胡萝卜愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养研究

分别以胡萝卜子叶、下胚轴和直根形成层为外植体诱导出愈伤组织,并建立细胞悬浮系.实验结果表明:胡萝卜下胚轴是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的理想外植体;诱导松散型愈伤组织的最佳激素浓度配比是1.0mg/L2,4 D+0.5mg/LKT;细胞悬浮培养细胞最佳起始密度为1.125×104个/mL～2.325×104个/50mL时,7d～9d为对数生长期;继代培养4代～5代时,可得到稳定的悬浮细胞系.     

茶愈伤组织诱导的研究

以茶树苗的叶片和幼茎为外植体诱导愈伤组织,比较了不同激素组合对叶片和幼茎诱导愈伤组织的影响.结果表明,叶片和幼茎均能诱导愈伤组织,但幼茎的愈伤组织诱导率较高,叶片的愈伤组织诱导率较低.叶片、幼茎愈伤组织培养的较适培养基是MS 6-BA(0.4 mg/L) 2,4-D(2 mg/L).     

半夏疏松愈伤组织诱导的研究

获得生长快速，疏松型愈伤组织是植物细胞悬浮培养的前提．用半夏叶片作外植体，采用单因子法，在添加不同浓度的2，4-D和BA的MS固体培养基上诱导半夏愈伤组织，比较愈伤组织的诱导率、性状和长势，其中当MS 3.0mg／L2，4-D 0．5mg／LBA时，愈伤组织诱导率和长势最好，为疏松愈伤组织系．结果表明：相同激素，不同浓度配比对愈伤组织诱导率、长势和发生的性状有明显的影响．     

怀牛膝愈伤组织诱导及分化的研究

对怀牛膝叶片和茎段愈伤组织的诱导及分化进行了研究.结果表明:KT 0.5 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L对叶片愈伤组织的诱导效果最好,KT 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L对茎段愈伤组织的诱导效果最好,出愈率均达100%;KT 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L有利于叶片形成的愈伤组织分化为根,6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L则有利于茎段形成的愈伤组织分化为芽.     

藏红花愈伤组织诱导和褐化抑制

对藏红花的球茎、无菌芽和幼叶的愈伤组织诱导条件进行研究,同时探讨愈伤组织诱导过程中的褐化和污染问题.结果表明:与球茎相比,以无菌芽和幼叶为外植体,愈伤组织诱导率较高,诱导时间较短,但形成的愈伤组织易褐化.较大球茎(≥20 g)也是藏红花愈伤组织诱导较好的外植体,愈伤组织诱导速度随球茎储藏时间的增加而升高.含有2.0 mg/L 2,4二氯苯氧乙酸(2,4D)和0.5 mg/L 6苄氨基嘌呤(6BA)的MS(Murashige and Skoog)培养基有利于球茎愈伤组织的诱导,30 d愈伤组织诱导率可达70%以上.在愈伤组织诱导过程中,连续转接外植体至新鲜培养基可以有效降低褐化率,而在培养基中添加活性炭(AC)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)不能有效抑制褐化.表面灭菌前采用流水冲洗过夜可有效减少球茎表面附生菌,明显降低污染率.     

两种补血草属植物愈伤组织诱导的比较

以黄花补血草和大叶补血草无菌苗叶片为外植体,采用不同激素配比诱导愈伤组织,并分化获得不定芽,以建立两种补血草无性系,为植株快繁和细胞悬浮培养提供理论依据.结果表明:以补血草无菌苗叶片为外植体进行愈伤组织诱导和分化,可实现补血草快速繁殖,黄花补血草愈伤组织的诱导和分化较大叶补血草的容易.黄花补血草最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA(0.3～0.5 mg/L) NAA(1.0～2.0 mg/L),最适分化培养基为MS 6-BA(0.3～1.0 mg/L) NAA(0.5～1.0mg/L);大叶补血草最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA(0.3～0.5 mg/L) NAA 2.0 mg/L,最适分化培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L.     

