,发酵温度37℃,在此条件下发酵液纤溶酶活性(相当尿激酶活力单位)高达862.2 U/mL.     

一株产α-淀粉酶芽孢杆菌的分离及产酶条件的优化

以筛选与鉴定尉犁县黑湖产淀粉酶细菌,并对筛选出的细菌进行产酶条件优化为研究目的,从43株细菌中筛选出淀粉酶高产菌株HM-22,并对其进行了菌株形态学鉴定、16S r DNA分子鉴定以及产酶条件优化。从尉犁县黑湖采样的30个水、土和泥样样品中分离筛选43株细菌,从中筛选出14株产淀粉酶的菌株,采用Yoo改良法对产透明圈较大的菌株进行酶活力测定,从中筛选出了一株产酶活性较高的菌株HM-22。经革兰氏染色、菌落形态观察、生理生化检测和16S r DNA序列比对鉴定该菌与Bacillus tequilensis的相似性为99.8%,属于芽孢杆菌属。对菌株HM-22产酶条件进行初步优化确定其产酶的最佳条件是:该菌产淀粉酶最适温度为40℃,最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为牛肉膏,最适反应pH为6.0,最适产酶培养时间为24 h。优化后菌株HM-22的酶活力从最初的的酶活力122.45 U/m L达到147.53 U/m L,酶活力提高了17%。该研究为从新疆盐湖细菌中筛选淀粉酶活力较高的菌种资源及应用提供了理论依据和参考。     

产褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化

为进一步探索高产褐藻胶裂解酶菌株,促进其工业化应用,以褐藻酸钠为唯一碳源筛选培养基,从鲍鱼内脏中筛选出一株高产褐藻胶裂解酶菌株B4,通过形态学观察和系统发育分析,鉴定为弧菌属细菌Vibrio sp.B4。通过单因素实验对B4菌株的发酵条件和发酵培养基进行优化,获得发酵培养基的最适碳源为褐藻酸钠10g/L,最适氮源为(NH4)2SO410g/L,最适发酵条件为温度30℃,接种量1%,培养基初始pH 6.0。在单因素实验的基础上,通过Plackett-Burman(PB)筛选出3个影响产酶活力的显著因素:(NH4)2SO4浓度、pH、接种量。通过响应面进一步分析优化,得到最佳的发酵培养基为褐藻酸钠10g/L,(NH_4)_2SO_4 10.91g/L,NaCl 10g/L,KH_2PO_4 1g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,CaCl_2 0.2g/L,FeSO_4·7H_2O 0.02g/L,最佳发酵条件为温度30℃,接种量1.1%,起始pH 6.07。在最佳培养条件下,褐藻胶裂解酶活力可达19.09U/mL,比基础培养条件下提高了3.67倍。该菌经过产酶发酵条件的优化,酶活力得到较大幅度的提高,且其发酵产酶时间短,可为褐藻胶裂解酶的进一步研究应用提供参考。