薄荷愈伤组织诱导与分化研究

本文研究了薄荷愈伤组织诱导与分化的影响因素。以薄荷茎段为外植体,研究培养基、激素水平对愈伤组织诱导、增殖培养的影响;以叶片为外植体,探讨叶片的愈伤组织诱导;以茎段、叶片和叶柄为外植体材料,比较不同外植体的愈伤组织诱导率。实验结果表明:MS比1/2 MS、B5培养基更适于茎段的诱导培养,诱导率达80%;叶片愈伤组织的诱导率为100%,以MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L NAA为最佳诱导培养基;幼叶是不同外植体中诱导效果最好的,以MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基。     

黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

黄芩愈伤组织与丛芽诱导

为寻求黄芩愈伤组织、丛芽诱导的最佳条件,分别以茎尖、茎段、叶片、带节茎段等为实验材料比较不同诱导条件对诱导率的影响;比较培养过程中愈伤组织的增重量及生长状态.结果表明,诱导率:带节茎段要高于其它外植体;MS+6-BA0.5 mg/L +NAA0.5 mg/L为愈伤组织诱导率最高、愈伤组织增殖最大的培养基组合;MS+6-BA1.0 mg/L +NAA0.5 mg/L为不定芽诱导最合适培养基.     

虎杖愈伤组织的诱导及其白藜芦醇含量的变化

为了利用细胞工程开发虎杖悬浮细胞培养、积累白藜芦醇,必须探索虎杖松散型愈伤组织的培养基及其培养条件.以灭菌虎杖茎段、叶片、茎尖等为外植体,探讨9种激素组合在琼脂和珍珠岩固体培养基上诱导愈伤组织的出愈时间、出愈率、在继代培养中分化状况和白藜芦醇含量变化.结果表明:珍珠岩作为支撑物,诱导的愈伤组织比琼脂好;含有NAA或KT的培养基,诱导形成的愈伤组织在继代中均可分化;①号培养基(MS+2,4-D 4.0 mg/L+6-BA 2.0mg/L+3%蔗糖)对幼叶、茎段和茎尖等都有出愈时间早、出愈率高和愈伤组织生长速度快、松散,适宜于悬浮细胞的培养;愈伤组织白藜芦醇的含量与其外植体来源呈正相关,其中,由幼茎形成的愈伤组织白藜芦醇舍量(鲜重)最高,达到160 μg/g.     

杜仲细胞的悬浮培养

杜仲外植体在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ的培养基上可诱导出生长速度快、离散性好、适合于悬浮培养的愈伤组织；愈伤组织在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ的液体培养基上进行振荡培养，经３～４次继代，即可建立起悬浮细胞系；悬浮细胞的形状为长形、椭圆形、圆形和“月牙”形。     

组培条件对何首乌愈伤组织诱导及生长的影响

为了寻找适合何首乌愈伤组织诱导与生长的培养条件，本文考察了愈伤组织形成的比率，分析了取样时间、光照条件、培养基中2，4-D、6BA和IBA的浓度对愈伤组织诱导和生长的影响。实验表明，在黑暗中，在添加有1．5mg/L2，4-D，1mg/L 6BA和0．5mg/L BA的MS培养基上，夏季取样的茎段，愈伤组织诱导率可达100％。     

红豆杉植物愈伤组织的培养及其紫杉醇形成的初探

不同品种的红豆杉外植体及同一品种的不同外植体，其愈伤组织的发生率、发生速度、发生状况有所不同，激素种类及浓度对愈伤组织的诱导及生长有较大影响，适量的水解酪蛋白和抗坏血酸能促进愈伤组织生长，继代培养以２５～３０天为一代较好，接种量以０．７５～１．２５ｍ／５０ｍｌ培养基为宜，薄层层析结果表明，云南红豆杉细胞培养物中存在着紫杉醇（Ｔａｘｏｌ）。     

不同植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织形成及器官发生的效应

以华黄芪（ＡｓｔｒａｇａｌｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓＬ．）为材料,ＭＳ为基本培养基,设计不同浓度的ＮＡＡ、２,４－Ｄ、６－ＢＡ、ＫＴ等单因子试验和不同比值的细胞分裂素／生长素组合试验,探讨植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织形成及器官发生的效应．结果表明：在愈伤组织形成过程中,单因子试验以５．０ｍｇ／ＬＮＡＡ、０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ、１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、２０ｍｇ／ＬＫＴ诱导效果较好,诱导频率可达１００％,且生长势好．组合试验比单因子试验能更有效地诱导愈伤组织形成．在器官发生过程中,单独使用生长素类有不定根形成,ＮＡＡ效果较好,２,４－Ｄ次之．单独使用细胞分裂素类有不定芽的形成,６－ＢＡ效果较好,ＫＴ次之．组合试验中,细胞分裂素／生长素比值大时有利于不定芽的形成,反之则有利于不定根的形成     

水稻悬浮细胞的固体表面培养及植株再生

报道了水稻根部悬浮细胞固体表面培养的试验结果。由水稻种子根部细胞诱导的愈伤组织,经两次继代培养后进行液体悬浮培养。除培养基成分外,愈伤组织的分裂活性及生理状态,是影响悬浮细胞迅速增殖的重要因素之一.在固体培养基表面培养悬浮细胞,对细胞团的出现和增殖有显著效果.再生小愈伤组织在再分化前进行一次固体继代培养,对再生愈伤组织的增殖和分化有明显的促进作用.     

植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织诱导、增殖及芽分化的效应

以华黄芪叶片为外植体,在附加不同浓度和比例的２,４－Ｄ与６－ＢＡ的ＭＳ培养基上,探讨植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织诱导、增殖及芽分化的效应,并在愈伤组织增殖过程中,初步对愈伤指数与愈伤组织生长量的关系进行了比较,结果表明：在ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上诱导率最高,且形成愈伤组织时间最短;在ＭＳ＋２,４－Ｄ０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上,芽的分化率最高;愈伤指数与“称重法”测定愈伤组织生长所得结果一致．     

由三倍体西瓜下胚轴诱导植株再生的研究

将三倍体西瓜(Citrullus Vul(?)aris Schrad。)下胚轴切段接种在添加0.02mg/L2,4-D和0.6mg/L6BA的MS培养基上,可诱导出生长旺盛、结构致密的愈伤组织.将愈伤组织转移到含不同浓度的6BA、IAA、IBA和三十烷醇的分化培养基上,分化出了芽和根,进而长成了正常的植株.将不定芽接种在含0.2～0.4mg/L6BA和6mg/L维生素P_1的MS培养基上.可得到许多簇生芽和植物体.用蛭石代替琼脂的生根培养基对于根系的生长和试管苗的移植有良好的效果.经细胞学观察表明,由三倍体西瓜下胚轴诱导出再生植株的染色体倍性有所变化,即有一倍体(n=11)、二倍体(2n=22),三倍体(3n=33)和非整倍体等.     

蛇床愈伤组织的形态发生及植株再生

蛇床幼茎外植体在ＭＳ＋２，４－Ｄ２ｍｇ／ｌ＋ＫＴ０．２ｍｇ／ｌ培养基上形成淡黄绿色松软状愈伤组织。愈伤组织在转入培养基ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ＋２Ｔ０．８ｎｇ／ｌ以后分化出不定芽，在１／２ＭＳ＋ＩＡＡ２ｍｇ／ｌ培养基中可产生不定根，进而发育成为完整植株。愈伤组织在ＭＳ＋２，４－Ｄ０．２ｍｇ／ｌ＋ＺＴＺＴ０．４ｍｇ／ｌ培养基中继代３～４次以后，再转入ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ＋ＺＴ０．８ｍｌ／ｌ培养基中继代１～２次，形成了大量胚状体。胚状体经过球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚最终发育成再生植株。器官发生和体细胞胚胎发生这两种形态发生方式在发生顺序、形态特征和所需激素条件等方面都是不同的。     

濒危植物四合木（Tetraena mongolica Maxim.）悬浮培养下体细胞胚胎发生

将四合木（Tetraena mongolicaMaxim.）外植体诱导产生的愈伤组织进行细胞悬浮培养。通过实验在MS培养基附加2,4－D0.1mg/L,6-BA0.25mg/L,水解酪蛋白500mgL的液体培养基中培养,经120～150r/min摇床振荡分散建立细胞悬浮系,直到体细胞胚胎产生后转至无激素的固体培养基中产生再生植株。结果表明：四合木悬浮培养条件下可以得到胚状体,并形成试管苗。